Pengaruh waktu pemberian ekstrak etanol biji Persea americana Mill. secara akut terhadap kadar kreatinin dan gambaran histologis ginjal tikus terinduksi karbon tetraklorida - USD Repository

  

PENGARUH WAKTU PEMBERIAN EKSTRAK ETANOL BIJI Persea

americana Mill. SECARA AKUT TERHADAP KADAR KREATININ DAN

  

GAMBARAN HISTOLOGIS GINJAL TIKUS TERINDUKSI KARBON

TETRAKLORIDA

SKRIPSI

  Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

  Program Studi Farmasi Oleh :

  Adrienne Roma Alphayovita NIM : 108114036

  

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

HALAMAN PERSEMBAHAN

  

(

“The only thing that stands between you and your dream is the

will to try and the belief that it is

actually possible.”

• – Joel Brown –

  Kupersembahkan karyaku ini untuk: Yesus Kristus, Sang Guru dan sumber segala ilmu

  Daddy, Mama, adik dan sahabat-sahabat yang menjadi sumber semangatku Serta Almamaterku tercinta Universitas Sanata Dharma

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  

PRAKATA

  Puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas perlindungan dan berkat-Nya yang melimpah, sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Pengaruh Waktu Pemberian Ekstrak Etanol Biji Persea americana

  

Mill. secara Akut terhadap Kadar Kreatinin dan Gambaran Histologis

Ginjal Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida” ini dengan baik dan lancar

  untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

  Penulis menyadari bahwa dalam penyelesaian skripsi ini banyak pihak yang membantu, baik secara langsung maupun tidak langsung. Oleh karena itu, penulis hendak mengucapkan terimakasih kepada:

  1. Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah mengijinkan penulis menjalankan pembelajaran selama masa studi.

  2. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt. selaku Dosen Pembimbing dan Dosen Penguji Skripsi yang telah mendampingi, memotivasi dan memberi masukan kepada penulis selama proses penyelesaian skripsi ini.

  3. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dosen Penguji Skripsi atas kritik dan saran demi kemajuan skripsi ini.

  4. Bapak Prof. Dr. C.J. Soegihardjo, Apt. selaku Dosen Penguji Skripsi atas kritik dan saran demi kemajuan skripsi ini.

  5. Ibu Rini Dwiastuti, M.Si., Apt. selaku Kepala Penanggungjawab Laboratorium Fakultas Farmasi yang telah memberikan ijin dalam

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  penggunaan semua fasilitas laboratorium untuk kepentingan penelitian skripsi ini.

  6. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., yang telah memberikan bantuan dalam determinasi tanaman Persea americana Mill.

  7. Bapak Kayatno, Bapak Heru, Bapak Suparjiman, Bapak Kunto, Bapak Wagiran, Bapak Suparlan selaku Staff Laboratorium Fakultas Farmasi yang telah banyak membantu dalam proses pelaksanaan penelitian.

  8. Keluargaku tercinta, Daddy Robinson Sitepu, Mama Maladina Ginting, dan adikku Benedict Roma Bethadiva yang selalu memberi semangat, nasihat dan doa kepada penulis.

  9. Rekan-rekan tim Persea americana ceria : Priscilla Diana Vivi Vionita, Angelia Rosari, Maria Malida Vernandes Sasadara, Ike Kumalasari, Yudhita, Inneke Devi, Robert Dwijantara Putra, Liana Risha, Gidion Krisnadi Yoseph, Rotua Winata Nopelia Silitonga, Komang Ayu Nopitasari, Irene, Lydia Setiawan, dan Ni Luh Putu Dian Prawita Putri atas kerjasama, bantuan, motivasi, masukan dan doa dalam pengerjaan skripsi.

  10. Sahabat-sahabatku Inggrid R. Tokan, Therezita Sahita Laksmi, Chatarina Serafina, Pande Putu Krishna Wedana, Juana Merianti Simanjuntak, Agustinus Hendy Larsen, Enggar Nugraheni Putri, Oswaldine Heraolia, Yovica Theresia, Stella Octaviani, Cornelio Thressyananda, Indriana Wijaya, Bradyenda Presindo Kaban dan Mas Aloysius Hendra untuk dukungan, doa, kebersamaan dan motivasinya.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  11. Sahabat dan saudara terbaikku Alm. Bonifasius Prasetya Krissutantriarsa yang telah menjadi sumber semangat dan motivasi untuk penulis.

  12. Antonius Budi Wasito dan keluarga untuk cinta, dukungan dan doanya.

  13. Seluruh dosen, karyawan dan teman-teman angkatan 2010 Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma

  14. Semua pihak yang tidak dapat disebutkan penulis satu per satu yang telah ikut berperan dan membantu selama penyusunan skripsi ini.

  Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih jauh dari sempurna. Oleh karena itu, penulis sangat terbuka dengan segala kritik dan saran yang membangun dari semua pihak. Akhir kata, semoga skripsi ini bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan terutama dalam bidang farmasi serta semua pihak yang membutuhkan.

