Daya antibakteri minyak atsiri daun kemangi (Ocimum basilicum L.) sebagai zat aktif dan sediaan gel terhadap Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 dan Bacillus Subtilis ATCC 6633 - USD Repository

  

DAYA ANTIBAKTERI MINYAK ATSIRI DAUN KEMANGI (Ocimum

basilicum L.) SEBAGAI ZAT AKTIF DAN SEDIAAN GEL TERHADAP

Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 DAN Bacillus subtilis ATCC 6633

  

SKRIPSI

  Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.)

  Program Studi Farmasi Oleh:

  Marsela Lotjita Parahita NIM : 098114062

  

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

  

DAYA ANTIBAKTERI MINYAK ATSIRI DAUN KEMANGI (Ocimum

basilicum L.) SEBAGAI ZAT AKTIF DAN SEDIAAN GEL TERHADAP

Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 DAN Bacillus subtilis ATCC 6633

  

SKRIPSI

  Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S. Farm.)

  Program Studi Farmasi Oleh:

  Marsela Lotjita Parahita NIM : 098114062

  

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

• ---- MAHATMA GANDHI----

  This thesis IS Dedicated to: Jesus christ Mother mary My late dad: IGN. SUKASWORO

  My wonderful mom: C. SARTINI] My sisters: ima, ika, dita And my almamater

  

PRAKATA

  Puji dan syukur penulis haturkan kepada Tuhan yang Maha Esa atas berkat dan rahmat-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan laporan penelitian yang berjudul “Daya Antibakteri Minyak Atsiri Daun Kemangi (Ocimum basilicum L.) Sebagai Zat Aktif dan Sediaan Gel Terhadap Staphylococcus epidermidis ATCC dan Bacillus subtilis ATCC 6633

  12228

  ” ini untuk memenuhi salah satu syarat untuk memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S. Farm) di Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta.

  Selesainya penulisan laporan penelitian ini, tidak terlepas dari bantuan baik berupa bimbingan, dukungan, sarana, maupun finansial dari berbagai pihak.

  Oleh karena itu, dengan rendah hati penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada:

1. Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

  2. C. M. Ratna Rini Nastiti, M.Pharm., Apt. selaku Dosen Pembimbing yang telah memberikan pengarahan, masukan, kritik, saran dan semangat selama persiapan, penelitian, sampai penyusunan skripsi ini.

  3. Rini Dwiastuti, M.Sc., Apt., selaku Dosen Penguji yang telah memberikan waktu, kesempatan, masukan dan bimbingan selama kuliah maupun selama penyelesaian skripsi ini.

  4. Yohanes Dwiatmaka, M.Si., selaku Dosen Penguji yang telah memberikan waktu, kesempatan, masukan dan bimbingan selama kuliah maupun selama penyelesaian skripsi ini.

  5. Seluruh dosen Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, yang telah memberikan ilmu selama penulis menempuh pendidikan di Fakultas Farmasi.

  6. Seluruh staf laboratorium, staf kebersihan, dan staf keamanan Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. Terutama Pak Mukminin, Pak Wagiran, Mas Sigit, Pak Musrifin, Mas Agung, Pak Parlan, Pak Yuwono yang telah banyak membantu kelancaran penulis dalam melakukan penelitian.

  7. Agustina Prita Pangudyaswara, Fitri Apriliyani Tiran, dan Putu Eny Guna Pramita, selaku teman seperjuangan skripsi atas kerjasama, semangat dan masukan yang diberikan.

  8. Teman-teman „Gosipol‟, Agustina Erni Purnamasari, Christina Yessy Jessica,

  F. Eky Suprabawati, Katherine Jessica Ariani, Bernadhea Wikan Pangesti, Diah Intan Sari, Yenny atas persahabatan, semangat, dan kekompakan selama 4 tahun ini.

  9. Teman-teman FKK B 2009, FSM B 2009, Kelompok praktikum C 2009, atas kebersamaan, kerjasama dan kenangan selama di Fakutas Farmasi.

  10. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan satu per satu yang telah membantu penulis dalam menyelesaikan pendidikan di perguruan tinggi ini.

  Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan dalam penyusunan skripsi ini, sehingga kritik dan saran yang membangun sangat dibutuhkan penulis menuju perubahan yang lebih baik. Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi pembaca pada khususnya dan ilmu pengetahuan pada umumnya.

  Penulis

  

DAFTAR ISI

  HALAMAN SAMPUL ................................................................................. i HALAMAN JUDUL .................................................................................... ii HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ............................................ iii HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................... iv HALAMAN PERSEMBAHAN .................................................................... v PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ........................................................ vi LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI.......................... vii PRAKATA ................................................................................................... viii DAFTAR ISI ................................................................................................ xi DAFTAR TABEL ........................................................................................ xv DAFTAR GAMBAR .................................................................................... xvi DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. xvii

  INTISARI ..................................................................................................... xviii

  

ABSTRACT ................................................................................................... xix

  BAB I PENGANTAR ................................................................................... 1 A. Latar Belakang ............................................................................ 1 B. Perumusan Masalah ..................................................................... 4 C. Keaslian Penelitian ...................................................................... 4 D. Manfaat Penelitian ....................................................................... 5 1. Manfaat teoretis ..................................................................... 5 2. Manfaat praktis ...................................................................... 5 E. Tujuan Penelitian......................................................................... 5

