LAPORAN PRAKTIK KERJA LAPANGAN (3)

LAPORAN PRAKTIK KERJA LAPANGAN (PKL)
DI BALAI BESAR PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN
TANAMAN OBAT DAN OBAT TRADISIONAL (B2P2TOOT)

Disusun Oleh :
ASLAM AL BASRI

NIM 12.005

MEY RINAWATI

NIM 12.026

NENI M. WIJAYATI

NIM 12.027

PATRISIUS ESTON N.

NIM 12.030

PETRISIA PUTRI R.

NIM 12.031

ROBBY HIDAYAT

NIM 12.038

AKADEMI ANALIS FARMASI DAN MAKANAN
PUTRA INDONESIA MALANG
2015

LAPORAN PRAKTIK KERJA LAPANGAN (PKL)
DI BALAI BESAR PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN
TANAMAN OBAT DAN OBAT TRADISIONAL (B2P2TOOT)

Disusun Oleh :
ASLAM AL BASRI

NIM 12.005

MEY RINAWATI

NIM 12.026

NENI M. WIJAYATI

NIM 12.027

PATRISIUS ESTON N.

NIM 12.030

PETRISIA PUTRI R.

NIM 12.031

ROBBY HIDAYAT

NIM 12.038

AKADEMI ANALIS FARMASI DAN MAKANAN
PUTRA INDONESIA MALANG
2015

1

HALAMAN PENGESAHAN
LAPORAN PRAKTIK KERJA LAPANGAN (PKL)
DI BALAI BESAR PENELITIAN DAN PENGEMBANGAN
TANAMAN OBAT DAN OBAT TRADISIONAL (B2P2TOOT)
Disusun Oleh :
ASLAM AL BASRI

NIM 12.005

MEY RINAWATI

NIM 12.026

NENI M. WIJAYATI

NIM 12.027

PATRISIUS ESTON N.

NIM 12.030

PETRISIA PUTRI R.

NIM 12.031

ROBBY HIDAYAT

NIM 12.038

Telah diperiksa dan disetujui oleh pembimbing
Pada tanggal : Karanganyar, Mei 2015
Menyetujui,
Pembimbing Lapangan

Pembimbing PKL

Ika Yanti M. Sholikhah, M.Sc

Misgiati, M.Pd

Koordinator PKL

Direktur

Ambar Fidya Sari, STP, MP

Ayu Ristamaya Yusuf, A.Md, ST

2

KATA PENGANTAR

Puji syukur kami panjatkan atas kehadiran Allah S.W.T yang telah

melimpahkan rahmat dan karunia-Nya, sehingga penyusunan Laporan Praktik Kerja
Lapangan ini telah terselesaikan.
Laporan Praktik Kerja Lapangan (PKL) ini digunakan sebagai syarat untuk
memenuhi mata kuliah PKL Akafarma Putra Indonesia Malang. Kami mengucapkan
terima kasih kepada semua pihak khususnya :
1.

Ika Yanti M. Sholikhah, M.Sc selaku pembimbing lapangan.

2.

Ayu Ristamaya Yusuf, A.Md, ST selaku Direktur Akafarma Putra Indonesia.

3.

Ambar Fidya Sari, STP, MP selaku koordinator PKL.

4.

Misgiati, M.Pd selaku pembimbing PKL.

5.

Semua pihak yang telah membantu dan membimbing selama menjalani PKL di
B2P2TOOT Tawangmangu – Karanganyar.
Kami menyadari bahwa Laporan Praktik Kerja Lapangan ini masih jauh dari

sempurna. Oleh karena itu, kami mengharapkan saran dan kritik yang bersifat
membangun untuk perbaikan di masa mendatang dan bermanfaat bagi semua.

Karanganyar, Mei 2015

Penyusun

3

DAFTAR ISI

Halaman Judul ........................................................................................................... i
Halaman Pengesahan................................................................................................. ii

Kata pengantar .......................................................................................................... ii
Daftar Isi ................................................................................................................. iv
Daftar Gambar ........................................................................................................... v
Daftar Tabel ............................................................................................................... vi
BAB I Pendahuluan ................................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang..................................................................................................... 1
1.2 Tujuan ................................................................................................................. 2
1.3 Manfaat ............................................................................................................... 3
BAB II Gambaran Umum Instansi............................................................................. 4
2.1 Sejarah Instansi ................................................................................................... 4
2.2 Stuktur Organisasi................................................................................................ 5
2.3 Tugas dan Fungsi ................................................................................................. 7
2.4 Loksi Instansi, Sarana, dan Prasarana.................................................................. 8
2.5 Profil Instansi....................................................................................................... 9
BAB III Tinjauan Pustaka.......................................................................................... 10
3.1 Tanaman Obat ...................................................................................................... 10
3.2 Obat Tradisional .................................................................................................. 10
3.3 Tinjauan Tentang Sampel..................................................................................... 11
3.4 Angka Jamur......................................................................................................... 23
3.5 Angka Lempeng Total ......................................................................................... 24

3.6 Kromatografi Lapis Tipis .................................................................................... 25
3.7 Spektrofotometri.................................................................................................. 27
BAB IV Metode Penelitian ....................................................................................... 29
4.1 Laboratorium Mikrobiologi ................................................................................ 29
4.2 Laboratorium Instrument..................................................................................... 33
BAB V Hasil dan Pembahasan .................................................................................. 37
5.1 Uji Parameter Cemaran Mikroba......................................................................... 37
5.2 Identifikasi dan Penetapan Kadar ........................................................................ 41
BAB VI Kesimpulan dan Saran ................................................................................ 49
6.1 Kesimpulan ......................................................................................................... 49
6.2 Saran ................................................................................................................ 50
DAFTAR PUSTAKA
LAMPIRAN

4

DAFTAR GAMBAR

2.1 Gambar Struktur Organisasi.................................................................................6
3.1 Gambar Kayu Secang ..........................................................................................11

3.2 Gambar Tempuyung.............................................................................................13
3.3 Gambar Temulawak ............................................................................................13
3.4 Gambar Pegagan..................................................................................................16
3.5 Gambar Kunyit.....................................................................................................18
3.6 Gambar Kumis Kucing .......................................................................................20
3.7 Gambar Sambiloto ..............................................................................................22
5.1 Gambar Visualisasi KLT Kurkumin pada Sampel Kunyit dan Temulawak.........41
5.2 Gambar Kurva Standard Penetapan Kadar Kurkumin.........................................43
5.3 Gambar Kurva Standard Penetapan Kadar Kumis Kucing..................................46
5.4 Gambar Kurva Standard Penetapan Kadar Andrografolid...................................47

5

DAFTAR TABEL

5.1 Tabel Hasil Uji Angka Lempeng Total Tempuyung.............................................37
5.2 Tabel Hasil Uji Angka Lempeng Total Secang ...................................................37
5.3 Tabel Hasil Uji Angka Lempeng Total Temulawak ............................................37
5.4 Tabel Hasil Uji Angka Lempeng Total Pegagan .................................................38
5.5 Tabel Hasil Uji Angka Lempeng Total Kunyit ....................................................38

