PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI ANTARA EKSTRAK ETANOL DARI SERBUK DAN SERBUK NANO DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum Ruiz Pav.) TERHADAP Strain BAKTERI Methicillin Resistant Staphylococcus aureus SKRIPSI
PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI ANTARA EKSTRAK ETANOL DARI SERBUK DAN SERBUK NANO DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum Ruiz & Pav.) TERHADAP Strain BAKTERI Methicillin Resistant Staphylococcus aureus SKRIPSI OLEH: NUR AZISAH NIM 121524063 PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2015
PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI ANTARA EKSTRAK ETANOL DARI SERBUK DAN SERBUK NANO DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum Ruiz & Pav.) TERHADAP Strain BAKTERI Methicillin Resistant Staphylococcus aureus SKRIPSI Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara OLEH: NUR AZISAH NIM 121524063 PROGRAM EKSTENSI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2015
PENGESAHAN SKRIPSI PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI ANTARA EKSTRAK ETANOL DARI SERBUK DAN SERBUK NANO DAUN SIRIH MERAH (Piper crocatum Ruiz & Pav.) TERHADAP Strain BAKTERI Methicillin Resistant Staphylococcus aureus
OLEH: NUR AZISAH NIM 121524063
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal : 11 Februari 2015 Disetujui Oleh: Pembimbing I, Panitia penguji, Prof. Dr. Karsono, Apt. Prof. Dr. Urip Harahap, Apt.
NIP 195409091982011001 NIP 195301011983031004 Prof. Dr. Karsono, Apt.
Pembimbing II,
NIP 195409091982011001 Popi Patilaya, S.Si., M.Sc., Apt.
Dr. Masfria, M.S., Apt. NIP 197812052010121004 NIP 195707231986012001 Drs. Awaluddin Saragih, M.Si., Apt.
NIP 195008221974121002 Medan, Februari 2015 Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara a.n Dekan, Wakil Dekan I, Prof. Dr. Julia Reveny, M.Si., Apt.
NIP 195807101986012001
KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kehadirat Allah SWT, yang telah melimpahkan rahmat dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi yang berjudul “Perbandingan Aktivitas Antibakteri Antara Ekstrak Etanol dari Serbuk dan Serbuk Nano Daun Sirih Merah (Piper crocatum Ruiz & Pav.) Terhadap Strain Bakteri Methicillin Resistant Staphylococcus
aureus ”, yang merupakan salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi di
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.Pada kesempatan kali ini dengan segala kerendahan hati penulis mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak Prof. Dr.
Karsono, Apt. dan Popi Patilaya, S.Si. M.Sc. Apt., sebagai dosen pembimbing saya yang telah memberikan pengarahan dan bimbingan dalam menyelesaikan skripsi ini, Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi USU. Ucapan terima kasih juga disampaikan kepada Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah mendidik penulis selama masa perkuliahan. Bapak Prof. Dr. Urip Harahap, Apt., Ibu Dr. Masfria, M.S. Apt., dan Bapak Drs. Awaluddin Saragih, M.Si. Apt., selaku dosen penguji yang memberikan masukan, kritikan, arahan, dan saran dalam penyusunan skripsi ini, serta Bapak Dr. Martua Pandapotan Nasution, MPS., Apt., selaku dosen pembimbing akademik.
Penulis juga ingin mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tulus kepada orang tua, Ayahanda Erman Sori (Alm.) dan Ibunda Ciknawati tercinta, atas doa dan dukungan baik moril maupun materil, kakak tersayang Erawati, Nuryanti, Masito, Lela Riani serta teman-teman Farmasi Ekstensi angkatan 2012 dan angkatan 2013 atas doa, dorongan dan semangat dalam penyelesaian skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya bidang farmasi.
Medan, Februari 2015 Penulis, Nur Azisah NIM 121524063
PERBANDINGAN AKTIVITAS ANTIBAKTERI ANTARA EKSTRAK
ETANOL DARI SERBUK DAN SERBUK NANO DAUN SIRIH MERAH
(Piper crocatum Ruiz & Pav.) TERHADAP Strain BAKTERIMethicillin Resistant Staphylococcus aureus
ABSTRAK
Latar Belakang: Staphylococcus aureus merupakan patogen yang menginfeksi
manusia. Infeksi ini dapat diatasi dengan pemberian antibiotik golongan betalaktam. Namun, bakteri Staphylococcus aureus telah resisten terhadap golongan antibiotik tersebut, salah satunya dikenal sebagai Methicillin Resistant
Staphylococcus aureus (MRSA). Maka diperlukan obat alternatif lain untuk
mengatasi infeksi tersebut. Sirih merah memiliki aktivitas antibakteri. Aktivitas antibakteri dari tanaman obat dapat dioptimasi melalui pemanfaatan teknologi nano partikel.