  BAB II PENELAAHAN PUSTAKA ............................................................ 6 A. Bau Kaki .................................................................................... 6 B. Staphylococcus epidermidis ....................................................... 7 C. Bacillus subtilis .......................................................................... 7 D. Uji Daya Antibakteri .................................................................. 8 E. Minyak Atsiri Daun Kemangi .................................................... 9 F. Destilasi Minyak Atsiri .............................................................. 11 G. Gel ............................................................................................. 12 H. Landasan Teori .......................................................................... 13 I. Hipotesis .................................................................................... 15 BAB III METODOLOGI PENELITIAN ...................................................... 16 A. Jenis dan Rancangan Penelitian .................................................. 16 B. Variabel dan Definisi Operasional .............................................. 16 1. Variabel penelitian ............................................................... 16 2. Definisi operasional ............................................................. 16 C. Bahan Penelitian ........................................................................ 17 D. Alat Penelitian ........................................................................... 17 E. Tata Cara Penelitian ................................................................... 18 1. Identifikasi tanaman kemangi ............................................... 18 2. Pengumpulan daun kemangi ................................................. 18 3. Destilasi minyak atsiri daun kemangi ................................... 18 4. Karakterisasi minyak atsiri daun kemangi ............................ 19

  5. Identifikasi kualitatif minyak atsiri daun kemangi dengan metode KLT ..................................................................................... 20 6. Penyiapan media uji ............................................................. 20 7. Uji daya antibakteri minyak atsiri daun kemangi dengan metode difusi sumuran...................................................................... 20

  8. Penentuan nilai KHM dan KBM dengan dilusi padat ............ 22 9.

  Pembuatan gel anti bau kaki minyak atsiri daun kemangi ..... 24 10.

  Uji sifat fisik sediaan gel anti bau kaki minyak atsiri daun kemangi ............................................................................... 25

  11. Uji daya antibakteri sediaan gel anti bau kaki minyak kemangi terhadap Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis dengan metode difusi sumuran ......................................................... 26 F. Analisis Data ............................................................................. 26

  BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ....................................................... 28 A. Identifikasi Daun Kemangi ........................................................ 27 B. Penyiapan Bahan Daun Kemangi ............................................... 27 C. Destilasi Minyak Atsiri Daun Kemangi ...................................... 27 D. Karakterisasi Minyak Atsiri Daun Kemangi ............................... 29 E. Uji Daya Antibakteri Minyak Atsiri Daun Kemangi terhadap Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis ....................... 32 F. Penentuan nilai KHM dan KBM Minyak Atsiri Daun Kemangi . 38 G. Formulasi Sediaan Gel Anti Bau Kaki Minyak Atsiri Daun Kemangi .................................................................................................. 41

  H.

  Uji Sifat Fisik Sediaan Gel Anti Bau Kaki ................................. 44 I. Uji daya antibakteri Sediaan Gel Anti Bau Kaki Minyak Atsiri Daun

  Kemangi terhadap Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis .................................................................................................. 47

  BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ........................................................ 50 A. Kesimpulan ................................................................................ 50 B. Saran.......................................................................................... 50 DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 51 LAMPIRAN ................................................................................................. 54 BIOGRAFI PENULIS .................................................................................. 85

  

DAFTAR TABEL

  Tabel I. Formula sediaan gel anti bau kaki minyak atsiri daun kemangi .... 25 Tabel II. Hasil uji

  ± SD diameter zona hambat minyak atsiri daun kemangi terhadap Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis ............ 33 Tabel III. Hasil uji distribusi normal data diameter zona daya hambat variasi konsentrasi minyak atsiri daun kemangi terhadap Staphylococcus

  epidermidis dan Bacillus subtilis ................................................... 36

  Tabel IV . Hasil post hoc test diameter zona daya hambat variasi konsentrasi minyak atsiri daun kemangi terhadap Staphylococcus epidermidis 37 Tabel V. Hasil post hoc test diameter zona daya hambat variasi konsentrasi minyak atsiri daun kemangi terhadap Staphylococcus epidermidis 37 Tabel VI. Hasil uji KHM dan KBM minyak atsiri daun kemangi terhadap

  Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis .......................... 38

  Tabel VII. Data hasil pengukuran viskositas dan daya sebar .......................... 45 Tabel VIII. Hasil

  ± SD

  pengukuran diameter zona hambat sediaan gel anti bau kaki terhadap Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis ... 46 Tabel IX. Hasil uji distribusi normal data diameter zona hambat gel minyak atsiri daun kemangi terhadap Staphylococcus epidermidis dan Bacillus

  subtilis .......................................................................................... 47

  Tabel X. Hasil post hoc test diameter zona hambat gel minyak atsiri daun kemangi terhadap Staphylococcus epidermidis .............................. 47 Tabel XI. Hasil post hoc test diameter zona daya hambat gel minyak atsiri daun kemangi terhadap Bacillus subtilis ................................................ 48

  

DAFTAR GAMBAR

  Gambar 1. Morfologi tanaman kemangi ....................................................... 9 Gambar 2. Daun kemangi ............................................................................ 27 Gambar 3. Minyak atsiri daun kemangi ........................................................ 28 Gambar 4. Profil kromatografi lapis tipis ..................................................... 31 Gambar 5. Grafik konsentrasi vs diameter zona hambat minyak atsiri daun kemangi terhadap Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis

   ..................................................................................................

