Isolasi Dan Elusidasi Struktur Kimia Flavonoida Dari Daun Pala (Myristica fragrans Houtt) dan Uji Aktivitas Antioksidan Appendix
Lampiran 1. Hasil determinasi tumbuhan Pala
Lampiran 2. Perhitungan Rendemen Ekstrak
Lampiran 3. Perhitungan nilai IC50 ekstrak daun Pala
Hasil absorbansi dari ekstrak metanol pada konsentrasi 25 ppm, 50 ppm dan
100 ppm berturut-turut adalah 0,151; 0,095; 0,050. Absorbansi blanko adalah 0,833.
Maka dapat dihitung % inhibisi dari ekstrak metanol sebagai berikut:
% Inhibisi 25 ppm =
= 62,06%
Dengan cara yang sama dengan perhitungan di atas diperoleh % inhibisi pada
konsentrasi 50 ppm dan 100 ppm masing-masing sebesar 88,60% dan 94,00%.
Selanjutnya diperoleh persamaan garis regresinya adalah y = 0,380x + 59,35. Maka
dicari harga x untuk y = 5 karena pada 50% inhibisi probitnya 5.
Hasil absorbansi ekstrak metanol, ekstrak etil asetat dan total flavonoid
masing-masing pada konsentrasi 25 ppm, 50 ppm dan 100 ppm ditabulasi pada Tabel
1.
Tabel 1. Hasil absorbansi dari ekstrak etil asetat dan total flavonoid
Ekstrak
25 ppm
% inhibisi
50 ppm
% inhibisi
100 ppm
% inhibisi
Metanol
0,151
62,060
0,095
88,595
0,050
93,998
Etil asetat
0,293
64,826
0,184
77,911
0,080
90,396
Total flavonoid
0,107
63,481
0,083
90,036
0,020
97,599
Berdasarkan Tabel 1 dapat dibuat persamaan regresi (Gambar 1) dari masingmasing ekstrak dan ditentukan nilai IC50 pada harga x untuk y = 5 karena pada 50%
ditunjukkan pada Tabel 2.
a. Grafik % inhibisi Vs Konsentrasi a. Grafik % inhibisi Vs Konsentrasi
ekstrak metanol
ekstrak etil asetat
c. Grafik % inhibisi Vs Konsentrasi ekstrak total flavonoid
Gambar 1. Grafik % inhibisi Vs Konsentrasi ekstrak daun Pala
Tabel 2. Persamaan regresi dan nilai IC50 dari ekstrak daun Pala
Ekstrak
Persamaan Regresi IC50 (ppm)
Metanol
y = 0,380x + 59,35
24,60
Etil asetat
y = 0,327x + 58,58
26,18
Total flavonoid
y = 0,411x + 59,7
23,57
Lampiran 4. Perhitungan nilai IC50 MFDH 1 sampai dengan MFDH 10 daun
Pala
Hasil absorbansi dari fraksi MFDH 1 sampai dengan MFDH 10 pada konsentrasi 25
ppm, 50 ppm dan 100 ppm ditunjukkan pada Tabel 3. Absorbansi blanko adalah
0,784.
Tabel 3. Hasil absorbansi fraksi MFDH 1 sampai dengan MFDH 10
25
%
50
%
100
Fraksi
ppm
inhibisi
ppm
inhibisi
ppm
MFDH 1
0,677
13,65
0,614
21,68
0,327
MFDH 2
0,422
46,17
0,226
71,17
0,080
MFDH 3
0,371
52,63
0,292
62,76
0,106
MFDH 4
0,361
53,95
0,199
74,62
0,037
MFDH 5
0,402
48,72
0,178
77,30
0,023
MFDH 6
0,379
51,66
0,245
68,75
0,055
MFDH 7
0,387
50,64
0,179
77,17
0,046
MFDH 8
0,476
39,29
0,268
65,82
0,083
MFDH 9
0,463
40,94
0,247
68,49
0,074
MFDH 10
0,438
44,13
0,256
67,35
0,077
%
inhibisi
58,29
89,80
86,48
95,28
97,07
92,98
94,13
89,41
90,56
90,18
Berdasarkan Tabel 3 dapat dibuat persamaan regresi (Gambar 2) dari masingmasing fraksi dan ditentukan nilai IC50 pada harga x untuk y = 5 karena pada 50%
ditunjukkan pada Tabel 4.