5.6 Tabel Hasil Uji Angka Lempeng Total Kumis Kucing .......................................38
5.7 Tabel Hasil Uji Angka Jamur Tempuyung...........................................................39
5.8 Tabel Hasil Uji Angka Jamur Secang .................................................................39
5.9 Tabel Hasil Uji Angka Jamur Temulawak ...........................................................39
5.10 Tabel Hasil Uji Angka Jamur Pegagan...............................................................40
5.11 Tabel Hasil Uji Angka Jamur Kunyit ................................................................40
5.12 Tabel Hasil Uji Angka Jamur Kumis Kucing ....................................................40
5.13 Tabel Perhitungan Konsentrasi Standard Kurkuminoid pada Sampel Kunyit
dan Temulawak .................................................................................................43
5.14 Tabel Hasil perhitungan Kadar Kunyit ..............................................................43
5.15 Tabel Hasil perhitungan Kadar Temulawak.......................................................43
5.16 Tabel Hasil Perhitungan Konsentrasi Standard Sinensetin................................45
5.17 Tabel Hasil perhitungan Kadar Sinensetin Pada Kumis Kucing........................46
5.18 Tabel Hasil Perhitungan Konsentrasi Standard Andrografolid..........................47
5.19 Tabel Hasil Perhitungan Kadar Andrografolid...................................................47

6

BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang
Indonesia dikenal sebagai negara yang memiliki berbagai jenis tanaman
obat. Dengan kekayaanya tersebut, Indonesia memiliki potensi untuk
mengembangkan produk herbal yang berkualitas dan dapat dimanfaatkan oleh
masyarakat luas. Sumber daya alam tersebut belum dimanfaatkan secara optimal,
baru sekitar kurang lebih 1.200 spesies tanaman obat yang dimanfaatkan dan
diteliti sebagai obat tradisional.
Obat tradisional diharapkan berperan untuk pencegahan dan pengobatan
penyakit serta peningkatan taraf kesehatan masyarakat. Pemerintah pun sudah
melegalkan obat tradisional dalam pelayanan kesehatan formal. Salah satu
contohnya adanya klinik Hortus Medicus di Balai Besar Penelitian dan
Pengembangan

Tanaman

Obat

dan

Obat

Tradisional

(B2P2TOOT)

Tawangmangu yang melayani pasien dengan menggunakan herbal untuk
mengobati pasien. Tentunya obat herbal ini telah mengalami standarisasi dan uji
klinis sebelum digunakan sebagai obat. Sebagai salah satu upaya untuk
memantau kualitas dan mutu tanaman obat dan obat tradisional, instansi
B2P2TOOT memiliki laboratorium terpadu, di antaranya adalah laboratorium
instrumen dan laboratorium mikrobiologi.

1

Mahasiswa akademi analis farmasi dan makanan diharapkan untuk
mengetahui tanaman apa saja yang mempunyai khasiat sebagai obat. Salah satu

2

3

institusi yang bergerak dalam bidang penelitian serta pengembangan ilmu kesehatan
khususnya mengenai tanaman herbal yaitu B2P2TOOT. Untuk meningkatkan
keanekaragaman jenis tanaman obat yang akan digunakan sebagai obat tradisional
perlu dilakukan penelitian serta pengembangan mengenai khasiat serta manfaat dari
tanaman obat tersebut.

1.2 Tujuan
Tujuan umum Praktik Kerja Lapangan adalah sebagai berikut:
1. Meningkatkan pengetahuan mahasiswa mengenai hubungan antara teori yang
telah didapatkan selama perkuliahan dengan penerapannya di dunia kerja.
2. Memenuhi persyaratan kurikulum yang harus ditempuh oleh setiap mahasiswa
Akademi Analis Farmasi dan Makanan Putra Indonesia Malang.
Tujuan khusus Praktik Kerja Lapangan adalah sebagai berikut:
1. Memperkenalkan

mahasiswa

kepada

lingkungan

fisik,

administratif,

akademis, dan sosial psikologis pada tempat Praktik Kerja Lapangan.
2. Meningkatkan kemampuan berfikir mahasiswa dalam mengaplikasikan ilmu
analis farmasi dan makanan, dalam hal ini pada bidang tanaman obat dan obat
tradisional.
1.3 Manfaat
Adapun manfaat yang dapat diperoleh dalam kegiatan Praktik Kerja Lapangan
antara lain:
1. Memperoleh pengetahuan tentang kegiatan yang ada pada instansi
pemerintahan seperti pada B2P2TOOT.

4

2. Membentuk karakter mahasiswa serta mampu bersosialisasi dengan
lingkungan kerja dan membentuk suatu kerja sama tim.

BAB II
GAMBARAN UMUM INSTANSI

2.1

Sejarah Instansi

2.1.1 Sejarah Singkat Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Tanaman Obat
dan Obat Tradisional (B2P2TOOT)
Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Tanaman Obat dan Obat
Tradisional (B2P2TOOT) Kementrian Kesehatan RI berdiri pada tahun 1948.
Pada awalnya B2P2TOOT merupakan rintisan kebun koleksi tanaman obat (TO)
di kaki Gunung Lawu Karanganyar yang dikenal dengan nama ”Hortus Medicus”.
Pada tahun 1963, kebun TO yang dikelola pemerintah sebagai bagian dari upaya
pengembangan budaya pengobatan dalam pelayanan kefarmasian, berada di
bawah koordinasi Badan Pelayanan Umum Farmasi. Kemudian tahun 1968 –
1975, kebun TO berada di bawah naungan Direktorat Jendral Farmasi (Lembaga
Farmasi Nasional) (Profil B2P2TOOT, 2013).
Berdasarkan SK Menteri Kesehatan No. 149/Menkes/SK/IV/78 pada
tanggal 28 April 1978, status kelembagaan berubah menjadi Balai Penelitian
Tanaman Obat (BPTO) yang merupakan Unit Pelaksanaan Teknis (UPT) Badan
Litbang, Depkes RI.
Selanjutnya

berdasarkan

peraturan

Menteri

Kesehatan

RI

No.

491/Per/Menkes/VII/2006 tertanggal 17 Juli 2006, BPTO meningkat status
kelembagaannya menjadi Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Tanaman
Obat dan Obat Tradisional (B2P2TOOT). Pada tahun 2010, B2P2TOOT

5

melakukan Pencanangan Saintifikasi Jamu (evidence based jamu development),
yang merupakan penelitian berbasis pelayanan. Pada tahun yang sama terbit
payung hukum Saintifikasi Jamu, yaitu Permenkes No. 003 tahun 2010. Pada
tahun 2012, B2P2TOOT menjadi koordinator Riset Khusus Tanaman Obat dan
Jamu (RISTOJA) berskala nasional. Riset tersebut meliputi 26 provinsi di luar
Jawa dan Bali, yang bekerja sama dengan 25 PTN untuk membangun database
TO dan Jamu (TOJA) Indonesia (Profil B2P2TOOT, 2013).

2.2

Struktur Organisasi
Susunan organisasi merupakan susunan dari bagian-bagian yang dijabat

oleh orang -orang yang berperan aktif dalam pengembangan organisasi. Susunan
organisasi B2P2TOOT Tawangmangu meliputi Kepala B2P2TOOT yang
membawahi berbagai bagian dan bidang dalam manajemen penelitian dan
pengembangan di B2P2TOOT Tawangmangu. Bagian yang dibawahi oleh kepala
B2P2TOOT adalah Bagian Tata Usaha yang membawahi Sub Bagian Umum dan
Sub Bagian Keuangan. Bidang yang dibawahi oleh Kepala B2P2TOOT antara
lain Bidang Program Kerjasama dan Informasi yang membawahi Seksi Program
dan Evaluasi, dan Seksi Kerjasama dan Informasi, serta Bidang Pelayanan
Penelitian yang membawahi Seksi Sarana Teknis. Selain itu, kepala juga
membawahi berbagai Instalasi dan Kelompok Jabatan Fungsional.Berikut ini
adalah keterangan hubungan fungsional antara jabatan tersebut.

