Pengaruh Minyak Buah Merah (Pandanus conoideus Lam.) Terhadap Gambaran Histopatologis Kolon Mencit Defisiensi Plaque Peyeri Yang Diinduksi Kolitis Dengan DSS.

(1)

Charles, 2012. Pembimbing I : Sylvia Soeng, dr., M. Kes., PA(K). Pembimbing II : Daniel Wirawan Purwadisastra, dr., PA.

Ulcerative colitis (UC) merupakan salah satu inflammatory bowel disease (IBD), dimana terjadi inflamasi kronis pada kolon. Radikal bebas dihasilkan makrofag saat inflamasi, merusak epitel kolon dan menyebabkan ulserasi mukosa. Stress oksidatif merupakan hallmark IBD. Penelitian membuktikan pemberian DSS pada mencit memberikan gambaran seperti UC pada manusia. Plaque Peyeri (PP) merupakan struktur limfoid penting untuk respon imun humoral. Penyuntikan anti IL-7Rα pada 14,5 – 15,5 hari setelah pembuahan menghilangkan PP mencit. Buah merah (BM) diduga menyembuhkan berbagai penyakit karena mengandung banyak antioksidan.

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek minyak BM terhadap gambaran histopatologis kolon mencit defisiensi PP yang diinduksi kolitis dengan DSS.

Penelitian dilakukan pada mencit galur Balb/C berumur 8 minggu, dibagi dalam 4 kelompok (n=6). Kelompok KN diberi aquadest. Kelompok KDSS diinduksi kolitis (DSS 2,5%) lalu diberi aquadest. Kelompok KDPP dihilangkan PP-nya (anti IL-7Rα 0,1 mL), diinduksi kolitis dan diberi aquadest. Kelompok KPerlakuan dihilangkan PP-nya, diinduksi kolitis dan diberi minyak BM 0,1 mL. Parameter penelitian yang diamati adalah gambaran histopatologis kolon dengan pewarnaan Hematoxyline-Eosine.

Hasil penelitian menunjukkan KPerlakuan memiliki nilai scoring histopatologis yang lebih rendah dibandingkan dengan KDSS dan KDPP (p<0,01).

Dapat disimpulkan bahwa minyak BM memperbaiki gambaran histopatologis kolon mencit defisiensi PP yang diinduksi kolitis dengan DSS.

(2)

IN Peyer’s Patches DEFICIENCY MICE COLITIS-INDUCED BY DSS Charles, 2012. 1st Supervisor : Sylvia Soeng, dr., M. Kes., PA(K).

2nd Supervisor : Daniel Wirawan Purwadisastra, dr., PA.

Ulcerative colitis (UC) is one of the inflammatory bowel diseases (IBD), where the colon experience chronic inflammation. Free radicals, produced by macrophage, damage colon epithelia, results in mucosal ulceration. Oxidative stress is IBD’s hallmark. DSS administration on mice subject resembles the human UC. Peyer’s patches (PPs) are lymphoid structures essential for humoral immune responses. Mice’s PPs are diminished by injection of anti IL-7Rα on 14.5 – 15.5 day post-coitus. Red-fruit is expected to cure various diseases because of its large amount of antioxidant content.

The aim of this research is to determine the effect of red-fruit oil in improving the histopathological feature of colon in PPs deficiency mice colitis-induced by DSS.

This research was done on eight weeks-old Balb/C mice, divided into four groups (n=6). The KN group was given distilled water. The KDSS group was colitis-induced (DSS 2.5%) and given distilled water. PPs were diminished (anti IL-7Rα 0.1 mL_{) in the} KDPP group, which was colitis-induced and given distilled water. PPs were also diminished in the KP group, which was colitis-induced and given red-fruit oil 0.1 mL. The histopathological features of colon with Hematoxyline-Eosine stain were observed.

The result showed that KP has lower histopathological score than KDSS and KDPP (p<0,01).

It can be concluded that red-fruit oil improves the histopathological feature of colon in PPs deficiency mice colitis-induced by DSS.

(3)

JUDUL DALAM ... i

LEMBAR PERSETUJUAN ... ii

SURAT PERNYATAAN ... iii

KATA PENGANTAR ... iv

ABSTRAK ... vi

ABSTRACT ... vii

DAFTAR ISI ... viii

DAFTAR TABEL ... xi

DAFTAR GAMBAR ... xii

DAFTAR LAMPIRAN ... xiii

BAB I PENDAHULUAN 1.1 Latar Belakang ... 1

1.2 Identifikasi Masalah ... 2

1.3 Maksud dan Tujuan ... 2

1.4 Manfaat Penelitian ... 2

1.5 Kerangka Pemikiran dan Hipotesis ... 3

1.5.1 Kerangka Pemikiran ... 3

1.5.2 Hipotesis Penelitian ... 4

1.6 Metode Penelitian ... 4

BAB II TINJAUAN PUSTAKA 2.1 Anatomi Kolon dan Ileum ... 5

2.1.1 Kolon ... 5

2.1.2 Ileum ... 7

2.2 Histologi Usus Besar ... 7

2.3 Fisiologi Usus Besar ... 9

(4)

