PENGEMBANGAN TUMBUHAN JAMBU BOL ( Eugenia malaccensis L. ) SEBAGAI OBAT ANTIDIABETES.

(1)

(2)

PENGEMBANGAN TUMBUHAN JAMBU BOL

(

Eugenia malaccensis

L. )

SEBAGAI OBAT ANTIDIABETES

Helmi Arifin, Apt, MS, Ph.D

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS ANDALAS

(3)

Team Peneliti

1. Helmi Arifin, Apt, (MS-ITB, Ph.D. USM Mal)

(Farmakologi, Toksikologi)

2. Henny Lucida, Apt, ( Ph.D. Curtin Univ. Aust)

(Farmasetika dan Stabilitas sediaan obat)

3. Roslinda Rasyid, Apt, (MSi-UNAND)

(4)

PENDAHULUAN

Ledakan DM tsb perlu diantisipasi dgn pembangunan

dibidang kesehatan ====>

a.l. Penyediaan obat DM

(LITBANGKES) :

Indonesia (Thn 2020) ====> penduduk ± 178 jt

prevalensi DM 4% /thn ====> 7 juta penderita DM

Asean (2010)

====> 19.4 juta penderita DM

(5)

Komplikasi/Penyulit :

stroke, neuropati autonomik (kardiovaskular),

nefropati (mis. kegagalan ginjal), disfungsi

saluran cerna, gangguan genitourinari dan seksual,

neuropati perifer dengan risiko ulcer pada kaki

(dapat menimbulkan amputasi), retinopati (dapat

menyebabkan kebutaan) dsb.

Penting obat Antidiabetes yang rasional

(6)

Sediaan Fitofarmaka

Obat sintetis beresiko tinggi

_{obat dari bahan alam}

Obat tradisional

_{Sediaan Fitofarmaka}

Serangkaian pengujian

Pre klinis sampai klinis

(7)

(8)

SAMPEL

EKSTRAK EKSTRAK

EKSTRAK TERSTANDAR EKSTRAK TERSTANDAR

FORMULASI TABLET FORMULASI TABLET SEDIAAN TERPILIH SEDIAAN TERPILIH Identifikasi & Ekstraksi Stabilitas Aktivitas UJI AKTIVITAS PENDAHULUAN UJI AKTIVITAS PENDAHULUAN Pemeriksaan Ekstrak Pemeriksaan Ekstrak UJI EVEKTIVITAS (ED-50) UJI EVEKTIVITAS (ED-50) UJI TOKSISITAS AKUT UJI TOKSISITAS AKUT UJI TOKSISTAS SUBKRONIS UJI TOKSISTAS SUBKRONIS UJI TOKSISITAS KHUSUS UJI TOKSISITAS KHUSUS = 2009 = 2010 = 2011

(9)

1. IDENTIFIKASI DAN EKSTRAKSI SAMPEL

2. SKRINING FITOKIMIA

3. STANDARISASI EKSTRAK

4. UJI AKTIVITAS EKSTRAK PREVENTIV TEST

5. UJI AKTIVITAS EKSTRAK CURATIV TEST

1. IDENTIFIKASI DAN EKSTRAKSI SAMPEL

2. SKRINING FITOKIMIA

3. STANDARISASI EKSTRAK

4. UJI AKTIVITAS EKSTRAK PREVENTIV TEST

5. UJI AKTIVITAS EKSTRAK CURATIV TEST

(10)

IDENTIFIKASI

Kingdom : Plantae

Divisio : Spermatophyta Sub division : Angiospermae Kelas : Dicotyledonae Ordo : Myrtales

Famili : Myrtaceae Genus : Eugenia

Spesies : Eugenia malaccensis L.

Syzygium malaccense (L.) Merr & Perry Nama Daerah : Jambu ripu (Aceh), dharsana (Madura),

jambu bol (Sunda, Batak, Lampung), Myambu bol (Bali), jambu jambak (Minangkabau), jambu boa (Jambi), dan maufa (Nias).

(11)

Kandungan Kimia

Pereaksi

Hasil

Alkaloid

Mayer

+

Flavonoid

Mg / HCl

+

Terpenoid / steroid

LB

+

Fenolik

FeCL3

+

Saponin

Busa

+

Hasil skrining fitokimia dari ekstrak etanol daun

(12)

1. Terpenoid :

Fraksi heksan dielusi dengan fasa gerak heksan:etil asetat (1 ml : 1 ml) didapatkan noda berwarna merah ungu pada Rf 0,9 dan Rf 0,85 dengan penampak noda asam sulfat pekat 10 % dalam metanol.