  Penulis

  

DAFTAR ISI

  Halaman HALAMAN JUDUL................................................................................... i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ......................................... ii HALAMAN PENGESAHAN..................................................................... iii HALAMAN PERSEMBAHAN ................................................................. iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ..................................................... v LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA

  ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS .................................... vi PRAKATA.................................................................................................. vii DAFTAR ISI............................................................................................... x DAFTAR TABEL....................................................................................... xv DAFTAR GAMBAR .................................................................................. xvi DAFTAR LAMPIRAN ............................................................................... xviii

  INTISARI.................................................................................................... xx

  

ABSTRACT .................................................................................................. xxi

BAB I. PENGANTAR ................................................................................

  1 A. Latar Belakang .....................................................................................

  1 1. Perumusan masalah.......................................................................

  4 2. Keaslian penelitian........................................................................

  4 3. Manfaat penelitian ........................................................................

  5 B. Tujuan Penelitian .................................................................................

  6 PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  2. Tujuan khusus ...............................................................................

  6 BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA.........................................................

  7 A. Ginjal....................................................................................................

  7 1. Anatomi dan fisiologi ginjal .........................................................

  7 2. Kerusakan ginjal (nefropati) .........................................................

  12 3. Histologis ginjal ............................................................................

  14 B. Kreatinin ..............................................................................................

  15 1. Metabolisme kreatinin ..................................................................

  16 2. Faktor yang mempengaruhi kadar kreatinin darah .......................

  17 3. Metode pemeriksaan kreatinin......................................................

  17 C. Karbon Tetraklorida.............................................................................

  18 D. Persea americana Mill. .......................................................................

  20 1. Morfologi ......................................................................................

  20 2. Sinonim .........................................................................................

  21 3. Nama lain ......................................................................................

  21 4. Taksonomi.....................................................................................

  21 5. Kandungan ....................................................................................

  22 6. Khasiat dan kegunaan ...................................................................

  22 E. Ekstraksi...............................................................................................

  22 F. Landasan Teori.....................................................................................

  25 G. Hipotesis ..............................................................................................

  25

  A. Jenis dan Rancangan Penelitian ...........................................................

  3. Penetapan kadar air pada serbuk kering biji Persea americana Mill 31 4. Pembuatan ekstrak etanol biji Persea americana Mill .................

  35 PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  34 12. Penetapan kadar serum kontrol dan serum kreatinin ....................

  34 11. Pembuatan preparat histologis ......................................................

  33 10. Pembuatan serum ..........................................................................

  33 9. Pengelompokkan dan perlakuan hewan uji...................................

  32 8. Uji pendahuluan ............................................................................

  32 7. Pembuatan suspending agent CMC-Na 1%..................................

  32 6. Pembuatan larutan karbon tetraklorida .........................................

  31 5. Penetapan konsentrasi pekat ekstrak.............................................

  30

  27 B. Variabel dan Definisi Operasional .......................................................

  30 2. Pengumpulan bahan uji dan pembuatan serbuk............................

  30 1. Determinasi serbuk biji Persea americana Mill ...........................

  30 E. Tata Cara Penelitian .............................................................................

  29 D. Alat atau Instrumen Penelitian.............................................................

  28 2. Bahan kimia ..................................................................................

  28 1. Bahan utama..................................................................................

  28 C. Bahan Penelitian ..................................................................................

  27 3. Definisi operasional ......................................................................

  27 2. Variabel pengacau.........................................................................

  27 1. Variabel utama ..............................................................................

  PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  F. Tata Cara Analisis Hasil ......................................................................

  36 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN ..................................................

  37 A. Penyiapan Bahan..................................................................................

  37 1. Hasil determinasi serbuk...............................................................

  37 2. Penetapan kadar air serbuk biji Persea americana Mill...............

  38 B. Uji Pendahuluan...................................................................................

  38 1. Penentuan dosis nefrotoksin karbon tetraklorida ..........................

  38 2. Penentuan waktu pencuplikan darah hewan uji ............................

  39 C. Hasil Uji Waktu Pemberian Ekstrak Etanol Biji P. americana secara Akut pada Tikus Terinduksi Karbon Tetraklorida ........................................

  41 1. Kelompok kontrol negatif (olive oil 2 ml/kgBB) ..........................

  44

  2. Kelompok kontrol nefrotoksin ( karbon tetraklorida 2 ml/kgBB)

  46

  3. Kelompok kontrol perlakuan (ekstrak etanol biji P. americana dosis 350mg/kgBB)................................................................................

  46

  4. Kelompok perlakuan ekstrak etanol biji P. americana dosis 350 mg/kgBB pada tikus terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB 47 5. Pemeriksaan histologis ginjal .......................................................

  52 D. Rangkuman Pembahasan .....................................................................

  57 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN.....................................................

  58 A. Kesimpulan ..........................................................................................

  58 B. Saran ....................................................................................................

  58

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  LAMPIRAN ................................................................................................

  64 BIOGRAFI PENULIS ................................................................................

  89 PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  

DAFTAR TABEL

  Halaman Tabel I. Rata-rata kadar kreatinin tikus setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada pencuplikan darah jam ke-0, 24, 48, dan 72 (n= 4).....................................................

