Validitas Antigen M. Tuberculosis Rapid Immunochromatography Test terhadap Kultur M. Tuberculosis Sampel Sputum pada Media Ogawa.

iv

ABSTRAK

VALIDITAS ANTIGEN M. TUBERCULOSIS

IMMUNOCHROMATOGRAPHY RAPID TEST TERHADAP

KULTUR M. TUBERCULOSIS SAMPEL SPUTUM PADA MEDIA OGAWA

Yunita Sari Purwanti, 1010073; Pembimbing 1 : Fenny, dr., Sp. PK, M.Kes. Pembimbing 2 : Penny S., dr., Sp. PK,M.Kes. Tuberkulosis (TB) merupakan salah satu masalah kesehatan global terbesar. Angka kejadian, morbiditas, dan mortalitas TB masih tinggi, khususnya di negara sedang berkembang seperti Indonesia. Penegakan diagnosis TB masih berdasarkan pemeriksaan hapus sputum mikroskopis basil tahan asam (BTA) atau kultur Mycobacterium tuberculosis (MTB). Hasil pemeriksaan apus sputum mikroskopis BTA bersifat subjektif dan kultur MTB membutuhkan waktu yang lama yaitu 6-8 minggu. Antigen MTB rapid immunochromatography (ICT) test merupakan sarana diagnostik TB baru yang cepat, praktis, dan relatif mudah digunakan. Pemeriksaan ini mendeteksi protein antigen ESAT-6, CFP-10, dan MPT64 yang dikode oleh gen RD1, RD2, dan RD3 yang secara praktis spesifik untuk infeksi MTB. Tujuan penelitian ini untuk mengetahui sensitivitas dan spesifisitas antigen MTB rapid ICT test untuk penegakkan diagnosis TB paru. Penelitian observasional-analitik terhadap sampel sputum 68 subjek penelitian yang dirujuk ke Balai Pengobatan Penyakit Paru-paru (BP4) Kota Bandung pada periode Juni–September 2013. Semua sampel diperiksa dengan antigen TB rapid ICT test dan dikultur pada media Ogawa sebagai pemeriksaan baku emas. Data dianalisis dengan uji diagnostik menggunakan tabel kontingensi 2x2.

Validitas antigen MTB rapid ICT test terhadap gold standard didapatkan memiliki sensitivitas sebesar 42,1% dan spesifisitas sebesar 79,6%.

Antigen MTB rapid ICT test cukup spesifik namun kurang sensitif dalam mendiagnosis kasus TB paru.

v

ABSTRACT

THE VALIDITY OF RAPID IMMUNOCHROMATOGRAPHY M. TUBERCULOSIS ANTIGEN TEST

TO M. TUBERCULOSIS SPUTUM CULTURE ON OGAWA MEDIUM Yunita Sari Purwanti, 1010073 ; 1st tutor : Fenny, dr., Sp. PK, M.Kes.

2nd tutor : Penny S., dr., Sp. PK, M.Kes.

Tuberculosis (TB) is one of the biggest global health issue. The rate of incidence, morbidity, and mortality are still high, especially in developing countries such as Indonesia. The diagnosis of TB is still based on acid-fast bacilli (AFB) microscopy sputum smear examination or Mycobacterium tuberculosis (MTB) culture. The result of AFB sputum smear is subjective and MTB culture takes a lot of time about 6-8 weeks. Rapid immunochromatography (ICT) MTB antigen test is a new TB diagnostic tool, which is rapid, practical, and relatively easy to use. It detects ESAT-6, CFP-10, and MPT64 antigen proteins encoded by RD1, RD2, and RD3 gene that practically specific in MTB infection. The aim of this study is to know the sensitivity and specificity of the rapid ICT antigen MTB test for diagnosing pulmonary TB.

This observational-analytical study on sputum samples of 68 subjects who were referred to Balai Pengobatan Penyakit Paru-paru (BP4) Kota Bandung in the June-September 2013 period. All specimens were tested by rapid ICT MTB antigen test and cultured on Ogawa medium as gold standard of the test. The data was analyzed with diagnostic test using 2x2 contingency table.

The validity of rapid ICT MTB antigen test to the gold standard shows that the test has sensitivity of 42.1% and specificity of 79.6%.

Rapid ICT MTB antigen test is specific enough for diagnosing pulmonary TB but less sensitive.

viii

DAFTAR ISI

Halaman

LEMBAR PERSETUJUAN ... ii

SURAT PERNYATAAN ... iii

ABSTRAK ... iv

ABSTRACT... v

KATA PENGANTAR ... vi

DAFTAR ISI ... viii

DAFTAR TABEL ... xi

DAFTAR GAMBAR ... xii

DAFTAR LAMPIRAN ... xiii

BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ... 1

1.2 Identifikasi Masalah ... 2

1.3 Maksud dan Tujuan Penelitian ... 2

1.4 Manfaat Penelitian ... 3

1.4.1 Manfaat Akademis ... 3

1.4.2 Manfaat Praktis ... 3

1.5 Kerangka Pemikiran ... 3

1.6 Hipotesis Penelitian ... 4

1.7 Metodologi Penelitian ... 5

BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Mycobacterium tuberculosis ... 6