2. Alkaloid :

Fraksi etil asetat dielusi dengan fasa gerak etil asetat : metanol : air (100 : 13,5 : 10) didapatkan noda berwarna jingga pada Rf 0,83 dengan penampak noda dragendorf.

3. Flavonoid :

Fraksi etil asetat dielusi dengan fasa gerak kloroform : etil asetat ( 6 : 4 ) didapatkan noda berwarna kuning pada Rf 0,1 dengan penampak noda citro borax.

1 2 3

(13)

No. Parameter Hasil

1. Organoleptis Bentuk : Kental

Warna : Coklat tua Bau : Khas Rasa : Sepat 2. Kadar senyawa terlarut dalam :

Air

Etanol 12,4% ± 0,55116% ± 0,924

3. Kadar abu 2,4% ± 1,03

5. Kadar abu yang tidak larut asam 0,1% ± 0,046

7. Total cemaran bakteri : 2,7 x 10 4 _{koloni/g (< 10}6₎

8. Total cemaran kapang : 3,3 x 10 3 _{koloni/g (< 10}4₎

9. Uji cemaran logam timbal {Pb} Negatif 10 Kandungan kimia ekstrak

 Alkaloid  Flavonoid  Terpenoid  Steroid  Fenolik  Saponin + + + + + + 11. Profil KLT

 Terpenoid

 Alkaloid

 Flavonoid

(+) pada Rf 0,9 dan Rf 0,85 (+) pada Rf 0,83

(14)

HASIL UJI AKTIVITAS EKSTRAK

EKSTRAK ETANOL DAUN

Eugenia malaccensis

L. DENGAN

DOSIS 100, 200, DAN 400 mg/KgBB



_{Secara OGTT dapat menurunkan kadar glukosa darah tikus}

pada waktu 30, 60 dan 120 menit, tidak ada pengaruh variasi

dosis ekstrak



_{Secara kuratif test dapat menurunkan kadar glukosa darah}

tikus diabetes yang dinduksi dengan STZ, tertinggi pada

dosis 400 mg/kg



_{Dapat menurunkan konsumsi air minum dan penge luaran}

volume urin tikus diabetes, dan dapat memperbaiki berat

badan tikus diabetes yang diinduksi dengan STZ.

(15)

Pengaruh dosis ekstrak etanol daun

Eugenia malaccensis

L. terhadap

kadar rata-rata glukosa darah tikus putih jantan selama 10 hari.

0 50 100 150 200 250 300 350

T1 T2 T3 T4 T5

w aktu pengukuran

ka d ar g lu ko sa d ar ah (m g /d L ) D1 D2 D3 D4 D5 D6 D7

T1 : kadar glukosa darah puasa

T2 : kadar glukosa darah 30 menit setelah beban glukosa T3 : kadar glukosa darah 60 menit setelah beban glukosa T4 : kadar glukosa darah 90 menit setelah beban glukosa T5 : kadar glukosa darah 120 menit setelah beban glukosa

Kelompok D1 : Kontrol

Kelompok D2 : Ekstrak dosis 25 mg/kg BB Kelompok D3 : Ekstrak dosis 50 mg/kg BB Kelompok D4 : Ekstrak dosis 100 mg/kg BB Kelompok D5 : Ekstrak dosis 200 mg/kg BB Kelompok D6 : Ekstrak dosis 400 mg/kg BB Kelompok D7 : Glibenklamid dosis 0.65 mg/kg BB

(16)

Pengaruh dosis ekstrak etanol daun

Eugenia malaccensis

L. terhadap

kadar rata-rata glukosa darah tikus putih jantan selama 10 hari.

E1 = Dosis 100 mg/kg E2 = Dosis 200 mg/kg E3 = Dosis 400 mg/kg

(17)

Pengaruh dosis ekstrak etanol daun

Eugenia malaccensis

L. terhadap berat badan (g x 10) tikus putih jantan selama 10 hari.

E1 = Dosis 100 mg/kg E2 = Dosis 200 mg/kg E3 = Dosis 400 mg/kg

(18)

Pengaruh dosis ekstrak etanol daun

Eugenia malaccensis

L. terhadap

volume air minum (ml x 10) tikus putih jantan selama 10 hari.

