Identifikasi Dan Uji Kapasitas Antioksidan Herba Seledri (Apium Graveolens L.) Secara Spektrofotometri Sinar Tampak
IDENTIFIKASI DAN UJI KAPASITAS
ANTIOKSIDAN HERBA SELEDRI
(Apium graveolens L.) SECARA
SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK
SKRIPSI
OLEH:
VIVIAN
NIM 091501040
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2013
Universitas Sumatera Utara
IDENTIFIKASI DAN UJI KAPASITAS
ANTIOKSIDAN HERBA SELEDRI
(Apium graveolens L.) SECARA
SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk
memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
VIVIAN
NIM 091501040
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2013
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
IDENTIFIKASI DAN UJI KAPASITAS ANTIOKSIDAN
HERBA SELEDRI (Apium graveolens L.) SECARA
SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK
OLEH:
VIVIAN
NIM 091501040
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 15 Juni 2013
Pembimbing I
Panitia Penguji,
Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt.
NIP 195401101980032001
Dra. Masfria, M.S., Apt.
NIP 195707231986012001
Pembimbing II
Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt.
NIP 195401101980032001
Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt.
NIP 195006221980021001
Dra. Saleha Salbi, M.Si., Apt.
NIP 194909061980032001
Dra. Siti Nurbaya, M.Si., Apt.
NIP 195008261974122001
Medan, Juni 2013
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Dekan,
Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.
NIP 195311281983031002
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala
limpahan rahmat dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan
penelitan dan penyusunan skripsi ini. Skripsi ini disusun untuk melengkapi
salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara, dengan judul Identifikasi dan Uji Kapasitas
Antioksidan Herba Seledri (Apium graveolens L.) secara Spektrofotometri
Sinar Tampak.
Pada kesempatan ini, dengan kerendahan hati dan hormat, penulis
mengucapkan terima kasih kepada Ibu Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt.,
dan Bapak Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt., yang telah membimbing dengan
sangat baik, memberikan petunjuk, saran-saran dan motivasi selama penelitian
hingga selesainya skripsi ini, Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.,
selaku Dekan Fakultas Farmasi USU Medan, yang telah memberikan
bimbingan dan penyediaan fasilitas sehingga penulis dapat menyelesaikan
pendidikan, Ibu Dra. Masfria, M.S., Apt., Ibu Dra. Saleha Salbi, M.Si., Apt.,
dan Ibu Dra. Siti Nurbaya, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah
memberikan kritik, saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan
skripsi ini, Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU Medan yang
telah mendidik selama perkuliahan, teman-teman yang selalu memberikan
dukungan, Riyan Tanady, Cut Shafa Safira dan Christine. Serta seluruh pihak
yang telah ikut membantu penulis namun tidak tercantum namanya.
Universitas Sumatera Utara
Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tiada
terhingga kepada kedua orangtua, Bong Syak Fo dan Deliana Junus, serta
abang tercinta, Benny, yang selalu mendukung, mendoakan dan memberikan
semangat.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih
jauh dari kesempurnaan. Oleh karena itu dengan segala kerendahan hati,
penulis menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya,
penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.
Medan, Juli 2013
Penulis,
Vivian
NIM 091501040
Universitas Sumatera Utara
IDENTIFIKASI DAN UJI KAPASITAS ANTIOKSIDAN DARI
HERBA SELEDRI (Apium graveolens L.) SECARA
SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK
ABSTRAK
Seledri (Apium graveolens L.) merupakan salah satu sayuran, dan
dalam pengobatan tradisional digunakan untuk antihipertensi. Berdasarkan
kandungan kimia herba seledri yang terdiri dari senyawa flavonoid dan
senyawa fenolik, herba seledri dapat dijadikan salah satu sumber antioksidan
alami. Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi, menguji dan
membandingkan kapasitas antioksidan dari herba seledri yang dimaserasi
dengan sediaan jamu herba seledri.
