Efek nefroprotektif dekoksi biji persea americana mill. jangka panjang terhadap kadar kreatinin dan gambaran histologis ginjal tikus yang diinduksi karbon tetraklorida - USD Repository

  EFEK NEFROP OPROTEKTIF DEKOKSI BIJI Persea ameri ericana Mill. JANGKA PAN ANJANG TERHADAP KADAR KREATIN

  ININ DAN GAMBARAN H N HISTOLOGIS GINJAL TIKUS YANG DIIN DIINDUKSI KARBON TETRAKLORIDA SKRIPSI

  Dia Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Me Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.)

  Program Studi Farmasi Oleh:

  Yudhytha Anggarhani Quraisyin NIM : 108114116

  FAKULTAS FARMASI U UNIVERSITAS SANATA DHARMA YOGYAKARTA 2013

  

HALAMAN PERSEMBAHAN

“Ia membuat segala sesuatu indah pada waktunya, bahkan Ia memberikan kekekalan dalam hati mereka.” Pengkotbah 3:11

  Karya ini kupersembahan untuk : Tuhan Yesus , atas segala penyertaan dan berkat-Nya yang melimpah Papa, Mama, Rangga, serta keluargaku atas cinta, semangat dan perhatian yang senantiasa diberikan Sahabat-sahabatku yang telah hadir di saat susah dan senang Serta Almamaterku Universitas Sanata Dharma

  

PRAKATA

  Puji syukur ke hadirat Tuhan yang Maha Pengasih, yang berkat rahmat dan penyertaan-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi “Efek Nefroprotektif Dekoksi Biji Persea americana Mill. Jangka Panjang Terhadap Kadar Kreatinin dan Gambaran Histologis Ginjal Tikus yang Diinduksi Karbon Tetraklorida” dengan luar biasa baik. Skripsi ini disusun untuk memenuhi salah satu syarat memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm) program studi Farmasi Universitas Sanata Dharma.

  Penulis menyadari bahwa dalam pembuatan skripsi ini tidak terlepas dari bantuan dan dukungan dari berbagai pihak. Oleh sebab itu, penulis mengucapkan terima kasih kepada :

  1. Ibu Phebe Hendra, M.Si., Ph.D., Apt. selaku Dosen Pembimbing skripsi atas perhatian, kesabaran, bimbingan, masukan dan motivasi kepada penulis dalam proses penyusunan skripsi ini.

  2. Bapak Ipang Djunarko, M.Si., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

  3. Ibu dr. Fenty, M.Kes., Sp.K sebagai dosen penguji yang telah memberikan kritik dan saran yang membangun selama proses pembuatan skripsi.

  4. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si. sebagai dosen penguji yang telah memberikan kritik dan saran yang membangun selama proses pembuatan skripsi.

  5. Ibu Rini Dwiastuti, M.Si., Apt. selaku Kepala Penanggungjawab Laboratorium Fakultas Farmasi yang telah memberikan ijin dalam penggunaan fasilitas laboratorium untuk kepentingan penelitian ini.

  6. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., yang telah menyediakan waktu untuk memberikan bantuan dalam determinasi biji Persea americana.

  7. Pak Kayat, Pak Heru, Pak Parjiman, Pak Wagiran, Pak Parlan, Pak Kunto, dan Pak Bimo selaku laboran laboratorium Fakultas Farmasi yang telah membantu penulis dalam proses pelaksanaan penelitian di laboratorium.

  8. Beasiswa Unggulan Kementrian Pendidikan dan Kebudayaan Republik Indonesia atas kontribusinya dalam membiayai proses perkuliahan dan penelitian ini.

  9. Keluargaku Papa, Mama, Rangga, yang menjadi motivasi terbesar Penulis.

  Terimakasih untuk cinta, perhatian, pengertian, dan semangat yang selalu diberikan kepada Penulis.

  10. Teman-teman seperjuangan dalam tim alpukat Angel, Dara, Ote, Cilla, Ike, Kiting, Diput, Dion, Lydia, Irene, Ita, Komang, Obet, dan Liana, untuk semangat, kerjasama, bantuan, dan informasi yang selalu di bagikan dalam proses penyusunan skripsi ini dari awal hingga akhir.

  11. Robert, terimaksih telah menjadi moodbuster, alarm dan memo yang selalu ada dan memberikan dukungan doa dan semangat selama proses pembuatan skripsi ini.

  12. Teman-teman “Wisma Surya” Mbak Tyas, Mbak Asti, Dita, Nadia, Via, Yoana, Kak Dini atas bantuan, dukungan, semangat, tawa, perhatian dan masukan yang diberikan selama pembuatan skripsi ini.

  13. Evan, Deva, Indra, Echy, terimaksih untuk tawa dan semangatnya selama pengerjaan skripsi ini.

  14. Teman-teman FSM D 2010, FKK B 2010 dan seluruh angkatan 2010 atas kebersamaan kita.

  15. Semua pihak yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu sehingga penulis dapat menyelesaikan tugas akhir ini dengan baik.

  Penulis menyadari bahwa tidak ada manusia yang sempurna. Demikian juga dengan tugas akhir ini yang belum sempurna dan masih banyak kekurangan.