KEPALA
Indah Yuning Prapti SKM.,M.Kes

Bagian Tata Usaha
Akhmad Saikhu, SKM, M.Sc.PH

Sub Bag.Umum
Fauzi, MP

Bidang Pelayanan dan Penelitian
Nita Supriyati, M.Biotech., Apt

Seksi Sarana & Penelitian
Harto Widodo, M.Biotech

Seksi Pelayanan &
Penelitian
Tri Widayat, M.Sc

Bidang Program Kerjasama dan Informasi
Nagiot Cansalony Tambunan, ME

Seksi Program &
Evaluasi
Indah Laksmiwati, S.Sos

INSTALASI
LABORATORIUM

KelompokJabatanFungsional
Slamet Wahyono M.Sc.,Apt

Gambar 2.1 Struktur Organisai
2.3

Tugas dan Fungsi

Sub Bag. Keuangan
Edwin Fajar Setyawan, SKM

SeksiKerjasama&Inform
asi
Amalia Damayanti M.Si

B2P2TOOT

Tawangmangu

mempunyai

tugas

untuk

melaksanakan

penelitian dan pengembangan tanaman obat dan obat tradisional. Dalam
melaksanakan tugas tersebut B2P2TOOT mempunyai fungsi :
1. Perencanaan, pelaksanaan, evaluasi penelitian dan /atau pengembangan
di bidang tanaman obat dan obat tradisional
2. Pelaksanaan eksplorasi, inventarisasi, identifikasi, adaptasi, dan koleksi
plasma nutfah tanaman obat
3. Pengembangan ilmu pengetahuan dan teknologi konservasi, serta
pelestarian plasma nutfah tanaman obat
4. Pengembangan ilmu pengetahuan dan teknologi standarisasi tanaman
obat dan bahan baku obat tradisional
5. Pengembangan jaringan kerjasama dan kemitraan dibidang tanaman
obat dan obat tradisional
6. Pelatihan teknis di bidang pembibitan, budidaya, pasca panen, analisis,
koleksi spesimen tanaman obat, serta uji keamanan dan kemanfaatan
obat tradisional
7. Pelaksanaan urusan tata usaha dan rumah tangga
Selain tugas pokok dan fungsi diatas, B2P2TOOT juga mempunyai kegiatan
utama yaitu :
1. Melaksanakan Saintifikasi Jamu : penelitian berbasis pelayanan
2. Mengembangkan bahan baku terstandarisasi
3. Mengembangkan jejaring kerjasama
4. Mengembangkan teknologi tepat guna

5. Diseminasi,

sosialisasi,

dan

pemanfaatan

hasil

penelitian

dan

pengembangan tanaman obat dan obat tradisional (TOOT)
6.

Mengembangkan karir dan mutu sumber daya manusia

7.

Meningkatkan perolehan HKI (Hak Kekayaan Intelektual) dari hasil
penelitian dan penegembangan tanaman obat dan obat tradisional (TOOT)

8.

Mengembangkan sarana dan prasarana

9. Menyusun draft regulasi dan kebijakan teknis litbang tanaman obat dan
obat tradisional

2.4

Lokasi Instansi Sarana dan Prasarana
Balai Besar Penelitian Dan Pengembanagan Tanaman Obat Dan Obat

Tradisional (B2P2TOOT) terletak di Jalan Raya Lawu No. 11 Tawangmangu,
Karanganyar, Jawa Tengah.
Sarana yang dimiliki sampai dengan saat ini antara lain berupa gedung yang
berada pada lokasi 1.200 meter di atas permukaan laut (dpl) yang dipergunakan
untuk perkantoran, perpustakaan, laboratorium, penanganan pasca panen, koleksi
simplisia, mushola, gedung pendidikan dan pelatihan, dan berbagai sarana.
Laboratorium yang ada di Balai Besar Penelitian dan Pengembangan
Tanaman Obat dan Obat TradisionalTawamangu di antaranya:
- Laboratorium Fisiologi dan Hama Penyakit Tanaman
- Laboratorium Fitokimia
- Laboratorium Galenika
- Laboratorium Farmakognosi dan Sistematika

- Laboratorium Formulasi
- Laboratorium Instrumentasi
- Laboratorium Biologi Molekuler
- Laboratorium Mikrobiologi
- Laboratorium Kultur Jaringan

2.5

Profil Balai Besar Penelitian Dan Pengembangan Tanaman Obat Dan
Obat Tradisional

2.5.1 Visi Balai Besar Penelitian Dan Pengembangan Tanaman Obat Dan Obat
Tradisional
Masyarakat sehat dengan jamu yang aman dan berkhasiat
2.5.2 Misi Balai Besar Penelitian Dan Pengembangan Tanaman Obat Dan Obat
Tradisional
1. Meningkatkan mutu litbang tanaman obat dan obat tradisional
2. Mengembangkan hasil litbang tanaman obat dan obat tradisional
3.

Meningkatkan pemanfaatan hasil litbang tanaman obat dan obat
tradisional

BAB III
TINJAUAN PUSTAKA

3.1 Tanaman Obat
Tanaman obat adalah tanaman yang memiliki khasiat obat dan digunakan
sebagai obat dalam penyembuhan maupun pencegahan penyakit. Pengertian
berkhasiat obat adalah mengandung zat aktif yang berfungsi mengobati penyakit
tertentu atau jika tidak mengandung zat aktif tertentu tapi mengandung efek
resultan / sinergi dari berbagai zat yang berfungsi mengobati (Flora,2008).
Tanaman obat atau biofarmaka didefinisikan sebagai jenis tanaman yang
sebagian, seluruh tanaman dan atau eksudat tanaman tersebut digunakan sebagai
obat, bahan atau ramuan obat-obatan. Eksudat tanaman adalah isi sel yang secara
spontan keluar dari tanaman atau dengan cara tertentu sengaja dikeluarkan dari
selnya. Eksudat tanaman dapat berupa zat-zat atau bahan-bahan nabati lainnya
yang dengan cara tertentu dipisahkan/diisolasi dari tanamannya.
3.2 Obat Tradisional
Obat tradisional adalah bahan atau ramuan yang berupa bahan
tumbuhan, bahan hewan, bahan mineral, sediaan galenik atau campuran dari
bahan-bahan tersebut, yang secara tradisional telah digunakan untuk
pengobatan berdasarkan pengalaman. Obat tradisional dibuat atau diramu dari
bahan tumbuh-tumbuhan, bahan hewan, sediaan sarian (galenik), atau
campuran bahan-bahan tersebut. Obat tradisional secara turun-temurun telah
digunakan untuk kesehatan berdasarkan pengalaman. Obat tradisional telah

digunakan oleh berbagai aspek masyarakat mulai dari tingkat ekonomi atas
sampai tingkat bawah, karena obat tradisional mudah didapat, harganya yang
cukup terjangkau dan berkhasiat untuk pengobatan, perawatan, dan
pencegahan penyakit (Ditjen POM, 1994).
Obat tradisional yang diperlukan oleh masyarakat adalah obat tradisional
yang mengandung bahan atau ramuan bahan yang dapat memelihara kesehatan,
mengobati gangguan kesehatan, serta dapat memulihkan kesehatan. Bahanbahan ramuan obat tradisional seperti bahan tumbuh-tumbuhan, bahan hewan,
sedian sarian atau galenik yang memiliki fungsi, pengaruh serta khasiat sebagai
obat, dalam pengertian umum kefarmasian bahan yang digunakan sebagai obat
disebut simplisia. Simplisia adalah bahan alamiah yang dipergunakan sebagai
obat yang belum mengalami pengolahan apapun juga dan kecuali dinyatakan
lain berupa bahan yang telah dikeringkan (Depkes RI, 1995).

3.3 Tinjauan Tentang Sampel
3.3.1 Kayu Secang (Caesalpinia sappan L.)

Gambar 3.1 Kayu Secang

3.3.1.1 Deskripsi tanaman
Secang merupakan perdu yang umumnya tumbuh ditempat terbuka sampai
ketinggian 1000 m diatas permukaan laut seperti di daerah pegunungan yang
berbatu tetapi tidak terlalu dingin, tingginya 5-10 m, batangnya berkayu, bulat
dan bewarna hijau kecoklatan. Pada batang dan percabangannya terdapat duriduri tempel yang bentuknya bengkok dan letaknnya tersebar.
Klasifikasi :
Divisi

: Spermatophyta

Kelas

: Dicolyledonae

Ordo

: Resales

Family : Esalpiniaceae
Genus

: Caesalpinia

Species : Caesalpinia sappan L
3.3.1.2 Kandungan Kimia dan Manfaat Kayu Secang
Daun dan batang secang mengadung saponin dan flavonoid. Selain itu
daunnya mengandung polifenol dan 0,16%-0,20 % minyak atsiri, batang atau
kayunya mengandung tanin, asam galat, resin, resorsin, brasilin, brasilein, dalfa-phellandrene, oscimene, dan minyak atsiri. Secara empiris kayu secang
dipakai sebagai obat luka, batuk berdarah, berak darah, darah kotor, penawar
racun, sipilis, menghentikan pendarahan, pengobatan pasca persalinan,
disinfektan, anti diare, dan nyeri karena ganguan sirkulasi darah (Wijayakusuma
dkk, 1992).

3.3.2 Tempuyung

Gambar 3.2 Tempuyung

3.3.2.1 Deskripsi Tanaman
Tempuyung termasuk ke dalam famili Asteraceae, dikenal dengan nama
Sonchus arvensis L, atau Shonchus wightianu (Siemonsma et al., 1994). Di
beberapa daerah tanaman ini dikenal dengan nama galibug, jombang,
lampenas, jombang lalakina, dan lempung atau rayana ( Wijayakusuma et al.,
1996). Sedang di Jawa dikenal dengan nama tempuyung. Urutan taksonomi
tempuyung adalah:
Divisi

: Spermatophyta

Kelas

: Dicotyledonae

Ordo

: Asterales

Familiy

: Asteraceace

Genus

: Sonchus

Spesies

: Sonchus arvensis L

3.3.2.2 Kandungan Kimiawi dan Manfaat Tempuyung
Tempuyung (sonchus arvensis L,.) merupakan salah satu dari
ketigabelas spesies yang ditetapkan oleh Badan Pengawas Obat dan Makanan
(BPOM) sebagai spesies unggulan bahan asli obat tradisional. Masyarakat
mengenal tempuyung sebagai peluru air seni, penghancur batu ginjal, obat
anti radang atau bengkak, dan berkhasiat lipotriptik (Soedibyo, 1998).
Tempuyung sudah lama dikenal dan dimanfaatkan oleh penduduk
Tawangmangu, Surakarta, Jawa Tengah, sebagai jamu untuk memulihkan
kesehatan fisik bagi perempuan yang selesai bersalin. Di Cina, selain sebagai
tumbuhan obat, tumbuhan ini digunakan juga sebagai insektisida (Rosita et
al., 1993)

3.3.3 Temulawak

Gambar 3.3 Temulawak (Sumber:www.google.com)

3.3.3.1 Deskripsi Tanaman
Temulawak merupakan tanaman obat berupa tumbuhan rumpun
berbatang semu. Di daerah Jawa Barat temulawak disebut sebagai koneng
gede sedangkan di Madura disebut sebagai temu lobak. Kawasan Indonesia
dan Malaysia merupakan tempat asal penyebaran temulawak ke seluruh dunia.
Saat ini tanaman ini selain di Asia Tenggara dapat ditemui pula di Cina,
Bardabos, India, Jepang, Korea, di Amerika Serikat dan beberapa negara
Eropa.
Klasifikasi:
Divisi

: Spermatophyta

Sub divisi

: Angiospermae

Kelas

: Monocotyledonae

Ordo

: Zingiberales

Family

: Zingiberaceae

Genus

: Curcuma

Spesies

: Curcuma xanthorrhiza ROXB

3.3.3.2 Kandungan Kimia dan Manfaat Temulawak
Di Indonesia satu-satunya bagian yang dimanfaatkan adalah rimpang
temulawak untuk dibuat jamu godog. Rimpang ini mengandung 48-59,64% zat
tepung, 1,6-2,2% kurkumin dan 1,48-1,63% minyak asiri dan dipercaya dapat
meningkatkan kerja ginjal serta anti inflamasi. Manfaat lain dari rimpang

tanaman ini adalah sebagai obat jerawat, meningkatkan nafsu makan, anti
kolesterol,

antiinflamasi,

anemia,

antioksidan,

pencegah

kanker,

dan

antimikroba. Suku Zingiberaceae, mengandung minyak atsiri < 5,80% v/b &
kurkuminoid tidak kurang dari 4,0% dihitung sebagai kurkumin.
3.3.4 Pegagan

Gambar 3.4 Pegagan

3.3.4.1 Deskripsi Tanaman
Pegagan merupakan tanaman herba tahunan yang tumbuh menjalar
dan berbunga sepanjang tahun. Tanaman akan tumbuh subur bila tanah dan
lingkungannya sesuai hingga dijadikan penutup tanah. Pegagan hijau sering
dijumpai di daerah persawahan, di sela-sela rumput, di tanah yang agak
lembab baik yang terbuka atau agak ternaungi, juga dapat ditemukan di
dataran rendah sampai daerah dengan ketinggian 2500 m dpl.
Klasifikasi
Divisio

: Spermatophyta

Kelas

: Dicotyledone

Ordo

: Umbillales

Family

: Umbillferae (Apiaceae)

Genus

: Centella

Species

: Centella asiatica

3.3.4.2 Kandungan Kimia dan Manfaat Pegagan
Penggunaan tumbuhan sebagai obat berkaitan dengan kandungan kimia
yang terdapat dalam tumbuhan tersebut terutama zat bioaktif. Tanpa adanya
suatu senyawa bioaktif dalam tumbuhan maka secara umum tumbuhan itu
tidak dapat digunakan sebagai obat. Noverita dan Marline (2012)
menyebutkan hasil uji fitokimia daun pegagan terdapat kandungan
triterpenoid. Pegagan mengandung bahan aktif seperti triterpenoid glikosida
(terutama asiatikosida, asam asiatik, asam madekasik, madekasosida (Hashim,
et al., 2011), flavonoid (kaemferol dan kuersetin), minyak atsiri (valerin,
kamfor, siniole dan sterol tumbuhan seperti kamfesterol, stigmasterol,
sitosterol), pektin, asam amino, alkaloid hidrokotilin, miositol, asam brahmik,
asam sentelik, asam isobrahmik, asam betulik, tanin serta garam mineral
seperti kalium, natrium, magnesium, kalsium dan besi. Zat valerin yang ada
memberikan rasa pahit.
Glikosida triterpenoid yang disebut asiatikosida merupakan antilepra
dan penyembuh luka yang sangat luar biasa. Manfaat lainnya sebagai
stimulasi sintesis kolagen glikosida ini juga ditemukan dalam aktivitasnya

melawan herpes simplex virus 1 and 2 dan mikobakterium tuberculosis
Neuroprotecta.
Manfaat yang berhubungan dengan fungsi saraf dan otak telah
dibuktikan lewat berbagai penelitian. Sebanyak 30 orang pasien anak-anak
yang menderita lemah mental menunjukkan kemajuan yang cukup berarti
setelah diberi perlakuan dengan ramuan Centella asiatica selama 12 minggu.
Sebanyak enam pasien sirosis hati menunjukkan perbaikan (kecuali yang
kronis) setelah dua bulan meminum ramuan tersebut. Penelitian lain
menunjukkan, berbagai penyakit seperti skleroderma, gangguan pembuluh
vena, maupun gangguan pencernaan rata-rata dapat disembuhkan dengan
ramuan itu hingga 80% setelah 2 - 18 bulan. Herba pegagan adalah seluruh
bagian diatas tanah Centella asiatica (L). Urb., suku Apiaceae mengandung
asiatikosida tidak kurang dari 0,07%.
3.3.5 Kunyit

Gambar 3.5 Kunyit (Sumber:www.google.com)

3.3.5.1 Deskripsi Tanaman
Kunyit merupakan tanaman obat berupa semak dan bersifat tahunan
(perenial) yang tersebar di seluruh daerah tropis. Tanaman kunyit tumbuh
subur dan liar disekitar hutan/bekas kebun. Diperkirakan berasal dari Binar
pada ketinggian 1300 - 1600 m dpl, ada juga yang mengatakan bahwa kunyit
berasal dari India. Kata curcuma berasal dari bahasa Arab kurkum dan
Yunani karkom. Pada tahun 77 - 78 SM, Dioscorides menyebut tanaman ini
sebagai Cyperus menyerupai jahe, tetapi pahit, kelat, dan sedikit pedas, tetapi
tidak beracun. Tanaman ini banyak dibudidayakan di Asia Selatan khususnya
di India, Cina Selatan, Taiwan, Indonesia (Jawa), dan Filipina.
Klasifikasi
Divisio

: Spermatophyta

Sub-diviso

: Angiospermae

Kelas

: Monocotyledoneae

Ordo

: Zingiberales

Famili

: Zungiberaceae

Genus

: Curcuma

Species

: Curcuma domestica Val

3.3.5.2 Kandungan Kimia dan Manfaat Kunyit
Rimpang kunyit mengandung minyak menguap sebanyak 3-5% v/b.
Terdiri atas turmeron, zingiberen, ar-turmeron, sedikit mengandung

fellandren, seskiterpen alkohol, borneol, kurkumin, desmetoksi kurkumin,
bisdesmetoksi kurkumin, pati, tannin, dan damar (Dalimartha, 2009).
Rimpang kunyit digunakan sebagai bumbu dapur dan sebagai obat
yang berkhasiat sebagai antikoagulan, menurunkan tekanan darah tinggi,
sebagai obat malaria, obat cacing, bakterisida, obat sakit perut, peluruh ASI,
fungisida, stimulan, mengobati keseleo, memar, rematik, obat asma, diabetes
melitus, usus buntu, amandel, sariawan, tambah darah, menghilangkan
jerawat, penurun panas, menghilangkan rasa gatal, menyembuhkan kejang
dan mengobati luka-luka (Syukur dan Hernani, 2001)
Di daerah Jawa, kunyit banyak digunakan sebagai ramuan jamu
karenaberkhasiat

menyejukkan,

membersihkan,

mengeringkan,

menghilangkan gatal, dan menyembuhkan kesemutan. Manfaat utama
tanaman kunyit, yaitu: sebagai bahan obat tradisional, bahan baku industri
jamu dan kosmetik, bahan bumbu masak, peternakan, dan lain-lain.
Disamping itu rimpang tanaman kunyit itu juga bermanfaat sebagai anti
inflamasi, anti oksidan, anti mikroba,pencegah kanker, anti tumor, dan
menurunkan kadar lemak darah dan kolesterol, serta sebagai pembersih
darah.

3.3.6 Kumis Kucing

Gambar 3.6 Kumis Kucing (Sumber:www.google.com)

3.3.6.1 Deskripsi Tanaman
Daun kumis kucing adalah daun Orthosiphon stamineus benth., suku
lamiaceae, mengandung flavanoid sinensetin tidak kurang dari 0,10%.
Klasifikasi
Divisi

: Spermatophyta

Sub divisi

: Angiospermae

Kelas

: Dicotyledonae

Keluarga

: Lamiaceae

Genus

: Orthosiphon

Spesies

: Orthosiphon spp

3.3.6.2 Kandungan Kimia dan Manfaat Kumis Kucing
Kumis kucing mengandung orthosiphonen glikosida, zat samak, minyak
atsiri, minyak lemak, saponin, sapofonen, garam kalium, myoinositol,
sinensetin, asamasam organik dan tannin. Salah satu tanaman yang sering
digunakan sebagai obat adalah tanaman kumis kucing (Orthosiphon spicatus
B. B. S.). Di Indonesia, daun kumis kucing yang kering (simplisia) dipakai
sebagai obat yang memperlancar pengeluaran air kemih (diuretik) sedangkan

di India untuk mengobati rematik. Masyarakat menggunakan kumis kucing
sebagai obat tradisional sebagai upaya penyembuhan batuk, encok, masuk
angin dan sembelit (Dalimarta, 2003). Tanaman ini juga bermanfaat untuk
pengobatan radang ginjal, batu ginjal, kencing manis, albuminuria dan
penyakit syphilis (Arief, 2005).

3.3.7 Sambiloto

Gambar 3.7 Sambiloto

3.3.7.1 Deskripsi Tanaman
Herba sambiloto adalah seluruh bagian diatas tanah Andrographis
paniculata Ness, suku Lamiaceae, mengandung andrograpfolid tidak kurang
dari 0,64%.
Klasifikasi
Divisi

: Spermatophyta

Sub divisi

: Angiospermae

Kelas

: Dicotyledonae

Keluarga

: Acanthaceae

Genus

: Andrographis

Spesies

: Andrographis paniculata

3.3.7.1 Kandungan Kimia dan Manfaat Sambiloto

Daun sambiloto memiliki sifat kimiawi berasa pahit, dingin, memiliki
kandungan

kimia

laktone

pada

percabangan

yang

terdiri

dari

dioksiandrografolid, andrografolid (zat pahit), neoandrografolid, 14-deoksi11-12-didehidroandrografolid, dan homoandrografolid. Daun sambiloto
bermanfaat untuk menurunkan demam tinggi dan malaria, jika direbus
anaman ini memiliki sifat bakteriostatik dan meningkatkan daya fagositosis
sel darah putih.

3.4 Angka Jamur (AJ)
Angka jamur didefinisikan sebagai pertumbuhan kapang dan khamir
setelah cuplikan diinukulasikan pada media yang sesuai dan diinkubasi pada
suhu 20º-25ºC. Tujuan dari uji angka jamur ini adalah memberikan jaminan
bahwa simplisia maupun ekstrak tidak mengandung cemaran jamur yang
melebihi batas yang ditetapkan karena berpengaruh pada stabilitas simplisia
maupun ekstrak yang berbahaya bagi kesehatan (Samporna, 2000). Penetapan
nilai batas angka kapang atau khamir dapat mengacu pada peraturan Mentri
Kesehatan No. 661/Menkes/Per/VII/1994 yang menetapkan simplisia atau
sediaan obat tradisional tidak boleh melebihi batas 104.
Perhitungan jumlah koloni dari angka lempeng total dan angka lempeng
jamur pada uji cemaran mikroba menggunakan metode hitungan cawan. Metode
ini merupakan cara yang paling sensitif untuk menghitung jumlah mikroba
karena beberapa alasan:

-

Hanya sel yang masih hidup yang dihitung
Beberapa jenis mikroba dapat terhitung sekaligus
Dapat digunakan untuk isolasi dan identifikas mikroba karena koloni yang

terbentuk mungkin berasal dari suatu sel mikroba dengan penampakn spesifik.
Selain keuntungan tersebut, metode hitungan cawan juga mempunyai
kelemahan sebagai berikut:
- Hasil perhitungan tidak

menunjukan

jumlah

sel

mikroba

yang

sesungguhnya, karena beberapa sel berdekatan mungkin membentuk satu
koloni.
- Medium dan kondisi yang berbeda mungkin menghasilkan nilai yang
berbeda
- Mikroba yang ditumbuhkan harus dapat tumbuh pada media medium padat
dan membentuk koloni yang kompak dan jelas, tidak menyebar.
- Memerlukan persiapan dan waktu inkubasi beberapa hari sehingga
pertumbuhan koloni baru dapat dihitung.

3.5 Angka Lempeng Total (ALT)
Angka lempeng total merupakan salah satu cara untuk menghitung
cemaran mikroba, dimana cara ini merupakan bagian dari metode hitung cawan.
Prinsip pada metode hitungan cawan adalah jika sel jasad renik yang masih
hidup ditumbuhkan pada medium agar, maka sel jasad renik tersebut akan
berkembang biak membentuk koloni yang dapat dilihat langsung dan dapat
dihitung dengan menggunakan mata tanpa mikroskop. Metode hitungan cawan
merupakan cara yang paling sensitif untuk menentukan jumlah jasad renik
karena beberapa hal yaitu :
1) Hanya sel yang masih hidup yang dapat dihitung.

2) Beberapa jenis jasad renik dapat dihitung satu kali.
3) Dapat digunakan untuk isolasi dan identitas jasad renik karena koloni yang
terbentuk mungkin berasal dari jasad renik yang menetap menampakkan
pertumbuhan yang spesifik.

3.6 Kromatografi Lapis Tipis (KLT)
Salah satu metode pemisahan yang sederhana ialah kromatografi lapis
tipis (Hortettmann, 1986). Pada dasarnya prinsip pada KLT mempunyai
kelebihan yang khas dibandingkan dengan kromatografi kertas yaitu
keserbagunaan, kecepatan, dan kepekaannya.
KLT dapat dipakai dengan dua tujuan. Pertama, dipakai sebagai metode
untuk mencapai hasil kualitatif, kuantitatif, ataupun preparatif. Kedua, dipakai
untuk menjajaki sistem pelarut dan sistem penyangga yang akan dipakai pada
kromatografi kolom atau Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (KCKT) (Gritter,
1991). Analisis dari KLT dapat membantu menentukan pelarut terbaik apa yang
akan dipakai dan berapa perbandingan antar pelarut yang akan digunakan
sebagai fasa gerak pada kromatografi.
Kromatografi lapis tipis sangat berhubungan dengan kromatografi kolom,
hal ini karena fasa fasa diam yang biasa digunakan dalam teknik keduanya
sama. Alumina dan silika gel adalah fase diam yang biasa digunakan, dan fase
geraknya menggunakan eluen yang sama. Walaupun demikian, tetap terdapat
perbedaan antara KLT dan kromatografi kolom. Fase gerak (cair) di dalam
kromatografi kolom bergerak turun, sedangkan dalam KLT bergerak naik.

Bahan fase diam yang digunakan dalam kromatografi kolom yang berupa kolom
digantikan dengan suatu lapisan tipis (tebalnya 100 nm) pada KLT, yang merata
pada seluruh bagian permukaannya. Bahan-bahan dari gelas atau lembaranlembaran plastik dapat digunakan sebagai bahan pendukung fase diam untuk
lapis tipisnya. Sangat dimungkinkan bagi kita untuk menyiapkan lembaran KLT
yang dari gelas, tetapi untuk yang bahan pendukungnya plastik hanya tersedia
secara komersil. Lembaran yang pendukungnya plastik sangat menarik karena
dapat dipotong dengan gunting menjadi lembaran-lembaran yang lebih kecil
dengan berbagai ukuran. Biasanya lembaran kecil itu berukuran 1x3 inci tetapi
untuk lembaran yang lebih kecil dapat disesuaikan (Mayo, 2000)
KLT mempunyai beberapa keuntungan, di antaranya adalah waktu yang
dibutuhkan tidak lama (2-5 menit) dan sampel yang dipakai hanya sedikit sekali
(2-2 mg). Kerugiannya dengan menggunakan KLT adalah tidak efektif untuk
skala industri. Walaupun lembaran KLT yang digunakan lebih besar dan tebal,
pemisahannya sering dibatasi hanya sampai beberapa miligram sampel saja
(Mayo, 2000). Larutan cuplikan atau sampel ditotolkan pada plat dengan pipet
mikro atau injektor pada jarak 1-2 cm dari batas plat. Setelah kering plat siap
untuk dikembangkan dengan fase gerak sampai pada batas tertentu. Proses
pengembangan dikerjakan dalam wadah tertutup yang diisi eluen dan telah
dijenuhi uap eluen agar dihasilkan pemisahan yang baik (Anwar, 1994).
Langkah selanjutnya yaitu mengeringkan sisa eluen dalam plat, kemudian
melakukan identifikasi yang dapat dilakukan dengan beberapa cara, yaitu:

pengamatan langsung (untuk noda/bercak yang tampak), dengan lampu
ultraviolet, atau dengan pereaksi semprot penimbul warna (Anwar, 1994).

3.7 Spektrofotometri
Dalam ilmu kefarmasian spektrofotometri digunakan untuk menganalisis
kadar obat. Spektrofotometri dapat mengindikasikan bahwa setiap obat harus
dapat bekerja secara maksimal dalam tubuh terutama dalam hal penyerapannya.
Prinsip yang digunakan adalah suatu molekul obat dapat menyerap ultraviolet
dan cahaya tampak dengan kemungkinan bahwa elektron molekul obat akan
tereksitas ke tingkat energi yang tinggi. Bertujuan untuk menentukan kadar obat
secara spektrofotometri serapan pada daerah ultraviolet dan cahaya tampak
(Hafni dan Martalius, 2009).
Spektrofotometri merupakan metode analisis yang didasarkan pada
absorpsi radiasi elektromagnet. Cahaya terdiri dari radiasi terhadap mana mata
manusia peka, gelombang dengan panjang berlainan akan menimbulkan cahaya
yang berlainan sedangkan campuran cahaya dengan panjang-panjang ini akan
menyusun cahaya putih. Cahaya putih meliputi seluruh spektrum nampak 400760 mm (Anonim, 1979 ).
Spektrofotometri ini hanya terjadi bila terjadi perpindahan elektron dari
tingkat energi yang rendah ke tingkat energi yang lebih tinggi. Perpindahan
elektron tidak diikuti oleh perubahan arah spin, hal ini dikenal dengan sebutan
tereksitasi singlet (Khopkar, 2003).