Identifikasi antioksidan dilakukan dengan menentukan daya reduksi
dari herba seledri, menggunakan reaksi Ag ammoniakal dan reaksi Fehling. Uji
kapasitas antioksidan dilakukan dengan metode fosfomolibdenum, yang akan
mereduksi Mo (VI) menjadi Mo (V) yang terdapat dalam kompleks
fosfomolibdenum pada pH asam, sehingga terjadi perubahan warna menjadi
warna hijau. Warna yang terbentuk diukur menggunakan spektrofotometer
sinar tampak pada panjang gelombang 711 nm.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa herba seledri memiliki sifat
antioksidan, karena memberikan hasil positif terhadap reaksi Ag Ammoniakal
dan reaksi Fehling. Hasil maserasi 1 g herba seledri segar ekivalen dengan
kapasitas antioksidan vitamin C seberat (0,59 ± 0,0847) mg, dan 1 g ekstrak
herba seledri dari sediaan jamu herba seledri ekivalen dengan kapasitas
antioksidan vitamin C seberat (31,07 ± 5,8049) mg.
Dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa herba seledri memiliki
sifat antioksidan dan terdapat adanya perbedaan kapasitas antioksidan antara
hasil maserasi herba seledri dan sediaan jamu herba seledri.
Kata kunci: Herba seledri, Apium graveolens L., antioksidan, fosfomolibdenum
vi
Universitas Sumatera Utara
IDENTIFICATION AND DETERMINATION OF ANTIOXIDANT
CAPACITY OF CELERY (Apium graveolens L.) HERB USING
VISIBLE SPECTROPHOTOMETRY METHOD
ABSTRACT
Celery (Apium graveolens L.) is a kind of vegetable and is used in
traditional medicinal as antihypertension. Based on its flavonoid and phenolic
compounds content, celery can be a source of natural antioxidants. The
objectives of this experiment are to identify, determine and compare the
antioxidant capacity from macerated celery herb and traditional dosage form of
celery herb.
The method of antioxidant identification is by determining the
reducing properties of celery herb using silver nitrate ammoniacal reaction and
Fehling reaction. The antioxidant capacity determination is done by
phosphomolybdenum method, which will reduce Mo (VI) into Mo (V) in
phosphomolybdenum complex in acidic pH so that the colour of the solution
changed into green colour. This green colour is measured by visible
spectrophotometer on 711 nm wavelength.
The results showed that the celery herb has antioxidant properties, by
determining its reduction properties as it gave positive results towards silver
nitrate ammoniacal reaction and Fehling reaction. 1 gram macerated fresh
celery herb is equivalent to antioxidant capacity of (0.59 ± 0.0847) mg vitamin
C and 1 gram of celery herb extract from the traditional dosage form of celery
herb is equivalent to antioxidant capacity of (31.07 ± 5.89049) mg.
From this research, it can be concluded that celery herb has
antioxidant properties and the macerated celery herb and the traditional dosage
form of celery herb have different antioxidant capacity.
Keywords:
Celery
phosphomolybdenum
herb,
Apium
graveolens
L.,
antioxidant,
vii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................
iii
KATA PENGANTAR ...............................................................................
iv
ABSTRAK .................................................................................................
vi
ABSTRACT ............................................................................................... vii
DAFTAR ISI .............................................................................................. viii
DAFTAR TABEL ....................................................................................... xii
DAFTAR GAMBAR ................................................................................. xiii
DAFTAR LAMPIRAN .............................................................................. xiv
BAB I PENDAHULUAN ........................................................................
1
1.1 Latar Belakang .......................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah ...............................................................
4
1.3 Hipotesis Penelitian ...............................................................
4
1.4 Tujuan Penelitian ...................................................................
5
1.5 Manfaat Penelitian .................................................................
5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..............................................................