2.7 Inflammatory Bowel Disease ... 15

2.8 Antioksidan ... 23

2.9 Buah Merah ... 24

2.9.1 Taksonomi Buah Merah ... 24

2.9.1.1 Morfologi Buah Merah ... 25

2.9.1.2 Kandungan Buah Merah ... 25

BAB III BAHAN DAN METODE PENELITIAN 3.1 Alat dan Bahan / Subjek Penelitian ... 28

3.1.1 Alat dan Bahan ... 28

3.1.2 Subjek Penelitian ... 29

3.1.3 Tempat dan Waktu Penelitian ... 29

3.2 Metode Penelitian ... 29

3.2.1 Desain Penelitian ... 29

3.2.2 Variabel Penelitian ... 30

3.2.2.1 Definisi Konsepsional Variabel ... 30

3.2.2.2 Definisi Operasional Variabel ... 30

3.2.3 Perhitungan Besar Sampel ... 31

3.2.4 Prosedur Kerja ... 31

3.2.4.1 Pengumpulan Bahan ... 31

3.2.4.2 Persiapan Bahan Uji ... 31

3.2.4.3 Persiapan Hewan Coba ... 32

3.2.4.4 Sterilisasi Alat ... 33

3.2.4.5 Pelaksanaan Penelitian ... 33

3.2.5 Pembuatan Preparat Histopatologis ... 34

3.2.6 Cara Pemeriksaan ... 36

(5)

BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penelitian ... 39

4.2 Pembahasan ... 43

4.3 Uji Hipotesis ... 45

BAB V SIMPULAN DAN SARAN 5.1 Simpulan ... 46

5.2 Saran ... 46

DAFTAR PUSTAKA ... 47

LAMPIRAN ... 53

(6)

Tabel 4.2 Median Scoring Histopatologis Kolitis (Kolon Medial) ... 39 Tabel 4.3 Median Scoring Histopatologis Kolitis (Kolon Distal) ... 39 Tabel 4.4 Tabel Perbandingan Nilai Scoring Histopatologis Kolon Berdasarkan

Uji Kruskal-Wallis ... 41 Tabel 4.5 Hasil Uji Mann-Whitney U terhadap Nilai Scoring Histopatologis

Kolon Proksimal ... 42 Tabel 4.6 Hasil Uji Mann-Whitney U terhadap Nilai Scoring Histopatologis

Kolon Medial ... 42 Tabel 4.7 Hasil Uji Mann-Whitney U terhadap Nilai Scoring Histopatologis

(7)

Gambar 2.3 Gambaran Histologis Usus Besar ... 8

Gambar 2.4 Sel Absorptive dan Sel Goblet ... 8

Gambar 2.5 Fungsi Penyerapan dan Penyimpanan Usus Besar ... 10

Gambar 2.6 Gambaran Histologis PP ... 11

Gambar 2.7 Mekanisme Imunitas PP ... 12

Gambar 2.8 Pengaruh ROS pada Jejas Sel ... 13

Gambar 2.9 Kematian Sel akibat Stress Oksidatif ... 14

Gambar 2.10 Struktur Kimia DSS ... 15

Gambar 2.11 Patogenesis IBD ... 18

Gambar 2.12 Pemeriksaan Barium Enema ... 20

Gambar 2.13 Gambaran Makroskopis Mukosa Kolon Penderita IBD ... 20

Gambar 2.14 Mukosa Friable, Ulserasi, dan Eksudat ... 21

Gambar 2.15 Hilangnya Gambaran Crypta ... 21

Gambar 2.16 Ulserasi Mukosa dan Abscess Crypta ... 22

Gambar 2.17 Buah Merah ... 25

Gambar 4.1 Grafik Median Scoring Histopatologis Kolon Proksimal ... 40

Gambar 4.2 Grafik Median Scoring Histopatologis Kolon Medial ... 40

Gambar 4.3 Grafik Median Scoring Histopatologis Kolon Distal ... 41

(8)

Lampiran 3 Hasil Analisis Scoring Histopatologis Menggunakan Uji

Kruskal-Wallis ... 55 Lampiran 4 Hasil Analisis Scoring Histopatologis Menggunakan Uji

Mann-Whitney U ... 56 Lampiran 5 Hasil Pemeriksaan Histopatologis Kolon ... 65

(9)

Lampiran 1. Alat dan Bahan Penelitian

Anti IL-7Rα Phosphate Buffered Aquadest Minyak Buah Merah Saline (PBS)

Tabung Falcon 15 mL dan 50 mL Sonde mencit

Syringe 1 mL dan jarum 26G Mencit galur Balb/C

(10)

Lampiran 2. Perhitungan Dosis

1. Anti IL-7Rα

Anti IL-7Rα yang dipakai sebanyak 1μg dilarutkan dalam 99 μL PBS 1x sehingga didapatkan larutan Anti IL 7Rα 1%. Larutan ini diberikan pada mencit secara intravena sebanyak 0,1 mL..

2. Dextran Sulfate Sodium (DSS)

DSS yang dipakai adalah 2,5 g dilarutkan dalam aquadest 100 mL sehingga didapatkan larutan DSS 2,5% (v/w). Larutan ini diberikan pada mencit melalui air minum.