Keuntungan utama pemilihan metode spektrofotometri bahwa metode ini
memberikan metode sangat sederhana untuk menetapkan kuantitas zat yang
sangat kecil (Anonim, 1979).
Spektrofotometri menyiratkan pengukuran jauhnya penyerapan energi
cahaya oleh suatu sistem kimia itu sebagai suatu fungsi dari panjang gelombang
radiasi, demikian pula pengukuran penyerapan yang menyendiri pada suatu
panjang gelombang tertentu (Underwood, 1986).
Spektrofotometri dapat dianggap sebagai perluasan suatu pemeriksaan
visual dengan studi yang lebih mendalam dari absorbsi energi. Absorbsi radiasi
oleh suatu sampel diukur pada berbagai panjang gelombang dan dialirkan oleh
suatu sampel diukur pada berbagai panjang gelombang dan dialirkan oleh suatu
perkam untuk menghasilkan spektrum tertentu yang khas untuk komponen yang
berbeda.
Dalam analisa spektrofotometri digunakan suatu sumber radiasi yang
menjorok ke dalam daerah ultraviolet spektrum itu. Dari spektrum ini dipilih
panjang-panjang gelombang tertentu dengan lebar pita kurang dari 1 nm
(Anonim,2010).

BAB IV
METODE PENELITIAN

4.1 Laboratorium Mikrobiologi
4.1.1

Alat dan Bahan
Alat dan bahan yang dibutuhkan untuk pengujian sampel meliputi : aquadest,

NaCl 0,9%, media Plate Count Agar (PCA), media Potato Dextrose Agar (PDA),
kertas aaring, Alkohol 70%, Blue Tipp, Conical Tube 15 mL bertutup, tabung reaksi
15 mL, cawan petri diameter 100 mm, neraca analitik, finn pipet 10 mL, corong gelas
diameter 50 mm, pipet volume 100-1000 µL, autoklaf, vortex, oven, Laminer Air
Flow (LAF), inkubator, hot plate, magnetic stirer, coloni counter, erlenmeyer 1L, rak
tabung reaksi.
4.1.2 Persiapan Alat Uji
1. Cawan petri, corong kaca, kertas saring, tip, conical tube disiapkan dan
dibungkus dengan kertas dan plastik
2. Cawan petri, corong kaca, kertas saring, tipp disterilisasi dengan autoklaf pada
suhu 121ºC, 1 atm selama 30 menit dan dikeringkan dalam oven pada suhu
50ºC
3. LAF disterilisasikan dengan dilakukan penyemprotan alkohol 70% didalam
ruangan kemudian dilap dengan tisu, menyalakan airator, tutup ruang LAF,
dan menyalakan lampu UV selama 30 menit.
4.1.3 Persiapan Bahan Uji

1. Secara seksama dan aseptis ditimbang simplisia bahan jamu sebanyak 1 g dan
dimasukkan kedalam conikal tube.

2. NaCl ditimbang untuk membuat larutan 0,9% dalam 1 liter aquadest steril,
dituang kedalam tabung reaksi sebanyak 9 ml, ditutup dengan sumbat kassa
steril.
3. Media PDA dan PCA dibuat dengan cara dilarutkan dengan aquadest steril
dan dilanjutkan dengan pemanasan diatas Hot Plate Magnetic Stirer hingga
hampir mendidih.
4. Larutan NaCl 0,9%, media PCA dan media PDA disterilisasi dengan autoklaf
pada suhu 121ºC, 1 atm selama 15 menit.
Prosedur Penetapan Uji Cemaran Mikroba

4.1.4
5.
1. Tabung reaksi sebanyak 7 buah disiapkan dan diisi dengan 0,9% NaCl
2. Simplisia bahan uji dimasukkan kedalam tabung reaksi berisi 9 ml larutan
0,9% NaCl steril kemudian dihomogenkan menggunakan vortex dan disaring
(terbentuk pengenceran 10-1)
3. Sampel dari pengenceran pertama (10-1) dipipet 1 ml kedalam salah satu
tabung reaksi yang berisi 9 ml larutan 0,9% NaCl, berikutnya homogenkan
sehingga menjadi pengenceran 10-2.
4.
Pengenceran untuk Angka Lempeng Total (ALT) dilakukan hingga
pengenceran 10-6 dan pengenceran 10-1 hingga 10-4 untuk Angka Jamur (AJ)
5. Dari setiap pengenceran dipipet 1 ml kedalam cawan petri steril. Dilakukan
masing-masing secara duplo pada penetapan Angka Lempeng Total (ALT) dan
Angka Jamur (AJ)
6. Media PCA dituang untuk penetapan ALT sebanyak 15-20 mL yang masih
cair (suhu 45º± 1ºC) ke dalam cawan petri yang telah berisi pengenceran bahan
uji, homogenkan dengan cara memutar cawan petri searah jarum jam
sebanyak 5-10 kali putaran.
7. Media PDA dituang untuk penetapan AJ sebanyak 15-20 mL yang masih cair
(suhu 45º± 1ºC) kedalam cawan petri yang telah berisi pengenceran bahan uji,

homogenkan dengan cara memutar cawan petri searah jarum jam sebanyak 510 kali putaran.
8. Blanko dibuat sebagai kontrol sterilitas berupa media tanpa sampel dan NaCl.
9. Penetapan ALT diinkubator pada suhu 35ºC selama 24-48 jam (dua hari) dan
inkubasi dengan suhu 20°C-25°C atau suhu ruang selam 5-7 hari untuk
penetapan AJ.
10. Koloni yang tumbuh pada setiap seri pengenceran diamati dan dihitung.
5.1.4 Perhitungan Angka Jamur dan Angka Lempeng Total
1. Penetapan uji cemaran mikroba angka lempeng total dengan syarat sebagai
berikut :
-

Memilih cawan dengan jumlah koloni 30-300 koloni > 300
dinyatakan TNTC (Too Numerous To Count) atau TBOD (Terlalu
Banyak untuk Dihitung). 2

maka jumlah yang dilaporkan adalah jumlah koloni dari
-

pengenceran terendah.
Apabila setiap pengenceran dilakukan duplo maka jumlah koloni
yang dilaporkan adalah nilai rata-rata dari tingkat pengenceran
yang diperhitungkan.Kontrol dilakukan dengan menggunkan
media dengan penambahan NaCl dan tanpa NaCl. Setiap sampel

yang diujikan diperlakukan duplo.
2. Penetapan uji cemaran mikroba angka lempeng total dengan syarat sebagai
berikut :
-

Dipilih cawan petri dari satu pengenceran yang menunjukkan

-

jumlah koloni antara 40-60 koloni.
Bila hanya salah satu diantara kedua cawan petri dari pengenceran
yang sama menunjukkan jumlah antara 40-60 koloni, dihitung
jumlah koloni dari kedua cawan dan dikalikan dengan faktor

5.2

pengenceran
Laboratorium Instrumentasi

6.

4.2.1 Alat dan Bahan

7.