6
2.1 Uraian Umum .........................................................................
6
2.1.1 Taksonomi Seledri ............................................................
6
2.1.2 Deskripsi Herba Seledri ....................................................
6
2.1.3 Kandungan Kimia Herba Seledri ......................................
7
2.2 Antioksidan ............................................................................
7
viii
Universitas Sumatera Utara
2.2.1 Mekanisme Antioksidan ...................................................
8
2.2.2 Defisiensi Antioksidan .....................................................
9
2.3 Senyawa Fenol .......................................................................
9
2.4 Reaksi Oksidasi-Reduksi ....................................................... 11
2.5 Reaksi Ag Ammoniakal ......................................................... 11
2.6 Reaksi Fehling ....................................................................... 12
2.7 Metode Fosfomolibdenum ..................................................... 12
2.8 Vitamin C ............................................................................... 13
2.9 Spektrofotometri .................................................................... 13
2.10 Validasi Metode Analisis ..................................................... 16
BAB III METODE PENELITIAN ............................................................ 19
3.1 Tempat dan Waktu Penelitian ............................................... 19
3.2 Bahan-bahan .......................................................................... 19
3.2.1 Sampel .............................................................................. 19
3.2.2 Pereaksi ............................................................................ 19
3.3 Alat-alat ................................................................................. 19
3.4 Pembuatan Pereaksi .............................................................. 20
3.4.1 Pereaksi Ag Ammoniakal ................................................ 20
3.4.2 Pereaksi Fehling ............................................................... 20
3.4.3 Pereaksi Fosfomolibdenum .............................................. 20
3.5 Prosedur Penelitian ............................................................... 20
3.5.1 Pengambilan Sampel ........................................................ 20
3.5.2 Identifikasi Sampel .......................................................... 21
ix
Universitas Sumatera Utara
3.5.3 Pengolahan Sampel .......................................................... 21
3.5.4 Prosedur Maserasi Herba Seledri ..................................... 21
3.5.5 Identifikasi Sifat Antioksidan Berdasarkan Daya
Reduksi ............................................................................. 21
3.5.5.1 Reaksi Ag Ammoniakal ......................................... 21
3.5.5.2 Reaksi Fehling ........................................................ 22
3.5.6 Pengukuran Kapasitas Antioksidan .................................. 22
3.5.6.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Vitamin C ........... 22
3.5.6.2 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum ........... 22
3.5.6.3 Penentuan Waktu Kerja .......................................... 22
3.5.6.4 Pengukuran Kurva Kalibrasi Vitamin C ................. 23
3.5.6.5 Pengukuran Kapasitas Antioksidan dari Hasil
Maserasi Herba Seledri ........................................... 23
3.5.6.6 Pengukuran Kapasitas Antioksidan dari Sediaan
Jamu Herba Seledri yang Beredar di Pasaran ......... 24
3.6 Penentuan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ...................... 24
3.7 Uji Akurasi dengan Persen Perolehan Kembali
(% Recovery) ........................................................................ 25
3.8 Analisis Data Secara Statistik ................................................ 25
3.8.1 Penolakan Hasil Pengamatan ........................................... 25
3.8.2 Simpangan Baku Relatif .................................................. 26
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................... 28
4.1 Identifikasi Antioksidan ......................................................... 28
4.2 Kapasitas Antioksidan ........................................................... 28
4.2.1 Panjang Gelombang Maksimum ...................................... 28
x
Universitas Sumatera Utara
4.2.2 Waktu Kerja ..................................................................... 29
4.2.3 Kurva Kalibrasi Vitamin C .............................................. 30
4.2.4 Hasil Uji Kapasitas Antioksidan dari Hasil Maserasi
Herba Seledri .................................................................... 31
4.2.5 Hasil Uji Kapasitas Antioksidan dari Sediaan Jamu
Herba Seledri yang Beredar di Pasaran ............................ 32
4.2.6 Pembahasan Kapasitas Antioksidan dari Hasil Maserasi
Herba Seledri dengan Sediaan Jamu Herba Seledri ......... 33
4.3 Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ....................................... 34
4.4 Persen Perolehan Kembali (% Recovery) .............................. 34
4.5 Simpangan Baku Relatif ....................................................... 35
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ................................................... 36
5.1 Kesimpulan ........................................................................... 36
5.2 Saran ...................................................................................... 36
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................ 37
LAMPIRAN ............................................................................................... 40
xi
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
3.1
Nilai Qkritis pada Taraf Kepercayaan 95% ........................................ 26
4.1
Hasil Identifikasi Antioksidan Secara Reaksi Kimia dari Hasil
Maserasi Herba Seledri ..................................................................... 28
4.2
Hasil Uji Kapasitas Antioksidan dari Hasil Maserasi Herba Seledri
4.3
Hasil Uji Kapasitas Antioksidan dari Sediaan Jamu Herba Seledri . 32
4.4
Hasil Kapasitas Antioksidan Sampel ................................................ 33
31
xii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1
Reaksi Fenol ...................................................................................... 10
2.2
Stabilisasi Radikal Fenoksi oleh Resonansi ...................................... 10
2.3
Diagram Blok dari Instrumen Spektrofotometer UV/Vis ................. 15
4.1
Kurva Panjang Gelombang Maksimum Vitamin C dengan
Konsentrasi 12,7273 µg/ml ............................................................... 29
4.2
Kurva Waktu Kerja ........................................................................... 30
4.3
Kurva Kalibrasi Vitamin C pada Panjang Gelombang 711 nm ........ 30
xiii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1. Perhitungan Bahan-bahan untuk Pembuatan 100 ml Pereaksi
Fosfomolibdenum ....................................................................................