2.1.1 Antigen yang Disekresi oleh Mycobacterium tuberculosis ... 8

2.1.2 Regions of Difference dalam Genom Mycobacterium tuberculosis dan Antigen yang Dikodenya ... 9

2.2 Tuberkulosis... 11

ix

2.2.2 Manifestasi Klinis Tuberkulosis dan Penunjang Diagnosis

Sederhana Tuberkulosis ... 15

2.2.3 Penegakan Diagnosis Kasus Tuberkulosis di Indonesia ... 18

2.2.4 Pemeriksaan Bakteriologi Mycobacterium tuberculosis ... 20

2.2.4.1 Pemeriksaan Mikroskopis Mycobacterium tuberculosis ... 20

2.2.4.2 Kultur Mycobacterium tuberculosis ... 23

2.2.5 Rapid Immunochromatography Mycobacterium tuberculosis Antigen Test ... 24

2.3. Uji Diagnostik ... 26

2.3.1 Kegunaan Sarana Diagnostik ... 26

2.3.2 Gold Standard ... 27

2.3.3 Struktur Uji Diagnostik ... 28

2.3.4 Sensitivitas, Spesifisitas, Nilai Duga Positif, dan Nilai Duga Negatif ... 29

BAB III BAHAN DAN METODE PENELITIAN 3.1 Bahan, Alat, dan Subjek Penelitian ... 31

3.1.1 Alat dan Bahan Penelitian... 31

3.1.2 Subjek Penelitian ... 31

3.2. Ukuran Sampel ... 32

3.3 Alur Penelitian ... 32

3.4 Metode Penelitian ... 33

3.4.1 Desain Penelitian ... 33

3.4.2 Variabel Penelitian ... 33

3.4.2.1 Variabel Bebas ... 33

3.4.2.2 Variabel Tergantung ... 33

3.4.3 Definisi Operasional ... 33

3.5 Prosedur Kerja ... 33

3.5.1 Prosedur Pengambilan Sampel... 33

3.5.2 Penanaman Kultur pada Media Lowenstein Jensen ... 34

x

3.6 Metode Analisis Data ... 35

3.7 Lokasi dan Waktu Penelitian ... 35

3.8 Aspek Etik Penelitian ... 35

BAB IV HASIL, PEMBAHASAN DAN PENGUJIAN HIPOTESIS PENELITIAN 4.1 Hasil Penelitian ... 36

4.2 Pembahasan ... 37

4.3 Keterbatasan Penelitian ... 38

BAB V SIMPULAN DAN SARAN 5.1 Simpulan ... 39

5.2 Saran ... 39

DAFTAR PUSTAKA ... 40

LAMPIRAN ... 45

xi

DAFTAR TABEL

Halaman Tabel 2.1 Distribusi regio RD pada berbagai spesies Mycobacterium ... 10 Tabel 2.2 Pelaporan hasil pemeriksaan mikroskopis BTA ... 22 Tabel 2.3 Tabel 2X2 yang menggambarkan hasil dari uji yang diteliti dan

hasil dari baku emas ... 28 Tabel 4.1 Validitas rapid ICT MTB antigen test dibandingkan dengan

xii

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar 2.1 Gambaran skematik dinding Mycobacterium tuberculosis ... 7

Gambar 2.2 Bakteri Mycobacterium tuberculosis ... 8

Gambar 2.3 Estimasi insidensi kasus tuberkulosis tahun 2011 ... 11

Gambar 2.4 Patogenesis tuberkulosis paru ... 14

Gambar 2.5 Perjalanan penyakit tuberkulosis paru ... 16

Gambar 2.6Gambaran radiologis penderita tuberkulosis paru aktif ... 17

Gambar 2.7 Kultur Mycobacterium tuberculosis pada media Lowenstein Jensen menunjukkan koloni kering berwarna putih pucat ... 24

xiii

DAFTAR LAMPIRAN

Halaman

Lampiran 1 Informed Consent ... 45

Lampiran 2 Komisi Etik Penelitian ... 46

Lampiran 3 Data Penelitian ... 47

Lampiran 4 Penghitungan Uji Diagnostik ... 48

1

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Tuberkulosis (TB) merupakan penyakit menular yang disebabkan oleh infeksi Mycobacterium tuberculosis (MTB). Angka insidensi, mortalitas, dan morbiditas penyakit TB masih tergolong tinggi terutama di negara-negara yang sedang berkembang. Penyakit tuberkulosis sangat mudah menular dan sebagian besar mengenai kelompok usia produktif yaitu 15-64 tahun sehingga penyakit ini merupakan salah satu masalah kesehatan global yang penting. World Health Organization (WHO) pada 2011 memperkirakan terdapat 8,7 juta kasus baru TB di dunia dan 13% diantaranya merupakan koinfeksi pada penderita Human Immunodeficiency Virus (HIV) dengan mortalitas 1,4 juta orang per tahun. Prevalensi kasus TB di Indonesia pada 2011 menempati urutan ke-4 di dunia yaitu sebanyak 450.000 kasus dengan mortalitas 65.000 kasus (Dias et al, 2012).