  39 Tabel II. Hasil uji Scheffe kadar kreatinin tikus setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada pencuplikan darah jam ke-0, 24, 48, dan 72................................................................

  41 Tabel III. Pengaruh waktu pemberian ekstrak etanol biji P. americana secara akut terhadap nefrotoksisitas karbon tetraklorida dilihat dari kadar kreatinin ................................................................

  42 Tabel IV. Hasil analisis kebermaknaan kadar kreatinin antar kelompok berdasarkan hasil uji Scheffe..................................................

  44 Tabel V. Perbandingan kadar kreatinin kelompok kontrol olive oil pada pencuplikan darah jam ke-0 dan jam ke-48 ...........................

  45 Tabel VI. Hasil pemeriksaan histologis ginjal tikus ..............................

  52

  PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  

DAFTAR GAMBAR

  Halaman Gambar 1. Struktur makroskopik ginjal ..................................................

  7 Gambar 2. Struktur mikroskopik ginjal ...................................................

  9 Gambar 3. Pembuluh darah ginjal dan suplai darah ginjal ......................

  10 Gambar 4. Gambaran mikroskopik ginjal normal (diwarnai dengan

  haematoxylin dan eosin). (A) Korteks ginjal, 1: korpuskuler

  ginjal; 2: tubulus kontortus proksimal; 3: tubulus kontortus distal; 4: kapsul Bowman. (B) Medula ginjal, 1: lengkung Henle; 2: jaringan ikat interstitial ......................................................

  14 Gambar 5. Korpuskular ginjal secara mikroskopik .................................

  14 Gambar 6. Tubulus kontortus proksimal (p) dan tubulus kontortus distal (d) secara mikroskopik ................................................................

  15 Gambar 7. Duktus kolektivus secara mikroskopik ..................................

  15 Gambar 8. Struktur molekul karbon tetraklorida.....................................

  18 Gambar 9. Mekanisme biotransformasi dan oksidasi karbon tetraklorida

  20 Gambar 10. Diagram batang hasil pengukuran kadar kreatinin tikus setelah induksi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada pencuplikan darah jam ke-0, 24, 48, dan 72 sebagai uji pendahuluan .......

  40 Gambar 11. Diagram batang rata-rata pengaruh waktu pemberian ekstrak etanol biji P. americana secara akut terhadap nefrotoksisitas

  Gambar 12. Diagram batang rata-rata perbandingan kadar kreatinin kontrol olive oil jam ke-0 dari kontrol olive jam ke-48 .........

  45 Gambar 13. Fotomikroskopik ginjal tikus normal (tidak ada perubahan patologik) ...............................................................................

  53 Gambar 14. Fotomikroskopik ginjal tikus Degenerasi Hidrofik Epitel Tubulus ..................................................................................

  54 Gambar 15. Fotomikroskopik ginjal tikus Intratubular hyaline cast ........

  55 PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  

DAFTAR LAMPIRAN

  Halaman Lampiran 1. Foto serbuk biji Persea americana Mill ..........................

  65 Lampiran 2. Foto serbuk biji Persea americana Mill. yang dimaserasi dengan pelarut etanol ........................................................

  65 Lampiran 3. Foto ekstrak etanol kental biji Persea americana Mill.....

  66 Lampiran 4. Foto ekstrak etanol kental yang telah dilarutkan dengan CMC-Na 1 % ....................................................................

  66 Lampiran 5. Surat pengesahan determinasi serbuk biji Persea americana Mill....................................................................................

  67 Lampiran 6. Hasil determinasi serbuk biji P. americana ......................

  68 Lampiran 7. Surat Ethics Committee Approval .....................................

  71 Lampiran 8. Hasil analisis statistik data kreatinin pada uji pendahuluan waktu pencuplikan darah hewan uji setelah induksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB......................................................

  72 Lampiran 9. Hasil analisis statistik data kreatinin pada kelompok kontrol olive oil dosis 2 ml/kgBB..................................................

  74 Lampiran 10. Hasil analisis statistik data kreatinin pada kelompok perlakuan ekstrak etanol biji Persea americana Mill. dosis 350 mg/kgBB pada tikus terinduksi karbon tetraklorida 2

  Lampiran 11. Penetapan kadar air serbuk biji P. americana...................

  80 Lampiran 12. Hasil rendemen ekstrak etanol biji P.americana ..............

  82 Lampiran 13. Bobot pengeringan ekstrak etanol biji P.americana hingga terbentuk ekstrak kental ....................................................

  82 Lampiran 14. Perhitungan konversi dosis untuk manusia .......................

  83 Lampiran 15. Perhitungan efek nefroprotektif ........................................

  83 Lampiran 16. Hasil pengukuran validitas dan reabilitas .........................

  84 Lampiran 17. Surat pengesahan hasil histologis ginjal ...........................

  85 Lampiran 18. Gambar fotomikroskopik ginjal ........................................

  87 PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  

INTISARI

  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh waktu pemberian ekstrak etanol biji Persea americana Mill. secara akut terhadap kadar kreatinin dan gambaran histologis ginjal tikus terinduksi karbon tetraklorida dan mengetahui waktu pemberian yang paling efektif.

  Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. Sebanyak 30 ekor tikus jantan galur Wistar, umur 2-3 bulan dengan berat 150-250 gram dibagi secara acak ke dalam 6 kelompok. Kelompok I (kontrol nefrotoksin) diberi karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB secara i.p. Kelompok II (kontrol negatif) diberi olive oil dosis 2 ml/kgBB secara i.p. Kelompok III (kontrol ekstrak) diberi ekstrak etanol biji

  

Persea americana Mill. dengan dosis 350 mg/kgBB secara p.o. Kelompok IV, V,

dan VI (kelompok perlakuan) diberi ekstrak etanol biji Persea americana Mill.

  dosis 350 mg/kgBB secara p.o, kemudian secara berturut-turut pada jam ke 1, 4 dan 6 setelah pemberian ekstrak etanol dilakukan pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB secara i.p. Pada jam ke-48 setelah pemberian karbon tetraklorida, semua kelompok diambil darahnya pada daerah sinus orbitalis mata untuk penetapan kadar kreatinin. Kemudian tikus dikorbankan dan diambil ginjalnya untuk dibuat preparat guna pengamatan histologis. Data kadar kreatinin yang diperoleh dianalisis secara statistik menggunakan one way ANOVA dan dilanjutkan uji Scheffe dengan tingkat kepercayaan 95%.

  Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa waktu pemberian ekstrak etanol biji Persea americana Mill. dosis 350 mg/kgBB secara akut berpengaruh terhadap penurunan kadar kreatinin dan perbaikan gambaran histologis ginjal tikus terinduksi karbon tetraklorida. Waktu paling efektif dalam menurunkan kadar kreatinin tikus terinduksi karbon tetraklorida yaitu 4 jam setelah pemberian ekstrak etanol biji P.americana dosis 350 mg/kgBB.

  

Kata kunci : biji Persea americana Mill., ekstrak etanol, akut, kreatinin,

karbon tetraklorida

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  

ABSTRACT

  This study aimed to determine the administration time effect of ethanol seed extract of Persea americana Mill. in acute on creatinine levels and renal histological figure in carbon tetrachloride-induced rats and to determine the most effective administration time.

  This study is purely experimental with completely randomized design. A total of 30 male Wistar rats, aged 2-3 months, weighing 150-250 g were randomly divided into 6 groups, five rats each. Group I (nephrotoxin control) was administered 2 ml/kgBW of carbon tetrachloride by i.p. Group II (negative control) was administered 2 ml/kgBW of olive oil by i.p. Group III (extract control) was orally administered ethanol seed extract of Persea americana Mill. at a dose of 350 mg/kgBW for 6 hours. Group IV-VI (treatment groups) were orally administered 350 mg/kgBW of P. americana ethanol seed extract. Then

  st th th

  successively on the 1 , 4 and 6 hours after administration of ethanol seed extract, 2 ml/kgBW of carbon tetrachloride was injected. Fourty eight hours after administration of carbon tetrachloride, all groups have blood drawn at eye orbital sinus area for the determination of creatinine levels. Then the rats were sacrificed and kidneys were taken for histological observations. Creatinine levels obtained data were statistically analyzed using one-way ANOVA and followed by Scheffe test with a 95% confidence level.

  This study showed that the administration time of ethanol seed extract of

  

Persea americana Mill. in acute effect on the decline of creatinine levels and

  renal histological figure in carbon tetrachloride-induced rats. The most effective time in lowering creatinine levels of carbon tetrachloride-induced rats is 4 hours after administration of the ethanol seed extract of P. americana at a dose of 350 mg /kgBW.

  

Key words : Persea americana Mill. seed, ethanol extract, acute, creatinine,

carbon tetrachloride

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Ginjal merupakan salah satu organ detoksifikasi utama setelah hati

  dengan membuang racun tubuh yang telah dilarutkan dalam air oleh hati agar dapat dibawa darah, kemudian dibuang bersama kelebihan cairan tubuh melalui urin (Alam dan Hadibroto, 2007). Bila ada nefropati atau kerusakan ginjal, maka racun tidak dapat dikeluarkan, sedangkan protein yang seharusnya dipertahankan ginjal bocor keluar (Tandra, 2007). Adanya kerusakan pada ginjal dapat ditandai dengan peningkatan kadar kreatinin dalam darah. Sintesis kadar kreatinin dalam darah relatif konstan sehingga merupakan indikator fungsi ginjal yang lebih akurat daripada BUN / Blood Urea Nitrogen (Sutedjo, 2009)

  Gagal ginjal merupakan salah satu penyakit yang sudah mendunia. Di Amerika Serikat pada akhir tahun 2007 tercatat sebanyak 527.283 orang mendapat pengobatan gagal ginjal tahap akhir (End Stage Renal Disease/ESRD), di mana 368.544 orang di antaranya mendapat terapi hemodialisis (National Kidney and

  

