Uji Aktivitas Antibakteri Ekstrak Etanol Dan Fraksi Kulit Buah Sawo Manila (Manilkara Zapota (L.) P. Royen) Terhadap Bakteri Staphylococcus Aureus Dan Escherichia Coli

Lampiran 1. Hasil identifikasi tumbuhan

45

Lampiran 2. Gambar tumbuhan sawo manila

46

Lampiran 3. Gambar buah dan kulit buah sawo manila

Buah sawo manila

Kulit buah sawo manila

47

Lampiran 4. Gambar simplisia kulit buah sawo manila

48

Lampiran 5. Gambar serbuk simplisia kulit buah sawo manila

49

Lampiran 6. Gambar mikroskopik serbuk simplisia kulit buah sawo manila
perbesaran 10 x 40

Parenkim berisi sel minyak

Berkas pembuluh berbentuk spiral

Serabut sklerenkim

50

Lampiran 7. Bagan metode penelitian
Kulit buah sawo manila
ditimbang
dikeringkan di lemari pengering
Simplisia
ditimbang

dilakukan makroskopik
dihaluskan
Serbuk simplisia

Karakterisasi simplisia

Skrining fitokimia

Meliputi pemeriksaan :
1. Makroskopik
2. Mikroskopik

Meliputi pemeriksaan :
1. Alkaloid
2. Flavonoid
3. Glikosida
4. Saponin
5. Tanin
6. Steroid/triterpenoid

Meliputi penetapan :
1. Kadar air
2. Kadar sari larut air
3. Kadar sari larut etanol
4. Kadar abu
5. Kadar abu tidak larut asam

51

Lampiran 7. (Lanjutan) Pembuatan ekstrak etanol kulit buah sawo manila
300 g serbuk simplisia
direndam dengan pelarut etanol 96%
selama 3 jam dalam bejana tertutup
dipindahkan massa ke dalam
perkolator
didiamkan selam 24 jam
dibuka kran dan dibiarkan ekstrak
menetes dari perkolator dengan
kecepatan 1 ml per menit
dihentikan perkolasi apabila 500 mg

perkolat yang keluar terakhir
diuapkan tidak meninggalkan sisa
Perkolat
dipekatkan dengan rotary evaporator
Ekstrak kental etanol 85 g

Uji antibakteri

52

Lampiran 7. (Lanjutan) Pembuatan fraksi n-heksana, etilasetat dan air dari
ekstrak etanol kulit buah sawo manila
30 g ekstrak kental etanol
dilarutkan dalam 60 ml etanol
dimasukkan ke dalam corong pisah
ditambahkan 150 ml akuades dan 150 ml n-heksana
dikocok
didiamkan sampai terbentuk 2 lapisan

Lapisan atas

Lapisan bawah
dimasukkan ke dalam corong pisah

dipekatkan
dengan rotary
evaportor

ditambahkan 150 ml etilasetat
dikocok
didiamkan sampai terbentuk 2 lapisan

Fraksi nheksana 0,78 g
Lapisan atas

Lapisan bawah

Uji antibakteri
dipekatkan
dengan rotary

evaportor

dipekatkan
dengan rotary
evaportor

Fraksi etilasetat 0,92 g

Fraksi air 24,4 g

Uji antibakteri

Uji antibakteri

53

Lampiran 7. (Lanjutan) Pengujian aktivitas ntibakteri
Biakan murni bakteri
diambil dengan jarum ose steril
diinokulasi pada media nutrient agar miring dengan cara

menggores
diinkubasi pada suhu 35 ± 2ºC selama 18-24 jam
Stok kultur bakteri
diambil 1 ose
disuspensikan ke dalam 10 ml nutrient broth
diukur kekeruhan suspense bakteri menggunakan
spektrofotometer UV pada panjang gelombang 580 nm
sampai diperoleh nilai transmitan 25%
Inokulum bakteri
dimasukkan 0,1 ml inokulum ke dalam cawan petri
dituang 15 ml media NA steril ke dalam cawan petri
dihomogenkan dan dibiarkan hingga memadat
Media padat
diletakkan cakram kertas yang telah direndam dengan
ekstrak/fraksi dengan berbagai konsentrasi dan pelarut
DMSO sebagai blanko ke atas media padat
diinkubasi pada suhu 35 ± 2ºC selama 18-24 jam
diukur diameter daerah hambat di sekitar larutan penguji
Hasil

54

Lampiran 8. Perhitungan penetapan kadar air simplisia kulit buah sawo manila

℅ Kadar air =

Volume air (ml)
Berat sampel (g)

× 100℅

1. Berat sampel
= 5,012 g
Volume air = 0,15 ml
℅ Kadar air

=

0,15 ml
5,012 g

× 100℅ = 2,99℅

2. Berat sampel
= 5,045 g
Volume air = 0,10 ml
℅ Kadar air

=

0,10 ml
5,045 g

× 100℅ = 1,98℅

3. Berat sampel
= 5,033 g
Volume air = 0,10 ml
℅ Kadar air

=

0,10 ml
5,033 g

℅ Kadar air rata-rata =

× 100℅ = 1,98℅

2,99 ℅ + 1,98℅ + 1,98℅
3

55

= 2,31℅

Lampiran 9. Perhitungan penetapan kadar sari larut dalam air simplisia kulit
buah sawo manila

