KARAKTERISASI ENZIM CGTASE- DARI ISOLAT Bacillus sp.DARI TAMAN RUMPUT UNPAD BERDASARKAN PARAMETER SUHU DAN PH.
ABSTRAK
Enzim CGTase-β (siklodekstrin glukosil transferase-β) merupakan produk
eksoenzim yang dihasilkan oleh bakteri, yang dapat mengubah pati menjadi
siklodekstrin-β, yang banyak digunakan di industri farmasi dan bernilai tinggi.
Penelitian terdahulu telah ditemukan bakteri penghasil enzim CGTase-β yang
berasal dari tanah Jatinangor yang diberi nama isolat Bacillus sp. dari Taman
Rumput Unpad. Karakteristik enzim CGTase-β yang berasal dari isolat tersebut
belum dikarakterisasi. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui suhu dan pH
optimum serta stabilitasnya untuk pengembangan produksi siklodekstrin-β paling
optimal. Pengujian dilakukan dengan mengekstraksi enzim kasar dengan media
produksi dan diuji aktivitasnya pada media Horikoshi. Pengujian optimasi dan
stabilitas suhu dilakukan dengan menginkubasi enzim uji dengan pati dalam
buffer pada variasi suhu, sedangkan untuk optimasi dan stabilitas pH dilakukan
pada pati dalam buffer pada variasi pH. Pengujian aktivitas pembentukan
siklodekstrin-β dilakukan dengan pengukuran penurunan absorbansi fenolftalein
pada panjang gelombang 550 nm pada spektrofotometer. Hasil pengujian aktivitas
enzim uji bekerja secara optimum pada suhu 40°C dan pH 9, serta stabilitasnya
pada rentang suhu 40°C-80°C dan pada pH 9-12.
Kata kunci: Siklodekstrin glukanotransferase-β, siklodekstrin-β, karakterisasi
suhu, karakterisasi pH
iii
ABSTRACT
β-CGTase (β-cyclodextrin glucosyl transferase) enzymes is the product of
exoenzyme produced by bacteria, which is capable to convert starch into β cyclodextrin. β-cyclodextrin has been used by most of pharmacy industries and it
is highly valuable. Previous studies had found isolate that produce β-CGTase
enzyme from soil sample in Jatinangor called Bacillus sp. from Taman Rumput
Unpad isolate. The β-CGTase enzyme of the isolate has not characterized yet.
This research was conducted to find out the optimal and stable temperature and
pH to develop the most optimal β-cyclodextrin production. The testing was
carried out by extracting the crude enzyme with production media and the activity
was tested in Horikoshi agar. The optimum and stable temperature was measured
by incubating the tested enzyme with starch in buffer solution at various
temperature, while optimum and stable pH was measured by varying its pH. The
activity of β-cyclodextrin formation was done by measuring the percentage
decrease in absorbance of phenolphtalein at 550 nm on spectrophotometer. The
result shows that the activity of enzyme works optimally at 40°C and pH of 9, and
it was stable between 40°C-80°C and pH of 9-12.
Keywords: β-Cyclodextrin glucanotransferase, β-cyclodextrin, characterization of
temperature, characterization of pH
iv
Enzim CGTase-β (siklodekstrin glukosil transferase-β) merupakan produk
eksoenzim yang dihasilkan oleh bakteri, yang dapat mengubah pati menjadi
siklodekstrin-β, yang banyak digunakan di industri farmasi dan bernilai tinggi.
Penelitian terdahulu telah ditemukan bakteri penghasil enzim CGTase-β yang
berasal dari tanah Jatinangor yang diberi nama isolat Bacillus sp. dari Taman
Rumput Unpad. Karakteristik enzim CGTase-β yang berasal dari isolat tersebut
belum dikarakterisasi. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui suhu dan pH
optimum serta stabilitasnya untuk pengembangan produksi siklodekstrin-β paling
optimal. Pengujian dilakukan dengan mengekstraksi enzim kasar dengan media
produksi dan diuji aktivitasnya pada media Horikoshi. Pengujian optimasi dan
stabilitas suhu dilakukan dengan menginkubasi enzim uji dengan pati dalam
buffer pada variasi suhu, sedangkan untuk optimasi dan stabilitas pH dilakukan
pada pati dalam buffer pada variasi pH. Pengujian aktivitas pembentukan
siklodekstrin-β dilakukan dengan pengukuran penurunan absorbansi fenolftalein
pada panjang gelombang 550 nm pada spektrofotometer. Hasil pengujian aktivitas
enzim uji bekerja secara optimum pada suhu 40°C dan pH 9, serta stabilitasnya
pada rentang suhu 40°C-80°C dan pada pH 9-12.
Kata kunci: Siklodekstrin glukanotransferase-β, siklodekstrin-β, karakterisasi
suhu, karakterisasi pH
iii
ABSTRACT
β-CGTase (β-cyclodextrin glucosyl transferase) enzymes is the product of
exoenzyme produced by bacteria, which is capable to convert starch into β cyclodextrin. β-cyclodextrin has been used by most of pharmacy industries and it
is highly valuable. Previous studies had found isolate that produce β-CGTase
enzyme from soil sample in Jatinangor called Bacillus sp. from Taman Rumput
Unpad isolate. The β-CGTase enzyme of the isolate has not characterized yet.
This research was conducted to find out the optimal and stable temperature and
pH to develop the most optimal β-cyclodextrin production. The testing was
carried out by extracting the crude enzyme with production media and the activity
was tested in Horikoshi agar. The optimum and stable temperature was measured
by incubating the tested enzyme with starch in buffer solution at various
temperature, while optimum and stable pH was measured by varying its pH. The
activity of β-cyclodextrin formation was done by measuring the percentage
decrease in absorbance of phenolphtalein at 550 nm on spectrophotometer. The
result shows that the activity of enzyme works optimally at 40°C and pH of 9, and
it was stable between 40°C-80°C and pH of 9-12.
Keywords: β-Cyclodextrin glucanotransferase, β-cyclodextrin, characterization of
temperature, characterization of pH
iv