UJI INVIO INVITRO CAIRAN SERVIK DAN KAPASITASI SPERMA

(1)

Curriculum Vitae KMA

• _{Education :}_{Education :}

1. FoM Unsri 1977FoM Unsri 1977 2.

2. FoM Unair 1982FoM Unair 1982 3.

3. FoM Monash Univ. 1983FoM Monash Univ. 1983

• Post :_{Post :}

1. Professor Andrology & MBProfessor Andrology & MB 2.

2. Former Dean FoM UnsriFormer Dean FoM Unsri 3.

3. WHO Temporary AdvisorWHO Temporary Advisor 4.

4. Members Executive Members Executive council PANDI

council PANDI 5.

5. President PANDIPresident PANDI 6.

6. President PERSANDIPresident PERSANDI 7.

7. Member of Indonesian Member of Indonesian Andrology Collegium Andrology Collegium 8.

8. Dean FoM Muhammadiyah Dean FoM Muhammadiyah University Palembang

University Palembang

• _{Education :}_{Education :}

1. FoM Unsri 1977FoM Unsri 1977 2.

2. FoM Unair 1982FoM Unair 1982 3.

3. FoM Monash Univ. 1983FoM Monash Univ. 1983

• _{Post :}_{Post :}

1. Professor Andrology & MBProfessor Andrology & MB 2.

2. Former Dean FoM UnsriFormer Dean FoM Unsri 3.

3. WHO Temporary AdvisorWHO Temporary Advisor 4.

4. Members Executive Members Executive council PANDI

council PANDI 5.

5. President PANDIPresident PANDI 6.

6. President PERSANDIPresident PERSANDI 7.

7. Member of Indonesian Member of Indonesian Andrology Collegium Andrology Collegium 8.

8. Dean FoM Muhammadiyah Dean FoM Muhammadiyah University Palembang

(2)

UJI IN-VIVO DAN IN-VITRO

CAIRAN SERVIKS DAN KAITAN

DENGAN RESPON IMUN DAN

KAPASITASI SPERMA

(3)

Pokok bahasan

1. Pendahuluan

_Pendahuluan

2. Faktor Imunologik

Infertilitas

3. Fertilisasi dan

_{Fertilisasi dan}

implantasi

4. Kapasitasi Sperma

5.

(4)

1. PENDAHULUAN

• _{Faktor Etiologi PIA :}

1. Suami, 23 %

2. Istri, 49 %

3. Unexplained,

_Unexplained,

28 %

_{28 %}

• Dari 28 % unexplained ,

_{Dari 28 % unexplained ,}

10 – 15 %

_{10 – 15 %}

disebabkan oleh faktor

immunologik,

(5)

Faktor Immunologik Infertilitas

In infertile women

・

・　　Autoimmunity to ovaries Autoimmunity to ovaries

― ― autoimmune autoimmune

oophoritis

　　― ― antibodies to zona antibodies to zona

pellucida

・　

・　 Isoimmunity to spermIsoimmunity to sperm

― ― antibodies to spermantibodies to sperm

・

・ autoimmune diseases_{autoimmune diseases} ―

― autoimmune autoimmune

thyroiditis

thyroiditis ― ―

antiphospholipid antibody

syndrome

・　

・　 EndometriosisEndometriosis

― ― inflammatory cytokines inflammatory cytokines

and chemokines

In infertile men

・　

・　 Autoimmunity to testis _{Autoimmunity to testis}

― ― autoimmune autoimmune

orchitis

― ― antibodies to antibodies to

sperm

(6)

KATEGORI RESPON IMUN PADA

WANITA

• _{Di dalam tubuh wanita ada 5}

kategori Respon imune :

1. HLA (Human Leukocyte Antigen)

2. APA (Antiphospholipid Antibodies)

3. ANA (Antinuclear Antibodies)

4. ASA (Antisperm Antibodies)

(7)

(8)

(9)

3 FASE PENETRASI Oocyte OLEH

SPERMA

(10)

REAKSI ACROSOME

(11)

REAKSI ACROSOME

(12)

(13)