Pemeriksaan penunjang gold standard diagnosis penyakit TB adalah kultur Mycobacterium tuberculosis dengan sensitivitas 99% dan spesifisitas 100%. Kultur akan menunjukkan hasil positif apabila minimal terdapat 50 basil tahan asam (BTA) per mL sputum dan membutuhkan waktu lama untuk menunggu pertumbuhan bakteri yaitu 6-8 minggu, jadi pemeriksaan ini kurang praktis (Dorman, 2010; Jasaputra, Onggowidjaja, & Soeng, 2005). Pemeriksaan penunjang diagnosis TB lain yang lebih mudah dilakukan adalah pemeriksaan direct smear sputum SPS (sewaktu-pagi-sewaktu). WHO pada tahun 1994 menyatakan bahwa diagnosis TB paru dapat ditegakkan dengan menggunakan direct smear sputum, apabila 2 atau lebih dari 3 sampel SPS menunjukkan BTA positif (WHO, 1994). Dorman mendapatkan sensitivitas pemeriksaan direct smear sputum pada daerah dengan koinfeksi HIV rendah sebesar 70% dan pada daerah dengan koinfeksi HIV tinggi sebesar 35%. Pemeriksaan direct smear sputum akan menunjukkan hasil positif apabila minimal terdapat 5000 BTA/mL sputum (Dorman, 2010).

2

Sarana imunodiagnostik TB telah dikembangkan sejak akhir abad 19 untuk mendeteksi antibodi yang dibentuk oleh individu yang terinfeksi Mycobacterium tuberculosis (MTB) akibat invasi MTB dengan metode Immunochromatography (ICT-TB rapid test), kemudian pada tahun 2011 WHO menerbitkan policy statement yang berisi bahwa tidak merekomendasikan penggunaan reagen komersial serodiagnostik untuk deteksi antibodi TB dalam penegakan diagnosis TB dikarenakan sensitivitas dan spesifisitas pemeriksaan ini bervariasi (Weyer, Mirzayev, Gemert, & Gilpin, 2011). Pembentukan antibodi terhadap antigen MTB memerlukan waktu lama karena infeksi MTB merupakan reaksi hipersensitivitas tipe lambat dan lebih melibatkan respon imun seluler dibandingkan respon imun humoral dalam patogenesisnya sehingga pemeriksaan ini tidak dapat mendeteksi penyakit TB secara dini. Pemeriksaan ini juga sering memberikan hasil false negative pada orang yang immunocompromised (Mathur, LoBue, & Catanzaro, 1999). Saat ini telah dikembangkan pemeriksaan untuk mendeteksi antigen MTB menggunakan metode rapid immunochromatography dengan harapan dapat dijadikan salah satu sarana penunjang diagnosis TB yang lebih baik daripada deteksi antibodi terhadap MTB.

Berdasarkan latar belakang tersebut, peneliti tertarik melakukan penelitian untuk mengetahui sensitivitas dan spesifisitas rapid ICT MTB antigen test dengan menggunakan sampel sputum yang akan diuji terhadap pemeriksaan gold standard untuk diagnosis TB paru yaitu kultur sputum pada media Ogawa.

1.2 Identifikasi Masalah

 Berapa prosentase sensitivitas rapid ICT MTB antigen test  Berapa prosentase spesifitas rapid ICT MTB antigen test 1.3 Maksud dan Tujuan

 Maksud penelitian ini adalah mengetahui validitas rapid ICT MTB antigen test sebagai salah satu sarana penunjang diagnosis TB yang prosedurnya relatif mudah, hasilnya cepat didapat, dan biaya relatif ekonomis.

3

 Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui sensitivitas dan spesifisitas rapid ICT MTB antigen test dengan sampel sputum yang diuji terhadap gold standard diagnosis TB yaitu kultur MTB pada media Ogawa.

1.4 Manfaat Penelitian 1.4.1 Manfaat Akademis

Manfaat akademis yang diharapkan dari penelitian ini yaitu menambah wawasan di bidang imunodiagnostik tuberkulosis paru, bahwa terdapat pemeriksaan deteksi antigen MTB dengan metode rapid ICT yang hasilnya cepat diperoleh dengan metode yang relatif sederhana tetapi mempunyai validitas yang baik sebagai penunjang diagnosis TB paru.

1.4.2 Manfaat Praktis

Manfaat praktis yang diharapkan dari penelitian ini yaitu memberikan informasi kepada praktisi di bidang medis dan masyarakat bahwa rapid ICT MTB antigen test merupakan wacana baru dalam penegakan diagnosis dini TB paru sehingga penatalaksaan dapat dilaksanakan lebih dini dengan demikian angka morbiditas dan mortalitas TB paru dapat diturunkan.

1.5 Kerangka Pemikiran

Tuberkulosis paru hingga saat ini masih merupakan global health issue, tetapi sarana penunjang diagnosis TB yang tersedia masih mempunyai banyak keterbatasannya untuk menegakkan diagnosis secara dini. Gold standard diagnosis tuberkulosis yaitu pemeriksaan kultur MTB butuh waktu cukup lama untuk menunggu pertumbuhan bakteri (Dorman, 2010). Sedangkan pemeriksaan direct smear sputum mempunyai sensitivitas rendah. Pemeriksaan imunodiagnostik ICT-TB untuk mendeteksi antibodi terhadap MTB tidak direkomendasikan sebagai penunjang diagnosis (Weyer, Mirzayev, Gemert, & Gilpin, 2011) dan kurang mendukung untuk penegakan kasus TB secara dini karena infeksi TB lebih melibatkan respon imun seluler dibandingkan humoral

4

dan sering timbul false negative pada pasien immunocompromised (Kanaujia, Lam, Perry, Brusasca, Catanzaro, & Gennaro, 2005).

Rapid ICT MTB antigen test merupakan sarana pemeriksaan penunjang baru untuk mendeteksi infeksi MTB. Rapid ICT MTB antigen test dapat mendeteksi protein antigen ESAT-6, CFP-10, dan MPT64. Pemeriksaan genomik MTB dengan menggunakan subtractive hybridization dan DNA microarray ini dapat mengidentifikasi suatu segmen genomik, yaitu Region of Difference (RD) 1, yang tidak terdapat pada semua strain Mycobacterium bovis bacillus Calmette-Guerin (BCG) sehingga pemeriksaan ini dapat membedakan antara infeksi MTB atau pasca vaksinasi BCG (Karla, Khuller, Sheikh, & Verma, 2010). Early Secreted Antigenic Target-6 (ESAT-6) dan Culture Filtrate Protein-10 (CFP-10) telah diidentifikasi sebagai antigen imunodominan yang dikode oleh RD1. Di sisi lain, Culture Filtrate Protein-21 (CFP-21) dan protein Mycobacterium tuberculosis (MPT64) yang dikode oleh RD2, dinyatakan sebagai antigen penting. Munk et al melaporkan bahwa ESAT-6 dan CFP-10 memegang peranan penting dalam diagnosis tuberkulosis paru aktif dan tuberkulosis ekstra paru (Munk, Arend, Brock, Ottenhoff, & Andersen, 2001). Rapid ICT MTB antigen test mengandung RD1-3 sehingga dapat digunakan untuk penegakan diagnosis kasus TB. Prosedur rapid ICT MTB antigen test relatif mudah dan sederhana, serta diharapkan mempunyai sensitivitas dan spesifisitas tinggi sebagai sarana penunjang diagnosis TB karena mengandung komponen yang hanya terdapat MTB penyebab TB pada manusia.

1.6 Hipotesis

 Rapid ICT MTB antigen test sputum memiliki sensitivitas tinggi sebagai sarana penunjang diagnosis TB paru.

 Rapid ICT MTB antigen test sputum memiliki spesifisitas tinggi sebagai sarana penunjang diagnosis kasus TB paru.

5

1.7 Metodologi Penelitian

Penelitian ini adalah penelitian observasional-analitik terhadap sampel sputum dari pasien-pasien yang dirujuk oleh dokter ke Balai Pengobatan Penyakit Paru-paru (BP4) Kota Bandung dan diperiksa dengan rapid ICT MTB antigen test. Validitas rapid ICT MTB antigen test diuji dengan uji diagnostik menggunakan tabel kontingensi 2x2 terhadap hasil pemeriksaan gold standard diagnosis TB paru pada media Ogawa untuk mengetahui sensitivitas, spesifisitas, nilai duga positif, dan nilai duga negatif. Pengambilan sampel menggunakan teknik consecutive admission sampling sampai memenuhi jumlah sampel yang diinginkan peneliti.

39

BAB V

SIMPULAN DAN SARAN

5.1. Simpulan

Penelitian rapid ICT MTB antigen test untuk mengetahui validitas sarana diagnosis tuberkulosis paru tersebut mendapatkan:

 Sensitivitas rapid ICT MTB antigen test sebesar 42,1%  spesifisitas rapid ICT MTB antigen test sebesar 79,6% 5.2. Saran

 Penelitian dilanjutkan dengan menggunakan jumlah sampel lebih banyak dan perlu diketahui prevalensi TB setempat karena nilai prevalensi akan mempengaruhi nilai duga positif dan nilai duga negatif

 Penelitian dilanjutkan dengan menggunakan media cair sebagai media kultur MTB dikarenakan media cair lebih sensitif dibandingkan dengan media berbahan dasar telur

 Pemeriksaan kultur dilanjutkan dengan tes niasin untuk memastikan jenis daripada MTB

 Rapid ICT MTB antigen test dapat dijadikan sarana penunjang diagnosis tuberkulosis yang prosedur pemeriksaannya relatif sederhana, hasil cepat didapatkan, dan ekonomis

 Penelitian sebaiknya dilakukan sebagai screening awal penderita tersangka TB paru yang belum mendapat pengobatan OAT

40

DAFTAR PUSTAKA

Abdallah, MA., van Pittius, NC., Cox, J., Champion, D., Luirink, J., Vandenbroucke-Grauls, CM., et al. 2007. Type VII Secretion Mycobacteria Show the Way. Nature Reviews Microbiology , 5, 883-91.

Agarwal, S., Caplivski, D., & Botonne, EJ. 2005. Disseminated Tuberculosis Presenting with Finger Swelling in a Patient with Tuberculous Osteomyelitis: a Case Report. Annals of Clinical Microbiology and Antimicrobials , 4, 18.

American Thoracic Society. 2000. Diagnostic Standards and Classification of Tuberculosis in Adults and Children. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine vol 161 , 1376-95.