℅ Kadar sari larut air =

1. Berat sampel

= 5,025 g

Berat sari

= 0,657 g

℅ Kadar sari =

0,657 g
5,025 g

×

100
20

= 5,022 g

Berat sari

= 0,677 g
0,677 g
5,022 g

×

100
20

= 5,028 g

Berat sari

= 0,608 g
0,608 g
5,028 g

℅ Kadar sari rata-rata =

×

100
20

100
20

× 100℅ = 67,40℅

3. Berat sampel

℅ Kadar sari =

Berat sampel (g)

×

× 100℅ = 65,37℅

2. Berat sampel

℅ Kadar sari =

Berat sari (g)

× 100℅ = 60,46℅

65,37℅ + 67,40℅ + 60,46℅
3

56

= 64,41℅

× 100℅

Lampiran 10. Perhitungan penetapan kadar sari larut dalam etanol simplisia kulit
buah sawo manila

℅ Kadar sari larut etanol =

1. Berat sampel

= 5,030 g

Berat sari

= 0,573 g

℅ Kadar sari =

0,573 g
5,030 g

×

100
20

= 5,029 g

Berat sari

= 0,648 g
0,648 g
5,029 g

×

100
20

= 5,033 g

Berat sari

= 0,576 g
0,576 g
5,033 g

×

100
20

100
20

× 100℅

× 100℅ = 64,42℅

3. Berat sampel

℅ Kadar sari =

Berat sampel (g)

×

× 100℅ = 56,95℅

2. Berat sampel

℅ Kadar sari =

Berat sari (g)

× 100℅ = 57,22℅

℅ Kadar sari larut air rata-rata =

56,95℅ + 64,42℅ + 57,22℅
3

57

= 59,53℅

Lampiran 11. Perhitungan penetapan kadar abu total simplisia kulit buah sawo
manila

℅ Kadar abu total =

1. Berat sampel
Berat abu

= 2,0303 g
= 0,1295 g

℅ Kadar abu total

=

2. Berat sampel
Berat abu

= 2,0482 g
= 0,1288 g

℅ Kadar abu total

=

3. Berat sampel
Berat abu

= 2,0350 g
= 0,1290 g

℅ Kadar abu total

=

0,1295 g
2,0303 g

0.1288 g
2,0482 g

0.1290 g
2,0350 g

℅ Kadar abu total rata-rata =

Berat abu (g)
Berat sampel (g)

× 100℅

× 100℅ = 6,37℅

× 100℅ = 6,28℅

× 100℅ = 6,33℅

6,37℅ + 6,28℅+ 6,33℅
3

58

= 6,32℅

Lampiran 12. Perhitungan penetapan kadar abu tidak larut dalam asam simplisia
kulit buah sawo manila

℅ Kadar abu tidak larut asam =

1. Berat sampel
Berat abu

× 100℅

0,0092 g
2,0303 g

× 100℅ = 0,45℅

= 2,0482 g
= 0,0112 g

℅ Kadar abu tidak larut asam =

3. Berat sampel
Berat abu

Berat sampel (g)

= 2,0303 g
= 0,0092 g

℅ Kadar abu tidak larut asam =

2. Berat sampel
Berat abu

Berat abu (g)

0,0112 g
2,0482 g

× 100℅ = 0,54℅

= 2,0350 g
= 0,0098 g

℅ Kadar abu tidak larut asam =

0,0098 g
2,0350 g

℅ Kadar abu tidak larut asam rata-rata =

× 100℅ = 0,48℅

0,45 ℅ + 0,54℅+ 0,48℅

59

3

= 0,49℅

Lampiran 13. Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus dan Escherichia coli pada ekstrak etanol
kulit buah sawo manila
Konsentrasi
(mg/ml)

Daerah diameter hambatan (mm)
Staphylococcus aureus
Eschericia coli
D1
20,8
19,9
18,2
17,2
16,6
14,8
-

D2
20,5
19,8
19,0
17,0
16,55
14,6
-

D3
20,3
19,5
18,7
17,7
15,6
13,85
-

D*
20,53
19,73
18,63
17,3
16,25
14,41
-

500
400
300
200
100
50
Blanko
Keterangan:
D
: Diameter daerah hambatan
*
: Rata-rata diameter daerah hambatan
: Tidak terdapat daerah hambatan
Blanko : DMSO

60

D1
19,15
18,3
16,25
15,0
14,0
13,0
-

D2
19,6
18,65
17,55
16,5
14,25
13,55
-

D3
21,6
18,1
18,0
15,0
14,5
13,75
-

D*
20,11
18,35
17,26
15,5
14,25
13,43
-

Lampiran 14. Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus dan Escherichia coli pada fraksi n-heksana
kulit buah sawo manila
Konsentrasi
(mg/ml)