PEMERIKSAAN INTERAKSI

SPERMA DAN LENDIR

SERVIKS

• _{Pemeriksaan interaksi}

spermatozoa dengan lendir

serviks ada 2

:

IN VIVO

Uji pasca senggama

IN VITRO

Simplified slide test

(14)

UJI PASCA SENGGAMA

• TUJUAN :_{TUJUAN :}

1. Menentukan jumlah spermatozoa aktif dan1. Menentukan jumlah spermatozoa aktif dan

menilai sperm survival di dalam lendir menilai sperm survival di dalam lendir serviks

serviks

(Sobrero & Mc Leod, 1962),(Sobrero & Mc Leod, 1962),

2. Meevaluasi perilaku sperma beberapa jam 2. Meevaluasi perilaku sperma beberapa jam

setelah coitus (peran resevoir lendir servisk setelah coitus (peran resevoir lendir servisk

(Moghissi, 1976).(Moghissi, 1976).

3. Penilaian adanya antibodi sperma pada pria3. Penilaian adanya antibodi sperma pada pria

atau wanita.atau wanita.

(15)

UJI PASCA SENGGAMA

• WAKTU :_{WAKTU :}

• _{Waktu pemeriksaan Uji Pasca Senggama}_{Waktu pemeriksaan Uji Pasca Senggama}

dilakukan sedekat mungkin dengan waktu

Ovulasi tetapi tetap sebelum ovulasi

Ovulasi tetapi tetap sebelum ovulasi..

• Penentuan didasarkan pada :_{Penentuan didasarkan pada :}

• Siklus haid , BBT, Perubahanan cairan _{Siklus haid , BBT, Perubahanan cairan}

serviks,

• Sitologi vaginal, Pemeriksaan Hormon LH _{Sitologi vaginal, Pemeriksaan Hormon LH}

dan Estrogen .

• _{Cairan serviks diperiksa di lab antara 9 –}_{Cairan serviks diperiksa di lab antara 9 –}

14 jam setelah senggama

(16)

UJI PASCA SENGGAMA

• INSTRUKSI UNTUK PIA :

_{INSTRUKSI UNTUK PIA :}

1. Abstinensia seksualis 2 hari,

2. Senggama dilakukan pada

malam sebelum tanggal

pemeriksaan,

(17)

UJI PASCA SENGGAMA

• _{PROSEDUR PEMERIKSAAN}

_:

• Masukkan speculum tanpa pelicin ke

_{Masukkan speculum tanpa pelicin ke}

dalam vagina,

• _{Ambil sebanyak mungkin cairan semen}

di fornix posterior vagina dengan : spuit

tuberclin tanpa jarum, ataupipet pasteur

• _{Dengan pipet atau spit lain diisap}

secukupnya cairan seviks dari canalis

endocervicalis,

• _{Teteskan cairan serviks ke atas objek}

glass dan tutup dengan gelas penutup

(18)

UJI PASCA SENGGAMA

• YANG DIPERIKSA

_{YANG DIPERIKSA}

;

1. Vaginal pool semen sample

2. Lendir seviks

3.

(19)

UJI PASCA SENGGAMA

• YANG DIPERIKSA ;

_{YANG DIPERIKSA ;}

1. Vaginal pool semen sample

- spermatozoa mati dalam

waktu 2 jam di dalam vagina

- periksa preparat basah dari

vaginal pool untuk memeriksa

adanya spermatozoa

(20)

UJI PASCA SENGGAMA

• YANG DIPERIKSA ;_{YANG DIPERIKSA ;}

2. Lendir seviks

- jumlah spermatozoa dibagian - jumlah spermatozoa dibagian bawah canalis cervicalis yang

bawah canalis cervicalis yang

dinyatakan per ul

- jumlah spermatozoa per x 400 - jumlah spermatozoa per x 400

HPF = 10 spermatozoa /20 nl lendir

serviks atau = 500 spermatozoa /ul

- Motilitas spermaatozoa di dalam - Motilitas spermaatozoa di dalam lendir serviks di rangking sbb:

lendir serviks di rangking sbb:

PR = progressive motilityPR = progressive motility

(21)

UJI PASCA SENGGAMA

Hasil uji pasca senggama

• _{Interpretasi :}

• _{Uji negatif jika tidak dijumpai}

spermatozoa,

• _{Jika dijumpai PR spermatozoa di}

endocervik AB (-) (Oei et al, 1995)

• _{Jika dijumpai NP spermatozoa dengan}

shaking phenomenon > AB (+) di

cairan serviks atau di spermatozoa

(22)

FORM UJI PASCA

SENGGMA

(23)

PEMERIKSAAN IN -

VITRO

• Uji In vitro dilakukan jika _{Uji In vitro dilakukan jika}

Uji Psaca Senggama Negatif,

• Menjadi lebih informatif jika di _{Menjadi lebih informatif jika di}

lakukan dengan uji silang

memakai sperma donor dan lendir

serviks donor,

• Memakai lendir serviks tengah _{Memakai lendir serviks tengah}

siklus

(24)

PEMERIKSAAN IN -

VITRO

• _{Tujuan pemeriksaan in-vitro :}_{Tujuan pemeriksaan in-vitro :}

1. Untuk membandingkan berbagai

kualitas berbagai macam lendir

serviks,

2. Untuk menilai berbagai kualitas

sample sperma

• _{Ada 2 :}_{Ada 2 :}

1.

(25)

1. SIMPLIFIED SLIDE TEST

• Prosedur :_{Prosedur :}

• Teteskan lendir servikke atas objek glas _{Teteskan lendir servikke atas objek glas}

kemudian t berutup dengan gelas penutup agar kemudian t berutup dengan gelas penutup agar

lendir merata di bawah glas ppenutup, lendir merata di bawah glas ppenutup,

• Teteskan semen di tiap sisi gelas penutup _{Teteskan semen di tiap sisi gelas penutup}

sehingga semen bis berkontak dengan lendir sehingga semen bis berkontak dengan lendir

servik servik

• Masukkan ke dalam inkubator selama 3 ment _{Masukkan ke dalam inkubator selama 3 ment} pada temperatur 37 C ( gelas objek di taruh pada temperatur 37 C ( gelas objek di taruh

pada pada

• Petri dish di alaskertas basah dan di tutup_{Petri dish di alaskertas basah dan di tutup}

(26)

1. SIMPLIFIED SLIDE TEST

• _{Pengamatan :}

• _{Penetrasi semen ke lendir servik}

• _{Penetrasi semen ke lendir serviks}

tetap terjadi meskipun Azoospermia,

• _{Spermatozoa masuk ke dalam lendir}

serviks melalaui penetrasi ini yang

berbentuk phalanges

(27)

1. SIMPLIFIED SLIDE TEST

• _{Interpretasi :}

• _{Normal jika spermatozoa yang}

menembus lendir serviks 90% motil,

• _{Buruk : jika spermatozoa tidak}

mampu menembus lendir

serviksepanjang 500u, ini

menujukkan adanya masala pada

interaksi semen dan lendir serviks,

(28)

1. SIMPLIFIED SLIDE TEST

• Interpretasi :_{Interpretasi :}

• Abnormal :_{Abnormal :}

• 1. spermatozoa berhasil menembus lendir _{1. spermatozoa berhasil menembus lendir}

servikstetapi segera menjadi immotile

atau shaking phenomenon, atau

• 2. spermatozoa tidak menembus semen- _{2. spermatozoa tidak menembus semen-}

lendir servisk interfase dan phalanges

tidak terbentuk. Ini menunjukka adanya

Anti bodi antisperm I lendir servis atau di

(29)

CAPILLARY TUBE TEST

• Capilary tube test aslinya didesain oleh Kremer (1965), dan saat ini ada banya modifikasinya

• Tes ini mengukur kemampuan spermatozoa untuk menembus colum lendir serviks yang ada dalam tabung kapiler..

• Prosedur terdiri dari : 1.