3. Dosis Buah Merah

Dosis manusia 70 kg = 2 x 15 mL (1 sendok makan) = 30 mL Dosis mencit 20 g = 30 mL x 0,0026 = 0,078 mL

(11)

Lampiran 3. Hasil Analisis Scoring Histopatologis Menggunakan Uji Kruskal-Wallis

Kolon proksimal

Ranks Test Statisticsa,b

Perlakuan N Mean

Rank

Hasil KN 7 4,00

KDSS 7 17,50

KDPP 7 25,00

KPerlakuan 7 11,50

Total 28

Kolon medial

Ranks Test Statisticsa,b

Perlakuan

N Mean

Rank

Hasil KN 7 4,00

KDSS 7 18,00

KDPP 7 25,00

KPerlakuan 7 11,00

Total 28

Kolon distal

Ranks Test Statisticsa,b

Perlakuan

N Mean

Rank

Hasil KN 7 4,00

KDSS 7 18,00

KDPP 7 25,00

KPerlakuan 7 11,00

Total 28

Hasil

Chi-Square 26,071

df 3

Asymp. Sig. ,000

Hasil

Chi-Square 26,727

df 3

Asymp. Sig. ,000

Hasil

Chi-Square 26,836

df 3

(12)

Lampiran 4. Hasil Analisis Scoring Histopatologis Menggunakan Uji Mann-Whitney U

 Kolon proksimal KN-KDSS

Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks

Hasil KN 7 4,00 28,00

KDSS 7 11,00 77,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,500

Asymp. Sig. (2 tailed) ,000 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

KN-KDPP

Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks

Hasil KN 7 4,00 28,00

KDPP 7 11,00 77,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,435

Asymp. Sig. (2 tailed) ,001 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

(13)

KN-KPerlakuan Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks

Hasil KN 7 4,00 28,00

KPerlakuan 7 11,00 77,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,606

Asymp. Sig. (2 tailed) ,000 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

KDSS-KDPP

Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks Hasil KDSS 7 4,00 28,00

KDPP 7 11,00 77,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,343

Asymp. Sig. (2 tailed) ,001 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

(14)

KDSS-KPerlakuan Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks Hasil KDSS 7 10,50 73,50

KPerlakuan 7 4,50 31,50 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U 3,500

Wilcoxon W 31,500

Z -3,122

Asymp. Sig. (2 tailed) ,002 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,004a

KDPP-KPerlakuan Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks Hasil KDPP 7 11,00 77,00

KPerlakuan 7 4,00 28,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,435

Asymp. Sig. (2 tailed) ,001 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

(15)

 KOLON MEDIAL KN-KDSS

Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks

Hasil KN 7 4,00 28,00

KDSS 7 11,00 77,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,606

Asymp. Sig. (2 tailed) ,000 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

KN-KDPP

Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks

Hasil KN 7 4,00 28,00

KDPP 7 11,00 77,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,435

Asymp. Sig. (2 tailed) ,001 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

(16)

KN-KPerlakuan Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks

Hasil KN 7 4,00 28,00

KPerlakuan 7 11,00 77,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,606

Asymp. Sig. (2 tailed) ,000 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

KDSS-KDPP

Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks Hasil KDSS 7 4,00 28,00

KDPP 7 11,00 77,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,435

Asymp. Sig. (2 tailed) ,001 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

(17)

KDSS-KPerlakuan Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks Hasil KDSS 7 11,00 77,00

KPerlakuan 7 4,00 28,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,606

Asymp. Sig. (2 tailed) ,000 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

KDPP-KPerlakuan Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks Hasil KDPP 7 11,00 77,00

KPerlakuan 7 4,00 28,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,435

Asymp. Sig. (2 tailed) ,001 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

(18)

 KOLON DISTAL KN-KDSS

Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks

Hasil KN 7 4,00 28,00

KDSS 7 11,00 77,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,606

Asymp. Sig. (2 tailed) ,000 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

KN-KDPP

Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks

Hasil KN 7 4,00 28,00

KDPP 7 11,00 77,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,500

Asymp. Sig. (2 tailed) ,000 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

(19)

KN-KPerlakuan Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks

Hasil KN 7 4,00 28,00

KPerlakuan 7 11,00 77,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,606

Asymp. Sig. (2 tailed) ,000 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

KDSS-KDPP

Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks Hasil KDSS 7 4,00 28,00

KDPP 7 11,00 77,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,500

Asymp. Sig. (2 tailed) ,000 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

(20)

KDSS-KPerlakuan Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks Hasil KDSS 7 11,00 77,00

KPerlakuan 7 4,00 28,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,606

Asymp. Sig. (2 tailed) ,000 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

KDPP-KPerlakuan Ranks

Perlakuan N Mean Rank

Sum of Ranks Hasil KDPP 7 11,00 77,00

KPerlakuan 7 4,00 28,00 Total 14

Test statisticsb

hasil

Mann-Whitney U ,000

Wilcoxon W 28,000

Z -3,500

Asymp. Sig. (2 tailed) ,000 Exact Sig. [2*(1-tailed Sig.)] ,001a

(21)

Lampiran 5. Hasil Pemeriksaan Histopatologis Kolon Kelompok Kontrol Negatif (KN)