  Karena itu penulis membuka diri untuk menerima kritik dan saran yang membangun dari semua pihak. Akhir kata, penulis berharap semoga tugas akhir ini dapat bermanfaat bagi semua pihak terutama demi kemajuan pengetahuan di bidang Farmasi.

  Yogyakarta, 29 Oktober 2013 Penulis

  

DAFTAR ISI

  HALAMAN JUDUL............................................................................................................ i HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING.................................................................. ii HALAMAN PENGESAHAN.............................................................................................. iii HALAMAN PERSEMBAHAN........................................................................................... iv PERNYATAAN KEASLIAN KARYA.............................................................................. v LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA

  ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS............................................................. vi PRAKATA........................................................................................................................... vii DAFTAR ISI........................................................................................................................ x DAFTAR TABEL................................................................................................................ xiv DAFTAR GAMBAR........................................................................................................... xv DAFTAR LAMPIRAN....................................................................................................... xvi

  INTISARI............................................................................................................................ xvii

  

ABSTRACT .......................................................................................................................... xviii

BAB I. PENGANTAR........................................................................................................

  1 A. Latar Belakang................................................................................................................

  1 1. Perumusan Masalah..................................................................................................

  4 2. Keaslian Penelitian...................................................................................................

  5 3. Manfaat Penelitian....................................................................................................

  5 B. Tujuan Penelitian.............................................................................................................

  6

  BAB II. PENELAAHAN PUSTAKA.................................................................................

  7 A. Anatomi dan Fisiologi Ginjal......................................................................................

  7 B. Persea americana Mill....................................................................................................

  18 1. Taksonomi................................................................................................................

  18 2. Sinonim....................................................................................................................

  18 3. Nama daerah.............................................................................................................

  18 4. Morfologi.................................................................................................................

  19 5. Kandungan ........................................................................................................

  19 6. Khasiat dan Kegunaan..............................................................................................

  20 C. Karbon tetraklorida................................................................................................

  21 D. Dekoksi.........................................................................................................................

  25 E. Keterangan Empiris......................................................................................................

  26 BAB III. METODE PENELITIAN.....................................................................................

  27 A. Jenis dan Rancangan Penelitian....................................................................................

  27 B. Variabel dan Definisi Operasional................................................................................

  27 1. Variabel utama.........................................................................................................

  27 2. Variabel pengacau....................................................................................................

  27 3. Definisi Operasional.................................................................................................

  28 C. Bahan Penelitian...........................................................................................................

  29 1. Bahan utama.............................................................................................................

  29 2. Bahan kimia..............................................................................................................

  29 D. Alat dan Instrumen Penelitian.......................................................................................

  30

  1. Alat pembuatan dekoksi Persea americana Mill................................................

  30 2. Alat uji nefroprotektif...............................................................................................

  30 E. Tata Cara Penelitian....................................................................................................

  30 1. Pengumpulan Bahan.........................................................................................

  30 2. Determinasi tanaman Persea americana Mill ....................................................

  31 3. Penetapan kadar air serbuk Persea americana Mill ..........................................

  31 4. Pembuatan dekoksi biji Persea americana Mill .............................................

  32 5. Penetapan dosis dekoksi biji Persea americana Mill .......................................

  32 6. Pembuatan larutan karbon tetraklorida..................................................................

  33 7. Uji Pendahuluan.....................................................................................................

  33 a. Penetapan dosis nefrotoksin karbon tetraklorida..............................................

  33 b. Penetapan waktu pencuplikan darah.............................................................

  33 8. Pengelompokan dan perlakuan hewan uji...........................................................

  34 9. Pembuatan preparat histologis...............................................................................

  35 10. Pembuatan Serum..................................................................................................

  35 11. Penetapan kadar serum kontrol dan serum kreatinin.........................................

  35 F. Tata Cara Analisis Hasil..................................................................................................

  36 BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN............................................................................

  37 A. Penyiapan Bahan ..........................................................................................................

  37 1. Hasil Determinasi Tanaman...................................................................................

  37 2. Penetapan Kadar Air serbuk biji Persea americana Mill...............................

  37 B. Uji Pendahuluan......................................................................................................

  38

  1. Penentuan dosis nefrotoksik karbon tetraklorida.................................................

  38 2. Penentuan waktu pencuplikan darah......................................................................

  39 3. Penetapan lama pemejanan dekoksi biji Persea americana Mill .......................

  41 4. Penetapan dosis dekoksi biji Persea americana Mill .........................................

  41 C. Hasil Uji Efek Nefroprotektif Dekoksi Biji Persea americana Mill .........................

  42 1. Kontrol negatif olive oil dosis 2ml/kgBB .............................................................

  45 2. Kontrol nefrotoksin karbon tetraklorida dosis 2ml/kgBB.....................................

  48 3. Kontrol dekoksi biji Persea americana Mill .......................................................

  51

  4. Kelompok perlakuan dekoksi Persea americana Mill dosis 360,71 mg/kgBB, 640,06 mg/kgBB, dan 1142,86 mg/kgBB pada tikus jantan galur Wistar terinduksi karbon tetraklorida 2ml/kgBB............................................................

  52 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN..............................................................................

  60 A. Kesimpulan...................................................................................................................

  60 B. Saran..............................................................................................................................

  60 DAFTAR PUSTAKA..........................................................................................................

  62 LAMPIRAN.........................................................................................................................

  68 BIOGRAFI PENULIS.........................................................................................................

  90

  

DAFTAR TABEL

  Tabel I. Kelas gagal ginjal kronis menurut

  National Kidney Foundation ..........................................................................

  14 Tabel II. Rata-rata kadar serum kreatinin tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, 48, dan 72 jam, n=4............................................................

  39 Tabel III. Hasil uji Pairwise Comparisons aktivitas serum kreatinin tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, 48, dan 72 jam..................................

  40 Tabel IV. Purata ± SD serum kreatinin praperlakuan dekoksi biji Persea

  americana Mill. Pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida, n=5...................................................................

  42 Tabel V Hasil uji Scheffe serum kreatinin praperlakuan dekoksi biji

  Persea americana Mill. Pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida..........................................................................

  44 Tabel VI Hasil pemeriksaan histologis ginjal pada keenam kelompok perlakuan..................................................................................

  45 Tabel VII Rata-rata serum kreatinin tikus setelah pemberian olive oil dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0 dan 48 jam, n=5........

  46 Tabel VIII Hasil penetapan kadar air serbuk biji Persea americana Mill.....................................................................................

  86 Tabel IX Hasil validitas dan realibilitas serum kontrol (range 1,09-1,71 U/l)......................................................................................

  87

  

DAFTAR GAMBAR

Gambar 1. Anatomi ginjal..........................................................................

  8 Gambar 2. Bagian nefron ginjal..................................................................

  9 Gambar 3. Gambaran mikroskopis ginjal normal........................................

  9 Gambar 4. Struktur kimia karbon tetraklorida.............................................

  21 Gambar 5. Mekanisme peroksidasi lipid......................................................

  24 Gambar 6. Diagram batang rata-rata aktivitas serum kreatinin tikus setelah pemberian karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB pada selang waktu 0, 24, 48, dan 72 jam..................................

  40 Gambar 7. Diagram batang purata serum kreatinin praperlakuan dekoksi biji Persea americana Mill. pada tikus yang terinduksi karbon tetraklorida...............................................................

  43 Gambar 8. Diagram batang rata-rata serum kreatinin tikus setelah pemberian olive oil dosis 2 mL/kgBB pada selang waktu 0 dan 48 jam............................................................................

  46 Gambar 9. Gambaran histologi ginjal tikus kontrol olive oil dosis 2 mL/kgBB berupa DHET...........................................................

  47 Gambar 10. Gambaran histologi ginjal kontrol olive oil dosis 2 mL/kgBB berupa ITC................................................................................

  47 Gambar 11. Histologi ginjal tikus kontrol karbon tetraklorida dosis 2ml/kgBB.................................................................................

  50 Gambar 12. Gambaran histologis ginjal tikus perlakuan Dosis 360,71 mg/kgBB tikus 1.......................................................................

  54 Gambar 13. Gambaran histologis ginjal tikus perlakuan Dosis 360,71 mg/kgBB tikus 1 berupa radang pelvis renal (RPR)..............

  54 Gambar 14. Gambaran histopatologi tikus perlakuan dekoksi biji Persea

  americana Mill. Dosis 642,06 mg/kgBB berupa dilatasi lumen tubulus.....................................................................................

  56

  

DAFTAR LAMPIRAN

Lampiran 1. Foto serbuk biji Persea americana Mill................................

  69 Lampiran 2. Foto pembuatan dekoksi biji Persea americana Mill............

  69 Lampiran 3. Foto larutan ekstrak etanol biji P.americana.......................

  69 Lampiran 4. Surat pengesahan determinasi serbuk biji Persea americana Mill.................................................................

  70 Lampiran 5. Hasil Determinasi Serbuk Biji Persea americana Mill......

  71 Lampiran 6. Surat pengesahan Medical and Health Research Ethics Committee (MHREC)...........................................................

  74 Lampiran 7. Analisis statistik kadar serum kreatinin pada uji pendahuluan penentuan dosis nefrotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB............................................

  75 Lampiran 8. Analisis statistik kadar serum kreatinin pada kontrol nefrotoksin karbon tetraklorida dosis 2 ml/kgBB..................

  77 Lampiran 9. Analisis statistik kadar serum kreatinin pada kontrol negatif olive oil dosis 2 ml/kgBB.....................................................

  79 Lampiran 10. Analisis statistik kadar serum kreatinin pada kontrol dekoksi dan perlakuan dosis 360,71; 642,06; 1142,86 mg/kgBB..........................................................................

  80 Lampiran 11. Perhitungan efek nefroprotektif (%)......................................

  83 Lampiran 12. Perhitungan penetapan peringkat dekoksi biji Persea Mill. kelompok perlakuan................................

  84

  americana Lampiran 13. Perhitungan konversi dosis untuk manusia..........................

  85 Lampiran 14. Penetapan kadar air biji Persea americana Mil...................

  86 Lampiran 15. Pengukuran validitas dan realibilitas.....................................

  87 Lampiran 16. Surat pengesahan hasil pemeriksaan histologis.....................

  89

  INTISARI

  Penelitian ini bertujuan untuk membuktikan adanya efek nefroprotektif pada pemberian jangka panjang dekoksi biji Persea americana Mill. teramati pada penurunan kadar kreatinin serum dan melihat gambaran histologis tikus terinduksi karbon tetraklorida.

  Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola searah. Penelitian ini menggunakan tikus jantan galur Wistar berusia 2-3 bulan, dengan berat badan 150-250 g. Penelitian dilakukan dengan membagi 30 ekor tikus jantan galur Wistar secara acak menjadi enam kelompok perlakuan. Kelompok I, yaitu kontrol nefrotoksin yang diberi karbon tetraklorida dalam olive oil (1:1) 2 ml/kgBB secara intraperitonial . Kelompok II (kontrol negatif) diberi olive oil dengan dosis 2 ml/kgBB. kelompok

  III (kontrol dekoksi) diberi dekoksi biji Persea americana Mill. dosis 1142,86 mg/kgBB kelompok IV-VI (kelompok perlakuan) diberi dekoksi biji Persea

  

americana Mill. dengan tiga peringkat dosis berturut-turut 360,71; 642,06;

  1142,86 mg/kgBB. Pemberian dekoksi biji Persea americana Mill. dilakukan secara per oral, sekali sehari selama enam hari berturut-turut kemudian pada hari yang ketujuh semua tikus pada kelompok perlakuan diberi karbon tetraklorida dosis 2ml/kgBB secara intraperitonial. Empat puluh delapan jam setelah diberikan karbon tetraklorida, darah diambil melalui sinus orbitalis mata tikus untuk diukur kadar kreatinin serumnya dan dianalisis dengan one-way ANOVA dan uji Scheffe. Lalu tikus dikorbankan untuk diambil ginjalnya, dicuci pada larutan larutan saline (NaCl 0,9%) dan diawetkan dengan direndam dalam formalin 10% untuk dibuat preparat histologis lalu diamati penampakan mikroskopiknya.

  Berdasarkan hasil penelitian, dekoksi biji Persea americana Mill.memberikan efek nefroprotektif pada tikus terinduksi karbon tetraklorida pada dosis 360,71; 642,06; dan 1142,86 mg/kgBB dengan efek nefroprotektif berturut-turut 100; 90,5; dan 52,4%. Dosis efektif nefroprotektif dekoksi biji

  

Persea americana Mill. adalah 360,71 mg/kgBB. Belum diketahui pengaruh

  pemberian dekoksi biji Persea americana Mill. pada tikus jantan galur Wistar yang diinduksi karbon tetraklorida hingga tingkat seluler organ ginjal.

  

Kata kunci : Persea americana Mill., nefroprotektif, dekoksi, karbon

tetraklorida, kreatinin, histologi

  

ABSTRACT

  The aim of this research to estabish nephroprotective effect of dekoksi

  

Persea americana Mill. seed by reducing creatinine serum level and histologic

review in rats induced by carbon tetrachloride and get the effective dose.

  This research was an experimental research with direct sampling design. This research used Wistar male rats, age 2-3 months, and weight ± 150-250 g. The rats were divided into six treatment groups randomly. The first group (negative control) was given olive oil 2 ml/kgBW. Then, the second group (nephrotoxin control) was givencarbon tetrachloride 2 ml/kgBW i.p. Third group (extract control) was given dekoksi dekoksi Persea americana Mill.seed 1142,86 mg/kgBW.The fourth until sixth group (treatment) were given dekoksi Persea

  

americana Mill.seed dose 360,71; 642,06; and 1142,86 mg/kgBW orally once a

  days for six days successively and then in the seventh day all of the treatments group were given carbon tetrachloride 2 ml/kgBW by i.p. Fourty eight hours later, blood was collected from the orbital sinus eye to be measured creatinine serum level and examined the histological properties of kidney. It was analyzed statistically with One Way Anova and Scheffe test.

  Based of the result of the research, dekoksi Persea americana Mill.seed gave nephroprotective effects by reducing creatinine serum level. Nephroprotective effect with dose of 360,71; 642,06; and 1142,86 mg/kgBW successively were 100%; 90,476%, and 52,381%. The effective dose of dekoksi

  

Persea americana Mill. seed was 360,71 mg/kgBW. We cannot say that using of

  dekoksi biji Persea americana Mill. can protect tke kidney until it’structural phase.

  

Keywords : Persea americana Mill. seed, nephroprotective, carbon

tetrachloride, creatinine, histologic, dekoksi

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Ginjal merupakan salah satu organ yang vital bagi manusia terkait

  fungsi utamanya sebagai organ ekskresi. Selain sebagai organ yang berperan dalam ekresi zat-zat yang beracun dari darah dalam bentuk urine, ginjal juga berfungsi untuk mengatur keseimbangan jumlah air dan garam dalam darah, keseimbangan pH tubuh, mengatur tekanan darah dan sebagai tempat pengolahan vitamin D (Pearce, 2009). Terdapat beberapa gangguan fungsi ginjal, yaitu gagal ginjal akut dan gagal ginjal kronis. Klasifikasi tersebut didasarkan pada kecepatan perkembangan penyakit, gejala yang muncul, dan sifat kerusakan yang ditimbulkan. Ada yang bersifat reversible ada pula yang irreversible (William James House, 2005).

  Gagal ginjal merupakan penyakit degeneratif yang akhir-akhir ini menjadi “trend”, tidak hanya di negara berkembang, tetapi juga di negara maju.

  Menurut NIDDK (2012), prevalensi terbesar gagal ginjal menyerang orang dengan usia 60 tahun ke atas. Dibandingkan dengan jumlah penderita gagal ginjal di tahun 1988-1994, jumlah penderita gagal ginjal yang berusia diatas 60 tahun pada tahun 2003-2006 mengalami lonjakan signifikan dari 18,8% menjadi 24,5%.

  Namun, prevalensi gagal ginjal ini tiga kali lebih banyak pada penduduk Afrika dan Amerika dibanding dengan Kaukasian. Prevalensi gagal ginjal di Asia lebih tinggi dibandingkan Kaukasian, tetapi tidak setinggi Amerika Indian ataupun

  2

  Afrika Amerika. Penderita end stage renal disfunction (ESRD) antara tahun 1990- 2009 meningkat hampir 600%, dari 290 menjadi 1.738 kasus per tahun, dan pada akhir tahun 2009 lebih dari 871.000 penderita ESRD menjalani terapi (NIDDK, 2012). Pada tahun 2007, di Amerika 110.000 penderita ESRD telah menjalani terapi. Penyebab utama dari ESRD di Amerika yaitu diabetes dan hipertensi (CDC, 2010). Jumlah penderita gagal ginjal di Indonesia belum diketahui secara akurat. Berdasarkan data InaSN pada tahun 2002-2004 jumlah penderita ESRD di Indonesia paling banyak berada di Jawa dan Bali (Prodjosujadi, 2006). Rendahnya pendapatan masyarakat menyebabkan hanya 10.000 pasien yang menjalani hemodialisis dari sekitar 150.000 penderita ESRD di Indonesia ( YDGI, 2009).

  Untuk mengatasi minimnya terapi pada penderita gagal ginjal, dapat digunakan obat tradisional sebagai pilihan terapi. Indonesia merupakan negara dengan mega center kedua di dunia diklaim mempunyai 30.00 jenis tumbuhan yang 7.000 di antaranya merupakan tanaman obat. Namun, penggunaan obat dari bahan alam yang terstandarisasi masih tergolong minim. Oleh karena itu perlu dilakukan pengembangan pemanfaatan lebih lanjut bahan alam yang ada dengan cara eksplorasi bahan alam dengan menguji aktivitasnya melalui sediaan yang terstandar. Dewasa ini, penggunaan obat dari herbal cenderung terus meningkat karena digunakan secara luas di seluruh dunia, dan dari segi ekonomi mempunyai harga yang lebih terjangkau (Sampurno, 2003). Salah satu strategi WHO (2002) untuk mengembangkan obat tradisional yaitu dengan meningkatkan keamanan, khasiat, dan mutu obat serta mempromosikan penggunannya oleh tenaga

  3

  kesehatan profesional. Oleh karena itu penting untuk terus mengembangkan obat herbal di Indonesia dengan penelitian berbasis ilmiah sehingga dapat diintegrasikan secara tepat dalam sistem kesehatan nasional (Sampurno, 2003).

  Persea americana Mill. (alpukat) merupakan tanaman yang tersebar

  secara merata di Indonesia (Rukmana, 1997). Ekstrak air dari biji Persea

  

americana Mill. ini banyak digunakan untuk terapi sejumlah penyakit degeneratif

  seperti diabetes, hiperkolesterolemia, dan hipertensi di Nigeria (Imafidon dan Okunrobo, 2009). Kemampuan ini didasarkan pada kandungannya akan sejumlah senyawa antioksidan, seperti saponin yang mempunyai efek sebagai diuretik (Nwaoguikpe dan Braide, 2011).

  Karbon tetraklorida sebagai senyawa model yang digunakan untuk memicu terjadinya stres oksidatif pada hewan uji. Karbon tetraklorida nantinya akan dimetabolisme oleh sitokrom P450 menjadi radikal bebas triklorometil (•CCl3) (Basu, 2003) dan triklorometilperoksida (•OOCCl3) yang lebih reaktif (US Enviromental Protection Agency, 2010). Triklorometil peroksi dapat menyerang poli asam lemak tidak jenuh pada membran sel sehingga membentuk

  

Reactive Oxygen Species (ROS) yang akhirnya menyebabkan nekrosis sel

  (Recknagel, Glende , Dolak, Waller, 1989). Perlakuan dengan karbon tetraklorida pada ginjal akan menginduksi peningkatan serum asam urat, urea, dan kreatinin secara signifikan setelah 72 jam pemejanan (Olagunju, Adeneyeb, Fagbohunkac, Bisugac, Ketikuc, Benebod, 2009).

  Penelitian mengenai daun dan buah Persea americana telah banyak dilakukan. Namun, penelitian mengenai biji Persea americana masih sangat

  4

  jarang dilakukan. Selama ini biji Persea americana hanya dibuang saja dan tidak memiliki manfaat sama sekali. Penelitian tentang biji Persea americana yang telah ada pun masih terbatas pada aktivitasnya terhadap profil lemak, kadar gula, dan tekanan darah. Belum ada penelitian tentang aktivitas biji Persea americana sebagai nefroprotektif. Padahal banyak penderita gagal ginjal di Indonesia yang belum menjalani terapi gagal ginjal karena tingginya biaya. Berdasarkan hal tersebut perlu dilakukan penelitian untuk membuktikan kemampuan nefroprotektif dekoksi biji Persea americana Mill. pada tikus terinduksi karbon tetraklorida, sehingga dapat digunakan sebagai alternatif terapi gagal ginjal, mengingat kandungan biji Persea americana Mill. akan sejumlah senyawa antioksidan. Dipilih dekoksi pada penelitian ini karena dekoksi merupakan cara yang paling sering digunakan oleh masyarakat dalam konsumsi obat tradisional.

  Sehingga diharapkan dapat diketahui efeknya sesuai dengan yang digunakan pada masyarakat luas.

1. Perumusan masalah

  a. Apakah pemberian dekoksi biji Persea americana Mill. dalam jangka panjang memberikan efek nefroprotektif dengan mencegah peningkatan kadar kreatinin pada tikus jantan galur Wistar yang diinduksi karbon tetraklorida? b. Apakah pemberian dekoksi biji Persea americana Mill. dalam jangka panjang mempengaruhi gambaran histologis ginjal tikus jantan galur Wistar yang diinduksi karbon tetraklorida?

  5

  c. Berapa besar dosis efektif nefroprotektif dekoksi biji Persea americana Mill. pada tikus jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida?

  2. Keaslian penelitian

  Terdapat sejumlah penelitian yang telah menggunakan ekstrak air biji alpukat. Alhassan, Sule, Atiku, Wudil, Abubakar, Mohammed (2012) menggunakan ekstrak air biji Persea americana sebagai antidiabetik pada tikus yang diinduksi aloksan. Hampir sama dengan penelitian tersebut, Anggraeni (2006) telah menguji aktivitas infusa biji Persea americana terhadap glukosa darah tikus Wistar yang diberi beban glukosa. Efek biji Persea americana pada tekanan darah dan profil lemak tikus hipertensi telah dilakukan oleh Imafidon dan Amaechina (2010). Ogochukwu, Raymond, dan Stephen juga melakukan penelitian serupa untuk melihat efek biji Persea americana pada tekanan darah tikus Sprague-Dawley. Sedangkan Nwaogikpe dan Braide (2012), melihat aktivitas biji Persea americana pada serum kolesterol di kelinci. Imafidon dan Okunrobo (2009) juga melakukan evaluasi biokimia penggunaan biji Persea

  americana sebagai obat tradisional. Sejauh penelusuran yang dilakukan oleh

  peneliti belum ada penelitian mengenai efek nefroprotektif jangka panjang biji

  Persea americana Mill. terhadap ginjal tikus jantan galur Wistar yang diinduksi karbon tetraklorida.

  3. Manfaat penelitian

  a. Manfaat teoritis Penelitian ini diharapkan memberikan manfaat bagi pengembangan ilmu pengetahuan, khususnya ilmu kefarmasian, mengenai

  6

  pemberian dekoksi biji Persea americana Mill. yang memiliki efek nefroprotektif jangka panjang.

  b. Manfaat Praktis Penelitian ini diharapkan dapat memberikan informasi kepada masyarakat mengenai dosis biji Persea americana Mill. yang memiliki efek nefroprotektif jangka panjang.

B. Tujuan Penelitian

  1. Tujuan Umum Mengetahui pengaruh pemberian dekoksi biji Persea americana Mill.

  terhadap ginjal tikus jantan galur Wistar.

  2. Tujuan Khusus

  a. Mengetahui pengaruh pemberian dekoksi biji Persea americana Mill. dalam jangka panjang terhadap kadar serum kreatinin tikus jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida.

  b. Mengetahui pengaruh pemberian dekoksi biji Persea americana Mill. dalam jangka panjang terhadap gambaran histologis ginjal tikus jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida.

  c. Mengetahui dosis efektif nefroprotektif dekoksi biji Persea americana Mill. pada tikus jantan galur Wistar yang terinduksi karbon tetraklorida.

BAB II PENALAAHAN PUSTAKA A. Anatomi dan Fisiologi Ginjal Ginjal (ren, nephros) merupakan bagian penting dari tractus urinaria

  yang terletak di dalam ruang retroperitonium pada dinding posterior abdomen, di kedua sisi columna vertebralis, dan di depan musculus psoas major. Ginjal kanan dan kiri berbentuk seperti kacang dengan skeleton thoracis sebagai pelindung pada bagian atasnya (Paryana dan Wibowo, 2007). Ukuran ginjal bervariasi, dengan panjang antara 6 sampai 7,5 sentimeter dan tebal 1,5 sampai 2,5 sentimeter dengan berat mencapai 140 gram pada orang dewasa. Ginjal bagian kanan jauh lebih pendek dan tebal dibandingkan ginjal bagian kiri. Selain itu, posisi ginjal bagian kanan jauh lebih rendah daripada ginjal bagian kiri karena adanya hepar yang memenuhi bagian kanan (Pearce, 2009).

  Ginjal mempunyai facies anterior, facies posterior, margo medialis,

  

margo lateralis, serta polus superior, dan polus inferior. Margo medialis

  berbentuk cekung pada daerah yang disebut hilum renale (gambar 1), sedangkan

  

margo lateralis berbentuk cembung. Hilum renale pada bagian margo medialis

  merupakan tempat masuk dan keluarnya ureter dan pembuluh darah. Selain itu, pada hilum renale juga terdapat celah yang masuk ke dalam ginjal dengan kedalaman kurang lebih dua setengah sentimeter yang disebut dengan sinus

  

renalis (gambar 1). Pada sinus renalis ini terdapat pelvis renalis, calices,

  8

  pembuluh darah, serabut saraf, serta sedikit jaringan adiposa (Paryana dan Wibowo, 2009).

  Gambar 1. Anatomi ginjal (Paryana dan Wibowo, 2009).

  Ukuran ginjal pada makhluk hidup ditentukan oleh jumlah nefron yang dimiliki. Nefron adalah unit dari setiap glomerus dan tubulus ginjal. Tubuh manusia tersusun dari 1,3 juta nefron. Nefron sendiri terdiri dari ujung tertutup yang melekuk membentuk cangkir (kapsul glomerolus) dan ujung lain yang tersambung ke tubulus kolektivus. Di bawah kapsul glomerolus masih terdapat sisa nefron yang terdiri atas tubulus kontortus proksimal, lengkung Henle, dan tubulus kontortus distal yang terhubung ke duktus kolektivus (gambar 2) (Angriani dan Nurachmah, 2011). Sel-sel tubulus dan vaskular pada lengkung Henle mengalami spesialisasi dan membentuk aparatus jukstaglomerolus, yang terletak di samping glomerolus (Sherwood, 2009).

  9 Gambar 2. Bagian nefron ginjal (Sheerwood, 2009) Gambar 3. Gambaran mikrskopis ginjal normal (Mills, 2007)

  10

  Fungsi glomerolus pada pembentukan urine dengan memfiltrasi urine sehingga bebas dari protein plasma. Selanjutnya urine akan menuju tubulus kontortus proksimal dan akan terjadi proses reabsorbsi substansi yang penting bagi tubuh seperti glukosa, asam amino, laktat, vitamin yang larut air, dan

  elektrolit (Na , K , Cl , dan HCO ). Setelah itu, urine akan menuju lengkung

3 Henle yang berperan dalam mengatur konsentrasi urine. Terakhir, urine akan

  menuju tubulus kontortus distal dan tubulus kolektivus berfungsi untuk mereabsorpsi natrium serta sekresi dan eliminasi kalium dari urine (Matfin dan Porth, 2009).

  Ginjal menerima suplai darah dari arteri renalis yang bercabang banyak dan membentuk banyak pembuluh halus yang disebut dengan arteriol aferen.

  Dimana masing-masing dari arteriol aferen ini akan menyuplai darah di setiap nefron. Darah yang tidak terfiltrasi akan meninggalkan glomerolus menuju ke komponen tubular melalui arteriol eferen, yang merupakan gabungan dari kapiler- kapiler glomerolus. Selanjutnya arteriol eferen akan bercabang-cabang membentuk kapiler lain yang dikenal dengan kapiler peritubulus. Fungsinya untuk menyuplai darah ke cairan ginjal dan mempunyai peran penting pada proses perubahan filtrat menjadi urine. Kapiler peritubulus akan menyatu dan membentuk venula yang akan mengalirkan darah kotor dari ginjal melalui vena renalis (Sherwood, 2009).

  Terdapat saraf simpatik dan parasimpatik pada pembuluh darah ginjal yang menyebabkan ginjal dapat melakukan autoregulasi dengan bebas.

  Autoregulasi merupakan suatu mekanisme pada ginjal dengan mempertahankan

  11

  aliran darah pada ginjal pada tekanan konstan dalam rentang tekanan darah sistolik (80-200 mmHg). Kedua saraf otonom tersebut menjalankan fungsinya dengan cara mengendalikan diameter pembuluh darah ginjal sehingga aliran darah pada ginjal tetap dapat terjaga pada rentang yang telah ditentukan (Angriani dan Nurachmah, 2011).

  Sebagai organ vital di dalam tubuh manusia, ginjal mempunyai beberapa fungsi penting, antara lain :

  1. Regulasi ion plasma

  Ginjal menjalankan fungsi ini dengan meningkatkan atau menurunkan ekskresi ion-ion spesifik di dalam urine dengan mengatur konsentrasi ion-ion tersebut di dalam plasma. Ion yang konsentrasinya diatur oleh ginjal seperti

• 2+ 2+

  natrium (Na ), potassium (K ), kalsium (Ca ), Magnesium (Mg ), klorida

• 3- - 2-

  (Cl ), bikarbonat (HCO ), dan fosfat (HPO

  4 dan H

  2 PO 4 ).

  2. Regulasi volume plasma

  Ginjal meregulasi volume plasma dengan mengontrol kecepatan ekskresi air pada urine yang mempunyai efek secara langsung ke volume dan tekanan darah.