40
2. Waktu Kerja .............................................................................................
42
3. Contoh Perhitungan Konsentrasi Larutan Standar Vitamin C
untuk Penentuan Kurva Kalibrasi ............................................................
43
4. Kurva Kalibrasi Larutan Vitamin C dengan Berbagai
Konsentrasi pada Panjang Gelombang 711 nm .......................................
44
5. Bagan Kerja ..............................................................................................
45
6. Perhitungan Persamaan Garis Regresi .....................................................
47
7. Perhitungan Koefisien Korelasi ...............................................................
49
8. Gambar Hasil Identifikasi Antioksidan ....................................................
50
9. Contoh Perhitungan Kapasitas Antioksidan dari Hasil Maserasi
Herba Seledri ............................................................................................
51
10. Pengukuran Kapasitas Antioksidan dari Hasil Maserasi Herba
Seledri ......................................................................................................
52
11. Contoh Perhitungan Kapasitas Antioksidan dari Sediaan Jamu
Herba Seledri yang Beredar di Pasaran ....................................................
53
12. Pengukuran Kapasitas Antioksidan dari Sediaan Jamu Herba
Seledri yang Beredar di Pasaran ..............................................................
54
13. Uji t ..........................................................................................................
55
14. Contoh Perhitungan Perolehan Kembali Kapasitas Antioksidan
dengan Metode Penambahan Baku ..........................................................
58
15. Perhitungan Perolehan Kembali Sampel Hasil Maserasi Herba
Seledri dengan Metode Penambahan Baku ..............................................
59
xiv
Universitas Sumatera Utara
16. Perhitungan Perolehan Kembali Sampel Sediaan Jamu Herba
Seledri yang Beredar di Pasaran dengan Metode Penambahan
Baku .........................................................................................................
60
17. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) .............
63
18. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Kapasitas
Antioksidan dari Hasil Herba Seledri ....................................................
64
19. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Kapasitas
Antioksidan dari Sediaan Jamu Herba Seledri yang Beredar di
Pasaran .....................................................................................................
65
20. Hasil Identifikasi Tumbuhan ....................................................................
66
21. Gambar Herba Seledri (Apium Graveolens L.) ........................................
67
22. Sediaan Jamu Herba Seledri ....................................................................
67
23. Sertifikat Analisis Baku Pabrik Vitamin C ..............................................
68
24. Daftar Nilai Distribusi t ............................................................................
69
xv
Universitas Sumatera Utara
ANTIOKSIDAN HERBA SELEDRI
(Apium graveolens L.) SECARA
SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK
SKRIPSI
OLEH:
VIVIAN
NIM 091501040
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2013
Universitas Sumatera Utara
IDENTIFIKASI DAN UJI KAPASITAS
ANTIOKSIDAN HERBA SELEDRI
(Apium graveolens L.) SECARA
SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk
memperoleh gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
OLEH:
VIVIAN
NIM 091501040
PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2013
Universitas Sumatera Utara
PENGESAHAN SKRIPSI
IDENTIFIKASI DAN UJI KAPASITAS ANTIOKSIDAN
HERBA SELEDRI (Apium graveolens L.) SECARA
SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK
OLEH:
VIVIAN
NIM 091501040
Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi
Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara
Pada Tanggal: 15 Juni 2013
Pembimbing I
Panitia Penguji,
Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt.