Tabel 4. Persamaan regresi dan nilai IC50 fraksi MFDH 1-MFDH 10 daun Pala
Fraksi
Persamaan regresi
IC50
MFDH 1
y = 0,614x - 4,655
88,900
MFDH 2
y = 0,551x + 36,86
23,811
MFDH 3
y = 0,454x + 40,76
20,311
MFDH 4
y = 0,531x + 43,62
12,003
MFDH 5
y = 0,531x + 43,62
18,327
MFDH 6
y = 0,541x + 39,54
19,314
MFDH 7
y = 0,545x + 42,15
14,379
MFDH 8
y = 0,640x + 27,48
35,159
MFDH 9
y = 0,630x + 29,91
31,883
MFDH 10
y = 0,591x + 32,71
29,221
Gambar 2. Grafik % inhibisi Vs Konsentrasi fraksi MFDH 1-MFDH 10 daun Pala
Lampiran 5. Perhitungan nilai IC50 MFDH 7.1.3.4; 7.14 dan 7.2.1 daun Pala
Hasil absorbansi dari isolat pada MFDH 7.1.3.4; 7.14 dan 7.2.1 pada konsentrasi 25
ppm, 50 ppm dan 100 ppm ditunjukkan pada Tabel 5. Absorbansi blanko adalah
0,932.
Tabel 5. Hasil absorbansi isolat MFDH 7.1.3.4, 7.1.4 dan 7.2.1
Fraksi
25 ppm
% inhibisi
50 ppm
% inhibisi
MFDH 7.1.3.4
MFDH 7.1.4
MFDH 7.2.1
0,355
0,389
0,436
61,91
58,26
53,22
0,268
0,263
0,146
71,24
71,78
84,33
100 ppm
0,032
0,047
0,039
Berdasarkan Tabel 5 dapat dibuat persamaan regresi (Gambar 3) dari masingmasing isolat dan ditentukan nilai IC50 pada harga x untuk y = 5 karena pada 50%
ditunjukkan pada Tabel 6.
Gambar 3. Grafik % inhibisi Vs Konsentrasi senyawa daun Pala
Tabel 6. Persamaan regresi dan nilai IC50 absorbansi isolat MFDH 7.1.3.4, 7.1.4 dan
7.2.1 daun Pala
Isolat
Persamaan regresi
IC50
MFDH 7.1.3.4
y = 0,470x + 49,04
9,75
MFDH 7.1.4
y = 0,470x + 46,67
6,85
MFDH 7.2.1
y = 0,519x + 47,47
4,85
Lampiran 2. Perhitungan Rendemen Ekstrak
Lampiran 3. Perhitungan nilai IC50 ekstrak daun Pala
Hasil absorbansi dari ekstrak metanol pada konsentrasi 25 ppm, 50 ppm dan
100 ppm berturut-turut adalah 0,151; 0,095; 0,050. Absorbansi blanko adalah 0,833.
Maka dapat dihitung % inhibisi dari ekstrak metanol sebagai berikut:
% Inhibisi 25 ppm =
= 62,06%
Dengan cara yang sama dengan perhitungan di atas diperoleh % inhibisi pada
konsentrasi 50 ppm dan 100 ppm masing-masing sebesar 88,60% dan 94,00%.
Selanjutnya diperoleh persamaan garis regresinya adalah y = 0,380x + 59,35. Maka
dicari harga x untuk y = 5 karena pada 50% inhibisi probitnya 5.
Hasil absorbansi ekstrak metanol, ekstrak etil asetat dan total flavonoid
masing-masing pada konsentrasi 25 ppm, 50 ppm dan 100 ppm ditabulasi pada Tabel
1.
Tabel 1. Hasil absorbansi dari ekstrak etil asetat dan total flavonoid
Ekstrak
25 ppm
% inhibisi
50 ppm
% inhibisi
100 ppm
% inhibisi
Metanol
0,151
62,060
0,095
88,595
0,050
93,998
Etil asetat
0,293
64,826
0,184
77,911
0,080
90,396
Total flavonoid
0,107
63,481
0,083
90,036
0,020
97,599
Berdasarkan Tabel 1 dapat dibuat persamaan regresi (Gambar 1) dari masingmasing ekstrak dan ditentukan nilai IC50 pada harga x untuk y = 5 karena pada 50%
ditunjukkan pada Tabel 2.