Urologic Disease Information Clearinghouse , 2010). Indonesia termasuk negara

  dengan tingkat penderita gagal ginjal yang cukup tinggi. Menurut data dari Perneftri (Persatuan Nefrologi Indonesia) pada tahun 2009, diperkirakan terdapat 70 ribu penderita gagal ginjal di Indonesia namun yang terdeteksi menderita gagal ginjal kronis tahap terminal dari mereka yang menjalani hemodialisis hanya

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  Melihat tingginya prevalensi penderita gagal ginjal di Indonesia, maka diperlukan alternatif pengobatan baru. Saat ini, masyarakat sudah mulai beralih ke pengobatan herbal karena mudah diperoleh, efek samping relatif lebih sedikit daripada obat-obatan konvensional bila digunakan secara tepat, dan terjangkau harganya (Duke, 1997). Salah satu tanaman yang terkenal memiliki banyak khasiat dan digunakan sebagai pengobatan herbal yaitu alpukat (Persea

  

americana Mill.). Selama ini, bagian tanaman Persea americana Mill. yang

  paling banyak diteliti dan digunakan untuk pengobatan yaitu buah dan daunnya, sedangkan bijinya masih banyak terbuang dan tidak dimanfaatkan. Padahal biji

  

Persea americana Mill. diketahui memiliki berbagai khasiat seperti antioksidan

  (Arukwe et al., 2012), antimikroba (Idris, Ndukwe, dan Gimba, 2009), antihipertensi (Anaka, Raymond, dan Stephen, 2009) serta antidiabetes (Alhassan

  et al ., 2012).

  Dalam penelitian ini, digunakan biji Persea americana Mill. yang diekstraksi menggunakan pelarut etanol karena etanol memiliki kemampuan menyari dengan polaritas yang lebar mulai dari senyawa non polar sampai senyawa polar, lebih selektif, kapang dan kuman sulit tumbuh, tidak beracun, absorpsinya baik dan dapat bercampur dengan air. Etanol juga dapat melarutkan alkaloid basa, minyak menguap, glikosida, kurkumin, kumarin, antrakinon, flavonoid, steroid, damar, dan klorofil (Direktorat Jenderal Pengawasan Obat dan Makanan, 1986). Pada penelitian yang dilakukan oleh Malangngi, Meiske, dan Jessy (2012) disebutkan bahwa ekstrak etanol biji Persea americana Mill.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  aktivitas antioksidan sebesar 93,045%. Tanin merupakan senyawa polifenol yang dapat membentuk kompleks dengan protein. Tanin terbagi menjadi dua jenis, yaitu tanin terhidrolisis dan tanin terkondensasi. Tanin terkondensasi memiliki peranan biologis sebagai antioksidan sehingga kandungan tanin dalam biji Persea

  

americana Mill. akan berpengaruh terhadap aktivitas penangkapan radikal bebas

yang menimbulkan kerusakan oksidatif (Malangngi, Meiske, dan Jessy, 2012).

  Karbon tetraklorida merupakan senyawa model nefrotoksin yang dapat menyebabkan Nekrosis Tubulus Akut (NTA). Karbon tetraklorida diubah oleh sitokrom P450 menjadi radikal bebas reaktif yang dapat mengakibatkan peningkatan peroksidasi lipid di liver dan jaringan ginjal (Manna, Sinha, dan Sil, 2006). Pemejanan karbon tetraklorida dalam jangka panjang dapat memicu terjadinya sirosis dan tumor hati, juga kerusakan ginjal (Timbrell, 2009).

  Kerusakan akibat terbentuknya ikatan kovalen antara radikal bebas dengan makromolekul jaringan menimbulkan kerusakan pada tubulus proksimal ginjal (Cotran dan Robbins, 1997).

  Dalam penelitian ini dilakukan pemberian ekstrak etanol biji Persea

  

americana Mill. secara akut/ jangka pendek (1 kali pemberian selama 1 jam, 4

  jam, dan 6 jam sebelum induksi karbon tetraklorida) untuk mengetahui waktu efektif ekstrak etanol biji Persea americana Mill. dalam memproteksi ginjal tikus terinduksi karbon tetraklorida, dengan dosis efektif yang diperoleh dari penelitian jangka panjang (pemberian ekstrak etanol biji P. americana selama 6 hari berturut-turut sebelum induksi karbon tetraklorida) yang dilakukan Silitonga

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  ekstrak dan diperoleh dosis efektif ekstrak etanol biji Persea americana Mill. konsentrasi 7% b/v sebesar 350 mg/kgBB, di mana pada dosis tersebut terjadi penurunan kadar kreatinin tertinggi pada tikus terinduksi karbon tetraklorida 2 ml/kgBB (konsentrasi 50% v/v). Sejauh ini belum ada penelitian mengenai waktu efektif pemberian ekstrak etanol biji Persea americana Mill. 350 mg/kgBB secara akut sebagai nefroprotektif. Maka dari itu, penelitian ini perlu untuk dilakukan.