  34 Gambar 6. Sediaan gel anti bau kaki minyak atsiri daun kemangi ................ 43

  

DAFTAR LAMPIRAN

  Lampiran 1. Pengesahan Surat Determinasi .................................................. 54 Lampiran 2. Surat keterangan Staphylococcus epidermidis ........................... 55 Lampiran 3. Surat keterangan Bacillus subtilis .............................................. 56 Lampiran 4. Data rendemen destilat minyak atsiri daun kemangi .................. 57 Lampiran 5. Data karakterisasi minyak atsiri daun kemangi .......................... 57 Lampiran 6. Uji daya antibakteri minyak atsiri daun kemangi terhadap

  Staphylococcus epidermidis ....................................................... 58

  Lampiran 7. Uji daya antibakteri minyak atsiri daun kemangi terhadap Bacillus

  subtilis ....................................................................................... 59

  Lampiran 8. Penentuan nilai KHM dan KBM Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis ..........................................................................

  60 Lampiran 9. Sediaan gel anti bau kaki minyak atsiri daun kemangi ............... 63 Lampiran 10. Uji aktivitas antibakteri gel anti bau kaki minyak atsiri daun kemangi ..................................................................................... 64 Lampiran 11. Pengukuran pH sediaan gel anti bau kaki minyak atsiri daun kemangi ..................................................................................... 66 Lampiran 12. Pengukuran uji sifat fisik sediaan gel minyak atsiri daun kemangi

  .................................................................................................. 66 Lampiran 13. Hasil perhitungan-perhitungan statistik ................................... 66

  

INTISARI

  Minyak kemangi (Ocimum basilicum L.) memiliki daya antibakteri terhadap bakteri penyebab bau pada kaki. Eugenol adalah senyawa di daun kemangi yang mempunyai aktivitas sebagai antibakteri. Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui daya antibakteri minyak kemangi dan gel minyak kemangi dalam menghambat bakteri Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis .

  Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni dengan rancangan penelitian acak lengkap pola searah. Tahapan penelitian meliputi uji daya antibakteri minyak atsiri daun kemangi terhadap beberapa variasi konsentrasi dengan difusi sumuran; dilanjutkan dengan penentuan nilai KHM dan KBM dengan dilusi padat, dan pengujian daya antibakteri gel minyak kemangi. Data yang diperoleh dianalisis menggunakan uji normalitas Shapiro Wilk, dilanjutkan dengan uji Kruskal-Wallis dan uji Wilcoxon menggunakan program R

  2.14.1. Berdasarkan hasil penelitian, minyak kemangi mempunyai kemampuan menghambat bakteri Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis. Nilai KHM dan KBM minyak atsiri daun kemangi terhadap Staphylococcus berturut-turut adalah 2% v/v dan 2.5% v/v, dan terhadap Bacillus

  epidermidis

subtilis, yaitu berturut-turut 2%v/v dan 2.5% v/v. Daya antibakteri gel minyak

  kemangi dan minyak kemangi 15% tidak berbeda bermakna. Kata kunci: minyak kemangi, Staphylococcus epidermidis, Bacillus subtilis, gel, antibakteri

  

ABSTRACT

  Basil oil (Ocimum basilicum L.) has antibacterial power against odor- causing bacteria on the feet. Eugenol in basil leaves is compound that has an activity as an antibacterial antibacterial activity. The aim of this study was to determine the antibacterial gel basil oil and basil oil in inhibiting the bacteria

  Staphylococcus epidermidis and Bacillus subtilis.

  This study was an experimental study design which had one way complete random design. Research began with a study of antibacterial activity of essential oils of basil leaves on some variation of the concentration with diffusion wells; followed by determination of MIC and MBC values with solid dilution; gel of basil leave oils has also tested in terms of antibacterial activity against

  

Staphylococcus epidermidis and Bacillus subtilis. Data were analyzed using the

  Shapiro Wilk normality test, followed by Kruskal-Wallis test and Wilcoxon test by using R 2.14.1 program.

  The research result of basil oil had the ability to inhibit the bacteria Staphylococcus epidermidis and Bacillus subtilis. MIC and MBC values of basil essential oils against Staphylococcus epidermidis that are 2% v/v and 2.5% v/v, and against Bacillus subtilis that are 2% v/v and 2.5% v/v. Antibacterial activity of gel basil oil and 15% basil oil was not significantly different.

  Keywords: basil oil, Staphylococcus epidermidis, Bacillus subtilis, gel, antibacteria

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Indonesia memiliki iklim tropis yang panas dan lembab sepanjang tahun. Keadaan yang seperti ini dapat menyebabkan timbulnya keringat yang berlebih,

  dan menimbulkan bau tak sedap pada tubuh yang mempunyai banyak kelenjar keringat. Keringat pada dasarnya tidak berbau dan mudah menguap, namun, di daerah-daerah tertentu tidak selalu mudah menguap, seperti di ketiak dan kaki. Hal ini dapat memicu pertumbuhan bakteri yang dapat menguraikan keringat membentuk senyawa yang menghasilkan bau tak sedap. Bromhidrosis atau bau badan yang tidak enak paling sering disebabkan karena adanya keringat yang berlebih dari kelenjar keringat eccrine atau apocrine, yang kemudian akan menyebabkan pertumbuhan bakteri yang berlebihan di kulit. Kelenjar keringat

