Karakterisasi dan Isolasi Senyawa Triterpenoid Steroid dari Daun Nipah (Nypa fruticansWurmb.)

Lampiran 1.Hasil identifikasi tumbuhan nipah (Nypa fruticans Wurmb.)

48
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 2. Gambar tumbuhan nipah

Tumbuhan nipah

49
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3. Gambar daun nipah segar

Daun nipah segar

Simplisia daun nipah

50
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3 (Lanjutan) Gambar serbuk simplisia daun nipah

Serbuk simplisia daun nipah

51
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 3 (Lanjutan) Gambar mikroskopik serbuk simplisia daun nipah

2

1

3
Mikroskopi serbuk simplisia daun nipah
Keterangan:
1. Berkas pembuluh bentuk spiral
2. Stomata tipe parasitik
3. Minyak atsiri

52
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4. Bagan Kerja penelelitian

1.

Pembuatan simplisia daun nipah, karakterisasi, dan skrining

Daun nipah
Dibersihkan
dari
kotoran
menggunakan kain basah
Dikeringkan
pengering

didalam

lemari

Ditimbang
Simplisia
Diserbuk / dihaluskan
Ditimbang
Serbuk simplisia

Skrining Fitokimia untuk pemeriksaan :
a.
b.
c.
d.
e.
f.
g

Karakterisasi simplisia :
a.
b.
c.

d.
e.

Alkaloida
Flavonoida
Glikosida
Antrakinon glikosida
Saponin
Tanin
Triterpenoid/steroid

Penetapan kadar air
Penetapan kadar sari larut air
Penetapan kadar sari larut etanol
Penetapan kadar abu total
Penetapan kadar abu tidak larut
asam

53
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4 (Lanjutan)

2.

Pembuatan ekstrak n-heksan daun nipah
Serbuk simplisia
Dimaserasi dengan pelarut n-heksana
dalam wadah gelap sampai terendam
selama 2 hari sambil sesekali diaduk
Disaring

Ampas

Maserat I
Dimaserasi dengan n-heksana
dan dibiarkan selama 2 hari
Disaring

Maserat II

Ampas
Dimaserasi dengan n-heksana
dan dibiarkan selama 2 hari
Disaring

Maserat III

Ampas

Dikumpulkan
Diuapkan dengan
rotary evaporator
dengan suhu ± 40ºC

Ekstrak n-heksana

54
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 4 (lanjutan)

3.

Bagan isolasi senyawa triterpenoid/steroid dari ekstrak n-heksana daun nipah

Ekstrak n-heksana

Di KLT preparatif, fase
gerak = n-heksana :
etilasetat(70:30),fase diam
= silikagel 60 F254,
penampak bercak LB

Di KLT, fase gerak = nheksana : etilasetat pada
berbagai perbandingan, fase
diam = silika gel GF254,
penampak bercak LB
5 Noda

Kromatogram

Masing-masing dikerok

Noda 5
(hijau)

Noda 4
(hijau)

Noda 3
(ungu)

Noda 5
(hijau)

Noda 1
(merah ungu)

Dielusi dengan

pelarutmetanol
Isolat

Isolat
Diuji kemurnian
dengan KLT
satu arah dan
dua arah
Isolat murni

Isolat murni
Dikarakterisasi dengan
spektrofotometri UV
dan IR

Spektrum

Spektrum

55

Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5.Perhitungan hasil karakterisasi serbuk simplisia daun nipah

I. Perhitungan penetapan kadar air simplisia
No

Berat sampel (gram)

Volume air (ml)

1

5,0120 g

0,20 ml

2

5,0230 g

0,25 ml

3

5,0160 g

0,30 ml

% Kadar air=

volume air (ml)

% Kadar air

0,20 ml
x100% = 3,93%
=
5,0120 g

% Kadar air

0,25ml
=
x 100 % = 4,98%
5,0230g

% Kadar air

0,30 ml
=
x 100 % = 5,98 %
5,0160 g

% Kadar air rata-rata =

x 100 %

berat sampel (gram)

3,93 % + 4,98 % + 5,98 %
3

= 4,98 %

56
Universitas Sumatera Utara

Lampran 5 (lanjutan)

II. Perhitungan penetapan kadar sari yang larut dalam air
No

Berat sampel
(gram)

Berat sari air (gram)

1

5,0740

0,215

2

5,0400

0,220

3

5,0260

0,241

% kadar sari yang larut dalam air =

Kadar sari larut dalam air

=

Kadar sari larut dalam air

=

Kadar sari larut dalam air

=

berat sari air 100
berat sampel

0,215 g 100
5,074g

x

0,220 g

20

x

100
20

0,241 g

100

5,0260 g

% Kadar sari larut dalam air rata-rata=

20

x 100 %

x 100 % = 21,18 %

5,0400 g

x

x

20

x 100 % = 21,82 %
x 100 % = 23,97 %

21,18 % + 21,82 %+ 23,97 %
3

= 22,32%

57
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5 (lanjutan)

III. Perhitungan penetapan kadar sari yang larut dalam etanol

No

Berat sampel (gram)

Berat sari etanol (gram)