E1 = Dosis 100 mg/kg E2 = Dosis 200 mg/kg E3 = Dosis 400 mg/kg

(19)

Pengaruh dosis ekstrak etanol daun

Eugenia malaccensis

L. terhadap volume urin (ml x 10) tikus putih jantan selama 10 hari.

E1 = Dosis 100 mg/kg

E2 = Dosis 200 mg/kg E3 = Dosis 400 mg/kg

(20)

• Organoleptik ekstrak : berkosistensi kental, berwarna coklat tua, berbau khas, dan

berasa sepat)

• kadar senyawa terlarut dalam air (12,4%



0,551)

• kadar senyawa terlarut dalam etanol (16%



0,924)

• kadar abu (2,4%



1,03)

• kadar abu yang tidak larut asam ( 0,1%



0,046)

• total cemaran bakteri (2,7x104) koloni/g

• total cemaran kapang (3,3x 103) koloni/g

• tidak ditemukan adanya cemaran logam Pb.

• Profil KLT ekstrak menunjukkan adanya suatu : terpenoid, alkaloid, dan flavonoid.

2. Ekstrak etanol daun Jambu Bol (

Eugenia malaccensis

L.) dapat menurunkan kadar

glukosa darah pada waktu 30, 60, dan 120 menit setelah pemberian beban glukosa

dan penurunan kadar glukosa darah tidak dipengaruhi oleh variasi dosis yang

diberikan.

KESIMPULAN

(21)

3. Ekstrak etanol daun Jambu Bol dengan dosis 100, 200, dan 400 mg/kgBB dapat

menurunkan kadar glukosa darah tikus diabetes yang diinduksi dengan STZ.

Penurunan kadar glukosa darah yang tertinggi yaitu pada dosis 400 mg/kgBB. Faktor

dosis dan waktu pengamatan mempengaruhi kadar glukosa darah rata-rata tikus putih

jantan secara sangat signifikan ( p<0,01 )

4. Ekstrak etanol daun Jambu Bol pada dosis yang digunakan dapat memperbaiki

berat badan, menurunkan konsumsi air minum dan pengeluaran volume urin

tikus diabetes yang diinduksi dengan STZ

(22)

1. Penentuan dosis efektif (ED-50) untuk menentukan Indek Terapi Ekstrak

2. Penentuan tingkat keamanan ekstrak dengan cara :

a. Uji toksisitas akut (penentuan harga LD-50 ekstrak)

b. Uji toksisitas sub kronis yang meliputi :

i. Pemeriksaan fungsi hati dan histopatologinya

ii. Pemeriksaan fungsi ginjal dan histopatologinya

3. Pemeriksaan toksisitas khusus (efek teratogen)

SARAN

Perlu dilanjutkan penelitian ini antara lain :.

Tahun 2010

Tahun 2011

(23)

1. Penentuan dosis efektif (ED-50) untuk menentukan

Indek Terapi Ekstrak

2. Penentuan tingkat keamanan ekstrak dengan cara :

a. Uji toksisitas akut (penentuan harga LD-50 ekstrak)

b. Uji toksisitas sub kronis yang meliputi :

i. Pemeriksaan fungsi hati dan histopatologinya

ii. Pemeriksaan fungsi ginjal dan histopatologinya

c. Pemeriksaan toksisitas khusus (efek teratogen)

(24)

(25)

SAMPEL

EKSTRAK EKSTRAK

EKSTRAK TERSTANDAR EKSTRAK TERSTANDAR

(26)

UJI EFEKTIVITAS

(ED-50)

PENGAMATAN PEMBERIAN 7 HARI

PENGAMATAN

PEMBERIAN 14 HARI PENGAMATAN _{PEMBERIAN 21 HARI}

KADAR GULA DARAH Diberi ekstrak 2 x sehari /21 hari

KADAR GULA DARAH KADAR GULA DARAH

(27)

UJI TOKSISITAS AKUT

(LD-50)

PENGAMATAN JLH KEMATIAN 24 JAM

PENGAMATAN TOK

TERTUNDA BERAT RATIO ORGAN

1. BERAT BADAN 2. WATER INTACK 3. WATER OUTPUT 1. JUMLAH KEMATIAN

2. PENGAMATAN VISUAL 3. MORFOLOGI ORGAN

1. ORGAN HATI

2. ORGAN JANTUNG 3. ORGAN GINJAL Diberi ekstrak 1 x pakai

(28)