  1. Perumusan masalah

  a. Apakah pemberian ekstrak etanol biji Persea americana Mill. dosis 350 mg/kgBB secara akut mempunyai pengaruh terhadap penurunan kadar kreatinin dan perbaikan gambaran histologis ginjal tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida ?

  b. Berapakah waktu efektif ekstrak etanol biji Persea americana Mill. 350 mg/kgBB yang berpengaruh terhadap penurunan kadar kreatinin dan perbaikan gambaran histologis ginjal tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida ?

  2. Keaslian penelitian

  Penelitian terhadap biji Persea americana Mill. pernah dilakukan oleh:

  a. Malangngi, Meiske, dan Jessy (2012) yang menyatakan bahwa ekstrak etanol biji Persea americana Mill. memiliki kandungan tanin dan antioksidan yang mampu menangkap radikal bebas DPPH.

  b. Idris, Ndukwe, dan Gimba (2009) yang menyatakan bahwa ekstrak biji Persea americana Mill. memiliki aktivitas antimikroba.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  c. Arukwe et al. (2012) yang menyatakan bahwa biji Persea americana mengandung tanin, saponin, flavonoid, alkaloid, steroid, sianogenik glikosida dan fenol yang memiliki aktivitas antiinflamasi, antioksidan serta meningkatkan sistem imun.

  d. Anaka, Raymond, dan Stephen (2009) yang menyatakan bahwa ekstrak air biji Persea americana Mill. memiliki aktivitas menurunkan tekanan darah pada tikus Sprague-Dawley.

  e. Kosinska et al. (2012) yang menyatakan bahwa ekstrak metanol kulit dan biji Persea americana Mill. tinggi kandungan fenolik serta memiliki kapasitas antioksidan terhadap radikal bebas DPPH dan ABST. Pada saat yang bersamaan dengan penelitian ini, juga dilakukan penelitian mengenai efek nefroprotektif pada pemberian jangka panjang ekstrak etanol biji Persea americana Mill terhadap penurunan kadar kreatinin serum dan gambaran histologis ginjal tikus terinduksi karbon tetraklorida (Silitonga, 2013).

  Sejauh penelusuran pustaka yang dilakukan penulis, penelitian tentang pengaruh waktu pemberian ekstrak etanol biji Persea americana Mill. secara akut terhadap kadar kreatinin dan gambaran histologis ginjal tikus terinduksi karbon tetraklorida belum pernah dipublikasikan.

3. Manfaat penelitian

  a. Manfaat teoritis. Penelitian ini diharapkan mampu mengembangkan dan memperkaya khasanah ilmu pengetahuan terutama ilmu kefarmasian mengenai pengaruh pemberian ekstrak etanol biji Persea americana Mill.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  secara akut terhadap kadar kreatinin dan gambaran histologis ginjal tikus terinduksi karbon tetraklorida.

  b. Manfaat praktis. Penelitian ini diharapkan mampu memberikan informasi kepada masyarakat mengenai waktu penggunaan akut biji Persea

  

americana Mill. sebagai alternatif dalam pengobatan gagal ginjal.

B. Tujuan Penelitian

  1. Tujuan umum

  Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan adanya pengaruh waktu pemberian ekstrak etanol biji Persea americana Mill. 350 mg/kgBB secara akut terhadap penurunan kadar kreatinin dan perbaikan gambaran histologis ginjal tikus terinduksi karbon tetraklorida.

  2. Tujuan khusus

  Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui waktu efektif ekstrak etanol biji Persea americana Mill. 350 mg/kgBB dalam memberikan efek nefroprotektif optimal dengan menurunkan kadar kreatinin dan memperbaiki gambaran histologis ginjal tikus terinduksi karbon tetraklorida.

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Ginjal

1. Anatomi dan fisiologi ginjal

  

Gambar 1. Struktur makroskopik ginjal

(Huether and McCance, 2008)

  Ginjal merupakan salah satu organ detoksifikasi utama setelah hati, dengan membuang racun tubuh yang telah dilarutkan dalam air oleh hati agar dapat dibawa darah, kemudian dibuang bersama kelebihan cairan tubuh melalui urin (Alam dan Hadibroto, 2007). Ginjal berbentuk kacang (gambar 1), yang panjangnya sekitar 11 cm, lebar 6 cm, tebal 3 cm, serta beratnya sekitar 150 gram. Ginjal terletak di dinding abdomen posterior, masing- masing 1 buah di sisi kiri dan kanan kolum vertebra, di belakang peritoneum dan di bawah diafragma.

  Ginjal kanan biasanya sedikit lebih pendek daripada ginjal kiri, mungkin karena di

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  atas ginjal kanan terdapat ruang yang ditempati hati. Ginjal melekat pada posisinya karena berikatan dengan suatu massa lemak. Selubung fasia renal fibroelastik membungkus ginjal dan lemak ginjal. Secara makroskopik (gambar 1), ginjal terdiri dari:

  a. Capsula fibrosa , mengelilingi ginjal, untuk melindungi struktur dalamnya yang rapuh.

  b. Cortex , lapisan jaringan yang berwarna coklat kemerahan tepat berada di bawah kapsul dan di luar piramid, di dalamnya terdapat berjuta nefron (Setiadi, 2007).

  c. Medulla , lapisan terdalam ginjal yang terdiri atas striasi (garis-garis) berbentuk kerucut yang pucat (pyramid renal), di dalamnya banyak terdapat duktus ginjal (Setiadi, 2007).