NIP 195401101980032001
Dra. Masfria, M.S., Apt.
NIP 195707231986012001
Pembimbing II
Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt.
NIP 195401101980032001
Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt.
NIP 195006221980021001
Dra. Saleha Salbi, M.Si., Apt.
NIP 194909061980032001
Dra. Siti Nurbaya, M.Si., Apt.
NIP 195008261974122001
Medan, Juni 2013
Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara
Dekan,
Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.
NIP 195311281983031002
Universitas Sumatera Utara
KATA PENGANTAR
Puji syukur penulis ucapkan kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala
limpahan rahmat dan karuniaNya, sehingga penulis dapat menyelesaikan
penelitan dan penyusunan skripsi ini. Skripsi ini disusun untuk melengkapi
salah satu syarat mencapai gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi
Universitas Sumatera Utara, dengan judul Identifikasi dan Uji Kapasitas
Antioksidan Herba Seledri (Apium graveolens L.) secara Spektrofotometri
Sinar Tampak.
Pada kesempatan ini, dengan kerendahan hati dan hormat, penulis
mengucapkan terima kasih kepada Ibu Dra. Tuty Roida Pardede, M.Si., Apt.,
dan Bapak Dr. Muchlisyam, M.Si., Apt., yang telah membimbing dengan
sangat baik, memberikan petunjuk, saran-saran dan motivasi selama penelitian
hingga selesainya skripsi ini, Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.,
selaku Dekan Fakultas Farmasi USU Medan, yang telah memberikan
bimbingan dan penyediaan fasilitas sehingga penulis dapat menyelesaikan
pendidikan, Ibu Dra. Masfria, M.S., Apt., Ibu Dra. Saleha Salbi, M.Si., Apt.,
dan Ibu Dra. Siti Nurbaya, M.Si., Apt., selaku dosen penguji yang telah
memberikan kritik, saran dan arahan kepada penulis dalam menyelesaikan
skripsi ini, Bapak dan Ibu staf pengajar Fakultas Farmasi USU Medan yang
telah mendidik selama perkuliahan, teman-teman yang selalu memberikan
dukungan, Riyan Tanady, Cut Shafa Safira dan Christine. Serta seluruh pihak
yang telah ikut membantu penulis namun tidak tercantum namanya.
Universitas Sumatera Utara
Penulis juga mengucapkan terima kasih dan penghargaan yang tiada
terhingga kepada kedua orangtua, Bong Syak Fo dan Deliana Junus, serta
abang tercinta, Benny, yang selalu mendukung, mendoakan dan memberikan
semangat.
Penulis menyadari sepenuhnya bahwa dalam penulisan skripsi ini masih
jauh dari kesempurnaan. Oleh karena itu dengan segala kerendahan hati,
penulis menerima kritik dan saran demi kesempurnaan skripsi ini. Akhirnya,
penulis berharap semoga skripsi ini dapat memberi manfaat bagi kita semua.
Medan, Juli 2013
Penulis,
Vivian
NIM 091501040
Universitas Sumatera Utara
IDENTIFIKASI DAN UJI KAPASITAS ANTIOKSIDAN DARI
HERBA SELEDRI (Apium graveolens L.) SECARA
SPEKTROFOTOMETRI SINAR TAMPAK
ABSTRAK
Seledri (Apium graveolens L.) merupakan salah satu sayuran, dan
dalam pengobatan tradisional digunakan untuk antihipertensi. Berdasarkan
kandungan kimia herba seledri yang terdiri dari senyawa flavonoid dan
senyawa fenolik, herba seledri dapat dijadikan salah satu sumber antioksidan
alami. Penelitian ini bertujuan untuk mengidentifikasi, menguji dan
membandingkan kapasitas antioksidan dari herba seledri yang dimaserasi
dengan sediaan jamu herba seledri.
