Kualitas Spermatozoa Sapi Limousin Se Penyimpanan Pada efrigerator dalam Pengencer Two-Step tm Extender dengan Suplementasi Kuning Telur Bebek

1

KUALITAS SPERMATOZOA SAPI LIMOUSIN SELAMA
PENYIMPANAN PADA REFRIGERATOR DALAM
PENGENCER TWO-STEP Tm EXTENDER
DENGAN SUPLEMENTASI KUNING
TELUR BEBEK

TESIS

Oleh

IBEZARO ZEGA
NIM :137030001 /BIO

PROGRAM PASCASARJANA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2015


2

KUALITAS SPERMATOZOA SAPI LIMOUSIN SELAMA
PENYIMPANAN PADA REFRIGERATOR DALAM
PENGENCER TWO-STEP Tm EXTENDER
DENGAN SUPLEMENTASI KUNING
TELUR BEBEK

TESIS

Diajukan sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar Magister Sains
DalamProgram Studi Magister Ilmu Biologi Pada Program Pascasarjana
Fakultas MIPAUniversitas Sumatera Utara

Oleh

IBEZARO ZEGA
NIM :137030001 /BIO

PROGRAM PASCASARJANA

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2015

3

PENGESAHAN

Judul Tesis

: KUALITAS SPERMATOZOA SAPI LIMOUSIN
SELAMA
PENYIMPANAN
PADA
REFRIGERATOR DALAM PENGENCER TWOSTEP Tm EXTENDER DENGAN SUPLEMENTASI
KUNING TELUR BEBEK

Nama Mahasiswa
Nomor Induk Mahasiswa

Program Studi
Fakultas

: IBEZARO ZEGA
: 137030001
: Magister Biologi
: Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam
Universitas Sumatera Utara

Menyetujui
Komisi Pembimbing,
Pembimbing I

Pembimbing II

Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M. BioMed
NIP : 19660209 199203 1 003

Dr. Salomo Hutahaen, M.Si
NIP : 196510111995011001


Mengetahui
Ketua Program Studi Biologi,

Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M. BioMed
NIP : 19660209 199203 1 003
Tanggal Lulus : 29 Agustus 2015

Dekan

Dr.Sutarman, M.Sc
NIP: 19631026 199103 1 001

4

PERNYATAAN ORISINALITAS
KUALITAS SPERMATOZOA SAPI LIMOUSIN SELAMA
PENYIMPANAN PADA REFRIGERATOR DALAM
PENGENCER TWO-STEP Tm EXTENDER
DENGAN SUPLEMENTASI KUNING

TELUR BEBEK

Dengan ini saya nyatakan bahwa saya mengakui semua karya tesis ini adalah hasil
kerja saya sendiri kecuali kutipan dan ringkasan yang tiap satunya telah dijelaskan
sumbernya dengan benar.

Medan, 29 Agustus 2015

Ibezaro Zega
NIM : 137030001

5

PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI
KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN
AKADEMIS

Sebagai sivitas akademika Universitas Sumatera Utara, saya yang bertanda tangan
di bawah ini :
Nama


: Ibezaro Zega

NIM

: 13703001

Program Studi

: Magister Biologi

Jenis Karya Ilmiah

: Tesis

Demi pengembangan ilmu pengetahuan, menyetujui untuk memberikan kepada
Universitas Sumatera Utara Hak Bebas Royalti Non-Eksklusif (Non-exlusive Free
Rigt) atas Tesis saya yang berjudul :

Kualitas Spermatozoa Sapi Limousin Selama Penyimpanan Pada

efrigerator dalam Pengencer Two-Step tm Extender
dengan
Suplementasi Kuning Telur Bebek
Beserta perangkat yang ada (jika diperlukan ). Dengan Hak Bebas Royalti NonEksklusif ini, Universitas Sumatera Utara berhak menyimpan, mengalih media,
memformat, mengolah dalam bentuk data-base, merawat dan mempublikasikan
Tesis saya tanpa memeinta izin dari saya selama tetap mencantumkan nama saya
sebagai penulis dan sebagai pemegang dan atau sebagai pemilik hak cipta.
Demikian pernyataan ini dibuat dengan sebenarnya.

Medan 29 Agustus 2015

Ibezaro Zega
Nim : 137030001

6

Telah diuji pada
Tanggal : 29 Agustus 2015

PANITIA PENGUJI TESIS

Ketua

: Prof. Dr. Syafruddin Ilyas. M.Biomed

Anggota

: 1. Dr.Salomo HutahaenmM.Si
2. Dr. Suci Rahayu, M.Si
3. Dr. Miswar Budi Mulya, M.Si

7

ABSTRACT

The aim of this research was to study the effect supplementation of Duck egg yolk
in two-steptm-extender on motility, viability, and morfology sperm of limousin
bull. The research used randomized completely design with five repetitions from
five different bulls. Sperm was stored for ten days. Sperm motility was observed
using light microscopy (400x) at temperature of 37°C. Sperm viability was
observed with eosin staining by light microscopy (400x). Sperm morfology was

observed with metilen blue staining by light microscopy (400x). The result of the
research showed that egg yolk supplementation in two-steptm extender affected
the motility and viability, morfology sperm of limousin bull during storage at 45°C. The best egg yolk concentration was 15% in protecting the motility
(41,00±2,24%) viability (74.44±4,77%) and morfology sperm (69,91±1,98%) of
Limousin bull after storage at 4-5°C.
Key words: two-steptm extender, egg yolk, motility, viability, morfology, limousin
bull sperm

8

ABSTRAK

Tujuan dari Penelitian ini adalah mengetahui pengaruh penambahan kuning telur
bebek dalam pengencer two-step Tm extender terhadap motilitas, viabilitas dan
morfologi spermatozoa sapi limousin. Penelitian menggunakan eksperimen
laboratorium menggunakan pola rangcangan acak lengkap (RAL) dengan 5 kali
ulangan dari 5 ejakulasi dari sapi yang sama. Spermatozoa disimpan selama
sepuluh hari. Motilitas spermatozoa diamati dengan mikroskop cahaya (200x)
pada suhu 370C. Viabiltas spermatozoa diamati dengan pewarnaan eosin
menggunakan mikroskop cahaya (400x), morfologi spermatozoa diamati dengan

pewarnaan Metilen blue menggunakan mikroskop cahaya (400x). Hasil penelitian
menunjukkan suplementasi kuning telur bebek pada pengencer two-step Tm
extender berpengaruh terhadap motilitas dan viabilitas, morfologi spermatozoa
sapi limousin selama penyimpanan pada suhu 4-5° C. Konsentrasi kuning telur
terbaik adalah 15% dalam mempertahankan motilitas (41,00%±2,24) viabilitas
(74,44±4,77%) dan morfologi (69,91±1,98%) spermatozoa sapi Limousin setelah
penyimpanan empat Hari pada suhu 4-50 c.

Kata kunci: two-step Tm extender , kuning telur, motilitas, viabilitas, morfologi
spermatozoa sapi Limousin

9

KATA PENGANTAR

Segala puji dan syukur saya panjatkan kehadirat Tuhan yang Maha Esa,
karena berkat limpahan Rahmat dan Karunia-Nya sehingga saya dapat menyusun
dan menyelesaikan tesis ini.
Perkenankan saya mengucapkan rasa terima kasih yang tak terhingga dan
penghargaan yang setinggi-tingginya kepada :

1. Rektor Universitas Sumatera Utara, Bapak Prof. Drs. Subhilhar, M.A., Ph.D
atas kesempatan yang diberikan kepada saya untuk mengikuti dan
menyelesaikan pendidikan Program Magister
2. Dekan Fakultas MIPA Universitas Sumatera Utara, Bapak Dr. Sutarman M.Sc
atas kesempatan kepada saya menjadi mahasiswa pada Program Pascasarjana
FMIPA Universitas Sumatera Utara.
3. Ketua Program Studi Magister Biologi, Bapak Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M.
Biomed, Sekretaris Program Studi Ibu Dr. Suci Rahayu, M.Si beserta seluruh
Staf Dosen pada Program Studi Magister Biologi Fakultas MIPA Universitas
Sumatera Utara.
4. Bapak Prof. Dr. Syafruddin Ilyas, M. Biomed sebagai pembimbing I dan
Bapak Dr. Salomo Hutahaean.M.Si sebagai pembimbing II yang telah
mengarahkan dan memotivasi saya sejak awal hingga akhir penelitian dengan
penuh kesabaran selama bimbingan hingga selesainya penulisan tesis ini.
5. Bupati Kabupaten Nias Utara Bapak Drs. Edward Zega, B.sc, MM dan Kepala
Dinas Pendidikan Kabupaten Nias Utara yang telah memberi rekomendasi dan
kesempatan kepada saya untuk Tugas Belajar di Universitas Sumatera Utara.
6. Kepada orang tua saya Singambowo Zega, Asaria Zai dan mertua saya dr.Erika
Mendrofa yang telah mendoakan saya selama perkuliahan.
7. Istri saya tercinta Eva Rahmani Elisabeth Lase,SS,SE yang selalu setia
mendampingin dan memotifasi selama perkuliahan.
8. Seluruh saudara saya yang telah memberi dorongan dan motivasi selama masa
perkuliahan.

i

10

9. Kepada Bapak Saharman Gea, Ph.D, Destarius Zebua, S.Pd, M.Si, Asaaro
Telaumbanua S.Pd, M.SI dan teman-teman seperjuangan yang telah
memberikan motivasi dan dorongan kepada saya selama perkuliahan.
10.Kepala UPT-BIBD SUMUT Bapak Ir.Harapan Hutauruk,MMA yang
memberikan kesempatan untuk melaksanakan penelitian ini.
11.Kepada ibu Rani staf di UPT-BIBD SUMUT yang mengarahkan selama
pelaksanaan penelitian ini.
12.Kepada pihak yang telah turut membantu baik moril maupun sprituil selama
perkuliahan dan penelitian yang tidak dapat saya sebut satu persatu, budi baik
ini tidak dapat dibalas hanya diserahkan kepada Tuhan Yang Maha Esa

Penulis,

Ibezaro Zega

ii

11

RIWAYAT HIDUP

DATA PRIBADI

Nama

: Ibezaro Zega

Tempat dan Tanggal Lahir

: Lawira, 20-02-1979

Alamat Rumah

: Kelurahan Ilir Kecamatan Gunungsitoli
Kota Gunungsitoli

Telepon

: 081361968192

e-mail

: zegaibezaro@gmail.com

Instansi Tempat Kerja

: Dinas Pendidikan Kabupaten Nias Utara

DATA PENDIDIKAN
SD

: Negeri No. 071039 Onozikho Nias

Tamat : 1992

SMP

: Negeri 1 Awaai Nias

Tamat : 1995

SMA

: Negeri 1 Sirombu Nias

Tamat : 1998

Strata-1

: IKIP Gunungsitoli

Tamat : 2006

Strata-2

: Program Pascasarjana FMIPA USU

Tamat : 2015

iii

12

DAFTAR ISI

Halaman

KATA PENGANTAR

i

ABSTRAK

ii

DAFTAR ISI

iv

DAFTAR GAMBAR

vi

DAFTAR LAMPIRAN

vii

BAB I. PENDAHULUAN

1

1.1

Latar Belakang

1
1.2

Rumusan Masalah

3

1.3

Tujuan Penelitian

3

1.4

Manfaat Penelitian

3

1.5

Hipotesis Penelitian

3

BAB II. TINJAUAN PUSTAKA

4

2.1

Sapi limousin

4

2.2

Reproduksi Sapi limousin

5

2.3

Anatomi

6

2.3.1. Alat kelamin primer

8

2.3.2. Alat kelamin sekunder

8

iv

13

2.4

Teknik-teknik evaluasi semen pada sapi

12

2.5

Regulasi hormonal reproduksi sapi jantan

13

2.6

Faktor-faktor yang mempengaruhi kualitas semen pada

2.7

penyimpanan

15

Parameter kualitas semen

18

BAB III. METODE PENELITIAN

21

3.1

Tempat dan waktu

21

3.2

Rancangan penelitian

21

3.3

Alat dan bahan

21

3.3.1. Alat

21

3.3.2. Bahan

21

Cara Kerja

22

3.4.1 Cara pengambilan sperma sapi

22

3.4

3.4.2. Cara penyimpanan sperma sapi didalam pengencer
Two-step tm extender yang disuplementasikan

kuning telur

22

3.5. Pengamatan kualitas sperma pada sapi

23

3.5.1. Cara menentukan motilitas sperma

23

3.5.2. Motilitas spermatozoa

24

3.5.3. Pengamatan motilitas spermatozoa

24

3.6. Cara menentukan daya viabilitas sperma sapi

24

3.6.1. Pengamatan viabilitas spermatozoa

25

3.7. Cara menentukan jumlah sperma normal
3.7.1. Morfologi normal spermatozoa
3.8. Analisis data

25
29
30

v

14

BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1
4.2
4.3

Motilitas spermatozoa selama penyimpanan
Viabilitas spermatozoa selama penyimpanan
Morfologi spermatozoa selama Penyimpanan

BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN

31
31
33
35
38

5.1

Kesimpulan

38

5.2

Saran

38

DAFTAR PUSTAKA

39

LAMPIRAN

43

vi

15

DAFTAR GAMBAR

Nomor

Judul

Halaman

Gambar

2.1.

Sapi limousin

05

2.2.

Reproduksi sapi limousin

06

2.3.1.

Proses spermatogenesis pada sapi

11

3.4.1.

Vagina buatan dan pengambilan sperma sapi

22

3.6.1.

Spermatozoa hidup (a,b) dan spermatozoa mati (c)

25

3.7.

Bentuk spermatozoa sapi limousin saat pengamatan

28

4.1.

Rata-rata motilitas spermatozoa selama penyimpanan

32

4.2.

Rata-rata Viabilitas spermatozoa selama penyimpanan

34

4.3.

Rata-rata morfologi normal sperma sapi selama penyimpanan 38

vii

16

DAFTAR LAMPIRAN

Nomor lampian

Judul

Halaman

1. Data hasil perlakuan P1 (Pengencer Extender ) pada ulangan
pertama
2.
Data hasil perlakuan P1 (Pengencer Extender ) pada ulangan
Kedua
3.
Data hasil perlakuan P1 (Pengencer Extender ) pada ulangan
ketiga
4.
Data hasil perlakuan P1 (Pengencer Extender ) pada ulangan
keempat
5.
Data hasil perlakuan P1 (Pengencer Extender ) pada ulangan
kelima
6.
Data hasil perlakuan P2 (Extender –KT 10% ) pada ulangan
pertama
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.

Data hasil perlakuan P2
kedua
Data hasil perlakuan P2
ketiga
Data hasil perlakuan P2
keempat
Data hasil perlakuan P2
kelima
Data hasil perlakuan P3
pertama
Data hasil perlakuan P3
kedua
Data hasil perlakuan P3
ketiga
Data hasil perlakuan P3
keempat
Data hasil perlakuan P3
kelima
Data hasil perlakuan P4
pertama

43
44
45
46
47
48

(Extender –KT 10% ) pada ulangan
49
(Extender –KT 10% ) pada ulangan
50
(Extender –KT 10% ) pada ulangan
51
(Extender –KT 10% ) pada ulangan
52
(Extender –KT 15% ) pada ulangan
53
(Extender –KT 15% ) pada ulangan
54
(Extender –KT 15% ) pada ulangan
55
(Extender –KT 15% ) pada ulangan
56
(Extender –KT 15% ) pada ulangan
57
(Extender –KT 20% ) pada ulangan
58

viii

17

17.

21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
34.
35.
36.

Data hasil penelitian dilapangan dengan pengencer Extender
–KT 20% pada percbaan kedua
Data hasil perlakuan P4 (Extender –KT 20% ) pada ulangan
ketiga
Data hasil perlakuan P4 (Extender –KT 20% ) pada ulangan
empat
Data hasil perlakuan P4 (Extender –KT 20% ) pada ulangan
kelima
Rata-rata motilitas pada pengencer Two-step tm Etender
Rata-rata motilitas pada pengencer Two-step tm Etender –KT 10%
Rata-rata motilitas pada pengencer Two-step tm Etender –KT 15%
Rata-rata motilitas pada pengencer Two-step tm Etender –KT 20%
Rata-rata viabilitas pada pengencer Two-step tm Etender
Rata-rata viabilitas pada pengencer Two-step tm Etender –KT 10%
Rata-rata viabilitas pada pengencer Two-step tm Etender –KT 15%
Rata-rata viabilitas pada pengencer Two-step tm Etender –KT 20%
Rata-rata morfologi pada pengencer Two-step tm Etender
Rata-rata morfologi pada pengencer Two-step tm Etender –KT 10%
Rata-rata morfologi pada pengencer Two-step tm Etender –KT 15%
Rata-rata morfologi pada pengencer Two-step tm Etender –KT 20%
Analisis motilitas anava
Multiple Comparisons
Bootstrap for Multiple Comparisons
Analisis viabilitas anava

37.

Multiple Comparisons

85

38.

Bootstrap for multiple comparisons

90

39.

Analisis morfologi anava

95

40.

Multiple Comparisons

96

41.

Bootstrap for multiple comparisons

18.
19.
20.

ix

59
60
61
62
64
65
66
67
68
69
70
71
72
73
74
75
76
77
80
84

101