1. PeralatanPeralatan 2.

2. Teknis pemeriksaanTeknis pemeriksaan 3.

3. ObservasiObservasi 4.

(30)

2. CAPILLARY TUBE

TEST

(31)

2. CAPILLARY TUBE

TEST

2. Prosedur :

1. Masukkan 100ul semen yang telah likuefaksi

1 jam setelah ejakulasi ke dalam reservoar ,

2. Isap lendir serviks ke dalam kapiler, dan

tutup salah satu ujungnya dengan dempul

3. Masukkan ujung kapiler yang terbuka ke

tabung reservoar dengan jarak 0,5 cm

4. letakkan dalam posisi horizontal dalam

inkubator dengan suhu 37o C selama 2 jam,

5. Amati pipa kapiler dengan mikroskop

pembesaran 100 x

6 . Masukkan kembali keinkubator dan amati

kembal setelah 24 jam

(32)

2. CAPILLARY TUBE

TEST

3. Pengamatan :

Setelah 2 jam periksa jarak migrasi Setelah 2 jam periksa jarak migrasi

kepadatan penetrasi, pengurangan migrasi

dan spermatozoa dengan forward motility,

a. Jarak migrasi : catat jarak dari ujung a. Jarak migrasi : catat jarak dari ujung kapiler yang ada dalam reservoar sampai

kapiler yang ada dalam reservoar sampai

jarak terjauh spermatozoa di dalam

kapiler,

b. Kepadatan penetrasi : ukur di 1 dan 4,5 b. Kepadatan penetrasi : ukur di 1 dan 4,5 cm dari ujung kapiler dalam reservoar.

cm dari ujung kapiler dalam reservoar.

Pada tiap jarak tersebut catat jumlah

(33)

2. CAPILLARY TUBE

TEST

3. Pengamatan :

(34)

2. CAPILLARY TUBE

TEST

4. Interpretasi :

(35)

KESIMPULAN

• _{Adanya respon imun dari wanita pada}

lendir servik dapat mencegah penetrasi

spermatozoa melalaui lendir serviks untuk

proses fertilisasi di tuba,

• Adanya antibodi pada sperma

_{Adanya antibodi pada sperma}

menyebabkan sperma tidak dapat

menembus lendir serviks

• _{Kegagalan dalam proses penetrasi sperma}

karena tidak baiknya proses reaksi

acrosome

(36)

KESIMPULAN

(37)

KESIMPULAN

(38)

S A R A N

• UJI REAKSI SPERMA LENDIR

_{UJI REAKSI SPERMA LENDIR}

SERVIKS PADA PIA HARUS

DILAKUKAN UNTUK MENCARI

FAKTOR IMUN SEBAGAI

PENYEBAB,

• UJI YANG DIANJURKAN :

_{UJI YANG DIANJURKAN :}

1.

(39)

(40)

(1)

KESIMPULAN

• _{Adanya respon imun dari wanita pada}_{Adanya respon imun dari wanita pada} lendir servik dapat mencegah penetrasi lendir servik dapat mencegah penetrasi

spermatozoa melalaui lendir serviks untuk spermatozoa melalaui lendir serviks untuk

proses fertilisasi di tuba, proses fertilisasi di tuba,

• Adanya antibodi pada sperma _{Adanya antibodi pada sperma}

menyebabkan sperma tidak dapat menyebabkan sperma tidak dapat

menembus lendir serviks menembus lendir serviks

• _{Kegagalan dalam proses penetrasi sperma}_{Kegagalan dalam proses penetrasi sperma} karena tidak baiknya proses reaksi

karena tidak baiknya proses reaksi acrosome

(2)

KMA, HIGERI SURABAYA ,2011

KESIMPULAN

(3)

KESIMPULAN

(4)

KMA, HIGERI SURABAYA ,2011

S A R A N

• UJI REAKSI SPERMA LENDIR

_{UJI REAKSI SPERMA LENDIR}

SERVIKS PADA PIA HARUS

DILAKUKAN UNTUK MENCARI

FAKTOR IMUN SEBAGAI

PENYEBAB,

• UJI YANG DIANJURKAN :

_{UJI YANG DIANJURKAN :}

1. UJI PASCA SENGGAMA DAN

2.

(5)

(6)

KMA, HIGERI SURABAYA ,2011