  Hilum merupakan batas medial ginjal berbentuk cekung dan tempat

  masuknya pembuluh darah dan pembuluh limfe ginjal, ureter dan saraf. Pelvis

  

renal merupakan struktur berbentuk corong yang bekerja sebagai wadah

penampung urine yang dibentuk oleh ginjal (Nurachmah dan Angriani, 2011).

  Batas luar pelvis terbagi menjadi kantong-kantong dengan ujung terbuka yang disebut kaliks mayor, yang meluas ke bawah dan terbagi menjadi kaliks minor, yang mengumpulkan urin dari tubulus setiap papilla. Papilla menonjol ke dalam ruang dari pelvis ginjal, yaitu sambungan dari ujung ureter bagian atas yang berbentuk corong (Guyton dan Hall, 2006).

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  

Gambar 2. Struktur mikroskopik ginjal

(Dipiro, Talbert, Yee, Matzke, Wells dan Posey, 2008)

  Secara mikroskopik (gambar 2), ginjal terdiri atas sekitar 1 juta unit fungsional nefron, dan sejumlah kecil duktus kolektivus. Duktus kolektivus mengangkut urine melalui piramid ke pelvis renal, menyebabkan piramid ini tampak bergaris-garis (tubulus nefron). Tubulus ditunjang oleh sejumlah kecil jaringan ikat yang berisi pembuluh darah, pembuluh limfe, serta saraf. Nefron merupakan bagian terkecil dari ginjal yang terdiri dari glomerulus yang dibungkus oleh kapsul Bowman (korpuskular ginjal), tubulus kontortus proksimal, lengkung Henle dan tubulus kontortus distal yang bersambung ke duktus kolektivus (Nurachmah dan Angriani, 2011). Glomerulus berfungsi untuk filtrasi air dan zat terlarut dalam darah (Leeson, 1996), sedangkan kapsula bowman merupakan suatu pelebaran nefron yang dibatasi oleh epitel yang menyelubungi glomerulus

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  untuk mengumpulkan zat terlarut yang difiltrasi oleh glomerulus (Leeson, 1996; Sherwood, 2006). Sel tubulus proksimal mereabsorbsi 60-65 % air yang disaring korpuskular ginjal, serta hampir semua nutrien, vitamin, ion, dan protein plasma kecil. Tubulus proksimal memiliki brush border untuk mereabsorbsi, sedangkan tubulus distal tidak memiliki brush border. Sel epitel tubulus sangat peka terhadap anoksia dan rentan terhadap toksin. Beberapa faktor yang menyebabkan tubulus mudah mengalami ketoksikan, yaitu termasuk permukaan luas bermuatan listrik untuk reabsorbsi tubulus, sistem transpor aktif ion dan asam organik, dan kemampuan melakukan pemekatan secara efektif, selain itu kadar sitokrom P450 yang tinggi untuk mendetoksifikasi atau mengaktifkan toksikan (Robbins dan Cotran, 2007). Duktus kolektivus merupakan saluran pengumpul yang akan menerima cairan dan zat terlarut lainnya dari tubulus distal (Sherwood, 2006).

  

Gambar 3. Pembuluh darah ginjal dan suplai darah ginjal

(Shier, 2006)

  Ginjal kaya akan pembuluh darah (gambar 3). Korteks adalah bagian

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  ginjal. Ginjal mendapat darah dari aorta abdominalis yang mempunyai percabangan arteria renalis. Arteri ini berpasangan kanan dan kiri (dextra dan sinistra). Arteria renalis bercabang menjadi arteria intralobularis, kemudian menjadi arteri arkuata. Arteria interlobularis yang berada di tepi ginjal bercabang menjadi kapiler membentuk gumpalan (glomerulus). Glomerulus dikelilingi oleh simpai Bowman. Disini terjadi penyaringan pertama dan kapiler darah yang meninggalkan simpai Bowman kemudian menjadi vena renalis lalu masuk ke vena cava inferior (Syaifuddin, 2003). Pembuluh darah ginjal dipersarafi oleh saraf simpatik dan parasimpatik yang mampu mengendalikan diameter pembuluh darah ginjal dan aliran darah ginjal dengan bebas melakukan autoregulasi (Nurachmah dan Angriani, 2011). Sirkulasi ginjal memiliki dua bentuk kapiler, yaitu kapiler glomerulus dan kapiler peritubulus, yang tersusun dalam suatu rangkaian dan dipisahkan oleh arteriol eferen yang membantu untuk mengatur tekanan hidrostatik dalam kedua perangkat kapiler. Adanya pengaturan tahanan arteriol aferen dan eferen, ginjal dapat mengatur tekanan hidrostatik pada kapiler glomerulus dan kapiler peritubulus, dengan demikian mengubah laju filtrasi glomerulus dan/atau reabsorbsi tubulus sebagai respons terhadap kebutuhan homeostatik tubuh (Guyton dan Hall, 2006).