 Kolon Proksimal (Score: 0) Perbesaran 100X

Keterangan: Kripta tampak normal, mukosa tidak mengalami ulserasi

Perbesaran 400X

(22)

 Kolon Medial (Score: 0) Perbesaran 100X

Keterangan: Kripta tampak normal, mukosa tidak mengalami ulserasi

Perbesaran 400X

(23)

 Kolon Distal (Score: 0) Perbesaran 100X

Keterangan: Kripta tampak normal, mukosa tidak mengalami ulserasi

Perbesaran 400X

(24)

Kelompok Kontrol DSS (KDSS)

 Kolon Proksimal (Score: 3) Perbesaran 100X

Keterangan: Jumlah kripta berkurang (50 – 90%) dari yang seharusnya

Perbesaran 400X

(25)

 Kolon Medial (Score: 3) Perbesaran 100X

Keterangan: Jumlah kripta berkurang (50 – 90%) dari yang seharusnya

Perbesaran 400X

(26)

 Kolon Distal (Score: 3) Perbesaran 100X

Keterangan: Jumlah kripta berkurang (50 – 90%) dari yang seharusnya

Perbesaran 400X

(27)

Kelompok Defisiensi PP (KDPP)

 Kolon Proksimal (Score: 5) Perbesaran 100X

Keterangan: Tampak ulserasi pada mukosa (tanda bintang)

Perbesaran 400X

(28)

 Kolon Medial (Score: 5) Perbesaran 100X

Keterangan: Tampak ulserasi pada mukosa (tanda bintang)

Perbesaran 400X

(29)

 Kolon Distal (Score: 5) Perbesaran 100X

Keterangan: Tampak ulserasi pada mukosa (tanda bintang)

Perbesaran 400X

(30)

Kelompok Perlakuan (KPerlakuan)

 Kolon Proksimal (Score: 2) Perbesaran 100X

Keterangan: Jumlah kripta berkurang (10 – 50%) dari seharusnya

Perbesaran 400X

(31)

 Kolon Medial (Score: 2) Perbesaran 100X

Keterangan: Jumlah kripta berkurang (10 – 50%) dari seharusnya

Perbesaran 400X

(32)

 Kolon Distal (Score: 2) Perbesaran 100X

Keterangan: Jumlah kripta berkurang (10 – 50%) dari seharusnya

Perbesaran 400X

(33)

RIWAYAT HIDUP

Nama : Charles

NRP : 0810124

Agama : Katolik

Tempat/Tanggal Lahir : Jambi, 27 Agustus 1990

Alamat : Jln. Pakubuwono no. 64, Jambi

Riwayat Pendidikan :

 TK Xaverius I Jambi (1994-1996)

 SD Xaverius I Jambi (1996-2002)

 SMP Xaverius I Jambi (2002-2005)

 SMA Xaverius I Jambi (2005-2008)

(34)

BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Inflammatory Bowel Disease (IBD) adalah respon inflamasi kronis pada sistem pencernaan terhadap mikroba normal usus yang tidak terkendali yang diperantarai oleh reaksi imunitas, dimana terjadi relaps dan remisi secara bergantian selama bertahun-tahun pada orang yang memiliki kerentanan genetis maupun tidak.Insidensi IBD berbeda-beda tergantung pada letak geografis, tetapi akhir-akhir ini mulai terjadi peningkatan pada daerah yang sebelumnya memiliki insidensi yang rendah. Dua penyakit utama IBD adalah Crohn’s Disease (CD)dan

ulcerative colitis (UC)(Turner, 2010; Popivanova et al., 2008; Abraham and Cho, 2009; Burstein and Fearon, 2008; Friedman and Blumberg, 2008; Stenson, 2008; Palmer et al., 2007).

Beberapa model percobaan kolitis telah diperkenalkan untuk mempelajari faktor-faktor yang dapat menginduksi terjadinya kolitis. Salah satu model yang telah dikenal yaitu dengan memberikan dextran sulfate sodium (DSS) secara oral pada air minum mencit yang mengakibatkan terjadinya kolitis akut dan kronis yang mirip dengan UC pada manusia (Popivanova et al., 2008; Stevceva et al., 2001; Zheng et al., 2005; Mähler et al., 1998).

Pada mencit yang mengalami defisiensi plaque Peyeri (PP), pemberian DSS akan menyebabkan reaksi inflamasi yang lebih parah. Hal ini diduga karena terganggunya suatu proses regulasi imun pada sistem pencernaan yang dikenal sebagai oral tolerance (Corr et al., 2007; Spahn et al., 2002; Fujihashi et al., 2001; Bouma and Strober, 2003).

Pada saat terjadi inflamasi, neutrofil dan makrofag akan melepaskan

reactive oxygen species (ROS) dan reactive nitrogen species (RNS). ROS dan RNS merupakan salah satu contoh radikal bebas, yang berfungsi untuk menghancurkan mikroba dan jaringan mati saat terjadi proses inflamasi. Stress

(35)

oksidatif dan kerusakan selular oksidatif ini merupakan hallmark penyakit IBD (Kumar et al., 2010; Gommeaux et al., 2007; Burstein and Fearon, 2008).