  3. Regulasi konsentrasi ion hidrogen di plasma (pH)

  Bersama dengan paru-paru, ginjal mengatur pH darah dengan mengatur konsentrasi ion bikarbonat dan hidrogen di dalam plasma.

  12

  4. Regulasi osmolaritas plasma

  Ginjal dapat mengatur osmolaritas (konsentrasi solut) dalam plasma karena kecepatan ginjal dalam mengekresikan air terhadap solut relatif bervariasi.

  5. Pembuangan produk sisa metabolisme dan substansi lain dari plasma

  Ginjal membersihkan plasma dari produk sisa dan mengeluarkannya dari tubuh dengan mengeksresikan kotoran dan substansi lain yang tidak berguna seperti urea dan asam urat, food additive, pestisida, atau obat yang masuk dari luar tubuh melalui urine.

  6. Fungsi sekunder

  Selain fungsinya sebagai regulator air dan ion, ginjal juga berperan sebagai organ endokrin karena daapt memproduksi hormon erythroprotein (menstimulasi produksi eritrosit di sumsum tulang belakang), renin (untuk produksi angiotensin II yang mengatur tekanan darah).

  Selain itu ginjal juga berfungsi untuk mengaktivasi vitamin D yang

  3

  berfungsi untuk mengatur kadar kalsium dan fosfat di dalam darah. Ginjal juga berfungsi untuk menyediakan suplai glukosa bagi plasma dari hasil glukoneogenesis yang mengubah giserol dan asam amino menjadi glukosa.

  (Stanfield, 2005). Terdapat beberapa macam kerusakan ginjal, antara lain :

  1. Gagal ginjal akut

  Gagal ginjal akut adalah jenis gangguan pada ginjal yang terjadi secara cepat dan mendadak (tiba-tiba). Gangguan ini dapat disebabkan karena

  13

  adanya trauma pada ginjal, kehilangan darah dalam jumlah besar, adanya racun dan obat-obatan yang merusak ginjal. Kondisi tersebut dapat menyebabkan gangguan fungsi ginjal secara permanen (William James House, 2005).

  Obat-obatan yang dapat menyebabkan gangguan ginjal antara lain Angiotensin-converting enzyme (ACE) Inhibitor, aminoglikosida, dan NSAIDs.

  Zat seperti karbon tetraklorida dan logam berat seperti merkuri juga dapat menyebabkan gangguan fungsi ginjal. Gagal ginjal akut ditandai dengan penurunan nilai Glomerular Filtration Rate (GFR), akumulasi buangan nitrogen di dalam darah (azotemia), dan perubahan cairan tubuh dan elektrolit.

  Terdapat tiga macam gagal ginjal akut, yaitu prerenal, intrarenal, dan postrenal. Prerenal disebabkan adanya penurunan aliran darah ke ginjal, intrarenal disebabkan adanya gangguan pada ginjal itu sendiri. Sedangkan postrenal disebabkan adanya obstruksi output urine (Matfin dan Porth, 2009).

2. Gagal ginjal kronis

  Gangguan tipe ini adalah gangguan yang menyebabkan kegagalan fungsi pada ginjal secara bertahap. Terjadi secara perlahan dan terkadang tidak ada gejala yang nampak dalam jangka waktu yang lama. Orang dengan gagal ginjal kronis lebih beresiko terkena serangan jantung dan stroke. Sebagian besar penyakit ginjal berupa penyakit ginjal kronis (William James House, 2005).

  Gagal ginjal kronis dapat terjadi sebagai hasil dari penyakit diabetes, hipertensi, glomerulonefritis, dan gangguan ginjal lain. Terdapat lima kelas

  14

  gagal ginjal kronis menurut National Kidney Foundation dapat dilihat pada Tabel I.

  

Tabel I. Kelas gagal ginjal kronis menurut National Kidney Foundation

  Matfin dan Porth, 2009 Glomerular

  Stage Deskripsi Filtration Rate

  2

  (mL/menit/1,73 m )

  1 Gangguan ginjal dengan nilai GFR ≥90 normal atau meningkat

  2 Gangguan ginjal dengan nilai GFR 60-89 menurun ringan

  3 Penurunan nilai GFR sedang 30-59

  4 Penurunan nilai GFR parah 15-29

  5 Gagal ginjal <15 Pada penderita gagal ginjal kronis dapat terjadi kondisi dimana ginjal seseorang dapat sudah hampir tidak bisa atau sudah tidak bisa melakukan fungsinya secara normal sebagai organ eksresi yang disebut sebagai end-stage

  

renal failure. Terapi yang dapat dilakukan terhadap penderita dengan kondisi

  ini adalah dengan dialisis atau transplantasi ginjal (William James House, 2005).