1

5,0430

0,154

2

5,0320

0,204

3

5,0210

0,186

% kadar sari yang larut dalam etanol =

Kadar sari larut dalam air

=

Kadar sari larut dalam air

=

Kadar sari larut dalam air

=

berat sari air 100
x

berat sampel 20

0,154 g 100
x

5,0430 g 20
0,204 g 100
x

5,0320 g 20
x

% Kadar sari larut dalam etanol rata-rata =

x100 % = 15,27 %

x100 % = 20,27 %

0,186 g 100
5,0210 g 20

x100 %

x100 % = 18,52 %

15,27% + 20,27%+ 18,52%
3

= 18,02 %

58
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5 (lanjutan)

IV. Perhitungan penetapan kadar abu total

No

Berat sampel (gram)

Berat abu (gram)

1

2,0105

0,1634

2

2,0311

0,1521

3

2,0163

0,1674

% kadar abu total

=

berat abu
berat sampel

% Kadar abutotal

0,1634
x 100 % = 8,12 %
=
2,0105

% Kadar abutotal

0,1521
x 100 % = 7,43 %
=
2,0311

% Kadar abu total

0,1674
x 100 % = 8,30 %
=
2,0163

% Kadar abu total rata-rata =

x 100 %

8,12%+ 7,43%+8,30%
3

= 7,96 %

59
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 5 (lanjutan)

V. Perhitungan penetapan kadar abu yang tidak larut dalam asam

No

Berat sampel
(gram)

Berat abu tidak
larut asam (gram)

1

2,0105

0,0396

2

2,0311

0,0424

3

2,0163

0,0401

% Kadar abu tidak larut asam =

berat abu tidak larut asam
berat sampel

x 100 %

0,0396
x 100 % = 1,97 %
% Kadar abu tidak larut asam =
2,0105
0,0424
x 100 % = 2,09 %
% Kadar abu tidak larut asam =
2,0311
0,0401
x 100 % = 1,99 %
% Kadar abu tidak larut asam =
2,0163
% Kadar abu tidak larut asam rata-rata =

1,97% +2,09%+ 1,99%
3

= 2,02 %

60
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 6.Gambar kromatogram ekstrak n-heksanadaun nipah dengan
gerak n-heksana-etilasetat.

fase

bp
1
1

1
2

2

2
1
2
1
2
tp

90 : 10

80 : 20

70 : 30

60 : 40

50 : 50

Keterangan:
Fase diam = plat pra lapis tipis silika gel 60 F254, penampak bercak = LiebermannBurchardt, tp = titik awal penotolan, bp = batas pengembang,
1 = merah ungu,
2 = ungu.

61
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 7.Gambar kromatogram ekstrak daun nipah dengan KLT preparatif

bp

mu

u

tp

Keterangan:
Fase diam = plat pra lapis silika gel 60 F254, fase gerak= n-heksana:etilaset(70 :
30),penampak bercak = Liebermann burchadt, tp = titik awal penotolan, bp =
batas pengembang, u = ungu, mu = merah ungu.

62
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 8.Gambar kromatogram KLT satu arah dari isolat I dengan fase gerak
yang berbeda.

bp

tp

1

II

III

Keterangan:
Fase diam = plat pra lapis silika gel GF254, fase gerak= I. n-heksanaetilasetat(90:10), II. benzen-etilasetat(90:10), III. n-heksana-etilasetat(70:30),
penampak bercak = Liebermann burchadt, tp = titik awal penotolan, bp = batas
pengembang,
= merah ungu

63
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 9.Gambar kromatogram KLT satu arah dari isolat II dengan fase gerak
yang berbeda.
bp

tpp

I

II

III

Keterangan:
Fase diam = plat pra lapis silika gel GF254, fase gerak = I. n-heksanaetilasetat(70:30), II. benzen-etilasetat(70:30), III. n-heksana-etilasetat(30:70),
penampak bercak = Liebermann burchadt, tp = titik awal penotolan, bp = batas
pengembang,
= ungu.

64
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 10.Gambar kromatogram KLT dua arah isolat I dengan fase gerak
yang berbeda.

Fase Gerak I

Fase Gerak II

tp

Keterangan:
Fase diam = plat pra lapis silika gel GF254, fase gerak1 = benzen-etilasetat(90:10),
fase gerak 2 = n-heksana-etilasetat(70:30), penampak bercak = Liebermann
burchadt, tp = titik awal penotolan,
= merah ungu

65
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 11.Gambar kromatogram KLT dua arah isolat II dengan fase gerak
yang berbeda.

Fase Gerak I

Fase Gerak II

tp

Keterangan:
Fase diam = plat pra lapis silika gel GF254, fase gerak1 = benzen-etilasetat(70:30),
fase gerak 2 = n-heksana-etilasetat(70:30), penampak bercak = Liebermann
burchadt, tp = titik awal penotolan,
= ungu

66
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 12. Gambar spektrum senyawatriterpenoid/steroid isolat I dengan
spektrofotometer ultraviolet.

67
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 13. Gambar spektrum senyawa triterpenoid/steroid isolat I dengan
spektrofotometer inframerah

Bilangan gelombang

68
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 14. Gambar spektrum senyawatriterpenoid/steroid isolat II dengan
spektrofotometer ultraviolet.

69
Universitas Sumatera Utara

Lampiran 15. Gambar spektrum senyawa triterpenoid/steroid isolat II dengan
spektrofotometer inframerah isolat

Bilangan gelombang

70
Universitas Sumatera Utara