  

apocrine terletak di ketiak, sedangkan kelenjar keringat eccrine ada yang terletak

  di kaki (Jacknin, 2001). Permukaan tubuh yang bau dapat ditimbulkan oleh keringat, sebum, dan sel-sel kulit mati yang telah diuraikan oleh bakteri menjadi senyawa berbau (Prabowo dkk., 2012). Bromhidrosis di kaki yang terjadi ketika kulit menebal, dalam keadaan panas, atau dalam keadaan basah dapat menjadi tempat tumbuh yang baik untuk bakteri. Bakteri akan merusak lapisan paling atas dari sel kulit dan sel keringat, kemudian membentuk senyawa kimia yang menghasilkan bau tak enak (Jacknin, 2001).

  Beberapa bakteri yang diduga dapat menjadi penyebab bau badan ialah bakteri Staphylococcus epidermidis, Cornybacterium acne, Pseudomonas

  

aeruginosa dan Streptococcus pyrogenes (Endarti, Yulinah, dan Soediro, 2002).

  Selain itu, bau pada kaki dapat disebabkan oleh fungi Candida albicans dan bakteri Staphylococcus aureus (Tierno, 2001).

  Bacillus subtilis merupakan salah satu spesies flora normal yang banyak

  ditemukan di kulit. Golongan bakteri Bacillus sp. diketahui mempunyai peranan penting sebagai penyebab bau kaki. Bacillus subtilis memegang peranan sebesar 11,5% dalam menyebabkan bau kaki, sedangkan Staphylococcus epidermidis memegang peranan 86,5% (Ara dkk., 2006).

  Staphylococcus epidermidis merupakan suatu flora normal di kulit

  manusia yang mampu menimbulkan infeksi pada kulit atau jaringan lunak (Jawetz, Melnick, dan Adelberg, 1996). Bakteri Staphylococcus epidermidis pada kulit akan mendegradasi asam amino leucine menjadi isovaleric acid. Ketika sel bakteri di kulit berkembangbiak di keringat, bakteri akan memecah beberapa protein di keringat (Pommerville, 2011).

  Masalah bau kaki ini melibatkan beberapa spesies bakteri, dan dua bakteri yang termasuk adalah Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis.

  

Staphylococcus epidermidis merupakan bakteri mayoritas di kulit, sehingga peran

  bakteri ini dalam menyebabkan bau kaki cukup tinggi. Bacillus subtilis merupakan bakteri yang memiliki enzim leucine dehydrogenase paling tinggi, sehingga mampu menimbulkan bau kaki yang paling menyengat (Ara dkk., 2006).

  Mekanisme terjadinya bau kaki adalah karena timbulnya keringat dari kelenjar eccrine yang mengandung kandungan organik seperti asam amino leusin.

  Bakteri di kaki yang mempunyai enzim pendegradasi leucine dehydrogenase akan mendegradasi asam amino leusin di keringat menjadi isovaleric acid, yaitu suatu yang merupakan senyawa berbau. Bakteri yang

  volatile lower fatty acids

  mempunyai banyak enzim leucine dehydrogenase akan menimbulkan bau yang sangat menyengat (Ara dkk., 2006).

  Minyak atsiri yang banyak di alam Indonesia memegang peranan bagi kesehatan. Di Indonesia, penggunaan minyak atsiri dapat melalui beberapa cara, yaitu melalui mulut (oral), pemakaian luar (topikal), pernapasan (inhalasai atau kemoterapi), dan pestisida nabati (Kardinan, 2005).

  Bagian dari tanaman kemangi (Ocimum basilicum L.) yang banyak digunakan adalah daunnya. Dalam penggunaannya, daun kemangi sering disuling dan diambil kandungan minyak atsirinya (Dzulkarnain dan Wahjoedi, 1996). Minyak atsiri kemangi mempunyai kandungan senyawa dominan seperti linalool, methylclavicol (estragol), 1-8 sineol, eugenol, terpineol, geraniol(1,6,7) (Sastroamidjojo, 2001).

  Senyawa kimia dalam minyak atsiri, yaitu eugenol, linalool (Knolbloch et

  

al. cit., Hadipoentyanti dan Sri, 2008) dan metil eugenol dapat bersifat sebagai

  anti bakteri. Eugenol adalah senyawa turunan fenol yang dapat berfungsi sebagai bakteriostatik terhadap fungi maupun bakteri. Eugenol dapat mengganggu struktur lipid bilayer membran luar bakteri, memecah lipid dan mitokondria, serta menyebabkan kebocoran protein membran sel bakteri (Winarsih, Onggung, dan Septiana, 2010).

  Pembuatan minyak atsiri daun kemangi ke dalam bentuk sediaan gel anti bau kaki diduga mempunyai afinitas bahan aktif dengan basis sediaan yang berbeda, sehingga mempengaruhi pelepasan zat aktif dari basis yang akan mempengaruhi pelepasan bahan aktif dari basis yang mempengaruhi efektivitas sediaan gel menghambat pertumbuhan bakteri penyebab bau pada kaki.

1. Perumusan masalah

  1) Apakah minyak atsiri daun kemangi mempunyai daya antibakteri terhadap

  Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis?

  2) Bagaimanakah daya hambat minyak atsiri daun kemangi dan gel minyak atsiri daun kemangi terhadap Staphylococcus epidermidis dan Bacillus

  subtilis ? 2.

   Keaslian penelitian

  Dewi (2008), melaporkan bahwa minyak atsiri daun kemangi mempunyai aktifitas antifungi terhadap Malassezia furfur dengan konsentrasi terendah adalah 6,25% (v/v). Komponen yang dimungkinkan berperan adalah golongan terpenoid.

  Berdasarkan penelitian Maryati, Ratna, dan Triastuti (2007), tanaman

  Ocimum basilicum L. mempunyai aktivitas antibakteri terhadap bakteri Staphylococcus aureus dan Escherichia coli dengan nilai KBM berturut-turut

  adalah 0,5% v/v dan 0,25% v/v.

  Penelitian Lertsatitthanakorn dan Satayavongthip (2012), membahas tentang formulasi gel kaki deodoran dari minyak cinnamon yang dapat dijadikan salah satu alternatif kosmetik yang dapat menurunkan bakteri penyebab bau kaki.

  Sejauh penelusuran pustaka yang dilakukan oleh penulis, penelitian tentang “Daya Antibakteri Minyak Atsiri Daun Kemangi (Ocimum basilicum L.) Sebagai Zat Aktif dan Sediaan Gel Terhadap Staphylococcus epidermidis

  ATCC 12228 dan Bacillus subtilis ATCC 6633 ” belum pernah dilakukan.

3. Manfaat penelitian a.

  Manfaat teoretis Menambah informasi ilmu pengetahuan, khususnya dalam bidang farmasi, mengenai pengembangan dan pemanfaatan tanaman obat tradisional yang kandungannya berkhasiat sebagai antibakteri.

  b.

  Manfaat praktis Sebagai salah satu alternatif untuk mengurangi bau di kaki dengan menghambat bakteri Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis menggunakan minyak atsiri daun kemangi.

B. Tujuan Penelitian a.

  Memastikan minyak atsiri daun kemangi mempunyai daya antibakteri terhadap Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis.

  b.

  Jika minyak atsiri daun kemangi mempunyai daya antibakteri, maka digunakan untuk mengetahui daya hambat minyak atsiri daun kemangi dan formula gel minyak atsiri daun kemangi terhadap Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis.

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Bau Kaki Bau kaki disebut juga bromohidrosis, sedangkan kaki berkeringat disebut

  

hiperhidrosis . Bau kaki terutama disebabkan oleh keringat. Menurut Toselli,

  (2005), terdapat sekitar 250.000 kelenjar keringat di kaki yang lebih banyak dibandingkan dengan bagian tubuh yang lainnya. Keringat di kaki sebenarnya tidak berbau keluar, sama seperti keringat di ketiak atau di tempat lain. Tetapi, bakteri di permukaan kaki mengolah keringat dan timbullah bau, ditambah sepatu dan kaus kaki yang menciptakan lingkungan yang gelap dan lembap yang memungkinkan bakteri berkembang subur (Leyner and Goldberg, 2006).

  Terdapat dua jenis kelenjar keringat yaitu kelenjar keringat eccrine dan

  

apocrine . Kelenjar keringat apocrine dapat ditemukan di ketiak, areola mammae,

  dan di bagian alat kelamin, sedangkan kelenjar keringat eccrine dapat ditemukan di seluruh tubuh termasuk di kaki. Keringat eccrine sebagian besar terdiri dari air tetapi juga mengandung sodium klorida, asam laktat dan urea dalam jumlah yang kecil. Keringat ini pada dasarnya tidak berbau tajam, tetapi dapat menjadi bau yang tidak enak karena disebabkan oleh bakteri yang ada di kulit. Pada awalnya telah diketahui bahwa penyebab bau pada kaki adalah rantai asam lemak dari

  

pelargonic acid dan caproic acid, namun belakangan diketahui bahwa penyebab

bau pada kaki, yaitu isovaleric acid (Elsevier, 1997).

  Zat kimia yang paling banyak berada di kaki adalah asam isovalerat yang dengan intensitas asam isovalerat. Bau tak sedap dari kaki dapat diinkubasi dari keringat tubuh dan lipid dari bakteri. Kelenjar keringat eccrine adalah sumber nutrisi utama di kaki dan dapat menjadi nutrisi pula untuk pertumbuhan bakteri (Kanda et al., cit., Toller and Dodd, 1992).

  B.

  

Staphylococcus epidermidis

  Bakteri Staphylococcus epidermidis merupakan bakteri Gram-positif, koloni berwarna putih atau kuning, dan bersifat anaerob fakultatif. Bakteri ini tidak mempunyai lapisan protein A pada dinding sel, dapat meragi laktosa, tidak meragi manitol, dan bersifat koagulase negatif. Staphylococcus epidermidis dapat menyebabkan infeksi kulit ringan yang disertai dengan pembentukan abses.

  

Staphylococcus epidermidis biotipe-1 dapat menyebabkan infeksi kronis pada

manusia (Radji, 2010).

  Staphylococcus epidermidis merupakan suatu flora normal di kulit

  manusia yang termasuk dalam stafilokokus nonhemolitik aerob dan anaerob serta koagulase negatif. Bakteri aerob dan anaerob seringkali bersama-sama menimbulkan infeksi yang sinergis pada kulit atau jaringan lunak. Koloni S.