Tujuan: Penelitian ini bertujuan untuk membandingkan aktivitas antibakteri
ekstrak etanol nano simplisia dan serbuk simplisia daun sirih merah (Piper
crocatum Ruitz & Pav) terhadap strain bakteri Staphylococcus aureus yang telah
resisten terhadap metisilin.Metode: Daun sirih merah dicuci dengan air mengalir dan dikeringkan pada suhu
40ºC. Simplisia diserbukkan menggunakan blender dan mesin nano. Serbuk simplisia diekstraksi dalam etanol secara maserasi. Pengujian aktivitas antibakteri dilakukan menggunakan metode difusi agar. Pencadang kertas yang mengandung ekstrak etanol daun sirih merah dengan konsentrasi 10, 20, 30, 40, 50, 75, 100, 125, 150, 175, dan 200 mg/ml masing-masing diletakkan di atas permukaan media biakan bakteri lalu diinkubasi pada suhu 37°C selama 18-24 jam. Setelah diinkubasi, diameter zona hambat diukur dengan jangka sorong. Analisis statistika dilakukan menggunakan perangkat lunak SPSS versi 17 dengan analisis variansi (anava) dan dilanjutkan dengan uji-T pada tingkat kepercayaan 95%.
Hasil: Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol nano dan serbuk
simplisia daun sirih merah memiliki aktivitas antibakteri dengan konsentrasi hambat minimum yaitu masing-masing 20 mg/ml. Konsentrasi efektif pada ekstrak etanol nano simplisia daun sirih merah 175 mg/ml sedangkan konsentrasi efektif ekstrak etanol serbuk simplisia yaitu >200 mg/ml. Vankomisin sebagai kontrol positif menghambat pertumbuhan bakteri MRSA dengan KHM 4µg/ml.
Kesimpulan: Ekstrak nano simplisia daun sirih merah memiliki aktivitas
antibakteri lebih kuat dibandingkan ekstrak serbuk simplisia daun sirih merah. Kata Kunci: Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah, Teknologi Nano, Antibakteri,Methicillin Resistant Staphylococcus aureus
THE COMPARISON OF ANTIBACTERIAL ACTIVITY BETWEEN ETHANOL EXTRACT OF POWDER AND NANO POWDER OF
Piper crocatum Ruiz & Pav. LEAVES AGAINST Methicillin Resistant Staphylococcus aureus ABSTRACT
Background: Staphylococcus aureus is a pathogen that infects the humans. This infection can be treated with betalactam antibiotics. However, Staphylococcus aureus resistant to betalactams, one of which is known as Methicillin-Resistant Staphylococcus aureus (MRSA). Therefore, alternative medicines are needed to treat the infection of bacterial resistant strain. Red betel (Piper crocatum Ruiz & Pav.) has antibacterial activity. Antibacterial activity of medicinal plants can be optimized through the utilization of nano-particle technology.
Objective: This study aimed to compare the antibacterial activity of ethanol extracts obtained from powder and nano powder of P. crocatum Ruiz & Pav. against strain of methicillin-resistant Staphylococcus aureus.
Methods: Piper crocatum Ruiz & Pav. leaves were washed with tap water and dried at 40°C . P. crocatum Ruiz & Pav. leaf was reduced in size using electrical blender and nano machine. P. crocatum Ruiz & Pav. leaf was extracted in ethanol by maceration. Antibacterial activity test was performed using agar diffusion method. Paper disk containing ethanol extract of P. crocatum Ruiz & Pav. leaf with concentrations of 10, 20, 30, 40, 50, 75, 100, 125, 150, 175, and 200 mg/ml were placed on the surface of the bacterial culture medium and then incubated at 37°C for 18 - 24 hours. After incubation, the diameter of inhibition zone was measured with calipers. Statistical analysis was performed using SPSS software version 17 with analysis of variance (ANOVA) followed by T-test at 95% confidence level .
Result: The results showed that the ethanol extract of nano powder and powder of P. crocatum Ruiz & Pav. leaves have antibacterial activity with minimum inhibitory concentration of 20 mg/ml, respectively. The effective concentration of the ethanol extract of nano powder was 175 mg/ml while the effective concentration of powder extract was above 200 mg/ml . Vancomycin served as a positive control inhibited the growth of MRSA bacteria with the MIC of 4 μg/ml.
Conclusion: The ethanol extract of P. crocatum Ruiz & Pav. nano powder have a stronger antibacterial activity than the extract of P.crocatum Ruiz & Pav. powder.