Daerah diameter hambatan (mm)
Staphylococcus aureus
Eschericia coli
D1
17,8
15,1
11,7
7,7
7,6
7,0
-

D2
16,3
15,0
10,1
7,95
7,15
7,0
-

D3
15,3
14,2
11,0
7,7
7,2
7,15
-

D*
16,46
14,76
10,93
7,78
7,31
7,05
-

500
400
300
200
100
50
Blanko
Keterangan:
D
: Diameter daerah hambatan
*
: Rata-rata diameter daerah hambatan
: Tidak terdapat daerah hambatan
Blanko : DMSO

61

D1
9,0
8,3
7,85
7,75
7,6
7,35
-

D2
8,95
8,1
7,7
7,6
7,5
7,2
-

D3
9,15
8,0
7,7
7,65
7,4
7,1
-

D*
9,03
8,13
7,75
7,66
7,5
7,21
-

Lampiran 15. Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus dan Escherichia coli pada fraksi etilasetat
kulit buah sawo manila
Konsentrasi
(mg/ml)

Daerah diameter hambatan (mm)
Staphylococcus aureus
Eschericia coli
D1
20,0
19,65
17,6
15,0
15,2
13,0
-

D2
21,0
19,3
17,9
18,1
15,5
13,6
-

D3
20,4
19,8
18,0
16,5
15,75
13,7
-

D*
20,46
19,58
18,83
16,53
15,48
13,43
-

500
400
300
200
100
50
Blanko
Keterangan:
D
: Diameter daerah hambatan
*
: Rata-rata diameter daerah hambatan
: Tidak terdapat daerah hambatan
Blanko : DMSO

62

D1
18,4
16,95
15,9
15,6
15,4
12,2
-

D2
19,0
17,0
16,0
15,5
15,0
12,0
-

D3
18,8
17,0
15,8
15,0
14,95
12,3
-

D*
18,73
16,98
15,9
15,36
15,11
12,16
-

Lampiran 16. Hasil pengukuran diameter daerah hambatan pertumbuhan bakteri
Staphylococcus aureus dan Escherichia coli pada fraksi air kulit
buah sawo manila
Konsentrasi
(mg/ml)

Daerah diameter hambatan (mm)
Staphylococcus aureus
Eschericia coli
D1
19,95
17,95
16,55
15,0
13,65
12,8
-

D2
19,8
18,4
16,9
15,1
13,9
12,9
-

D3
19,9
18,2
16,8
14,95
13,85
12,2
-

D*
19,88
18,18
16,75
15,01
13,8
12,63
-

500
400
300
200
100
50
Blanko
Keterangan:
D
: Diameter daerah hambatan
*
: Rata-rata diameter daerah hambatan
: Tidak terdapat daerah hambatan
Blanko : DMSO

63

D1
10,0
8,55
8,35
8,0
7,2
6,6
-

D2
10,2
9,25
8,25
8,15
7,45
7,1
-

D3
9,9
8,6
8,5
8,1
7,95
7,0
-

D*
10,03
8,8
8,36
8,08
7,53
6,9
-

Lampiran 17. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol kulit buah
sawo manila terhadap bakteri Staphylococcus aureus

500

400

300

Blanko
200

100

50

Keterangan : Konsentrasi ekstrak dalam satuan mg/ml

64

Lampiran 18. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri ekstrak etanol kulit buah
sawo manila terhadap bakteri Escherichia coli

500

400

300

Blanko
200

100

50

Keterangan : Konsentrasi ekstrak dalam satuan mg/ml

65

Lampiran 19. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri fraksi n-heksana kulit buah
sawo manila terhadap bakteri Staphylococcus aureus

500

400

300

Blanko

200

100

50

Keterangan : Konsentrasi ekstrak dalam satuan mg/ml

66

Lampiran 20. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri fraksi n-heksana kulit buah
sawo manila terhadap bakteri Escherichia coli

500
400

300

Blanko

200
100

50

Keterangan : Konsentrasi ekstrak dalam satuan mg/ml

67

Lampiran 21. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri fraksi etilasetat kulit buah
sawo manila terhadap bakteri Staphylococcus aureus

500

400

300

Blanko

200

100

50

Keterangan : Konsentrasi ekstrak dalam satuan mg/ml

68

Lampiran 22. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri fraksi etilasetat kulit buah
sawo manila terhadap bakteri Escherichia coli

500

400

300

Blanko
200

100

50

Keterangan : Konsentrasi ekstrak dalam satuan mg/ml

69

Lampiran 23. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri fraksi air kulit buah sawo
manila terhadap bakteri Staphylococcus aureus

500

400

300

Blanko
200
100

50

Keterangan : Konsentrasi ekstrak dalam satuan mg/ml

70

Lampiran 24. Gambar hasil uji aktivitas antibakteri fraksi air kulit buah sawo
manila terhadap bakteri Escherichia coli

500

400

300

Blanko

200
100

50

Keterangan : Konsentrasi ekstrak dalam satuan mg/ml

71