  

epidermidis berwarna abu-abu sampai putih pada isolasi pertama. Banyak koloni

  membentuk pigmen hanya bila telah lama dieramkan (Jawetz, Melnick, dan Adelberg, 1996).

C. Bacillus subtilis

  Bacillus subtilis adalah bakteri Gram positif yang membentuk endospora

  yang tahan terhadap kondisi lingkungan yang tidak menguntungkan, dan berbentuk batang. Merupakan bakteri yang motil dengan flagela dan bersifat aerobik (Devine, 2000).

  Bacillus subtilis diketahui terdapat pada kulit dan dapat menimbulkan bau yang kuat pada kaki dan dapat meningkat pada saat terjadi bau pada kaki.

  Menurut Takemura et al., bahwa bau tidak enak disebabkan oleh Bacillus subtilis yang didukung dengan adanya isobutyric acid, isovaleric acid dan 2- . Isovaleric acid diprediksikan diproduksi di kulit ketika asam

  methylbutyric acid

  amino leusin yang ada dalam keringat dimetabolisme oleh mikroorganisme normal di kulit, yaitu salah satunya oleh Bacillus subtilis (Ara et al., 2006).

D. Uji Daya Antibakteri

  Uji daya antibakteri dapat dilakukan menggunakan dua cara, yaitu: 1. Metode difusi

  Prinsip metode difusi adalah pengukuran potensi antibakteri berdasarkan pengamatan diameter daerah hambatan bakteri karena berdifusinya obat dari titik awal pemberian ke daerah difusi. Pada metode difusi ini digunakan paper disk, lubang sumuran, atau silinder tak beralas yang mengandung senyawa antibakteri di atas media yang diinkubasi pada suhu 37 C selama 18-24 jam. Setelah penginkubasian didapatkan diameter hambatan jernih sebagai daya antibakteri (Jawetz, Melnick, and Adelberg, 1996).

2. Metode dilusi

  Masing-masing konsentrasi larutan uji ditambahkan suspensi bakteri uji berdasarkan kekeruhan media. Media yang kekeruhannya paling tipis merupakan media dengan konsentrasi yang dapat menghambat pertumbuhan bakteri. Potensi antibakteri dapat ditentukan dengan melihat konsentrasi terendah yang dapat menghambat bakteri (McKane dan Kandel, 1996).

E. Minyak Atsiri Daun Kemangi

  Minyak atsiri merupakan salah satu jenis minyak nabati yang multimanfaat. Minyak atsiri berupa cairan kental yang dapat disimpan pada suhu ruangan. Minyak atsiri dapat diperoleh dari berbagai tanaman seperti daun, bunga, buah, biji, kulit biji, batang, akar, atau rimpang. Ciri dari minyak atsiri adalah mudah menguap dan beraroma khas (Syahbana, 2010).

  Minyak atsiri daun kemangi adalah minyak esensial yang berasal dari tanaman kemangi (Ocimum basilicum L.) yang termasuk famili Lamiaceae (mint

  family) (Mars, 2007).

  

Gambar 1. Morfologi tanaman kemangi (McGuire, 2012).

1. Deskripsi tanaman daun kemangi

  Klasifikasi tanaman Ocimum basilicum L. menurut Kartesz (2013): Kerajaan : Plantae Subkerajaan : Tracheobionta Superdivisi : Spermatophyta Divisi : Magnoliophyta Kelas : Magnoliopsida Subkelas : Asteridae Orde : Lamiales Suku : Lamiaceae Genus : Ocimum L.

  Spesies : Ocimum basilicum L. Sinonim : Ocimum americanum L., Ocimum album L.,

  Basilicum citratum Rumph, Ocimum menthaefolium Hochst (Seidemann, 2005).

  Nama daerah : Solasih (Sunda); telasih (Jawa); dan amping, kukuru (Minahasa) (Agromedia, 2008).

  Kemangi merupakan tanaman berupa semak dengan tinggi mencapai 60 cm dengan batang berkayu, berbentuk bulat, dan bercabang. Daun tunggal, berbentuk bulat telur, dengan panjang 1-5 cm, dan letaknya berhadapan. Bunga berbentuk malai, daun pelindung berbentuk elips, dan berwarna hijau. Kelopak bunga berbentuk ginjal dan berambut. Benang sari berwarna kuning, sedangkan kepala sari berwarna kuning kecokelatan. Putik bercabang dua, berwarna ungu dan kepala putik berwarna putih. Mahkota bunga berbibir dua dan berwarna putih (Agromedia, 2008).

  Kegunaan daun kemangi, yaitu dapat dimanfaatkan untuk mengobati bau badan dan bau keringat, bau mulut, badan lesu, ejakulasi primer, peluruh gas perut, peluruh haid, peluruh ASI, panas dalam dan sariawan (Hariana, 2008). Minyak atsiri daun kemangi mengandung 1,8-cineole, eugenol,

  limonene, ocimene, geranial, cis-3-hexenol, citronellol, alpha-terpineol, camphor, methyleugenol, methyl cinnamate, dan linalool (Khare, 2004).

2. Deskripsi minyak atsiri daun kemangi

  Minyak atsiri daun kemangi dapat dimanfaatkan untuk menghilangkan bau badan dan bau mulut. Minyak atsiri daun kemangi banyak digunakan sebagai bahan campuran pembuatan obat ataupun untuk perawatan tubuh seperti sabun mandi, parfum, body lotion, minyak gosok, dan permen pelega tenggorokan (Putriyanti dkk., 2009). Menurut Khare (2004), minyak atsiri daun kemangi (Ocimum basilicum) mempunyai aktivitas antibakteri dari

  Bacillus subtilis dan Staphylococcus sp.. Senyawa yang ditemukan dapat

  sebagai antibakteri adalah eugenol. Kandungan bahan aktif utama dari minyak atsiri daun kemangi adalah eugenol yaitu berkisar 30-46% (Kardinan, 2005).

F. Destilasi Minyak Atsiri

  Terdapat tiga cara yang biasa dilakukan untuk mengambil komponen minyak atsiri, yaitu destilasi, ekstraksi memakai pelarut dan pengaliran udara atau aerasi (Robinson, 1995). Cara yang lazim digunakan untuk mendapatkan minyak atsiri adalah dengan penyulingan (Kardinan, 2005). Destilasi atau penyulingan adalah proses pemisahan komponen yang berupa cairan atau padatan dari dua macam campuran, berdasarkan titik uapnya dan proses ini dilakukan terhadap minyak atsiri yang tidak larut air (Guenther, 2006). Tiga jenis destilasi, yaitu:

  1. Destilasi air Bahan-bahan tanaman yang didestilasi langsung terkena dasar ketel dan air. Sesuai untuk simplisia kering yang tidak rusak dengan pendidihan

  (Departemen Kesehatan RI, 1985).

  2. Destilasi uap air Bahan tanaman berinteraksi dengan uap air panas dengan tekanan lebih dari 1 atm (Departemen Kesehatan RI, 1985). Digunakan untuh bahan yang mengandung minyak atsiri dengan titik didih tinggi (Guenther, 2006).

  3. Destilasi uap dan air Bahan tanaman tidak mengalami kontak langsung dengan dasar ketel karena diletakkan dalam angsang alat destilasi (Guenther, 2006). Untuk bahan yang kering atau segar yang mungkin rusak saat pendidihan (Tyler et al., 1988).

G. Gel

  Menurut USP, gel didefinisikan sebagai sistem semisolid yang terdiri dari dari partikel inorganik kecil atau molekul organik yang besar yang interpenetrated oleh cairan. Gel juga didefinisikan sebagai sistem yang semi rigid yang membatasi pergerakan dari medium dispers oleh jaringan ikatan tiga dimensi dari partikel atau makro partikel di medium pendispers (Troy, 2006).

  Pembuatan gel menggunakan gelling agents yang merupakan suatu polimer yang membentuk matriks tiga dimensi karena tingginya kadar dari cross-

  

link ketika didispersikan ke dalam pelarut. Konsentrasi gelling agent yang

  digunakan adalah berkisar antara 0,5%

• – 10%, untuk membatasi pergerakan dari medium dispers yang terjebak dalam medium pendispernya yang kemudian akan meningkatkan viskositas sediaan (Troy, 2006).

  Gel mempunyai lebih banyak air dibandingkan krim dan ointment. Alkohol banyak ditambahkan pada formulasi pembuatan gel, karena dengan adanya air dan alkohol banyak obat yang mudah larut. Alkohol juga berperan sebagai permeation enhancer yang membantu penetrasi obat ke dalam kulit, selain itu mempercepat pengeringan ketika diaplikasikan di kulit dan memberikan sensasi dingin (Desai, 2007).

  ®

  Salah satu contoh gelling agents adalah carbomer (Carbopol ) yang memiliki bobot molekul yang tinggi, sintetik, polimer yang larut dalam air dari hasil derivat acrylic acid (Desai and Mary, 2007).

H. Landasan Teori

  Minyak atsiri daun kemangi mengandung 1,8-cineole, eugenol, limonene, ocimene, geranial, cis -3-hexenol, citronellol, alpha-terpineol, camphor, methyleugenol, methyl cinnamate, dan linalool (Khare, 2004). Daun kemangi dapat dimanfaatkan untuk mengobati bau badan, bau keringat, bau mulut, badan lesu (Hariana, 2008). Senyawa kimia yang berperan sebagai antibakteri pada minyak atsiri daun kemangi adalah eugenol (Winarsih, Onggung, dan Septiana,

  Bau kaki yang disebut juga bromohidrosis disebabkan oleh keringat yang bercampur dengan bakteri. Zat kimia yang dapat menimbulkan bau kaki adalah

  

isovaleric acid (Toller and Dodd, 1992). Isovaleric acid adalah hasil degradasi

  asam amino leusin yang ada di keringat oleh bakteri yang mempunyai enzim leusine dehydrogenase (Ara et al., 2006).

  Staphylococcus epidermidis adalah suatu flora normal di kulit manusia

  yang dapat menimbulkan infeksi pada kulit (Jawetz, Melnick, dan Adelberg, 1996). Bacillus subtilis adalah salah satu penyebab bau pada kaki dengan memecah asam amino leusin menjadi isovaleric acid, penyebab bau yang tak sedap pada kaki. Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis adalah dua bakteri yang dapat menyebabkan bau yang kuat di kaki (Ara et al., 2006).