a. Grafik % inhibisi Vs Konsentrasi a. Grafik % inhibisi Vs Konsentrasi
ekstrak metanol
ekstrak etil asetat
c. Grafik % inhibisi Vs Konsentrasi ekstrak total flavonoid
Gambar 1. Grafik % inhibisi Vs Konsentrasi ekstrak daun Pala
Tabel 2. Persamaan regresi dan nilai IC50 dari ekstrak daun Pala
Ekstrak
Persamaan Regresi IC50 (ppm)
Metanol
y = 0,380x + 59,35
24,60
Etil asetat
y = 0,327x + 58,58
26,18
Total flavonoid
y = 0,411x + 59,7
23,57
Lampiran 4. Perhitungan nilai IC50 MFDH 1 sampai dengan MFDH 10 daun
Pala
Hasil absorbansi dari fraksi MFDH 1 sampai dengan MFDH 10 pada konsentrasi 25
ppm, 50 ppm dan 100 ppm ditunjukkan pada Tabel 3. Absorbansi blanko adalah
0,784.
Tabel 3. Hasil absorbansi fraksi MFDH 1 sampai dengan MFDH 10
25
%
50
%
100
Fraksi
ppm
inhibisi
ppm
inhibisi
ppm
MFDH 1
0,677
13,65
0,614
21,68
0,327
MFDH 2
0,422
46,17
0,226
71,17
0,080
MFDH 3
0,371
52,63
0,292
62,76
0,106
MFDH 4
0,361
53,95
0,199
74,62
0,037
MFDH 5
0,402
48,72
0,178
77,30
0,023
MFDH 6
0,379
51,66
0,245
68,75
0,055
MFDH 7
0,387
50,64
0,179
77,17
0,046
MFDH 8
0,476
39,29
0,268
65,82
0,083
MFDH 9
0,463
40,94
0,247
68,49
0,074
MFDH 10
0,438
44,13
0,256
67,35
0,077
%
inhibisi
58,29
89,80
86,48
95,28
97,07
92,98
94,13
89,41
90,56
90,18
Berdasarkan Tabel 3 dapat dibuat persamaan regresi (Gambar 2) dari masingmasing fraksi dan ditentukan nilai IC50 pada harga x untuk y = 5 karena pada 50%
ditunjukkan pada Tabel 4.
Tabel 4. Persamaan regresi dan nilai IC50 fraksi MFDH 1-MFDH 10 daun Pala
Fraksi
Persamaan regresi
IC50
MFDH 1
y = 0,614x - 4,655
88,900
MFDH 2
y = 0,551x + 36,86
23,811
MFDH 3
y = 0,454x + 40,76
20,311
MFDH 4
y = 0,531x + 43,62
12,003
MFDH 5
y = 0,531x + 43,62
18,327
MFDH 6
y = 0,541x + 39,54
19,314
MFDH 7
y = 0,545x + 42,15
14,379
MFDH 8
y = 0,640x + 27,48
35,159
MFDH 9
y = 0,630x + 29,91
31,883
MFDH 10
y = 0,591x + 32,71
29,221
Gambar 2. Grafik % inhibisi Vs Konsentrasi fraksi MFDH 1-MFDH 10 daun Pala
Lampiran 5. Perhitungan nilai IC50 MFDH 7.1.3.4; 7.14 dan 7.2.1 daun Pala
Hasil absorbansi dari isolat pada MFDH 7.1.3.4; 7.14 dan 7.2.1 pada konsentrasi 25
ppm, 50 ppm dan 100 ppm ditunjukkan pada Tabel 5. Absorbansi blanko adalah
0,932.
Tabel 5. Hasil absorbansi isolat MFDH 7.1.3.4, 7.1.4 dan 7.2.1
Fraksi
25 ppm
% inhibisi
50 ppm
% inhibisi
MFDH 7.1.3.4
MFDH 7.1.4
MFDH 7.2.1
0,355
0,389
0,436
61,91
58,26
53,22
0,268
0,263
0,146
71,24
71,78
84,33
100 ppm
0,032
0,047
0,039
Berdasarkan Tabel 5 dapat dibuat persamaan regresi (Gambar 3) dari masingmasing isolat dan ditentukan nilai IC50 pada harga x untuk y = 5 karena pada 50%
ditunjukkan pada Tabel 6.
Gambar 3. Grafik % inhibisi Vs Konsentrasi senyawa daun Pala
Tabel 6. Persamaan regresi dan nilai IC50 absorbansi isolat MFDH 7.1.3.4, 7.1.4 dan
7.2.1 daun Pala
Isolat
Persamaan regresi
IC50
MFDH 7.1.3.4
y = 0,470x + 49,04
9,75
MFDH 7.1.4
y = 0,470x + 46,67
6,85
MFDH 7.2.1
y = 0,519x + 47,47
4,85