Efek Imunomodulator Ekstrak Etanol Daun Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl) Terhadap Respon Hipersensitivitas dan Titer Antibodi Sel Imun Mencit Jantan

Lampiran 1. Hasil Identifikasi Daun Mahkota Dewa

36
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. Kode Etik Penelitian

37
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. Skema Penelitian
1. Respon Hipersensitivitas
Mencit berat 30-40 g

Diaklimatisasi + 7 hari
Ditimbang dengan neraca hewan
Diinjeksikan SDMS 1% sebanyak 0,1 ml pada hari 0
secara i.p
Dioralkan kontrol (CMC Na), EEDMD 50, 100, 200
mg/kg BB, dan levamisole 25 mg/kg BB selama 7 hari
Dihari ke 7 dihitung V0 (Volume awal kaki)

Diinjeksikan SDMS 1% 0,1 ml secara intraplantar
Setelah 24 jam (hari ke 8) dihitung Vt (Volume kaki akhir)
Hasil data, diolah
secara statistika
2. Titer Antibodi
Mencit berat 30-40 g

Diaklimatisasi + 7 hari
Ditimbang dengan neraca hewan
Diinjeksikan SDMS 1% sebanyak 0,1 ml pada hari 0
secara i.p
Dioralkan kontrol (CMC Na), EEDMD 50, 100, 200
mg/kg BB, dan levamisole 25 mg/kg BB selama 7 hari
Dihari ke 7 setelah 2-3 jam pemeberian oral, darah diambil
pada bagian vena ekor mencit
Disentrifuse 1900 rpm selama 10 menit
Pada microtitration plate 25 µl serum + PBS 25 µl (lubang
1), dari lubang 1 diambil 25 µl untuk lubang ke 2, begitu
seterusnya
Diteteskan 25 µl SDMS 1%

Didiamkan + 1 jam

Dilihat secara visual

38
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. Perhitungan Hewan
Rumus Federer:
(t-1) (n-1) > 15
(5-1) (n-1) > 15
5n-5-n+1 > 15
4n-4 > 15
4n > 15+4
4n > 19
n>

9

n > 4,75

Maka, n dibulatkan menjadi 5, sehingga hewan yang dipakai adalah 5 ekor.

Keterangan:
t : jumlah perlakuan
n : banyaknya sampel setiap perlakuan.

39
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5. Perhitungan Serbuk Levamisole yang Ditimbang
Berat bobot 20 tablet

= 5,799 g

Kandungan Levamisol tablet
= 29,46 mg
Serbuk sampel yang ditimbang setara 25 mg Levamisol:
=

=


x

x 9,

g

g

g

x bobot 20 tablet

x 5,799 g = 0,246 g = 0,25 g

Jadi, serbuk yang ditimbang sebanyak 0,25 g.

40
Universitas Sumatera Utara


Lampiran 6. Contoh perhitungan dosis
a)

Perhitungan dosis CMC Na 1%
=

g

= 10 mg/ml
Perhitungan CMC Na 1% pada mencit 30 g
=

x 30 g = 0,3 ml

Volume yang diberikan = 0,3 ml

b) Perhitungan dosis EEDMD
1. Untuk dosis 50 mg/kg BB
Jumlah ekstrak yang diberikan =
Jumlah volume yang diberikan =

2. Untuk dosis 100 mg/kg BB

,

Jumlah ekstrak yang diberikan =
Jumlah volume yang diberikan =
3 Untuk dosis 200 mg/kg BB
.Jumlah ekstrak yang diberikan =
Jumlah volume yang diberikan =

g

x 30 g = 1,5 mg

g
g

x 10 ml = 0,3 ml

g


g

g
g

x 30 g = 3 mg

g
g

g
g

g

x 10 ml = 0,3 ml

x 30 g = 6 mg
x 10 ml = 0,3 ml


41
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 7. Volume Pembengkakan Kaki Mencit dan Nilai Titer Antibodi

Volume kaki mencit (ml)
NO Perlakuan

1.

2.

3.

4.

5.

CMC Na 1%


V0

Vt

ΔV

0,52
0,47
0,50
0,50
0,51

0,72
0,62
0,63
0,67
0,69

0,20

0,15
0,13
0,17
0,18
0,17 + 0,027
0,31
0,24
0,20
0,22
0,28
0,25 + 0,044
0,42
0,40
0,35
0,39
0,44
0,4 + 0,033
0,77
0,65
0,74

0,66
0,70
0,7 + 0,051
0,78
0,81
0,77
0,69
0,80
0,77 + 0,047

Rata-rata + SD
EEDMD 50
0,44
0,56
0,46
0,50
0,50
Rata-rata + SD
EEDMD 100 0,50
0,44
0,56
0,50
0,47
Rata-rata + SD
EEDMD 200 0,54
0,47
0,53
0,50
0,45
Rata-rata + SD
Levamisole
0,44
0,56
0,46
0,50
0,41
Rata-rata + SD

0,75
0,80
0,66
0,72
0,77
0,92
0,84
0,91
0,89
0,91
1,31
1,12
1,27
1,16
1,15
1,22
1,37
1,23
1,19
1,2`

Nilai Titer Antibodi
Titer
Anti
bodi
8
4
4
4
4
16
8
8
8
16
16
16
16
16
16
32
32
64
32
32
32
64
32
32
64

[2(Log titer)+1]
2,80
2,20
2,20
2,20
2,20
2,32 + 0,268
3,40
2,80
2,80
2,80
3,40
3,04 + 0,328
3,40
3,40
3,40
3,40
3,40
3,4 + 0
3,40
4,01
4,61
4,01
4,01
4,008 + 0,427
4,01
4,61
4,01
4,01
4,61
4,25 + 0,328

Keterangan:
V0 = Volume awal kaki mencit
Vt = Volume pembengkakan kaki mencit
ΔV = Selisih antara volume waktu tertentu (Vt) dengan volume awal (V0)

42
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 8. Gambar Alat-alat

Pletysnometer Digital

Centrifuse PLC Series

Microtitration Plate

Mikropipet

43
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 9. Hewan Percobaan

Mencit jantan

44
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 10. Pembengkakan Kaki Mencit dan Hemaglutinasi

Sebelum Induksi Antigen

24 Jam Setelah Induksi Antigen

Hemaglutinasi Titer Antibodi
1
2
3

CMC Na 1%

4
5

1
2

EEDMD 50 mg/kg BB

3
4
5

45
Universitas Sumatera Utara

1

EEDMD 100 mg/kg
BB

2
3
4
5

1
2

EEDMD 200 mg/kg
BB

3
4
5

1
2
3

Levamisole 25 mg/kg
BB

4
5

46
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11. Tabel Hasil Perhitungan
Tabel Deskriptive
Descriptives
95% Confidence
Interval for Mean

N

Mean

Std.

Std.

Lower

Upper

Minim

Maxim

Deviation

Error

Bound

Bound

um

um

Pembengkak

CMC Na

5

,1660

,02702 ,01208

,1325

,1995

,13

,20

an

EEDMD 50

5

,2500

,04472 ,02000

,1945

,3055

,20

,31

EEDMD 100

5

,4000

,03391 ,01517

,3579

,4421

,35

,44

EEDMD 200

5

,7040

,05128 ,02293

,6403

,7677

,65

,77

Tablet Levamisole

5

,7700

,04743 ,02121

,7111

,8289

,69

,81

25

,4580

,24865 ,04973

,3554

,5606

,13

,81

CMC Na

5

2,3200

,26833 ,12000

1,9868

2,6532

2,20

2,80

EEDMD 50

5

3,0400

,32863 ,14697

2,6319

3,4481

2,80

3,40

EEDMD 100

5

3,4000

,00000 ,00000

3,4000

3,4000

3,40

3,40

EEDMD 200

5

4,0080

,42781 ,19132

3,4768

4,5392

3,40

4,61

Tablet Levamisole

5

4,2500

,32863 ,14697

3,8419

4,6581

4,01

4,61

25

3,4036

,75896 ,15179

3,0903

3,7169

2,20

4,61

Total
Titerantibodi

Total

Tabel Uji One Way ANOVA
ANOVA
Sum of
Squares
Pembengkakan

Between Groups
Within Groups
Total

Titerantibodi

Between Groups
Within Groups
Total

Mean
df

Square

1,449

4

,362

,035

20

,002

1,484

24

11,940

4

2,985

1,884

20

,094

13,825

24

F

Sig.

206,729

,000

31,688

,000

47
Universitas Sumatera Utara

Tabel Uji Post Hoc Tukey
Multiple Comparisons
Tukey HSD
95%
Confidence
Interval

Mean
Dependent

(I)

Variable

Perlakuan

Pembengkakan CMC Na

Differen

Std.

Lower

Upper

(J) Perlakuan

ce (I-J)

Error

Bound

Bound

EEDMD 50

-,08400*

,02647

EEDMD 100

-,23400*

,034

-,1632

-,0048

,02647

,000

-,3132

-,1548

EEDMD 200

-,53800*

,02647

,000

-,6172

-,4588

-,60400*

Tablet

,02647

,000

-,6832

-,5248

,08400*

,02647

,034

,0048

,1632

EEDMD 100

-,15000*

,02647

,000

-,2292

-,0708

EEDMD 200

-,45400*

,02647

,000

-,5332

-,3748

Tablet

-,52000*

,02647

,000

-,5992

-,4408

,23400*

,02647

,000

,1548

,3132

EEDMD 50

,15000*

,02647

,000

,0708

,2292

EEDMD 200

-,30400*

,02647

,000

-,3832

-,2248

Tablet

-,37000*

,02647

,000

-,4492

-,2908

,53800*

,02647

,000

,4588

,6172

EEDMD 50

,45400*

,02647

,000

,3748

,5332

EEDMD 100

,30400*

,02647

,000

,2248

,3832

Tablet

-,06600

,02647

,132

-,1452

,0132

CMC Na

,60400*

,02647

,000

,5248

,6832

EEDMD 50

,52000*

,02647

,000

,4408

,5992

EEDMD 100

,37000*

,02647

,000

,2908

,4492

EEDMD 200

,06600

,02647

,132

-,0132

,1452

EEDMD 50

-,72000*

,19412

,011

-

-,1391

Sig.

Levamisole
EEDMD 50

CMC Na

Levamisole
EEDMD 100 CMC Na

Levamisole
EEDMD 200 CMC Na

Levamisole
Tablet
Levamisole

Titerantibodi

CMC Na

1,3009
EEDMD 100

1,08000*

,19412

,000

-

-,4991

1,6609

48
Universitas Sumatera Utara

EEDMD 200

-

,19412

,000

1,68800*
Tablet

-

EEDMD 50

-

2,2689 1,1071
,19412

,000

1,93000*

Levamisole

-

-

-

2,5109 1,3491

CMC Na

,72000*

,19412

,011

EEDMD 100

-,36000

,19412

,372

-,9409

,2209

EEDMD 200

-,96800*

,19412

,001

-

-,3871

,1391 1,3009

1,5489
Tablet

-

,19412

,000

1,21000*

Levamisole

-

-,6291

1,7909

1,08000*

,19412

,000

EEDMD 50

,36000

,19412

,372

-,2209

,9409

EEDMD 200

-,60800*

,19412

,037

-

-,0271

Tablet

-,85000*

EEDMD 100 CMC Na

,4991 1,6609

1,1889
,19412

,002

Levamisole

-

-,2691

1,4309
1,68800*

,19412

,000 1,1071 2,2689

EEDMD 50

,96800*

,19412

,001

,3871 1,5489

EEDMD 100

,60800*

,19412

,037

,0271 1,1889

Tablet

-,24200

,19412

,725

CMC Na

1,93000*

,19412

,000 1,3491 2,5109

EEDMD 50

1,21000*

,19412

,000

,6291 1,7909

EEDMD 100

,85000*

,19412

,002

,2691 1,4309

EEDMD 200

,24200

,19412

,725

EEDMD 200 CMC Na

-,8229

,3389

Levamisole
Tablet

-,3389

,8229

*. The mean difference is significant at the 0.05 level.

49
Universitas Sumatera Utara

Tabel Homgoneous
Pembengkakan
Tukey

HSDa
Subset for alpha = 0.05

Perlakuan

N

1

2

3

4

CMC Na

5

EEDMD 50

5

EEDMD 100

5

EEDMD 200

5

,7040

Tablet Levamisole

5

,7700

Sig.

,1660
,2500
,4000

1,000

1,000

1,000

,132

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

Titerantibodi
Tukey

HSDa
Subset for alpha = 0.05

Perlakuan

N

1

2

3

CMC Na

5

EEDMD 50

5

3,0400

EEDMD 100

5

3,4000

EEDMD 200

5

4,0080

Tablet Levamisole

5

4,2500

Sig.

2,3200

1,000

,372

,725

Means for groups in homogeneous subsets are displayed.
a. Uses Harmonic Mean Sample Size = 5,000.

50
Universitas Sumatera Utara

Dokumen yang terkait

Efek Imunomodulator Ekstrak Etanol Daun Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl) Terhadap Respon Hipersensitivitas dan Titer Antibodi Sel Imun Mencit Jantan

0 0 14

Efek Imunomodulator Ekstrak Etanol Daun Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl) Terhadap Respon Hipersensitivitas dan Titer Antibodi Sel Imun Mencit Jantan

0 0 2

Efek Imunomodulator Ekstrak Etanol Daun Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl) Terhadap Respon Hipersensitivitas dan Titer Antibodi Sel Imun Mencit Jantan

0 2 5

Efek Imunomodulator Ekstrak Etanol Daun Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl) Terhadap Respon Hipersensitivitas dan Titer Antibodi Sel Imun Mencit Jantan

0 0 10

Efek Imunomodulator Ekstrak Etanol Daun Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl) Terhadap Respon Hipersensitivitas dan Titer Antibodi Sel Imun Mencit Jantan Chapter III V

0 0 16

Efek Imunomodulator Ekstrak Etanol Daun Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl) Terhadap Respon Hipersensitivitas dan Titer Antibodi Sel Imun Mencit Jantan

0 3 4

Efek Imunomodulator Ekstrak Etil Asetat Daun Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.) Terhadap Respon Hipersensitivitas Dan Titer Antibodi Sel Imun Mencit Jantan

0 0 14

Efek Imunomodulator Ekstrak Etil Asetat Daun Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.) Terhadap Respon Hipersensitivitas Dan Titer Antibodi Sel Imun Mencit Jantan

0 0 2

Efek Imunomodulator Ekstrak Etil Asetat Daun Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.) Terhadap Respon Hipersensitivitas Dan Titer Antibodi Sel Imun Mencit Jantan

0 0 6

Efek Imunomodulator Ekstrak Etil Asetat Daun Mahkota Dewa (Phaleria macrocarpa (Scheff) Boerl.) Terhadap Respon Hipersensitivitas Dan Titer Antibodi Sel Imun Mencit Jantan

0 2 16