Antioksidan adalah suatu kelompok senyawa yang dapat menghambat stress

oksidatif terhadap sel akibat radikal bebas. Antioksidan ini secara alami ditemukan pada sayur-sayuran dan buah-buahan. Salah satu sumber senyawa antioksidan eksogen adalah buah merah (BM) yang banyak dimanfaatkan oleh masyarakat Papua dalam kehidupan sehari-hari (Longe, 2005; Kumar et al., 2010; I Made Budi, 2005; Machmud Yahya dan Bernard Wahyu Wiryanta, 2005).

Berdasarkan hal-hal diatas, maka penelitian ini dilakukan untuk memberikan gambaran mengenai pengaruh minyak BM sebagai antioksidan sehingga memperbaiki gambaran histologis kolon pada mencit defisiensi PP yang diinduksi kolitis dengan DSS.

1.2 Identifikasi Masalah

 Apakah minyak buah merah dapat memperbaiki gambaran histopatologis kolon pada mencit defisiensi PP yang diinduksi kolitis dengan DSS.

1.3 Maksud dan Tujuan

Maksud penelitian ini adalah untuk mengetahui khasiat buah merah sebagai tanaman obat asli Indonesia yang mengandung senyawa antioksidan.

Tujuan penelitian ini adalah untuk menilai peranan buah merah dalam memperbaiki gambaran histopatologis kolon pada mencit defisiensi PP yang diinduksi kolitis dengan DSS.

1.4 Manfaat Penelitian

Manfaat akademis dari penelitian ini adalah memperluas wawasan pembaca mengenai tanaman obat asli Indonesia, khususnya buah merah sebagai sumber

(36)

antioksidan eksogen alami dalam menghambat kolitis pada mencit defisiensi PP yang diinduksi kolitis dengan DSS.

Manfaat praktis dari penelitian ini adalah untuk menilai potensi buah merah sebagai terapi tambahan dalam mengobati penyakit IBD, khususnya UC.

1.5 Kerangka Pemikiran dan Hipotesis 1.5.1 Kerangka Pemikiran

Pada IBD, sel T CD4+ pada lamina propria yang teraktivasi menyekresikan sitokin-sitokin inflamasi. Beberapa di antaranya mengaktifkan sel inflamasi lain (makrofag dan sel B) dan yang lain secara tidak langsung memanggil limfosit lain, leukosit inflamasi, dan sel mononuklear dari aliran darah ke usus melalui reseptor pada leukosit, dan addressin pada endotel vaskuler.

Sel T CD4+ terdiri dari 3 jenis utama, yaitu TH1, TH2, TH17. TH1 berperan

pada CD, sedangkan pada UC yang berperan adalah TH2 yang atipikal. TH2

menghasilkan IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-13 dan menyebabkan respon alergi dengan cara mengakumulasi sel B, sel mast, dan sel eosinofil. Pada UC, yang sangat berperan hanya IL-10 dan IL-13, tetapi tidak IL-4, sehingga disebut atipikal.

Pada mencit model kolitis telah dibuktikan bahwa menghilangkan sitokin spesifik (IL-2, IL-10, TGF-) atau reseptornya, menghapus molekul yang berhubungan dengan pengenalan antigen sel T (reseptor antigen sel T) atau

mengganggu fungsi barrier sel epitel usus dapat menyebabkan kolitis

(Popivanova et al., 2008; Stevceva et al., 2001; Friedman and Blumberg, 2008; Bouma and Strober, 2003; Stenson, 2007; Lewis et al., 2008; Mills and Stappenbeck, 2010; Sedlack et al., 2008; Eckman et al., 2010; Roda et al., 2011).

Pada mencit yang mengalami defisiensi PP, pemberian DSS akan menyebabkan terjadi reaksi inflamasi yang lebih parah akibat tidak adanya sel-sel regulator imunitas seperti sel dendritik yang berfungsi menghasilkan IL-10, yang mempengaruhi proses inflamasi pada saluran cerna, serta dalam mekanisme oral tolerance; dan sel M yang berfungsi dalam transportasi antigen untuk

(37)

dipresentasikan kepada sel limfosit T dan B pada proses oral tolerance (Corr et al., 2007; Spahn et al., 2002; Fujihashi et al., 2001; Bouma and Strober, 2003).

Pada saat terjadi inflamasi, neutrofil dan makrofag akan melepaskan ROS dan RNS pada saat terjadi inflamasi. ROS dan RNS merupakan salah satu contoh radikal bebas, yang dihasilkan dalam jumlah yang besar oleh sel leukosit, terutama neutrofil dan makrofag, untuk menghancurkan mikroba dan jaringan mati saat terjadi proses inflamasi. Stress oksidatif dan kerusakan selular oksidatif ini merupakan hallmark dari penyakit IBD (Gommeaux et al., 2007; Burstein and Fearon, 2008; Kumar et al., 2010).

Antioksidan adalah adalah suatu kelompok senyawa yang mengikat radikal bebas, sehingga dapat menghambat stress oksidatif terhadap sel. Antioksidan secara alami ditemukan pada sayur-sayuran dan buah-buahan. Buah merah adalah salah satu sumber antioksidan eksogen alami seperti karotenoid, beta-karoten, alfa-tokoferol, asam oleat, asam linoleat, asam linolenat dan dekanoat, omega-3 dan omega-9, yang banyak dimanfaatkan oleh masyarakat Papua. Buah merah berkhasiat mengendalikan beragam penyakit seperti kanker, hipertensi, dan infeksi (Longe, 2005; Kumar et al., 2010; I Made Budi, 2005; Machmud Yahya dan Bernard Wahyu Wiryanta, 2005).

