PENENTUAN AKTIVITAS ESTROGENIK FRAKSI ETIL ASETAT DAN FRAKSI AIR DAUN JERUJU (Acanthus ilicifolius L.) MENGGUNAKAN

  PENENTUAN AKTIVITAS ESTROGENIK FRAKSI ETIL ASETAT DAN FRAKSI AIR DAUN JERUJU ( Acanthus ilicifolius L.) MENGGUNAKAN

YEAST ESTROGEN SCREEN (YES) ASSAY

  SKRIPSI Untuk memenuhi sebagian persyaratan Mencapai Derajat Sarjana S-1 Diajukan Oleh ERGIA ADANG SUGIANTORO 100801010016 Kepada FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH PURWOKERTO PURWOKERTO 2014

  HALAMAN PERSETUJUAN PENENTUAN AKTIVITAS ESTROGENIK FRAKSI ETIL ASETAT DAN FRAKSI AIR DAUN JERUJU ( Acanthus ilicifolius L.) MENGGUNAKAN

YEAST ESTROGEN SCREEN (YES) ASSAY

  ERGIA ADANG SUGIANTORO 1008010016 Diperiksa dan disetujui oleh Mengetahui Dosen Pembimbing I Dosen Pembimbing II Binar Asrining Dhiani. M.Sc., Apt Susanti. M.Phil., Apt

NIK. 2160392 NIK. 2160386

  HALAMAN PENGESAHAN PENENTUAN AKTIVITAS ESTROGENIK FRAKSI ETIL ASETAT DAN FRAKSI AIR DAUN JERUJU ( Acanthus ilicifolius L.) MENGGUNAKAN

YEAST ESTROGEN SCREEN (YES) ASSAY

  Ergia Adang Sugiantoro 1008010016 Telah dipertahankan di depan Panitia Ujian Skripsi Pada hari Rabu tanggal 20 Agustus 2014 SUSUNAN PANITIA Ketua Sekretaris

Retno Wahyuningrum, M.Si., Apt Suparman, M.Sc., Apt

NIK. 2160387 NIK. 2160446

  Penguji I Penguji II Binar Asrining Dhiani, M.Sc., Apt Susanti, M.Phil., Apt NIK. 2160392 NIK. 2160386 Indri Hapsari, M.Si., Apt

Indri Hapsari, M.Si., Apt NIK 2160347

Mengetahui

  Dekan Fakultas Farmasi NIK 2160347 Universitas Muhammadiyah Purwokerto Dr. Nunuk Aries Nurulita, S.Si., M.Si., Apt Indri Hapsari, M.Si., Apt NIK 2160217 NIK 2160347 Indri Hapsari, M.Si., Apt

  PERNYATAAN

  Yang bertandatangan di bawah ini, saya: Nama : Ergia Adang Sugiantoro NIM : 1008010016 Program Studi : Farmasi Fakultas/Universitas : Farmasi/Universitas Muhammadiyah Purwokerto Menyatakan dengan sebenar-benarnya bahwa skripsi ini adalah hasil dari proses penelitian saya yang telah dilakukan dengan prosedur penelitian yang benar dengan arahan dari dosen pebimbing dan bukan hasil penjiplakan dari karya orang lain. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan dalam daftar pustaka di bagian akhir skripsi ini.

  Demikian pernyataan ini, dan apabila kelak dikemudian hari terbukti ada unsur penjiplakan maka saya bersedia mempertanggungjawabkan sesuai dengan ketentuan yang berlaku.