UJI TOKSISITAS SUBKRONIS

PENGAMATAN VISUAL PENGAMATAN FUNGSI

ORGAN _{HISTOPATOLOGI}PENGAMATAN

1. BERAT BADAN 2. WATER INTACK 3. WATER OUTPUT

4. RATIO BERAT ORGAN

1. AKT. SGOT/SGPT 2. KREATININ URIN 3. KREATININ SERUM 4. BERSIHAN GINJAL

1. ORGAN HATI

2. ORGAN JANTUNG 3. ORGAN GINJAL Diberi ekstrak 3 bln peroral 2x sehari

(29)

UJI TOKSISITAS KHUSUS

EFEK TERATOGEN

JUMLAH TAPAK RESORBSI JUMLH KEMATIAN FETUS BERAT RATA-RATA FETUS KELAINAN MORFOLOGI

Ditandai dengan adanya gumpalan merah sebagai tempat tertanamnya fetus teresorbsi

Dihitung jumlah fetus yang hidup dan yang mati dalam kedua plasenta untuk setiap induk

Ditimbang berat rat-rata fetus dalam kedua plasenta untuk setiap induk

Pengamatan secara visual terhadap adanya

kelainan, bentuk ekor, telinga, kelopak mata, jumlah jari kaki depan dan belakang.

Pemberian ekstrak peroral 1 x sehari pada masa kehamilan 6-15 hari

(30)

PENGAMATAN CACAT

MORFOLOGI

FIKSASI DALAM LARUTAN BOUIN

RENDAM DALAM ALIZARIN MERAH

Periksa kecacatan bagian luar fetus meliputi telinga, mata, kaki, ekor. Selanjutnya diamati ada tidaknya celah pada langit-langit dengan cara menyelipkan pisau bedah pada geraham, sayat kepalanya menurut bidang datar tepat dibagian tengah daun telinga.

Pengamatan dilakukan terhadap tulang dada, tulang punggung, tulang ekor, tulang kaki dan jari-jari kaki.

Semua hasil pengamatan dibandingkan dengan kelompok kontrol.

(31)

(1)

UJI EFEKTIVITAS

(ED-50)

PENGAMATAN PEMBERIAN 7 HARI

PENGAMATAN

PEMBERIAN 14 HARI PENGAMATAN _{PEMBERIAN 21 HARI}

KADAR GULA DARAH Diberi ekstrak 2 x sehari /21 hari

KADAR GULA DARAH KADAR GULA DARAH

(2)

UJI TOKSISITAS AKUT

(LD-50)

PENGAMATAN JLH KEMATIAN 24 JAM

PENGAMATAN TOK

TERTUNDA BERAT RATIO ORGAN

1. BERAT BADAN 2. WATER INTACK 3. WATER OUTPUT 1. JUMLAH KEMATIAN

2. PENGAMATAN VISUAL 3. MORFOLOGI ORGAN

1. ORGAN HATI

2. ORGAN JANTUNG 3. ORGAN GINJAL Diberi ekstrak 1 x pakai

(3)

UJI TOKSISITAS SUBKRONIS

PENGAMATAN VISUAL PENGAMATAN FUNGSI

ORGAN _{HISTOPATOLOGI}PENGAMATAN

1. BERAT BADAN 2. WATER INTACK 3. WATER OUTPUT

4. RATIO BERAT ORGAN

1. AKT. SGOT/SGPT 2. KREATININ URIN 3. KREATININ SERUM 4. BERSIHAN GINJAL

1. ORGAN HATI

2. ORGAN JANTUNG 3. ORGAN GINJAL Diberi ekstrak 3 bln peroral 2x sehari

(4)

UJI TOKSISITAS KHUSUS

EFEK TERATOGEN

JUMLAH TAPAK RESORBSI JUMLH KEMATIAN FETUS BERAT RATA-RATA FETUS KELAINAN MORFOLOGI

Ditandai dengan adanya gumpalan merah sebagai tempat tertanamnya fetus teresorbsi

Dihitung jumlah fetus yang hidup dan yang mati dalam kedua plasenta untuk setiap induk

Ditimbang berat rat-rata fetus dalam kedua plasenta untuk setiap induk

Pengamatan secara visual terhadap adanya

kelainan, bentuk ekor, telinga, kelopak mata, jumlah jari kaki depan dan belakang.

Pemberian ekstrak peroral 1 x sehari pada masa kehamilan 6-15 hari

(5)

PENGAMATAN CACAT

MORFOLOGI

FIKSASI DALAM LARUTAN BOUIN

RENDAM DALAM ALIZARIN MERAH

Pengamatan dilakukan terhadap tulang dada, tulang punggung, tulang ekor, tulang kaki dan jari-jari kaki.

Semua hasil pengamatan dibandingkan dengan kelompok kontrol.

(6)