  Gel adalah sistem semi-rigid yang mampu menahan pergerakan dari medium dispernya dengan matriks tiga dimensi yang berasal dari medium pendispersnya (Troy, 2006). Matriks yang terbentuk berasal dari gelling agent yaitu contohnya adalah carbomer (Desai, 2007).

  Pengujian daya antibakteri ini bertujuan untuk melihat kemampuan minyak atsiri daun kemangi dan melihat nilai KHM dan KBM dalam menghambat bakteri penyebab bau pada kaki, serta mengetahui daya hambat minyak daun atsiri kemangi saat diformulasikan ke dalam bentuk sediaan gel.

I. Hipotesis 1.

  Minyak atsiri daun kemangi dan gel minyak atsiri daun kemangi mempunyai daya antibakteri terhadap Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis.

  2. Terdapat perbedaan daya hambat antibakteri antara minyak atsiri daun kemangi dan gel minyak atsiri daun kemangi terhadap Staphylococcus

  epidermidis dan Bacillus subtilis.

BAB III METODOLOGI PENELITIAN A. Jenis dan Rancangan Penelitian Penelitian ini termasuk penelitian ekperimental murni dengan rancangan penelitian acak lengkap pola searah. B. Variabel dan Definisi Operasional 1. Variabel penelitian a. Variabel bebas adalah variasi konsentrasi minyak atsiri daun kemangi dan bentuk sediaan gel anti bau kaki.

  b.

  Variabel tergantung adalah diameter zona hambat pertumbuhan bakteri Staphylococcus epidermidis dan Bacillus subtilis.

  c.

  Variabel pengacau terkendali yaitu suhu pembiakan dan inkubasi bakteri (37 C), waktu inkubasi (24 jam), diameter sumuran (8mm), kepadatan suspensi bakteri uji setara dengan larutan standar Mc Farland 0,5

  8

  (konsentrasi mikroba 1,5.10 CFU/ml), paparan sinar matahari pada saat proses destilasi dan penyimpanan (fotosensitif).

  d.

  Variabel pengacau tak terkendali adalah lingkungan tempat tumbuh tumbuhan daun kemangi.

2. Definisi operasional a.

  Minyak atsiri daun kemangi adalah minyak nabati yang mudah menguap dan beraroma khas yang berasal dari daun kemangi (Ocimum basilicum L.). Minyak atsiri diperoleh dari hasil destilasi uap dan air dengan meletakkan daun di atas angsang alat destilasi, sehingga tidak berkontak langsung dengan air di dasar ketel.

  b.

  Gel minyak atsiri daun kemangi adalah sediaan topikal semisolid yang mengandung bahan aktif minyak atsiri daun kemangi kadar 15% dengan pembawa senyawa hidrofilik, yaitu carbopol yang digunakan untuk mengurangi bau pada kaki sesuai dengan formula.

  c.

  Diameter zona hambat adalah parameter daya antibakteri berupa diameter area jernih yang dihasilkan agen antibakteri yang sudah dikurangi dengan diameter area jernih dari kontrol negatif dan lubang sumuran.

C. Bahan Penelitian

  Daun segar daun kemangi diperoleh dari Pasar Tradisional Beringharjo Yogyakarta, aquadest, etanol 96%, larutan standar Mc Farland 0.5, kultur murni

  

Staphylococcus epidermidis ATCC 12228 dan Bacillus subtilis ATCC 6633,

  Mueller Hinton Agar (Merck), Mueller Hinton Broth (Merck), propilenglikol, carbopol 940, trietanolamin, natrium sulfat anhidrat, dan gel Medi-Klin

  ® (Clindamycin phosphate 1,2%).

  D.

  

Alat Penelitian

Microbiological Safety Cabinet , oven, piknometer 10 ml, hand

refractometer , autoklaf, inkubator, pH meter, vortex, alat-alat gelas, ose, neraca

  analitik, mikropipet, pelubang sumuran no.4 (8mm), seperangkat alat destilasi, Viscotester Riot, double plate, mixer, dan penggaris (Butterfly

  ® ).

  E.

  

Tata Cara Penelitian

1. Identifikasi tanaman kemangi

  Identifikasi tanaman kemangi dilakukan di Laboratorium Farmakognosi Fitokimia Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta dengan mengacu pada buku panduan menurut Steenis (1975), untuk memastikan bahwa tanaman yang digunakan benar-benar tanaman kemangi.

  2. Pengumpulan daun kemangi

  Daun kemangi diperoleh dari Pasar Tradisional Beringharjo, Yogyakarta. Bagian tanaman yang digunakan adalah bagian daun berwarna hijau yang masih segar. Daun dipisahkan dari batang dan bunga, kemudian dilakukan pencucian untuk menghilangkan kotoran yang kemungkinan masih terdapat di daun.

  3. Destilasi minyak atsiri daun kemangi

  Destilasi uap dan air dilakukan dengan menimbang terlebih dahulu bobot daun kemangi segar, kemudian didestilasi menggunakan air selama 4-6 jam. Daun kemangi berada di atas air dengan adanya pembatas sehingga air tidak menyentuh daun kemangi secara langsung. Kemudian uap air dan minyak dialirkan melalui pendingin dan hasil destilasi ditampung. Destilat yang dihasilkan adalah berupa minyak dan air. Digunakan natrium sulfat anhidrat untuk menarik air dari hasil destilat minyak atsiri, sehingga yang didapatkan adalah minyak atsiri yang murni.