1.5.2 Hipotesis

 Minyak buah merah memperbaiki gambaran histopatologis kolon pada

mencit defisiensi PP yang diinduksi kolitis dengan DSS.

1.6 Metode Penelitian

Penelitian ini bersifat prospektif eksperimental laboratorium sungguhan dengan rancangan acak lengkap (RAL), bersifat komparatif. Mencit dibagi dalam 4 kelompok secara acak dengan masing-masing kelompok terdiri dari 6 ekor mencit dan mendapat perlakuan berbeda.

(38)

5.1 Simpulan

Dari hasil penelitian ini, dapat disimpulkan bahwa pemberian minyak buah merah dapat memperbaiki gambaran histopatologis kolon mencit defisiensi plaque

Peyeri yang diinduksi kolitis dengan DSS.

5.2 Saran

1. Diperlukan penelitian lebih lanjut di bidang klinis untuk menerapkan buah merah sebagai terapi tambahan pada penderita kolitis.

2. Diperlukan penelitian lebih lanjut untuk mengetahui dosis toksik dari masing-masing antioksidan yang terkandung pada buah merah.

(39)

2009. 361: 2055-78.

American Veterinary Medical Association. AVMA Guidelines on Euthanasia. USA; 2007.

Bai SK, Lee SJ, Na HJ, Ha KS, Han JA, Lee H, et al. Beta-Carotene Inhibits Inflammatory Gene Expression in Lipopolysaccharide-Stimulated Macrophages by Supressing Redox-Based NF-kappaB Activation. Exp Mol Med; 2005. 37(4) : 323-34.

Bambang Budiono. 2008. Hati-hati Konsumsi Suplemen Antioksidan. Opini Tribun R.S. Dr. Wahidin Sudirohusodo. Makassar. 29 Juni 2008.

Bouma G, Strober W. The Immunological and Genetic Basis of Inflammatory Bowel Disease. Nat Rev Immunol; 2003. 3(7): 521-33.

Burstein E, Fearon ER. Colitis and Cancer: A Tale of Inflammatory Cells and Their Cytokines. JCI; 2008. 118(2): 464-7.

Canadian Council on Animal Care. CCAC Guidelines On: Euthanasia of Animals Used in Science. Canada: Guidelines Committee; 2010.

Corr SC, Gahan CCGM, Hill C. M-Cells: Origin, Morphology and Role in Mucosal Immunity and Microbial Pathogenesis. FEMS Immunol Med Microbiol; 2007. 52(2008): 2-12.

Dieleman LA, Palmen MJHJ, Akol H, Bloemena E, Pena AS, Meuwissen SGM,

et al. Chronic Experimental Colitis Induced by Dextran Sulphate Sodium (DSS) is Characterized by Th1 and Th2 Cytokines. Clin Exp Immunol; 1998. 114: 385-91.

Drake RL, Vogl W, Mitchell AWM, editors. Gray’s Anatomy for Students. USA: Elsevier; 2007.

Eckert LB, Nguyen GC, Harris ML. 2006. Inflammatory Bowel Disease. In: Nilsson Jr. KR, Piccini JP. editors. The Osler Medical Handbook/Osler Medical Service, Johns Hopkins Hospital. 2nd ed. USA: Elsevier-Mosby.

(40)

Eckman M, Labus D, Thompson G, Lockhart A, editors. Atlas of Pathophysiology. 3rd ed. China: Lippincott Williams & Wilkins; 2010.

Friedman S, Blumberg RS. Inflammatory Bowel Disease. In: Fauci AS, Kasper DL, Longo DL, Braunwald E, Hauser SL, Jameson JL, Loscalzo J, editors.

Harrison’s Principles of Internal Medicine. 17th ed. USA: McGraw-Hill;

2008.

Fujihashi K, Dohi T, Rennert PD, Yamamoto M, Koga T, Kiyono H, et al. Peyer’s Patches Are Required for Oral Tolerance to Protein. PNAS; 2001. 98(6): 3310-15.

Gartner LP, Hiatt JL, editors. Color Textbook of Histology. 3rd ed. USA: Elsevier-Saunders; 2007.

Gommeaux J, Cano C, Garcia S, Gironella M, Pietri S, Culcasi M, et al. Colitis and Colitis-Associated Cancer Are Exacerbated in Mice Deficient for Tumor Protein 53-Induced Nuclear Protein. Mol Cell Biol; 2007. 27(6): 2215-28.

Guyton AC, Hall JE, editors. Textbook of Medical Physiology. 11th ed. USA: Elsevier-Saunders; 2006.

Hana Ratnawati, Khie Khiong, Sylvia Soeng, Sri Utami Sugeng, Evan Kristiono, Elsa Angelie, et al. 2008. Pengaruh ekstrak Buah Merah (Pandanus conoideus Lam.) terhadap berat limpa, jumlah dan proliferasi limfosit pada mencit jantan galur Swiss-Webster yang diinokulasi Listeria monocytogenes. Disampaikan dalam KONAS XII dan PIN PAAI (Perhimpunan Ahli Anatomi Indonesia); 20 – 21 Juni 2008; Jakarta, Indonesia.