Identifikasi antioksidan dilakukan dengan menentukan daya reduksi
dari herba seledri, menggunakan reaksi Ag ammoniakal dan reaksi Fehling. Uji
kapasitas antioksidan dilakukan dengan metode fosfomolibdenum, yang akan
mereduksi Mo (VI) menjadi Mo (V) yang terdapat dalam kompleks
fosfomolibdenum pada pH asam, sehingga terjadi perubahan warna menjadi
warna hijau. Warna yang terbentuk diukur menggunakan spektrofotometer
sinar tampak pada panjang gelombang 711 nm.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa herba seledri memiliki sifat
antioksidan, karena memberikan hasil positif terhadap reaksi Ag Ammoniakal
dan reaksi Fehling. Hasil maserasi 1 g herba seledri segar ekivalen dengan
kapasitas antioksidan vitamin C seberat (0,59 ± 0,0847) mg, dan 1 g ekstrak
herba seledri dari sediaan jamu herba seledri ekivalen dengan kapasitas
antioksidan vitamin C seberat (31,07 ± 5,8049) mg.
Dari penelitian ini dapat disimpulkan bahwa herba seledri memiliki
sifat antioksidan dan terdapat adanya perbedaan kapasitas antioksidan antara
hasil maserasi herba seledri dan sediaan jamu herba seledri.
Kata kunci: Herba seledri, Apium graveolens L., antioksidan, fosfomolibdenum
vi
Universitas Sumatera Utara
IDENTIFICATION AND DETERMINATION OF ANTIOXIDANT
CAPACITY OF CELERY (Apium graveolens L.) HERB USING
VISIBLE SPECTROPHOTOMETRY METHOD
ABSTRACT
Celery (Apium graveolens L.) is a kind of vegetable and is used in
traditional medicinal as antihypertension. Based on its flavonoid and phenolic
compounds content, celery can be a source of natural antioxidants. The
objectives of this experiment are to identify, determine and compare the
antioxidant capacity from macerated celery herb and traditional dosage form of
celery herb.
The method of antioxidant identification is by determining the
reducing properties of celery herb using silver nitrate ammoniacal reaction and
Fehling reaction. The antioxidant capacity determination is done by
phosphomolybdenum method, which will reduce Mo (VI) into Mo (V) in
phosphomolybdenum complex in acidic pH so that the colour of the solution
changed into green colour. This green colour is measured by visible
spectrophotometer on 711 nm wavelength.
The results showed that the celery herb has antioxidant properties, by
determining its reduction properties as it gave positive results towards silver
nitrate ammoniacal reaction and Fehling reaction. 1 gram macerated fresh
celery herb is equivalent to antioxidant capacity of (0.59 ± 0.0847) mg vitamin
C and 1 gram of celery herb extract from the traditional dosage form of celery
herb is equivalent to antioxidant capacity of (31.07 ± 5.89049) mg.
From this research, it can be concluded that celery herb has
antioxidant properties and the macerated celery herb and the traditional dosage
form of celery herb have different antioxidant capacity.
Keywords:
Celery
phosphomolybdenum
herb,
Apium
graveolens
L.,
antioxidant,
vii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................
iii
KATA PENGANTAR ...............................................................................
iv
ABSTRAK .................................................................................................
vi
ABSTRACT ............................................................................................... vii
DAFTAR ISI .............................................................................................. viii
DAFTAR TABEL ....................................................................................... xii
DAFTAR GAMBAR ................................................................................. xiii
DAFTAR LAMPIRAN .............................................................................. xiv
BAB I PENDAHULUAN ........................................................................
1
1.1 Latar Belakang .......................................................................
1
1.2 Perumusan Masalah ...............................................................
4
1.3 Hipotesis Penelitian ...............................................................
4
1.4 Tujuan Penelitian ...................................................................
5
1.5 Manfaat Penelitian .................................................................
5
BAB II TINJAUAN PUSTAKA ..............................................................
6
2.1 Uraian Umum .........................................................................
6
2.1.1 Taksonomi Seledri ............................................................
6
2.1.2 Deskripsi Herba Seledri ....................................................
6
2.1.3 Kandungan Kimia Herba Seledri ......................................
7
2.2 Antioksidan ............................................................................
7
viii
Universitas Sumatera Utara
2.2.1 Mekanisme Antioksidan ...................................................
8
2.2.2 Defisiensi Antioksidan .....................................................
9
2.3 Senyawa Fenol .......................................................................
9
2.4 Reaksi Oksidasi-Reduksi ....................................................... 11
2.5 Reaksi Ag Ammoniakal ......................................................... 11
2.6 Reaksi Fehling ....................................................................... 12
2.7 Metode Fosfomolibdenum ..................................................... 12
2.8 Vitamin C ............................................................................... 13
2.9 Spektrofotometri .................................................................... 13
2.10 Validasi Metode Analisis ..................................................... 16
BAB III METODE PENELITIAN ............................................................ 19
3.1 Tempat dan Waktu Penelitian ............................................... 19
3.2 Bahan-bahan .......................................................................... 19
3.2.1 Sampel .............................................................................. 19
3.2.2 Pereaksi ............................................................................ 19
3.3 Alat-alat ................................................................................. 19
3.4 Pembuatan Pereaksi .............................................................. 20
3.4.1 Pereaksi Ag Ammoniakal ................................................ 20
3.4.2 Pereaksi Fehling ............................................................... 20
3.4.3 Pereaksi Fosfomolibdenum .............................................. 20
3.5 Prosedur Penelitian ............................................................... 20
3.5.1 Pengambilan Sampel ........................................................ 20
3.5.2 Identifikasi Sampel .......................................................... 21
ix
Universitas Sumatera Utara
3.5.3 Pengolahan Sampel .......................................................... 21
3.5.4 Prosedur Maserasi Herba Seledri ..................................... 21
3.5.5 Identifikasi Sifat Antioksidan Berdasarkan Daya
Reduksi ............................................................................. 21
3.5.5.1 Reaksi Ag Ammoniakal ......................................... 21
3.5.5.2 Reaksi Fehling ........................................................ 22
3.5.6 Pengukuran Kapasitas Antioksidan .................................. 22
3.5.6.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Vitamin C ........... 22
3.5.6.2 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum ........... 22
3.5.6.3 Penentuan Waktu Kerja .......................................... 22
3.5.6.4 Pengukuran Kurva Kalibrasi Vitamin C ................. 23
3.5.6.5 Pengukuran Kapasitas Antioksidan dari Hasil
Maserasi Herba Seledri ........................................... 23
3.5.6.6 Pengukuran Kapasitas Antioksidan dari Sediaan
Jamu Herba Seledri yang Beredar di Pasaran ......... 24
3.6 Penentuan Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ...................... 24
3.7 Uji Akurasi dengan Persen Perolehan Kembali
(% Recovery) ........................................................................ 25
3.8 Analisis Data Secara Statistik ................................................ 25
3.8.1 Penolakan Hasil Pengamatan ........................................... 25
3.8.2 Simpangan Baku Relatif .................................................. 26
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ................................................... 28
4.1 Identifikasi Antioksidan ......................................................... 28
4.2 Kapasitas Antioksidan ........................................................... 28
4.2.1 Panjang Gelombang Maksimum ...................................... 28
x
Universitas Sumatera Utara
4.2.2 Waktu Kerja ..................................................................... 29
4.2.3 Kurva Kalibrasi Vitamin C .............................................. 30
4.2.4 Hasil Uji Kapasitas Antioksidan dari Hasil Maserasi
Herba Seledri .................................................................... 31
4.2.5 Hasil Uji Kapasitas Antioksidan dari Sediaan Jamu
Herba Seledri yang Beredar di Pasaran ............................ 32
4.2.6 Pembahasan Kapasitas Antioksidan dari Hasil Maserasi
Herba Seledri dengan Sediaan Jamu Herba Seledri ......... 33
4.3 Batas Deteksi dan Batas Kuantitasi ....................................... 34
4.4 Persen Perolehan Kembali (% Recovery) .............................. 34
4.5 Simpangan Baku Relatif ....................................................... 35
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ................................................... 36
5.1 Kesimpulan ........................................................................... 36
5.2 Saran ...................................................................................... 36
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................ 37
LAMPIRAN ............................................................................................... 40
xi
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR TABEL
Tabel
Halaman
3.1
Nilai Qkritis pada Taraf Kepercayaan 95% ........................................ 26
4.1
Hasil Identifikasi Antioksidan Secara Reaksi Kimia dari Hasil
Maserasi Herba Seledri ..................................................................... 28
4.2
Hasil Uji Kapasitas Antioksidan dari Hasil Maserasi Herba Seledri
4.3
Hasil Uji Kapasitas Antioksidan dari Sediaan Jamu Herba Seledri . 32
4.4
Hasil Kapasitas Antioksidan Sampel ................................................ 33
31
xii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR GAMBAR
Gambar
Halaman
2.1
Reaksi Fenol ...................................................................................... 10
2.2
Stabilisasi Radikal Fenoksi oleh Resonansi ...................................... 10
2.3
Diagram Blok dari Instrumen Spektrofotometer UV/Vis ................. 15
4.1
Kurva Panjang Gelombang Maksimum Vitamin C dengan
Konsentrasi 12,7273 µg/ml ............................................................... 29
4.2
Kurva Waktu Kerja ........................................................................... 30
4.3
Kurva Kalibrasi Vitamin C pada Panjang Gelombang 711 nm ........ 30
xiii
Universitas Sumatera Utara
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran
Halaman
1. Perhitungan Bahan-bahan untuk Pembuatan 100 ml Pereaksi
Fosfomolibdenum ....................................................................................
40
2. Waktu Kerja .............................................................................................
42
3. Contoh Perhitungan Konsentrasi Larutan Standar Vitamin C
untuk Penentuan Kurva Kalibrasi ............................................................
43
4. Kurva Kalibrasi Larutan Vitamin C dengan Berbagai
Konsentrasi pada Panjang Gelombang 711 nm .......................................
44
5. Bagan Kerja ..............................................................................................
45
6. Perhitungan Persamaan Garis Regresi .....................................................
47
7. Perhitungan Koefisien Korelasi ...............................................................
49
8. Gambar Hasil Identifikasi Antioksidan ....................................................
50
9. Contoh Perhitungan Kapasitas Antioksidan dari Hasil Maserasi
Herba Seledri ............................................................................................
51
10. Pengukuran Kapasitas Antioksidan dari Hasil Maserasi Herba
Seledri ......................................................................................................
52
11. Contoh Perhitungan Kapasitas Antioksidan dari Sediaan Jamu
Herba Seledri yang Beredar di Pasaran ....................................................
53
12. Pengukuran Kapasitas Antioksidan dari Sediaan Jamu Herba
Seledri yang Beredar di Pasaran ..............................................................
54
13. Uji t ..........................................................................................................
55
14. Contoh Perhitungan Perolehan Kembali Kapasitas Antioksidan
dengan Metode Penambahan Baku ..........................................................
58
15. Perhitungan Perolehan Kembali Sampel Hasil Maserasi Herba
Seledri dengan Metode Penambahan Baku ..............................................
59
xiv
Universitas Sumatera Utara
16. Perhitungan Perolehan Kembali Sampel Sediaan Jamu Herba
Seledri yang Beredar di Pasaran dengan Metode Penambahan
Baku .........................................................................................................
60
17. Perhitungan Batas Deteksi (LOD) dan Batas Kuantitasi (LOQ) .............
63
18. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Kapasitas
Antioksidan dari Hasil Herba Seledri ....................................................
64
19. Perhitungan Simpangan Baku Relatif (RSD) Kapasitas
Antioksidan dari Sediaan Jamu Herba Seledri yang Beredar di
Pasaran .....................................................................................................
65
20. Hasil Identifikasi Tumbuhan ....................................................................
66
21. Gambar Herba Seledri (Apium Graveolens L.) ........................................
67
22. Sediaan Jamu Herba Seledri ....................................................................
67
23. Sertifikat Analisis Baku Pabrik Vitamin C ..............................................
68
24. Daftar Nilai Distribusi t ............................................................................
69
xv
Universitas Sumatera Utara