Key Words: Ethanol Extract of Red Betel leaves, Nano Technology,
Antibacterial, Methicillin Resistant Staphylococcus aureus.DAFTAR ISI
Halaman JUDUL ..................................................................................................... i HALAMAN PENGESAHAN .................................................................. iii KATA PENGANTAR ............................................................................. iv ABSTRAK ............................................................................................... vi ABSTRACT ............................................................................................. vii DAFTAR ISI ............................................................................................ viii DAFTAR TABEL .................................................................................... xi DAFTAR GAMBAR ............................................................................... xii DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................ xiii
BAB I. PENDAHULUAN ....................................................................... 1
1.1. Latar Belakang ....................................................................... 1
1.2. Perumusan Masalah ............................................................... 3
1.3. Hipotesis ................................................................................. 3
1.4. Tujuan Penelitian ................................................................... 4
1.5. Manfaat Penelitian ................................................................. 4
1.6. Kerangka Pikir ....................................................................... 4
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA ............................................................. 5
2.1. Uraian Bakteri ........................................................................ 5
2.2. Antibiotik ............................................................................... 6
2.2.1. Mekanisme kerja obat antimikroba ............................ 7
2.2.2. Resistensi mikroba terhadap antibiotik ...................... 8
2.3. Methicillin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA) .......... 9
2.4. Sirih Merah ............................................................................ 12
2.5. Ekstraksi ................................................................................. 14
2.5.1. Cara dingin ............................................................ 14
2.5.2. Cara panas ............................................................. 15
2.6. Nanoteknologi ........................................................................ 16
2.7. Uji Antibiotik Antibakteri ................................................... 19
BAB III. METODE PENELITIAN ......................................................... 21
3.1. Alat dan Bahan .................................................................... .. 21
3.1.1. Alat .............................................................................. 21
3.1.2. Bahan .......................................................................... 21
3.1.3. Bakteri Uji ................................................................... 21
3.2. Pengambilan dan Pengolahan Sampel .................................. 22
3.2.1. Pengambilan sampel ................................................... 22
3.2.2. Identifikasi sampel ...................................................... 22
3.2.3. Pengolahan sampel ...................................................... 22
3.2.4. Pembuatan nano simplisia daun sirih merah ............... 23
3.2.5. Pemeriksaan partikel nano dan serbuk simplisia daun sirih merah ........................................................ 23
3.3. Pembuatan Ekstrak Etanol Simplisia Nano dan Serbuk Simplisia Daun Sirih Merah .................................................. 24
3.4. Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak Etanol Daun Sirih Merah .................................................................................... 24
3.5. Pembuatan Media .................................................................. 24
3.5.1. Penyiapan media ......................................................... 24
3.5.2. Larutan NaCl 0,9% ...................................................... 25
3.5.3 Kontrol positif . ............................................................. 25
3.5.4. Pembuatan media agar miring ..................................... 25
3.6. Pembiakan Bakteri ................................................................ 25
3.6.1. Penyiapan biakan stok kultur bakteri .......................... 25
3.6.2. Penyiapan inokulum .................................................... 25
3.6.3. Penyiapan larutan uji ekstrak etanol nano dan Serbuk simplisia daun sirih merah dengan berbagai konsentrasi ..................................................... 26
3.6.4. Pengujian aktivitas antibakteri ekstra etanol nano dan serbuk simplisia daun sirih merah terhadap strain bakteri MRSA ............................................................. 26
3.7. Analisis Statistik ................................................................... 27
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................ 28
4.1. Identifikasi Tumbuhan .......................................................... 28
4.2. Karakteristik Simplisia dan Ekstrak ...................................... 28
4.3. Reidentifikasi Bakteri ........................................................... 29
4.4. Uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol nano dan serbuk simplisia daun sirih merah terhadap strain bakteri MRSA .. 30 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN .................................................. 34
5.1. Kesimpulan ........................................................................... 34
5.2. Saran ...................................................................................... 34 DAFTAR PUSTAKA .............................................................................. 35 LAMPIRAN ............................................................................................. 39
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 4.1 Karakteristik ekstrak etanol daun sirih merah29 Tabel 4.2 Diameter zona hambat ekstrak etanol nano dan serbuk simplisia daun sirih merah terhadap pertumbuhan bakteri
MRSA
31
DAFTAR GAMBAR
Halaman Gambar 1.1 Kerangka pikir peneliti ........................................................
4 Gambar 2.1 Tanaman sirih merah ...........................................................
13 Gambar 2.2 Contoh alat pembuat nanopartikel .......................................
18 Gambar 4.1 Karakterisasi mikroskop pemindai elektron nanopartikel dan serbuk daun sirih merah ...............................................
28 Gambar 4.2 Bakteri Staphylococcus aureus ...........................................
29 Gambar 4.3 Diagram hubungan konsentrasi ekstrak dengan diameter zona hambat terhadap pertumbuhan MRSA ......................
32