I Made Budi. Seri Agrisehat Buah Merah. Jakarta: Penebar Swadaya; 2005. h. 17-23.

Ingrid S. Surono, Nishigaki T, Anang Endaryanto, Priyo Waspodo. Indonesia Biodiversities, From Microbes to Herbal Plants As Potential Functional Foods. Journal of the Faculty of Agriculture Shinshu University; 2008. 44(1): 23-7.

(41)

Ingrid S. Surono, Nishigaki T. Novel Chemopreventive Herbal Plant Buah Merah (Pandanus conoideus) for Lung Cancers. PATPI Conference; 2007 July 17 – 18; Bandung, Indonesia.

Jung C, Hugot JP, Barreau F. Peyer’s Patches: The Immune Sensors of the Intestine. International Journal of Inflammation; 2010. 823710: 1-12. Junqueira LC, Carneiro J, editors. Basic Histology Text & Atlas. 11th ed. USA:

McGraw-Hill; 2005.

Kemas Ali Hanafiah. Rancangan Percobaan. Teori dan Aplikasi. Jakarta: Raja Grafindo Persada; 2000. h. 6-7.

Khie Khiong, Hana Ratnawati, Sylvia Soeng, Sri Utami Sugeng, Elsa Angelie, Evan Kristiono, et al. 2008. Efek imunomodulator Buah Merah (Pandanus conoideus Lam) terhadap mencit (Mus musculus) galur DDY yang diinduksi colitis dengan DSS. Disampaikan dalam KONAS XII dan PIN PAAI (Perhimpunan Ahli Anatomi Indonesia); 20-21 Juni 2008; Jakarta, Indonesia.

Kim TW, Seo JN, Suh YH, Park HJ, Kim JH, Kim JY, et al. Involvement of Lymphocytes in Dextran Sulfate Sodium-Induced Experimental Colitis.

World J. Gastroenterol; 2006. 12(2):302-5.

Kumar V, Abbas AK, Fausto N, Aster JC. Acute and Chronic Inflammation. In: Kumar V, Abbas AK, Fausto N, Aster JC, editors. Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease. 8th ed. USA: Elsevier-Saunders; 2010.

. Cellular Responses to Stress and Toxic Insults: Adaptation, Injury, and Death. In: Kumar V, Abbas AK, Fausto N, Aster JC, editors. Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease. 8th ed. USA: Elsevier-Saunders; 2010. Lewis DE, Harriman GR, Blutt SE. Organization of Immune System. In: Rich RR, Fleisher TA, Shearer WT, Schroeder Jr. HW, Frew AJ, Weyand CM, editors. Clinical Immunology Principles and Practice. 3rd ed. USA: Elsevier-Mosby; 2008.

Longe JL. The Gale Encyclopedia of Alternative Medicine. 2nd ed. USA: Thomson Gale; 2005.

(42)

Machmud Yahya dan Bernard T. Wahyu Wiryanta. Khasiat & Manfaat Buah Merah: Si Emas Merah dari Papua. Depok: Agromedia Pustaka; 2005. Mähler M, Bristol IJ, Leiter EH, Workman AE, Birkenmeier EH, Elson CO, et al.

Differential Susceptibility of Inbred Mouse Strains to Dextran Sulfate Sodium-Induced Colitis. Am J Physiol Gastointest Liver Physiol; 1998. 274: 544-51.

Mills JC, Stappenbeck TS. Gastrointestinal Disease. In: McPhee SJ, Hammer GD, editors. Pathophysiology of Disease An Introduction to Clinical Medicine. 6th ed. China: McGraw-Hill; 2010.

Moore KL, Dalley AF. Clinically Oriented Anatomy. 5th ed. USA: Lippincott William & Wilkins; 2006.

Palmer KR, Penman ID, Paterson-Brown S. Alimentary Tract and Pancreatic Disease. In: Boon NA, Colledge NR, Walker BR, editors. Davidson’s

Principles & Practice of Medicine. 20th ed. USA: Elsevier-Churchill Livingstone; 2007.

Pfeifer K. Inflammatory Bowel Disease. In: Torre DM, Lamb GC, van Ruyswik JJ, Schapira RM, Kochar MS, editors. Kochar’s Clinical Medicine for

Students. 5th ed. USA: Lippincott Williams & Wilkins; 2009.

Popivanova BK, Kitamura K, Wu Y, Kondo T, Kagaya T, Kaneko K, et al. Blocking TNF- in Mice Reduces Colorectal Carcinogenesis Associated with Chronic Colitis. JCI; 2008. 118(2): 560-70.

Roda G, Marocchi M, Sartini A, Roda E. Cytokine Networks in Ulcerative Colitis.

Hindawi Publishing Corporation. 2011; 391787: 1-5.

Rohman A, Riyanto S, Yuniarti N, Saputra WR, Utami R, Mulatsih W. Antioxidant Activity, Total Phenolic, and Total Flavonoid of Extracts and Fractions of Red Fruit (Pandanus conoideus Lam). International Food Research Journal; 2010. 17: 97-106.