  Ginjal berfungsi untuk mengatur volume cairan dalam tubuh, mengatur keseimbangan osmotik, elektrolit dan asam basa cairan tubuh, mengekskresi sisa hasil metabolisme (ureum, asam urat, kreatinin) zat-zat toksik dan obat-obatan, mensekresi hormon dan pembentukan eritrosit (Syaifuddin, 2003). Nefron ginjal

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  a. Filtrasi glomerulus. Pada proses ini, terjadi penyerapan darah dimana yang tersaring adalah bagian cairan darah, kecuali protein. Cairan yang tersaring ditampung oleh simpai Bowman. Cairan terdiri dari elektrolit (natrium, klorida, kalium) dan molekul organik (kreatinin, ureum, dan glukosa) yang konsentrasinya sama di dalam plasma. Cairan yang tersaring diteruskan ke tubulus ginjal. Jumlah filtrat glomerulus yang dibentuk setiap menit dalam semua nefron kedua ginjal disebut laju filtrasi glomerulus (GFR= Glomerular Filtration Rate ).

  b. Transport tubulus (reabsorpsi dan sekresi). Pada proses reabsorpsi, terjadi penyerapan kembali sebagian besar glukosa, natrium, klorida, fosfat, dan ion bikarbonat secara pasif di tubulus kontortus proksimal. Pada tubulus kontortus distal juga terjadi proses reabsorpsi natrium dan ion bikarbonat bila diperlukan. Pada proses sekresi, zat yang tidak diperlukan dibersihkan di tubulus kontortus dan diekskresikan ke dalam urine. Pada proses ini terjadi sekresi ion hidrogen untuk mempertahankan pH normal darah (Huether dan McCance, 2008).

2. Kerusakan ginjal (nefropati)

  Ginjal bekerja untuk membersihkan darah dari racun yang masuk dan yang dibentuk oleh tubuh. Bila ada nefropati atau kerusakan ginjal, racun tidak dapat dikeluarkan, sedangkan protein yang seharusnya dipertahankan ginjal bocor keluar (Tandra, 2007). Gagal ginjal akut adalah penurunan fungsi ginjal tiba-tiba yang ditunjukkan dengan peningkatan kadar BUN (Blood Urea Nitrogen) dan

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

  Fisiologi kelainan ginjal dibedakan menjadi lima macam kategori fisiologik, yaitu:

  1. Kegagalan akut ginjal, terjadi jika fungsi ginjal menurun secara mendadak dan reversibel karena kegagalan pra-renal, intrarenal, dan pascarenal.

  Kegagalan pra-renal secara prinsip adalah hal-hal yang menyebabkan penurunan perfusi darah ke ginjal sehingga terjadi kerusakan hipoksik.

  Kegagalan intrarenal mencakup kerusakan parenkim ginjal akibat nefrotoksin, penyakit seperti glomerulonefritis atau hipoksia akibat penurunan perfusi ginjal yang tidak diperbaiki dan berlangsung lama serta NTA (Nekrosis Tubulus Akut) (Brooker, 2005).

  2. Kegagalan kronis ginjal, jika fungsi ginjal menurun secara progresif dan ireversibel karena destruksi ginjal yang progresif dan terus- menerus.

  3. Ginjal hipertensif, jika terjadi cedera vaskuler pada ginjal karena hipertensi sehingga mengganggu pemeliharaan volume dan keseimbangan air serta garam secara keseluruhan.

  4. Sindroma nefrotik, jika glomerulus mengalami cedera yang berat sehingga sejumlah protein (lebih dari 3,5 gram) keluar melalui urin per hari dan umumnya terjadi edema anasarka.

  5. Kelainan spesifik tubulus yaitu kelainan histologik dan fungsional tubulus serta interstisium dalam derajat yang lebih besar dibandingkan glomerulus dan pembuluh darah ginjal sehingga menyebabkan reabsorbsi abnormal atau kurangnya reabsorbsi zat-zat tertentu oleh tubuh sehingga LFG (Laju Filtrasi

PLAGIAT MERUPAKAN TINDAKAN TIDAK TERPUJI

3. Histologis ginjal

  Secara histologis ginjal terdiri dari unsur utama yaitu glomerulus, tubulus dan interstitium, dan pembuluh darah (Kumar, Abbas, and Fausto, 2010). Berikut gambaran kondisi ginjal normal yang dilihat secara mikroskopik (gambar 4):

  

Gambar 4. Gambaran mikroskopik ginjal normal (diwarnai dengan haematoxylin dan

eosin). (A) Korteks ginjal, 1: korpuskuler ginjal; 2: tubulus kontortus proksimal; 3: tubulus

kontortus distal; 4: kapsul Bowman. (B) Medula ginjal, 1: lengkung Henle; 2: jaringan ikat

interstitial (Gunin, 2000)

  Korpuskular ginjal terdiri dari struktur-struktur yang secara mikroskopik terlihat pada gambar 5: