Efek hepatoprotektif jangka panjang ekstrak etanol kulit Persea americana Mill. terhadap aktivitas ALT-AST pada tikus terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository

  

EFEK HEPATOPROTEKTIF JANGKA PANJANG EKSTRAK

ETANOL KULIT Persea americana Mill. TERHADAP AKTIVITAS ALT-

AST PADA TIKUS TERINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA

SKRIPSI

  Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar sarjana farmasi (S.Farm.) Program Studi Farmasi

  Diajukan oleh : Bernadet Brigita Puspita Wardani

  NIM : 118114048

  

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

  

HALAMAN PERSEMBAHAN

“Tuhan menaruhmu di tempat yang sekarang bukan karena kebetulan.

  Orang yang hebat tidak dihasilkan melalui kemudahan, kesenangan, dan kenyamanan, mereka dibentuk melalui kesukaran, tantangan, dan air mata…” Don’t run ahead of God. Let Him direct your steps.

  He has plans, God’s clock is never early or late, it always strikes on time

• –instagood.org-

  Dream, believe, and make it happen

• –Agnes Monica-

  Kupersembahkan karya kecil ini untuk : Yesus Kristus sumber rahmat dan keajaiban

  PRAKATA

  Puji syukur penulis panjatkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas berkat dan perlindunganNya sehingga skripsi berjudul “Efek Hepatoprotektif Jangka

  Panjang Ekstrak Eatanol Kulit Persea americana Mill. Terhadap Aktivitas ALT- AST Pada Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida

  ” yang disusun untuk memenuhi persyaratan memperoleh gelar Sarjana Strata Satu Program Studi Farmasi (S.

  Farm.) dapat dikerjakan dengan baik, lancar serta tepat pada waktunya.

  Penulis menyadari bahwa penulisan skripsi ini tidak terlepas dari bimbingan dan bantuan berbagai pihak. Kesempatan ini penulis pergunakan untuk mengungkapkan rasa terimakasih kepada :

  1. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah mengijinkan penulis menjalankan pembelajaran selama masa studi.

  2. Ibu Phebe Hendra, M. Si., Ph. D., Apt. selaku Dosen Pembimbing Skripsi yang telah meluangkan waktu, tenaga, dan pikiran dalam memberi bimbingan, motivasi kepada penulis selama penelitian dan penyusunan skripsi ini.

  3. Bapak Ipang Djunarko, M. Sc., Apt selaku Dosen Penguji yang telah memberikan kritik dan saran selama penyusunan skripsi.

  4. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si. selaku dosen penguji yang telah memberikan kritik dan saran selama penyusunan skripsi dan atas bantuannya dalam determinasi tanaman Persea americana Mill. selaku Dosen Penguji yang telah memberikan kritik dan saran selama penyusunan skripsi.

  5. Ibu Agustina Setiawati, M. Sc., Apt selaku Kepala Penanggungjawab Laboratorium Fakultas Farmasi yang telah memberikan ijin dalam penggunaan fasilitas laboratorium untuk kepentingan penelitian ini.

  6. Pak Kayat, Pak Heru, Pak Parjiman, Pak Wagiran, Pak Parlan dan selaku laboran laboratorium Fakultas Farmasi yang telah membantu penulis dalam proses pelaksanaan penelitian di laboratorium.

  7. Keluargaku tercinta Bapak Windiyono, Ibu Anna Lucia, Mas Andreas Suryo, Adik Monika, Adik Sandi, Eyang Ti, Eyang Kung, dan semua yang selalu mengirimkan doa, semangat dan dukungan dalam penyusunan skripsi ini

  8. Leonardus Damar Wirokusumo atas ketulusan, perhatian, pengertian dan semangat yang selalu diberikan kepada penulis dalam penyusunan skripsi ini.

  9. Sahabat-sahabat tercinta Kezia Irma, Vivo Puspitasari, Christiana Putri, Levina Apriyani, Yudist Latubayesian, Maria Verita, Laurensia Jessie, Theresia Eviani atas kebersamaan, kekeluargaan, keceriaan, suka duka, semangat dan motivasi yang diberikan

  10. Teman-teman seperjuangan alpukat Siska, Mita, Sita, Angel, Puput, Gemah, Jolin, Wina, Evi dan tentunya tim etanolers (Vivo, Uci, Ester, Risa, Novel) atas segala kerjasama, bantuan dan semangat yang selalu bergelora dalam penyusunan skripsi ini dari awal hingga akhir.

  11. Teman-teman KKN Alternatif Padukuhan Pondok Cynthia Feliana, Maria Verita, Fransisca, Theresia Eviani.

  12. Seluruh teman-teman panitia INSADHA 2013 atas kebersamaan, semangat,

  13. Seluruh teman-teman PSM Cantus Firmus atas canda tawa, kekeluargaan, semangat dalam segala situasi yang ada.

  14. Teman-teman FSM B 2011, FST A 2011 dan seluruh teman-teman angkatan 2011 atas bantuan, kerjasama dan motivasi yang diberikan.

  15. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu sehingga penulis dapat menyelesaikan tugas akhir ini dengan baik.

  Penulis menyadari bahwa tugas akhir ini belum sempurna dan masih banyak kekurangan sehingga penulis berharap kritik dan saran dari semua pihak yang membangun demi kemajuan di masa yang akan datang.

  Akhir kata, penulis berharap semoga tugas akhir ini dapat bermanfaat bagi semua pihak dan mampu memberikan sumbangan kecil bagi perkembangan ilmu pengetahuan terutama di bidang ilmu Farmasi.

  Penulis

  DAFTAR ISI

  HALAMAN JUDUL ................................................................................................ i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ..................................................... ii HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ iii HALAMAN PERSEMBAHAN ............................................................................ iv PERNYATAAN KEASLIAN PENULIS ................................................................ v LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA ................. vi PRAKATA ............................................................................................................ vii DAFTAR ISI ............................................................................................................ x DAFTAR TABEL ................................................................................................ xiv DAFTAR GAMBAR ............................................................................................. xv DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................ xvi

  INTISARI ........................................................................................................... xviii

  

ABSTRACT ........................................................................................................... xix

  BAB I. PENGANTAR ............................................................................................. 1 A. Latar Belakang ................................................................................................... 1

  1. Perumusan masalah ...................................................................................... 4

  2. Keaslian penelitian ....................................................................................... 4

  3. Manfaat penelitian ........................................................................................ 5

  B. Tujuan Penelitian ............................................................................................... 5

  1. Tujuan umum ............................................................................................... 5

  BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA ..................................................................... 7 A. Hati ..................................................................................................................... 7

  1. Anatomi dan fisiologi hati ............................................................................ 7

  2. Kerusakan hati .............................................................................................. 9

  3. Hepatotoksin .............................................................................................. 11

  B. Alanin Aminotransferase (ALT) dan Aspartat Aminotransferase (AST) ........ 11

  C. Karbon Tetraklorida ......................................................................................... 12

  D. Antioksidan ...................................................................................................... 15

  E. Persea americana Mill. .................................................................................... 15

  1. Sinonim ...................................................................................................... 15

  2. Taksonomi .................................................................................................. 16

  3. Nama lain ................................................................................................... 16

  4. Morfologi ................................................................................................... 17

  5. Kandungan kimiawi ................................................................................... 18

  6. Khasiat dan kegunaan ................................................................................ 18

  F. Metode Pengujian............................................................................................. 19

  G. Metode Ekstraksi .............................................................................................. 20

  H. Landasan Teori ................................................................................................. 21

  I. Hipotesis ........................................................................................................... 22

  BAB III. METODE PENELITIAN........................................................................ 23 A. Jenis dan Rancangan Penelitian ....................................................................... 23 B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional .................................................. 23

  2. Variabel pengacau ...................................................................................... 23

  3. Definisi operasional ................................................................................... 24

  C. Bahan Penelitian............................................................................................... 25

  1. Bahan utama ............................................................................................... 25

  2. Bahan kimia ............................................................................................... 25

  D. Alat Penelitian .................................................................................................. 26

  1. Alat pembuatan serbuk kering dan ekstrak ................................................ 26

  2. Alat uji hepatoprotektif .............................................................................. 27

  E. Tata Cara Penelitian ......................................................................................... 27

  1. Determinasi kulit P. americana ................................................................. 27

  2. Pengumpulan bahan uji .............................................................................. 27

  3. Pembuatan serbuk ...................................................................................... 27

  4. Penetapan kadar air serbuk kulit P. americana .......................................... 28

  5. Pembuatan ekstrak etanol kulit P. americana ........................................... 28

  6. Penetapan konsentrasi pekat ekstrak .......................................................... 29

  7. Penetapan dosis ekstrak etanol kulit P. americana .................................... 29

  8. Pembuatan CMC-Na 1% ............................................................................ 30

  9. Pembuatan larutan karbon tetraklorida ...................................................... 30

  10. Uji pendahuluan ......................................................................................... 30

  11. Pengelompokan dan perlakuan hewan uji .................................................. 31

  F. Tata Cara Analisis Hasil................................................................................... 31

  BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ............................................................. 33

  B. Hasil Kadar Air Serbuk Kulit P. americana .................................................... 33

  C. Standarisasi Ekstrak Etanol Kulit P. americana .............................................. 34

  D. Uji Pendahuluan .............................................................................................. 35

  1. Penentuan dosis hepatotoksin karbon tetraklorida ..................................... 35

  2. Penentuan waktu pencuplikan darah .......................................................... 35

  E. Efek Hepatoprotektif Jangka Panjang Ekstrak Etanol Kulit P. ameicana ....... 38

  1. Kontrol negatif olive oil 2 ml/kgBB .......................................................... 42

  2. Kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida 2 mL/kgBB .............................. 43

  3. Kontrol ekstrak etanol kulit P. americana ................................................. 44

  4. Kelompok perlakuan ekstrak etanol kulit P. americana jangka panjang dosis 0,35 g/kgBB, 0,7 g/kgBB, dan 1,4 g/kgBB pada hewan uji terinduksi CCl

  4 dosis 2 ml/kgBB .............................................. 45

  F. Rangkuman Pembahasan ................................................................................ 48

  BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................... 51 A. Kesimpulan ...................................................................................................... 51 B. Saran ................................................................................................................ 51 DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 52 LAMPIRAN ........................................................................................................... 57 BIOGRAFI PENULIS ......................................................................................... 102

  DAFTAR TABEL

  Tabel I Komposisi dan konsentrasi reagen serum ALT ............................. 26 Tabel II Komposisi dan konsentrasi reagen serum AST .............................. 26 Tabel III Rata-rata aktivitas serum ALT tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada rentang waktu 0,

  24, dan 48 jam ................................................................................ 36 Tabel IV Perbedaan peningkatan aktivitas serum ALT setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada rentang waktu 0, 24, dan 48 jam.................................................................. 37

  Tabel V Pengaruh perlakuan ekstrak etanol kulit P. americana dilihat dare rata-rata ± SE aktivitas serum ALT dan AST ......................... 38 Tabel VI Hasil analisis statistik uji Post Hoc Mann Whitney dari kebermaknaan aktivitas serum ALT antar kelompok ..................... 40 Tabel VII Hasil analisis statistik uji Post Hoc Mann Whitney dari kebermaknaan aktivitas serum AST antar kelompok ..................... 41 Tabel VIII Nilai persen efek hepatoprotektif pada ketiga kelompok peringkat dosis perlakuan ekstrak etanol kulit P. americana

  Mill. ................................................................................................ 47 Tabel IX Hasil rendemen ekstak etanol kulit P. americana .......................... 99 Tabel X Pengeringan ekstrak etanol kulit P. americana ............................ 100

  DAFTAR GAMBAR

  Gambar 1 Struktur molekul karbon tetraklorida ............................................. 12 Gambar 2 Mekanisme biotransformasi dan oksidasi dari karbon tetraklorida ...................................................................................... 14 Gambar 3 Tanaman P. americana Mill. ......................................................... 17 Gambar 4 Diagram batang rata-rata aktivitas serum ALT setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB pada rentang waktu 0, 24, dan 48 jam.................................................................. 36

  Gambar 5 Diagram batang aktivitas serum ALT tikus jantan galur Wistar pada perlakuan jangka panjang ekstrak etanol kulit P.

  americana ....................................................................................... 39

  Gambar 6 Diagram batang aktivitas serum AST tikus jantan galur Wistar pada perlakuan jangka panjang ekstrak etanol kulit P.

  americana ....................................................................................... 42

  DAFTAR LAMPIRAN

  Lampiran 1 Foto Bagian Luar P. americana ............................................. 58 Lampiran 2 Foto Bagian Dalam P. americana .......................................... 58 Lampiran 3 Foto Bagian Kulit dan Biji P. americana ............................... 58 Lampiran 4 Foto Serbuk Kulit P. americana ............................................. 59 Lampiran 5 Foto Ekstrak Kental Kulit P. americana ................................ 59 Lampiran 6 Foto Larutan Ekstrak Etanol Kulit P. americana ................... 59 Lampiran 7 Surat Pengesahan Determinasi Kulit P. americana ................ 60 Lampiran 8 Surat Hasil Penetapan Kadar Air Serbuk Kulit P.

  americana ...............................................................................

  61 Lampiran 9 Surat Pengesahan Medical and Health Research Ethics Commitee (MHREC) .............................................................. 62

  Lampiran 10 Hasil Analisis Statistik Serum ALT Pada Uji Pendahuluan Penentuan Waktu Pencuplikan Darah .................................... 63

  Lampiran 11 Hasil Analisis Statistik Serum ALT Kontrol Hepatotoksin (CCl4), Kontrol Negatif (Olive Oil), Kontrol Ekstrak Etanol Kulita P. americana, Perlakuan Ekstrak Etanol Kulit P. americana (dosis 0,35; 0,70; 1,40 g.kgBB) .............. 66

  Lampiran 12 Hasil Analisis Statistik Serum AST Kontrol Hepatotoksin (CCl4), Kontrol Negatif (Olive Oil), Kontrol Ekstrak Etanol Kulita P. americana, Perlakuan

  Ekstrak Etanol Kulit P. americana (dosis 0,35; 0,70; 1,40 g.kgBB) ........................................................................... 82

  Lampiran 13 Hasil Rendemen Ekstrak Etanol Kulit P. americana ............. 99 Lampiran 14 Perhitungan Persen Hepatoprotektif ..................................... 100

  

INTISARI

  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek hepatoprotektif ekstrak etanol jangka panjang kulit Persea americana Mill. dalam menurunkan aktivitas serum Alanin Aminotransferase (ALT) dan Aspartat Aminotransferase (AST) pada tikus jantan terinduksi karbon tetraklorida serta mengetahui dosis efektif pemberian ekstrak etanol kulit P.americana Mill.

  Penelitian ini bersifat eksperimental murni dengan rancangan penelitian acak lengkap pola searah. Penelitian ini menggunakan tikus jantan galur Wistar, umur 2-3 bulan, dan berat 150-250 gram. Tikus dibagi secara acak ke dalam enam kelompok perlakuan. Kelompok I merupakan kontrol hepatotoksin karbon tetraklorida dosis 2 mL/kgBB secara intraperitonial. Kelompok II merupakan kontrol negatif diberi olive oil dengan pemberian dosis 2 mL/kgBB secara intraperitonial. Kelompok III merupakan kontrol perlakuan yaitu pemberian ekstrak etanol kulit P.americana Mill dosis 1,4 g/kgBB secara per oral. Kelompok

  IV-VI merupakan kelompok perlakuan ekstrak etanol kulit P.americana Mill dengan dosis 0,35; 0,70; 1,4 g/kgBB secara oral sekali sehari selama 6 hari berturut-turut kemudian pada hari ke-7 semua kelompok perlakuan (IV-VI) diberi karbon tetraklorida 2 mL/kgBB secara intraperitonial. Pada jam ke-24 setelah pemberian CCl semua kelompok diambil darahnya pada daerah sinus orbitalis di

  4,

  mata tikus untuk diukur aktivitas serum ALT dan AST. Data dianalisis dengan uji

  

Kolmogorov-Smirnov untuk melihat distribusi datanya dan uji Mann-Whitney

untuk mengetahui perbedaan aktivitas serum ALT dan AST antar kelompok.

  Berdasarkan hasil penelitian, ekstrak etanol kulit Persea americana Mill. memberikan efek hepatoprotektif dengan adanya penurunan aktivitas ALT dan AST pada tikus terinduksi karbon tetraklorida. Hasil persen hepatoprotektif berturut-turut adalah 77,3; 101,9; dan 89,4%. Dosis efektif ekstrak etanol kulit

  

P.americana Mill setelah dilakukan analisis data secara statistik adalah 0,70

g/kgBB.

  

Kata Kunci : kulit Persea americana Mill., ekstrak etanol, karbon

tetraklorida, hepatoprotektif, ALT, AST

  ABSTRACT

  This aim of study research were to prove hepatoprotective effect of ethanol extract Persea americana Mill. peel for reducing serum activity of ALT and AST in rats induced by carbon tetrachloride and get effective dose of ethanol extract Persea americana Mill. peel.

  This research was purely experimental research with randomized complete direct sampling design. This research use male Wistar rats, attain the age 2-3 months, and 150-250 gram weight. The rats were divided into six treatment groups. Group I was carbon tetrachloride hepatotoxin control dose 2 mL/kgBW intraperitoneally. Group II was olive oil control by giving as much as 2 mL/kgBW intraperitoneally. Group III was control treatment given 1.40 g/kgBW ethanol extract Persea americana Mill. peel orally. Group IV-VI were the treatment group for ethanol extract Persea americana Mill. peel with dose 0.35; 0.70; 1.40 g/kgBW orally once a day for six days succesively and in the seventh day all the tratments group (IV-VI) were given carbon tetrachloride 2 mL/kgBW

  th

  intraperitoneally. At the 24 hour administration of CCl 4, all groups had blood drawn at the orbital sinus region to be measured ALT and AST serum activity. Data were analyzed using Kolmogorov-Smirnov test to look at the data distribution and Mann-Whitney test to determine the differences in ALT and AST serum activity in each group.

  Based of the result, ethanol extract Persea americana Mill. peel gave hepatoprotective effect for reducing serum activity of serum ALT and AST in rats induced by carbon tetrachloride with % hepatoprotective for smallest dose to largest dose was 77.3; 101.9; and 89.4% based from ALT serum. From the data measurement of activities ALT and AST serum which were obtained, the effective dose from ethanol extract Persea americana Mill. peel was 0.70 g/kgBW.

  

Keywords : Persea americana Mill. seed, ethanol extract, carbon

tetrachloride, hepatoprotective, ALT, AST

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Penelitian Hati atau hepar merupakan organ intestinal yang paling besar dalam

  tubuh manusia dan sangat penting peranannya dalam kelangsungan hidup manusia. Hati memegang peranan penting dalam hampir setiap proses metabolisme dan juga mampu mendetoksifikasi obat dan zat berbahaya (Nurachman dan Angriani, 2011). Akan tetapi, sama seperti halnya organ lain, hati juga dapat mengalami kerusakan/kelainan yang dapat menganggu kerja hati.

  Beberapa penyakit hati seperti peradangan (hepatitis) hingga sirosis dapat disebabkan oleh virus, obat-obatan, dan juga alkohol (Ganong dan McPhee, 2011).

  Penyakit hepar sudah menjadi perhatian dunia sebagai permasalahan kesehatan yang cukup serius baik di negara maju maupun negara berkembang.

  Prevalensi kerusakan hati di dunia menunjukkan jumlah yang serius untuk diwaspadai, misalnya di negara Inggris mengalami hepatotoksisitas dengan mengalami peningkatan kadar Alanin Aminotransferase (ALT) dan Aspartat

  

Aminotransferase (AST) sebanyak tiga hingga lima kali lipat sebesar 38,2%

  (Walker et al., 2009). Prevalensi penyakit perlemakan hati di Indonesia menurut penelitian Sofia, Nurdjanah, dan Ratnasari (2009) sebesar 30,6%. memberikan kerusakan sel hati berupa perlemakan hati. CCl

  4 yang bersifat toksik

  berperan sebagai pelarut lipid sehingga memudahkan senyawa tersebut menyebrangi membran sel dan terdistribusi ke semua organ. Ketoksikan CCl

  4

  telah terbukti bahwa pada dosis kecil sekalipun dapat menghasilkan timbunan radikal bebas dan menimbulkan efek pada berbagai organ termasuk susunan saraf pusat, hati, ginjal, dan peredaran darah, tetapi efek toksik CCl

  4 yang paling terlihat yaitu pada hati (Gene, 1999).

  Banyaknya kasus hepatotoksisitas membuat dunia kesehatan pada zaman sekarang ini sangat membutuhkan senyawa yang bisa bertindak sebagai hepatoprotektor. Penggunaan tumbuh-tumbuhan telah memainkan peranan penting dalam menjaga kesehatan dan menyembuhkan penyakit. World Health

  

Organization pada tahun 2008 memprediksi bahwa sekitar 80% penduduk dunia

  telah memanfaatkan tumbuhan obat tradisional dan melibatkan penggunaan ekstrak tanaman atau komponen aktifnya. Masyarakat umumnya menggunakan tanaman obat berdasarkan pengalaman empiris sehingga masih terbatasnya jaminan keamanan dan keuntungannya (Elvin-Lewis, 2001).

  Dalam penelitian ini penulis memilih alpukat (Persea americana Mill.) sebagai tanaman yang diyakini memiliki senyawa sebagai hepatoprotektor. Buah alpukat memiliki kandungan antioksidan dan zat gizi berupa lemak yang sangat baik untuk kesehatan. Menurut penelitian, biji alpukat (biji P. americana) mengandung alkaloid, tanin, triterpen, flavonoid, fenol, kuinon, dan saponin antialergi, antiviral, antiinflamasi, hepatoprotektif, antioksidan dan antikanker (Salah et al., 1995). Penelitian yang dilakukan Nopitasari (2013) melaporkan bahwa ekstrak etanol biji P. americana dengan dosis 0,35 g/kgBB secara jangka panjang (enam hari) memiliki efek hepatoprotektif pada tikus terinduksi CCl

  4

  dengan adanya penurunan nilai aktivitas ALT dan AST. Biji P. americana memang kaya akan berbagai kandungan, tetapi kulit P. americana pun memiliki kandungan antioksidan, protein, glukosinolat, pektin dan protease (Chitturi, Gopichans, Vuppu, 2013). Ekstrak kulit P. americana memiliki kandungan komponen fenolik dan aktivitas antioksidan yang lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak biji P. americana (Kosinska et al., 2012).

  Pada penelitian ini digunakan bentuk sediaan ekstrak etanol kulit alpukat. Hal ini berdasarkan penelitian Javier, David, Maria, Petri, dan Mario (2011) menyatakan bahwa dapat diperoleh senyawa fenolik dan aktivitas antioksidan biji

  

P. americana dari hasil isolasi dengan pelarut organik bersifat polar. Penggunaan

  pelarut etanol diharapkan mampu memperoleh senyawa fenolik dan aktivitas antioksidan dari biji P. americana, sehingga untuk menarik senyawa fenolik dan aktivitas antioksidan dari kulit dilakukan cara yang sama dengan biji. Pengamatan nilai aktivitas ALT dan AST didasarkan pada penelitian Edem dan Akpanabiatu (2006) menyatakan bahwa enzim ALT dan AST merupakan enzim pada serum yang dapat menjadi indikator untuk kerusakan hati, perubahan fungsi hati atau adanya toksisitas pada hati. Eksplorasi tanaman P. americana khususnya kulit yang terkait dengan efek hepatoprotektif masih belum banyak dilakukan. efek hepatoprotektif jangka panjang ekstrak etanol kulit P. americana terhadap aktivitas ALT-AST pada tikus terinduksi karbon tetraklorida.

1. Perumusan masalah

  Berdasarkan latar belakang yang telah diuraikan, permasalahan yang diajukan dalam penelitian ini adalah :

a. Apakah pemberian jangka panjang ekstrak etanol kulit alpukat (P.

  americana ) dapat memberikan efek hepatoprotektif terhadap penurunan

  aktivitas ALT-AST pada tikus jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida? b. Berapa dosis efektif pemberian ekstrak etanol kulit alpukat (P. americana) untuk memberikan efek hepatoprotektif terhadap penurunan aktivitas

  ALT-AST pada tikus jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida?

2. Keaslian penelitian

  Penelitian sebelumnya yang berkaitan dengan P. americana yaitu penelitian yang dilakukan oleh Kate dan Lucky (2009) melaporkan bahwa biji P.

  

americana dapat secara signifikan menurunkan tekanan darah, kadar kolestrol,

  glukosa, urea dan berfungsi sebagai antihipertensi. Nopitasari (2013) melaporkan lainnya menyatakan bahwa ekstrak kulit P. americana memiliki kandungan komponen fenolik dan aktivitas antioksidan yang lebih tinggi dibandingkan dengan ekstrak biji P. americana (Kosinska et al., 2012). Berdasarkan penelusuran pustaka yang dilakukan, penelitian efek hepatoprotektif jangka panjang ekstrak etanol kulit P. americana terhadap tikus terinduksi karbon tetraklorida belum pernah dilakukan.

3. Manfaat penelitian

  a. Manfaat teoritis. Penelitian ini diharapkan dapat memberikan sumbangan ilmu pengetahuan terutama ilmu kefarmasian mengenai pengaruh pemberian jangka panjang ekstrak etanol kulit alpukat terhadap penurunan aktivitas ALT-AST pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida.

  b. Manfaat praktis. Penelitian ini dapat dijadikan bahan pertimbangan masyarakat untuk menggunakan kulit alpukat dengan dosis yang diperoleh dalam penelitian sebagai alternatif pengobatan penyakit hati.

B. Tujuan Penelitian

1. Tujuan umum

  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek hepatoprotektif pemberian jangka panjang ekstrak etanol kulit P. americana pada tikus jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida dengan melihat penurunan aktivitas ALT- AST.

2. Tujuan khusus

  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui dosis pemberian ekstrak etanol kulit

  

P. americana yang efektif terhadap penurunan aktivitas ALT-AST pada tikus

jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida.

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Hati 1. Anatomi dan fisiologi hati Hati merupakan kelenjar terbesar dalam tubuh manusia yang terletak pada bagian teratas dalam rongga abdomen sebelah kanan di bawah diafragma. Hati dengan berat sekitar 1,4 kg atau 2-2,5% dari berat tubuh manusia dewasa

  menerima hampir 25% curah jantung atau sekitar 1500 mL darah per menit melalui vena porta dan arteri hepatica (Robbins & Cotran, 2005). Letak hati bergantung pada distensi organ sekitarnya, posisi tubuh dan juga gerak diafragma pada pernapasan (Widjaja, 2007)

  Hati memiliki dua lobus utama, yaitu lobus kanan yang besar dan lobus kiri yang kecil. Lobus kanan terdiri dari bagian segmen anterior dan posterior, sedangkan lobus kiri terdiri dari bagian segmen medial dan lateral. Lobus kanan dan lobus kiri dipisahkan di antero-superior oleh ligamentum falsiformis dan di postero-inferior oleh fisura. Ligamentum falsiformis dari hati melintasi diafragma sampai ke dinding abdomen anterior. Hepar memiliki 4 saluran, yaitu arteri

  

hepatica , vena porta hepatica, vena hepatica, dan kanal empedu. Setiap lobus

  pada hati terbagi menjadi struktur-struktur yang disebut dengan lobulus yang terdiri dari lempeng-lempeng sel hati yang berbentuk kubus dan tersusun menjulur ke vena sentral yang disebut sinusoid. Sinusoid merupakan cabang vena porta dan arteri hepatica dan dibatasi oleh sel Kupffer. Fungsi dari sel Kupffer adalah sebagai sistem monosit makrofag untuk menelan bakteri dan benda-benda asing dalam darah, sehingga hati merupakan salah satu organ yang sangat penting dalam pertahanan bakteri ataupun agen toksik (Baradero, Dayrit, Siswandi, 2005).

  Hati mempunyai fungsi utama sebagai pusat metabolisme tubuh. Beberapa aktifitas hati dalam regulasi metabolisme adalah sebagai berikut: a. Metabolisme karbohidrat. Kadar gula darah dapat distabilkan oleh hati.

  Hepatosit dapat memecah glikogen dan mengeluarkan glukosa ke aliran darah serta mensisntesis glukosa dari asam amino yang tersedia, jika kadar gula darah menurun. Sintesis glukosa dari komponen lain disebut juga glukoneogenesis. Saat tubuh kekurangan gula darah, cadangan glikogen yang disimpan dalam hati akan diubah menjadi glukosa baru dengan memecah glikogen (Martini, 2004).

  b. Metabolisme lipid. Apabila kadar trigliserida, asam lemak, dan kolestrol menurun, hati akan memecah cadangan lipid dan akan dikeluarkan ke aliran darah. Trigliserida yang ada di dalam tubuh nantinya akan menjadi asam lemak untuk cadangan energi (Martini, 2004).

  c. Metabolisme asam amino. Hepar dapat menurunkan peningkatan jumlah asam amino dalam sirkulasi darah. Kegunaan asam amino untuk mensisntesis protein dan dapat diubah menjadi glukosa atau lipid untuk cadangan energi d. Detoksifikasi. Hepar berperan dalam menghilangkan zat-zat endogen dan eksogen yang dapat merugikan tubuh. Kerusakan pada hepar menandakan efek toksik dari zat-zat tersebut tidak dapat didetoksifikasi (Baradero et al., 2005).

  e. Penyimpanan mineral. Hati dapat mengubah cadangan besi menjadi ferritin dan protein ion kompleksnya dapat disimpan (Martini, 2004).

  f. Penyimpanan vitamin. Vitamin A, D, E, dan K yang dapat larut dalam lemak dapat diabsorbsi dari darah dan disimpan di dalam hepar (Martini, 2004).

  g. Inaktivasi obat. Hepar dapat menghilangkan dan memecah sirkulasi obat tanpa menurunkan durasi dari efeknya (Martini, 2004).

  Sel-sel hati mendapatkan suplai darah dari vena portae hepatis yang kaya akan makanan, tidak mengandung oksigen dan terkadang toksik. Sistem peredaran darah yang tidak biasa ini menyebabkan sel-sel hati mendapat darah yang relatif kekurangan oksigen dan keadaan ini dapat menjelaskan penyebab sel hati lebih rentan terhadap kerusakan dan penyakit ( Wibowo dan Paryana, 2009).

2. Kerusakan hati

  Hepatotoksik adalah kerusakan hati yang berhubungan dengan kerusakan fungsi hati karena paparan obat atau agen non-infeksi lainnya (Navarro dan Senior, 2006). Berbagai macam kerusakan hati bergantung pada agen toksik, kekerasan intoksikasi dan jenis pejanan yang termasuk akut atau kronis. Ketika sel hati rusak maka enzim hati yang spesifik dikeluarkan, yaitu alanin aminotransferase (ALT), aspartat aminotransferase (AST), alkalin fosfatase (ALP) ke dalam darah (Hodgson, 2010).

  Senyawa toksik dapat menyebabkan berbagai jenis efek toksik pada berbagai organel dalam sel hati. Jenis kerusakan hati, seperti :

a. Steatosis (Perlemakan Hati). Perlemakan hati adalah hati yang mengandung berat lipid lebih dari 5% atau mengenai lebih dari separuh jaringan sel hati.

  Perlemakan hati ini berpotensi menjadi penyebab kerusakan hati dan sirosis hati (Gregus dan Klaaseen, 2001). Mekanisme terjadinya penimbunan lemak dalam hati cukup beragam, yang paling umum adalah terjadinya pelepasan trigliserida hati ke plasma (Lu, 1995).

  b. Nekrosis hati. Nekrosis hati adalah suatu kematian hepatosit yang biasanya merupakan kerusakan akut yang ditandai dengan pembengkakan sel, kebocoran, dan hancurnya inti serta masuknya sel-sel radang. Kematian sel terjadi bersamaan dengan pecahnya membran plasma. Perubahan biokimia pada nekrosis hati ini bersifat kompleks (Lu, 1995).

  c. Sirosis hati. Sirosis hati merupaka bentuk kerusakan hati yang kronis dan fatal. Hal ini ditandai dengan adanya penghancuran hepatosit dan adanya septa kolagen yang tersebar di sebagian besar hati (Mary, Mary dan Yakobus, 2005). Sirosis bersifat irreversibel, biasanya juga disebabkan oleh paparan berulang zat kimia beracun misalnya alkohol ( Lu, 1995).

3. Hepatotoksin

  Senyawa dan obat yang dapat menyebakan kerusakan hati dibedakan menjadi dua, yaitu : a. Hepatotoksin teramalkan (Tipe A). Hepatotoksin tipe A ini merupakan obat atau senyawa yang bila diberikan dapat mempengaruhi sebagian besar orang yang mengonsumsinya dalam jumlah yang cukup untuk menimbulkan efek toksik dan bergantung pada dosis pemberian. Contoh dari obat-obat pada tipe ini adalah parasetamol, karbon tetraklorida, tetrasiklin, dan salisilat ( Forrest, 2006).

  b. Hepatotoksin tidak teramalkan (Tipe B). Hepatotoksin tipe B ini merupakan obat atau senyawa yang tidak bersifat toksik pada hati tetapi jika diberikan pada orang tertentu dapat menimbulkan efek toksik dan hepatotoksin ini tidak tergantung pada dosis pemberian. Contoh obat-obat pada tipe ini adalah isoniazid, halothan, klorpromazin (Forrest, 2006).

B. Alanin Aminotransferase (ALT) dan Aspartat Aminotransferase (AST)

  Kerusakan sel-sel hati dapat dideteksi dengan pengukuran indeks fungsional dan mengamati produk hepatosit yang rusak. Uji enzim seringkali menjadi petunjuk adanya cedera sel pada penyakit hati karena perubahan ringan kapasitas ekskretorik mungkin tersamarkan akibat kompensasi dari bagian hati

  Enzim ALT dan AST merupakan enzim pada serum yang dapat menjadi indikator untuk kerusakan hati, perubahan fungsi hati atau adanya toksisitas pada hati (Edem dan Akpanabiatu, 2006). AST menjadi perantara reaksi antara asam aspartat dan asam alfaketoglutamat sedangkan ALT memindahkan satu gugus amino antara alanin dan asam ketoglutamat (Sacher dan McPherson, 2004). Enzim ALT lebih spesifik untuk organ hati karena proporsinya paling banyak berada pada organ ini disbanding organ tubuh lainnya (Edem dan Akpanabiatu, 2006). Menurut AIDSC (cit., Fajar, 2013), kerusakan akut pada hepar terjadi ketika peningkatan kadar ALT lebih dari lima kali dari kadar normalnya. Hati yang mengalami nekrosis atau kehancuran akan menyebabkan kenaikan kadar transaminase pada serum. Enzim transaminase akan masuk ke dalam pembuluh darah dan membuat kadar transaminase dalam darah meningkat (Hartono, Nurwanti, Ikasari, Wiryanti, 2005).

C. Karbon Tetraklorida

  

Gambar 1. Struktur molekul karbon tetraklorida (Direktorat Jenderal

Pengawasan Obat dan Makanan, 1995)

  Karbon tetraklorida (Gambar 1) merupakan senyawa golongan halogen yang berbentuk cairan jernih, bersifat mudah menguap, tidak berwarna, dan berbau khas. Senyawa karbon tetraklorida mempunyai BM 153,82 dan sangat sukar larut dalam air, sangat mudah larut dalam alkohol, benzene, kloroform, eter, karbon disulfida, aseton (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1995).

  Karbon tetraklorida termasuk dalam golongan senyawa beracun dan sangat berbahaya bagi lingkungan. Senyawa ini digunakan biasanya sebagai fumigasi atau pengasapan di pertanian, penghilang noda, bahan dasar

  

chlorofluorocarbon (CFC) untuk pendingin AC, pelarut minyak, lilin, dan karet

  (SiKerNas, 2010). Senyawa ini merupakan molekul sederhana, yang jika diberikan kepada berbagai spesies dapat menyebabkan nekrosis sentrilobuler dan perlemakan hati (Timbrell, 2008).

  Kerusakan sel dapat diinisiasi oleh beberapa mekanisme antara lain penghambatan enzim, pengurangan metabolit atau kofaktor, pengurangan ATP, interaksi dengan reseptor, peningkatan intraseluler kalsium, pembentukan metabolit aktif, dan perubahan membran sel. Obat dapat menyebabkan kerusakan sel melalui mekanisme aktifasi metabolit pada tingkatan yang lebih tinggi seperti radikal bebas, karbon, dan nitro akibat stres oksidatif (Hodgson, 2010).

  Karbon tetraklorida cepat diabsorbsi melalui rute apa saja pada manusia dan hewan. Karbon tetraklorida setelah mengalami absorbsi akan didistribusikan diantara jaringan terutama yang memiliki banyak timbunan lipid. Karbon CYP450. Metabolisme CCl

  4 dilakukan penelitian in vivo dan in vitro pada

  mamalia. Tahap awal biotransformasi dari karbon tetraklorida adalah reduksi dehalogenisasi: pembelahan ikatan klorida karbon menjadi ion klorida dan radikal triklorometil. Triklorometil radikal (

  ●CCl3) dapat berikatan kovalen dengan protein atupun lipid menyebabkan kerusakan membran (Klaassen, 2001).

  

Gambar 2. Mekanisme biotransformasi dan oksidasi dari karbon

tetraklorida (Timbrell, 2008)

  Penyebab terjadinya kerusakan jaringan oleh karbon tetraklorida tergantung pada metabolisme aktivasi oleh sitokrom P450, terutama CYP2EI.

  Enzim mikrosomal CYP2EI akan mempengaruhi aktivasi metabolit dari senyawa agen pereduksi dan mengkatalis adisi elektron yang mengakibatkan hilangnya satu ion klorin sehingga terbentuk radikal bebas triklorometil (

  3 ) yang merupakan

  ●CCl metabolit reaktif. Radikal bebas triklorometil ini dengan adanya oksigen (O

  2 ) akan

  berubah menjadi radikal bebas triklorometilperoksi (

  3 ) (Gambar 2) yang

  ●OOCCl bersifat lebih reaktif (Klaaseen, 2001).

D. Antioksidan

  Antioksidan merupakan senyawa pemberi elektron yang bekerja dengan mendonorkan satu elektronnya kepada senyawa yang bersifat oksidan sehingga aktivitas senyawa oksidan tersebut bisa terhambat. Antioksidan menstabilkan radikal bebas dengan melengkapi kekurangan elektron yang dimiliki radikal bebas dan menghambat terjadinya reaksi berantai dari pembentukan radikal bebas (Winarsi, 2007). Senyawa antioksidan bisa didapatkan dari berbagai tanaman dan memiliki potensi tinggi untuk mengurangi berbagai resiko penyakit. Senyawa antioksidan seperti asam fenolik, polifenol, flavonoid dapat menghambat mekanisme oksidasi yang mengarah pada penyakit degeneratif (Percival, 1996).

E. Persea americana Mill.

1. Sinonim

  L., Persea americana var. angustifolia Miranda, Persea

  Laurus persea

americana var. drymifolia (Schldtl &Cham) S. F. Blake, Persea americana var.

  

Persea edulis Raf., Persea floccosa Mez, Persea gigantea L. O. Williams, Persea

gratissima

C. F. Gaertn., Persea gratissima var. drimyfolia (Schldtl. & Cham.)

  Mez, Persea pleiogyna Blake, Persea nubigena L. O. Williams, Persea

paucitriplinervia Lundell, Persea persea (L.) Cockerell, Persea streyermarkii C.

  K. Allen. (Lim, 2012).

  2. Taksonomi

  Kingdom : Plantae (Tumbuhan) Subkingdom : Tracheobionta (Tumbuhan berpembuluh) Super Divisi : Spermatophyta (Menghasilkan biji) Divisi : Magnoliophyta (Tumbuhan berbunga) Kelas : Magnoliopsida (Berkeping dua/dikotil) Sub Kelas : Magnoliidae Ordo : Laurales Famili : Lauraceae Genus : Persea Spesies : Persea americana.Mill.

  (USDA, 2014).

  3. Nama Lain Avocado, avocado-per, butter fruit (Inggris), avocado (Filipina),

alligatorbirne, avocadobirne (Jerman), adpukat, avokad (Indonesia), apukado,

  

avokado (Malaysia), Aguacate, Pagua (Spanyol), awokado (Thailand), avocat,

avocatier, zabelbok, zaboka (Prancis) (Yasir, Das, Kharya, 2010).

  4. Morfologi Gambar 3. Tanaman P. americana Mill. (Proseanet, 2012) Persea americana (Gambar 3) merupakan pohon yang selalu hijau