Aryati, & Sujianto. 2011. Nilai Diagnostik M. tuberculosis Antigen (Tb Ag) Rapid Test Device untuk Diagnosis Kasus Tuberkulosis Paru. Penelitian Unair.

Bhargava, A., Jain, A., & Agarwal, S. 2007. A Comparison of Liquid and Solid Culture Media with Radiometric System for Detection of Mycobacteria in Clinical Specimen. India Journal Tuberculosis , 48-9.

Boyars, M. 1990. Clinical Methods: The History, Physical, and Laboratory Examinations (Vol. 3rd Edition). Boston: Butterworths.

CDC and Prevention Division of Tuberculosis Elimination. (2013). CDC - Tuberculosis (TB). Retrieved 2013, from CDC web Site: www.cdc.gov/tb/education/corecurr/pdf/chapter2.pdf

Chan, CY., Yeang, CA., Yew, W. W., Leung, CC., & Cheng, AF. 2004. In Vitro Postantibiotic Effects of Rifampine, Isoniazid, and Moxifloxacin against Mycobacterium tuberculosis. Antimicrobial Agents and Chemotherapy , 48, 340-3.

Chihota, VN., Grant, AD., Fielding, K., Ndibongo, B., van Zyl, A., & Muirhead, D. 2010. Liquid Vs. Solid Culture For Tuberculosis: Performance And Cost In A Resource Constrained Setting. International Journal Tuberculosis and Lung Disease , 1024-31.

41

Dan, M. (2010). Essensial Evidence Based Medicine (Second Edition ed.). New York: Cambridge University Press.

Dias, HM., Falzon, D., Fitzpatrick, C., Floyd, K., Glaziou, P., Hiatt, T., et al. 2012. Global Tuberculosis Report. WHO. France: WHO.

Dorman, SE. 2010. New Diagnostic Tests for Tuberculosis: Bench, Bedside, and Beyond Clinical Infectious Diseases. CID , 50, 173-7.

Fauci, AS., Kasper, DL., Longo, DL., Braunwald, E., Hauser, SL., Lameson, J. L., et al. 2008. Harrison's Principle of Internal Medicine 17th Edition. New York: McGraw-Hill.

Jasaputra, DK., Onggowidjaja, P., & Soeng, S. 2005. Akurasi Deteksi Mycobacterium tuberculosis dengan Teknik PCR menggunakan "Primer X" dibandingkan dengan Pemeriksaan Mikroskopik dan Kultur Sputum Penderita dengan Gejala Tuberkulosis Paru. Journal Kedokteran Maranatha , 13.

JD Biotech Corp. JD BIOTECH. Retrieved October 22, 2013, from JD BIOTECH website: www.jdbiotech.com

Jensen, PA., Lambert, LA., Iademarco, MF., & Ridzon, R. 2005. Guidelines for Preventing the Transmission of Mycobacterium tuberculosis in Health Care Settings. Atlanta: Center for Disease Control and Prevention.

John, D.S., & Swischuk, E.L. 2007. Fundamentals of Diagnostic Radiology (3rd ed.). Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins.

Kanaujia, GV., Lam, PK., Perry, S., Brusasca, PN., Catanzaro, A., & Gennaro, ML. 2005. Integration of Microscopy and Serodiagnostic Tests to Screen for Active Tuberculosis. International Journal of Tuberculosis and Lung Diseases , 9(10), 1120-1126.

Karla, M., Khuller, GK., Sheikh, JA., & Verma, I. 2010. Evaluation of Mycobacterium tuberculosis Spesific RD Antigen for Delayed Type Hypersensitivity Response in Guinea Pig. Indian Journal of Experimental Biology , 48, 117-123.

Kementerian Kesehatan Republik Indonesia Direktorat Jenderal Pengendalian Penyakit dan Penyehatan Lingkungan. 2011. Pedoman Nasional Pengendalian Tuberkulosis. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.

42

Kementerian Kesehatan Republik Indonesia Direktorat Jenderal Pengendalian Penyakit dan Penyehatan Lingkungan. 2012. Standar Prosedur Operasional Pemeriksaan Mikroskopis TB. Jakarta: Kementerian Kesehatan RI.

Kumar, V., Abbas, A.K., Aster, J. C., & Fausto, N. 2010. Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease Eighth Edition. Philadelphia: Saunders Elsevier. Levinson, W. 2010. Review of Medical Microbiology & Immunology Eleventh

Edition. New York: McGraw-Hill Companies Inc.

Loscalzo, J. 2010. Harrison's Pulmonary and Critical Care Medicine. New York: McGraw-Hill Companies, Inc.

Lubasi, D., Habeenzu, C., & Mitarai, S. 2004. Evaluation of an Ogawa Mycobacterium Culture Method Modified for Higher Sensitivity Employing Concentrated Samples. Tropical Medicine and Health Vol. 32 no. 1 , 1-4. Mahairas, G., Sabo, P., Hickey, M., Singh, D., & Stover, C. 1996. Molecular

Analysis of Genetic Differences between Mycobacterium bovis BCG and Virulent M. Bovis. J Bacteriology , 1274-82.

Mahon, C., Lehman, D., & Manuselis, G. 2011. Textbook of Diagnostic Microbiology. Maryland Heights, Missiouri: Saunders Elsevier.

Mathur, M.L., LoBue, P.A., & Catanzaro, A. 1999. Evaluation of a Serologic Test for the Diagnosis of Tuberculosis. The International Journal of Tuberculosis and Lung Disease , 732-5.

Munk, M.E., Arend, S.M., Brock, I., Ottenhoff, T H., & Andersen, P. 2001. Use of ESAT-6 and CFP-10 Antigens for Diagnosis of Extrapulmonary Tuberculosis. The Journal of Infectious Disease , 183 (1).

Narayan, S., & Kumudini, T. 2012. A Comparison of Three Different Staining Methods for the Detection of Acid Fast Bacili (Mycobacterium tuberculosis) in Sputum Samples. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Sciences , 14 (14), 1-2.

Nayak, S., & Acharjya, B. (2012). Mantoux Test and It's Interpretation. Indian Dermatology Online Journal , 3 (1), 2-6.

43

Parkash, O., Singh, B., & Pai, M. 2009. Regions of Differences Encoded Antigens as Targets for Immunodiagnosis of Tuberculosis in Humans. Scandinavian Journals of Immunology , 345-57.

Patel, B., & Douglas, T. 2012. Creating a Virtual Slide Map from Sputum Smear Images for Region-of-interest Localisation in Automated Microscopy. Computer Methods and Programs in Biomedicine , 108 (1), 38-52.

Peterson, E., Nakasone, A., Platon-DeLeon, J., Jang, Y., de La Maza, L., & Desmond, E. 1999. Comparison of Direct and Concentrated Acid-Fast Smears to Identify Specimens Culture Positive. J Clin Microbiology , 3564-8.

Pusponegoro, H.D., Wirya, IW., Pudjiadi, AH., Bisanto, J., & Zulkarnain, S. Z. 2011. Dasar-dasar Metodologi Penelitian Klinis (4 ed.). Jakarta: CV. Sagung Seto.

Ryan, KJ., Ray, CG., Champoux, JJ., Neidhardt, FC., Drew, WL., & Plorde, J. J. 2004. Sherris Medical Microbiology. New York: McGraw-Hill Medical.

Shen, GH., Chiou, CS., Hu, ST., Wu, KM., & Chen, JH. 2011. Rapid Identification of the Mycobacterium tuberculosis Complex by Combining the ESAT-6/CFP-10 Immunochromatographic Assay and Smear Morphology. Journal of Clinical Microbiology , 902-7.

Smith, I. 2003. Mycobacterium tuberculosis Pathogenesis and Molecular Determinants of Virulence. Clinical Microbilogy Review vol. 16 , 463-96. Tanoue, S., Mitarai, S., & Shisido, H. 2002. Comparative Study on the Use of

Solid Media: Lowenstein-Jensen and Ogawa in the Determination of Anti-Tuberculosis Drugs Susceptibility. Anti-Tuberculosis vol 82 , 63-7.

Valadas, E., Hänscheid, T., Fernandes, M., & Antunes, F. 2003. Smear Microscopy to Diagnose Tuberculosis Early and Prevent Further Transmission in a Population with a High Prevalence of HIV Infection. Clinical Microbiolgy Infection , 1045-7.

Van Pixteren, LA., Ravn, P., Agger, EM., Pollock, J., & Andersen, P. 2000. Diagnosis of Tuberculosis Based on the Two Spesific Antigens ESAT-6 and CFP-10. Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology , 155-160.

44

Weyer, K., Mirzayev, F., Gemert, W. v., & Gilpin, C. 2011. Commercial Serodiagnostic Test for Diagnosis of Tuberculosis. Geneva: World Health Organization Press.

WHO. 1994. Framework for Effective Tuberculosis Control. Switzerland: World Health Organization Press.

WHO. 2007. Revision of the Case Definition for Sputum Smear Positive Pulmonary TB. Geneva: WHO.

WHO. 2007. Use of Liquid TB Culture and Drug Susceptibility Testing (DST) in Low and Medium Income Settings. Geneva: WHO.

WHO. 2010. Framework for Implementing New Tuberculosis Diagnosis. Geneva: World Health Organization Press.

39

BAB V

SIMPULAN DAN SARAN

5.1. Simpulan

Penelitian rapid ICT MTB antigen test untuk mengetahui validitas sarana diagnosis tuberkulosis paru tersebut mendapatkan:

 Sensitivitas rapid ICT MTB antigen test sebesar 42,1%  spesifisitas rapid ICT MTB antigen test sebesar 79,6% 5.2. Saran

 Penelitian dilanjutkan dengan menggunakan jumlah sampel lebih banyak dan perlu diketahui prevalensi TB setempat karena nilai prevalensi akan mempengaruhi nilai duga positif dan nilai duga negatif

 Penelitian dilanjutkan dengan menggunakan media cair sebagai media kultur MTB dikarenakan media cair lebih sensitif dibandingkan dengan media berbahan dasar telur

 Pemeriksaan kultur dilanjutkan dengan tes niasin untuk memastikan jenis daripada MTB

 Rapid ICT MTB antigen test dapat dijadikan sarana penunjang diagnosis tuberkulosis yang prosedur pemeriksaannya relatif sederhana, hasil cepat didapatkan, dan ekonomis

 Penelitian sebaiknya dilakukan sebagai screening awal penderita tersangka TB paru yang belum mendapat pengobatan OAT

40

Abdallah, MA., van Pittius, NC., Cox, J., Champion, D., Luirink, J., Vandenbroucke-Grauls, CM., et al. 2007. Type VII Secretion Mycobacteria Show the Way. Nature Reviews Microbiology, 5, 883-91.