Sedlack RE, Viggiano TR, Poterucha JJ. Gastrenterology and Hepatology. In: Habermann TM, Ghosh AK, editors. Mayo Clinic Internal Medicine Concise Textbook. Canada: Mayo Clinic Scientific Press; 2008.

(43)

Sies H, Stahl W. Vitamins E and C, β-carotene, and Other Carotenoids As Antioxidants. Am J Clin Nutr; 1995. 62: 1315-21.

Sies S. Oxidative Stress: Oxidants and Antioxidants. Experimental Physiology; 1997. 82: 291-5.

Spahn TW, Herbst H, Rennert PD, Lügering N, Maaser C, Kraft M, et al. Induction of Colitis in Mice Deficient of Peyer’s Patches and Mesenteric Lymph Nodes Is Associated with Increased Disease Severity and Formation of Colonic Lymphoid Patches. Am J Pathol; 2002. 161: 2273– 2282.

Stenson WF. Inflammatory Bowel Disease. In: Goldman L, Ausiello D, editors.

Cecil Medicine. 23rd ed. USA: Elsevier-Saunders; 2008.

Stevceva L, Pavli P, Husband A, Ramsay A, Doe WF. Dextran Sulphate Sodium-Induced Colitis is Ameliorated in Interleukin 4 Deficient Mice. Genes and Immunity; 2001. 2: 309-16.

Trubus. Panduan Praktis Buah Merah Bukti Empiris dan Ilmiah. Jakarta: Penebar Swadaya; 2005. h. 14-20, 50-52, 58-61.

Turner JR. The Gastrointestinal Tract, In: Kumar V, Abbas AK, Fausto N, Aster JC, editors. Robbins and Cotran Pathologic Basis of Disease. 8th ed. USA: Elsevier-Saunders; 2010. p. 807-13.

Yoshida H, Honda K, Shinkura R, Adachi S, Nishikawa S, Maki K, et al. IL-7 Receptor a+ CD3- Cells in The Embryonic Intestine Induces The Organizing Center of Peyer’s Patches. Int. Immunol; 1999. 11(5): 643-55. Young B, Lowe JS, Stevens A, Heath JW. Wheather’s Functional Histology A

Text and Colour Atlas. 5th ed. USA: Elsevier Churchill Livingstone; 2007. Zheng P, Niu FL, Liu WZ, Shi Y, Lu LG. Anti-Inflammatory Mechanisms of

Oxymatrine in Dextran Sulfate Sodium-Induced Colitis of Rats. World J Gastroenterol; 2005. 11(31): 4912-15.

http://www.phytochemicals.info/phytochemicals/beta-cryptoxanthin.php. 2011.

Beta-Cryptoxanthin. 20 Oktober 2011.

http://www.mpbio.com/index.php. 2011. Dextran Sulphate Sodium Salt. 20 Oktober 2011.

(44)

http://www.flixya.com/photo/2421626/red-fruit-Papua-Indonesia. 2011. Red Fruit Papua Indonesia. 20 Oktober 2011.

http://www.plantamor.com/index.php?plant=937. 2011. Buah Merah. 20 Oktober 2011.

(1)

2009. 361: 2055-78.

American Veterinary Medical Association. AVMA Guidelines on Euthanasia. USA; 2007.

Bambang Budiono. 2008. Hati-hati Konsumsi Suplemen Antioksidan. Opini Tribun R.S. Dr. Wahidin Sudirohusodo. Makassar. 29 Juni 2008.

Bouma G, Strober W. The Immunological and Genetic Basis of Inflammatory Bowel Disease. Nat Rev Immunol; 2003. 3(7): 521-33.

Burstein E, Fearon ER. Colitis and Cancer: A Tale of Inflammatory Cells and Their Cytokines. JCI; 2008. 118(2): 464-7.

Canadian Council on Animal Care. CCAC Guidelines On: Euthanasia of Animals Used in Science. Canada: Guidelines Committee; 2010.

Corr SC, Gahan CCGM, Hill C. M-Cells: Origin, Morphology and Role in Mucosal Immunity and Microbial Pathogenesis. FEMS Immunol Med Microbiol; 2007. 52(2008): 2-12.

Dieleman LA, Palmen MJHJ, Akol H, Bloemena E, Pena AS, Meuwissen SGM,

et al. Chronic Experimental Colitis Induced by Dextran Sulphate Sodium (DSS) is Characterized by Th1 and Th2 Cytokines. Clin Exp Immunol; 1998. 114: 385-91.

Drake RL, Vogl W, Mitchell AWM, editors. Gray’s Anatomy for Students. USA: Elsevier; 2007.

(2)

Eckman M, Labus D, Thompson G, Lockhart A, editors. Atlas of Pathophysiology. 3rd ed. China: Lippincott Williams & Wilkins; 2010.

Friedman S, Blumberg RS. Inflammatory Bowel Disease. In: Fauci AS, Kasper DL, Longo DL, Braunwald E, Hauser SL, Jameson JL, Loscalzo J, editors.

Harrison’s Principles of Internal Medicine. 17th ed. USA: McGraw-Hill; 2008.