Alat yang digunakan dalam identifikasi dan penetapan kadar antara

lain: timbangan analitik, botol reagen, sonikaqtor, sentrifuse, mikro pipet, blue
tip, rak tabung, chamber, dan oven. Bahan yang digunakan adalah plat silica gel
60 F254, metanol, etanol, heksan, etil asetat, etanol absolut dan akuabides.
8. 4.2.2 Identifikasi Kurkumin dalam Sampel Temulawak dan Kunyit
1. Sampel ditimbang seksama masing-masing 100 mg
2. Sampel dilarutkan dengan masing-masing10 ml etanol p.a.
3. Sampel disonikasi selama 15 menit

4. Sampel diendapkan selama 24 jam atau disentrifuse selama 5 menit dengan
kecepatan 10.000 rpm
5. Disiapkan TLC visualizer
6. Plat silica gel 60 F254 disiapkan sebagi fase diam
7. Kloroform : etanol (25:1) dihomogenkan sebagai fase gerak
8. Sampel ditotolkan dengan automatic sampler Linomat 5 (sampel : 0,5 µl)
9. Sampel dieluasi pada fase gerak
10. Plat dikeringkan dengan cara diangin-anginkan
11. Visualisasi hasil noda dilakukan dengan TLC visualizer
9.
10. 4.2.3 Penetapan Kadar Andrografolid pada Sampel Sambiloto
1.
2.
3.
4.

Sampel ditimbang dengan seksama masing-masing 100 mg
Sampel dilarutkan dengan etanol pa masing-masing 10 ml
Sampel disonikasi selama 15 menit
Sampel diendapkan selama 24 jam atau disentrifuse selama 5 menit dengan

5.
6.
7.
8.

kecepatan 10.000 rpm
Disiapkan TLC visualizer
Plat silica gel 60 F254 disiapkan sebagai fase diam
Kloroformmetanol (9:1) disiapkan sebagai fase gerak
Sampel ditotolkan dengan automatic sampler Linomat 5 dengan volume

standart masing-masing 1 µl, 2 µl, 3 µl, 4 µl, 5 µl dan sampel : 3 µl
9. Sampel dieluasi pada fase gerak
10. Plat dikeringkan dengan cara diangin-anginkan
11. Visualisasi hasil noda pada TLC visualizer
12. Kadar andrografolid yang telah diperoleh kemudian dilakukan perhitungan
11. 4.2.4 Penetapan Kadar Total Flavonoid pada Sampel Meniran
1. Sampel ditimbang dengan seksama masing-masing 100 mg
2. Sampel dilarutkan dengan etanol pa masing-masing 10 ml
3. Sampel disonikasi selama 15 menit
4. Sampel diendapkan selama semalaman
5. Sampel diukur masing-masing 2 ml
6. Sampel diuapkan hingga kering pada oven dengan suhu 50°C
7. Sampel yang kering dilarutkan dengan metanol p.a. masing-masing 4 ml
8. Sonikasi sampel selama 15 menit
9. Sampel diendapkan selama semalam
10. Larutan uji dan blanko dipreparasi
- Blanko

12. 1 ml sampel + 4 ml akuabides
Larutan Uji
13. 1 ml sampel + 1 ml AlCl3 + 3 ml akuabides
11. Sampel didiamkan selama 15-20 menit
12. Hasil TLC dibaca dengan Scaner pada λ 425 nm
13. Total flavonoid yang telah diperoleh kemudian dilakukan perhitungan
-

14. 4.2.5 Penetapan Kadar Kurkumin
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.

Sampel ditimbang dengan seksama masing-masing 100 mg
Sampel dilarutkan dengan etanol pa masing-masing 10 ml
Sonikasi sampel selama 15 menit
Sampel diendapkan selama semalam
Plat silica gel 60 F245 disiapkan sebagai fase diam
Heksan : Etil Asetat ( 1:1 ) disiapkan sebagai fase gerak
Sampel ditotolkan dengan automatic sampler Linomat 5 dengan volume
standart masing-masing 0,2 µl, 0,4 µl, 0,6 µl, 0,8 µl, 1,0 µl, sampel kunyit 0,1

µl dan sampel temulawak : 0,5 µl
8. Sampel dieluasi pada fase gerak
9. Plat dikeringkan dengan cara di angin-anginkan
10. Hasil TLC dibaca dengan Scaner pada λ 425 nm
11. Visualisasi hasil dibaca pada TLC visualizer
12. Kadar kurcuminoid yang telah diperoleh kemudian dilakukan perhitungan
15. 4.2.6 Penetapan Kadar Sinensetin pada Sampel Kumis Kucing
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Sampel ditimbang dengan seksama masing-masing 100 mg
Sampel dilarutkan dengan masing-masing 10 ml etanol pa
Sampel dilakukan sonikasi sampel selama 15 menit
Sampel diendapkan (semalam)
Kloloroform : Etil asetat (6:4) disiapkan sebagai fase diam
Penotolan dilakukan dengan automatic sampler Linomat 5 dengan volume

standart 0,2 µl, 0,4 µl 0,6 µl, 0,8 µl 1,0 µl dan sampel
7. Sampel dieluasi pada fase gerak
8. Plat dikeringkan dengan cara diangin-anginkan
9. Hasil TLC dibaca dengan scaner pada λ 366 nm
10. Visualiasi hasil dibaca pada TLC visualizer
11. Diolah data kadar Sinensetin
16.

: 3 µl

17.

18. BAB V
19. HASIL DAN PEMBAHASAN
20.
21. 5.1 Uji Parameter Cemaran Mikroba
22. 5.1.1 Uji Angka Lempeng Total (ALT)
23.

Hasil pengujian angka lempeng total dari simplisia tempuyung,
secang, temulawak, pegagan, kunyit dan kumis kucing dapat dilihat pada tabel
5.1, tabel 5.2, tabel 5.3, tebel 5.4, tabel 5.5 dan tabel 5.6

24. Tabel 5.1 Hasil Uji Angka Lempeng Total (ALT) dari Sampel Tempuyung
25. Ju
ml
ah
Kol
oni
34. Ula
nga
nI
41. Ula
nga
n II
48.

28. 101

29. 102

26. Pengenceran
30. 1031. 103

4

32. 1
0-

33. 1
0

5

6

35. -

36. 21
0

37. 88

38. 13

39. 1

40. 0

42. -

43. 31
1

44. 51

45. 5

46. 0

47. 0

49.
50. Tabel 5.2 Hasil Uji Angka Lempeng Total (ALT) dari Sampel Secang
51. Ju
ml
ah
Kol
oni
60. Ula
nga
nI
67. Ula
nga
n II
74.

54. 101

55. 102

52. Pengenceran
56. 1057. 103

4

58. 1
05

59. 1
0
6

61. 24

62. 2

63. 1

64. 0

65. 0

66. 0

68. 84

69. 1

70. 2

71. 0

72. 0

73. 0

75.
76. Tabel 5.3 Hasil Uji Angka Lempeng Total (ALT) dari Sampel Temulawak
77. Ju
mla
h
Kol
oni
82. Ula
nga
nI
85. Ula
nga
n II
88.

78. Pengenceran
80. 10-3
81. 10-4

83. 137

84. 102

86. 152

87. 120

89. Tabel 5.4 Hasil Uji Angka Lempeng Total (ALT) dari Sampel Pegagan
90. Ju
mla
h
Kol
oni
95. Ula
nga
nI
98. Ula
nga
n II

91. Pengenceran
93. 10-3
94. 10-4

96. 11
99. 52

97. 31
100.
13

101.
102.
103.

Tabel 5.5 Hasil Uji Angka Lem