Agarwal, S., Caplivski, D., & Botonne, EJ. 2005. Disseminated Tuberculosis Presenting with Finger Swelling in a Patient with Tuberculous Osteomyelitis: a Case Report. Annals of Clinical Microbiology and Antimicrobials, 4, 18.

American Thoracic Society. 2000. Diagnostic Standards and Classification of Tuberculosis in Adults and Children. American Journal of Respiratory and Critical Care Medicine vol 161 , 1376-95.

Aryati, & Sujianto. 2011. Nilai Diagnostik M. tuberculosis Antigen (Tb Ag) Rapid Test Device untuk Diagnosis Kasus Tuberkulosis Paru. Penelitian Unair.

Bhargava, A., Jain, A., & Agarwal, S. 2007. A Comparison of Liquid and Solid Culture Media with Radiometric System for Detection of Mycobacteria in Clinical Specimen. India Journal Tuberculosis , 48-9.

Boyars, M. 1990. Clinical Methods: The History, Physical, and Laboratory Examinations (Vol. 3rd Edition). Boston: Butterworths.

CDC and Prevention Division of Tuberculosis Elimination. (2013). CDC - Tuberculosis (TB). Retrieved 2013, from CDC web Site: www.cdc.gov/tb/education/corecurr/pdf/chapter2.pdf

Chan, CY., Yeang, CA., Yew, W. W., Leung, CC., & Cheng, AF. 2004. In Vitro Postantibiotic Effects of Rifampine, Isoniazid, and Moxifloxacin against Mycobacterium tuberculosis. Antimicrobial Agents and Chemotherapy , 48, 340-3.

Chihota, VN., Grant, AD., Fielding, K., Ndibongo, B., van Zyl, A., & Muirhead, D. 2010. Liquid Vs. Solid Culture For Tuberculosis: Performance And Cost In A Resource Constrained Setting. International Journal Tuberculosis and Lung Disease , 1024-31.

41

Dan, M. (2010). Essensial Evidence Based Medicine (Second Edition ed.). New York: Cambridge University Press.

Dias, HM., Falzon, D., Fitzpatrick, C., Floyd, K., Glaziou, P., Hiatt, T., et al. 2012. Global Tuberculosis Report. WHO. France: WHO.

Dorman, SE. 2010. New Diagnostic Tests for Tuberculosis: Bench, Bedside, and Beyond Clinical Infectious Diseases. CID, 50, 173-7.

Fauci, AS., Kasper, DL., Longo, DL., Braunwald, E., Hauser, SL., Lameson, J. L., et al. 2008. Harrison's Principle of Internal Medicine 17th Edition. New York: McGraw-Hill.

Jasaputra, DK., Onggowidjaja, P., & Soeng, S. 2005. Akurasi Deteksi Mycobacterium tuberculosis dengan Teknik PCR menggunakan "Primer X" dibandingkan dengan Pemeriksaan Mikroskopik dan Kultur Sputum Penderita dengan Gejala Tuberkulosis Paru. Journal Kedokteran Maranatha , 13.

JD Biotech Corp. JD BIOTECH. Retrieved October 22, 2013, from JD BIOTECH website: www.jdbiotech.com

Jensen, PA., Lambert, LA., Iademarco, MF., & Ridzon, R. 2005. Guidelines for Preventing the Transmission of Mycobacterium tuberculosis in Health Care Settings. Atlanta: Center for Disease Control and Prevention.

John, D.S., & Swischuk, E.L. 2007. Fundamentals of Diagnostic Radiology (3rd ed.). Philadelphia: Lippincott Williams & Wilkins.

Kanaujia, GV., Lam, PK., Perry, S., Brusasca, PN., Catanzaro, A., & Gennaro, ML. 2005. Integration of Microscopy and Serodiagnostic Tests to Screen for Active Tuberculosis. International Journal of Tuberculosis and Lung Diseases , 9(10), 1120-1126.

Karla, M., Khuller, GK., Sheikh, JA., & Verma, I. 2010. Evaluation of Mycobacterium tuberculosis Spesific RD Antigen for Delayed Type Hypersensitivity Response in Guinea Pig. Indian Journal of Experimental Biology, 48, 117-123.

Kementerian Kesehatan Republik Indonesia Direktorat Jenderal Pengendalian Penyakit dan Penyehatan Lingkungan. 2011. Pedoman Nasional Pengendalian Tuberkulosis. Jakarta: Departemen Kesehatan Republik Indonesia.

Kementerian Kesehatan Republik Indonesia Direktorat Jenderal Pengendalian Penyakit dan Penyehatan Lingkungan. 2012. Standar Prosedur Operasional Pemeriksaan Mikroskopis TB. Jakarta: Kementerian Kesehatan RI.

Kumar, V., Abbas, A.K., Aster, J. C., & Fausto, N. 2010. Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease Eighth Edition. Philadelphia: Saunders Elsevier. Levinson, W. 2010. Review of Medical Microbiology & Immunology Eleventh

Edition. New York: McGraw-Hill Companies Inc.

Loscalzo, J. 2010. Harrison's Pulmonary and Critical Care Medicine. New York: McGraw-Hill Companies, Inc.

Lubasi, D., Habeenzu, C., & Mitarai, S. 2004. Evaluation of an Ogawa Mycobacterium Culture Method Modified for Higher Sensitivity Employing Concentrated Samples. Tropical Medicine and Health Vol. 32 no. 1 , 1-4. Mahairas, G., Sabo, P., Hickey, M., Singh, D., & Stover, C. 1996. Molecular

Analysis of Genetic Differences between Mycobacterium bovis BCG and Virulent M. Bovis. J Bacteriology , 1274-82.

Mahon, C., Lehman, D., & Manuselis, G. 2011. Textbook of Diagnostic Microbiology. Maryland Heights, Missiouri: Saunders Elsevier.

Mathur, M.L., LoBue, P.A., & Catanzaro, A. 1999. Evaluation of a Serologic Test for the Diagnosis of Tuberculosis. The International Journal of Tuberculosis and Lung Disease , 732-5.

Munk, M.E., Arend, S.M., Brock, I., Ottenhoff, T H., & Andersen, P. 2001. Use of ESAT-6 and CFP-10 Antigens for Diagnosis of Extrapulmonary Tuberculosis. The Journal of Infectious Disease, 183 (1).

Narayan, S., & Kumudini, T. 2012. A Comparison of Three Different Staining Methods for the Detection of Acid Fast Bacili (Mycobacterium tuberculosis) in Sputum Samples. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Sciences , 14 (14), 1-2.

Nayak, S., & Acharjya, B. (2012). Mantoux Test and It's Interpretation. Indian Dermatology Online Journal, 3 (1), 2-6.

43

Parkash, O., Singh, B., & Pai, M. 2009. Regions of Differences Encoded Antigens as Targets for Immunodiagnosis of Tuberculosis in Humans. Scandinavian Journals of Immunology , 345-57.

Patel, B., & Douglas, T. 2012. Creating a Virtual Slide Map from Sputum Smear Images for Region-of-interest Localisation in Automated Microscopy. Computer Methods and Programs in Biomedicine, 108 (1), 38-52.

Peterson, E., Nakasone, A., Platon-DeLeon, J., Jang, Y., de La Maza, L., & Desmond, E. 1999. Comparison of Direct and Concentrated Acid-Fast Smears to Identify Specimens Culture Positive. J Clin Microbiology , 3564-8.

Pusponegoro, H.D., Wirya, IW., Pudjiadi, AH., Bisanto, J., & Zulkarnain, S. Z. 2011. Dasar-dasar Metodologi Penelitian Klinis (4 ed.). Jakarta: CV. Sagung Seto.

Ryan, KJ., Ray, CG., Champoux, JJ., Neidhardt, FC., Drew, WL., & Plorde, J. J. 2004. Sherris Medical Microbiology. New York: McGraw-Hill Medical. Shen, GH., Chiou, CS., Hu, ST., Wu, KM., & Chen, JH. 2011. Rapid

Identification of the Mycobacterium tuberculosis Complex by Combining the ESAT-6/CFP-10 Immunochromatographic Assay and Smear Morphology. Journal of Clinical Microbiology , 902-7.

Smith, I. 2003. Mycobacterium tuberculosis Pathogenesis and Molecular Determinants of Virulence. Clinical Microbilogy Review vol. 16 , 463-96. Tanoue, S., Mitarai, S., & Shisido, H. 2002. Comparative Study on the Use of

Solid Media: Lowenstein-Jensen and Ogawa in the Determination of Anti-Tuberculosis Drugs Susceptibility. Tuberculosis vol 82 , 63-7.

Valadas, E., Hänscheid, T., Fernandes, M., & Antunes, F. 2003. Smear Microscopy to Diagnose Tuberculosis Early and Prevent Further Transmission in a Population with a High Prevalence of HIV Infection. Clinical Microbiolgy Infection , 1045-7.

Van Pixteren, LA., Ravn, P., Agger, EM., Pollock, J., & Andersen, P. 2000. Diagnosis of Tuberculosis Based on the Two Spesific Antigens ESAT-6 and CFP-10. Clinical and Diagnostic Laboratory Immunology , 155-160.

Weyer, K., Mirzayev, F., Gemert, W. v., & Gilpin, C. 2011. Commercial Serodiagnostic Test for Diagnosis of Tuberculosis. Geneva: World Health Organization Press.

WHO. 1994. Framework for Effective Tuberculosis Control. Switzerland: World Health Organization Press.

WHO. 2007. Revision of the Case Definition for Sputum Smear Positive Pulmonary TB. Geneva: WHO.

WHO. 2007. Use of Liquid TB Culture and Drug Susceptibility Testing (DST) in Low and Medium Income Settings. Geneva: WHO.

WHO. 2010. Framework for Implementing New Tuberculosis Diagnosis. Geneva: World Health Organization Press.