  Purwokerto, Agustus 2014 Yang Menyatakan

  Ergia Adang Sugiantoro

  INTISARI ERGIA ADANG SUGIANTORO. Penentuan Aktivitas Estrogenik Fraksi Etil

  Asetat dan Fraksi Air Daun Jeruju (Acanthus ilicifolius L.) Menggunakan Yeast

  Estrogen Screen (YES) Assay

  Dibawah Bimbingan BINAR ASRINING DHIANI dan SUSANTI

  Latar belakang : Estrogen merupakan hormon yang bertanggung jawab dalam

  mengatur seluler kompleks terkait dengan diferensiasi, fungsi dan pengaturan jaringan reproduksi wanita. Penggunaan Hormone Replacement Therapy (HRT) dapat mencegah gejala defisiensi estrogen, namun bila digunakan jangka waktu panjang berisiko terjadinya proliferasi endometrium berlebihan dan mungkin kanker endometrium. Fitoestrogen merupakan dekomposisi alami pada tumbuhan yang memiliki banyak kesamaan dengan estradiol, bentuk alami estrogen yang paling poten. Tanaman Acanthus ilicifolius mengandung senyawa glukosida, alkaloid, flavonoid, asam lemak, steroid, lignan, dan komponen fenol dan terpenoid. Berdasarkan landasan tersebut, maka penelitian aktivitas estrogenik Jeruju (Acanthus ilicifolius L.) dilakukan.

  Tujuan Penelitian : Penelitian ini bertujuan untuk menentukan fraksi etil asetat

  dan fraksi air dari daun Acanthus ilicifolius memiliki aktivitas estrogenik yang ditentukan menggunakan Yeast Estrogen Screen (YES) Assay.

  Metode Penelitian : Penelitian dilakukan dengan menggunakan Yeast Estrogen Screen (YES) Assay. Uji ini dilakukan secara in vitro, kontrol yang digunakan 17-

• 4 -6 -8 -10 -12 -14

  β-estradiol dengan konsentrasi 10 M, 10 M, 10 M, 10 M, 10 M, 10 M,

• 5 -7 - -16

  dan 10 M dalam DMSO dan genistein dengan konsentrasi 10 M, 10 M, 10

  9 -11 -13 -15 -17

  M, 10 M, 10 M, 10 M, dan 10 M. Sampel fraksi etil asetat dan fraksi air daun jeruju (Acanthus ilicifolius L.) dengan konsentrasi 50 µg/ml, 100 µg/ml, 200 µg/ml, 400 µg/ml, 800 µg/ml, 1000 µg/ml, 1200 µg/ml, 1600 µg/ml, dan 2000 µg/ml dalam DMSO.

  Hasil : EC50 17-β-estradiol YES-hERα yaitu no response, sedangkan pada YES-

  9

• 17

  hERβ

  yaitu 2,0094x10 M. EC50 genistein pada YES-hERα yaitu 7,8219x10 M, sedangkan YES-hERβ yaitu no response. EC50 pada fraksi etil asetat pada YES-

  hERα

  yaitu 28712 µg/ml, sedangkan YES-hERβ yaitu 1327 µg/ml. EC50 pada fraksi air YES-hERα dan YES-hERβ yaitu no response

  Kesimpulan : Fraksi etil asetat daun jeruju (Acanthus ilicifolius L.) memiliki

  aktivitas estrogen yang rendah sedangkan fraksi air daun jeruju yang tidak memiliki aktivitas estrogen. Kandungan senyawa pada fraksi etil asetat daun jeruju meliputi alkaloid, flavonoid, terpenoid, tanin dan saponin, sedangkan fraksi air daun jeruju meliputi flavonoid dan tanin.

  Kata kunci : Yeast Estrogen Screen Assay, Acanthus ilicifolius, estrogenik

  ABSTRACT Background: Estrogen is the hormone responsible for regulating cellular complex

  associated with differentiation, function and regulation of female reproductive tissues. Use of Hormone Replacement Therapy (HRT) can prevent these symptoms, but when used long term excessive risk of endometrial proliferation and endometrial cancer as possible. Phytoestrogens are natural decomposition of the plant that has many similarities with estradiol, a natural form of estrogen that is most potent. Acanthus ilicifolius plants contain compounds glucoside, alkaloids, flavonoids, fatty acids, steroids, lignans, and phenolic components and terpenoids. Based on these premises, then the weeds research estrogenic Acanthus ilicifolius.

  Objective: This study aimed to determine the fraction of ethylacetate and water

  fraction of leaves Acanthus ilicifolius have estrogenic activity were determined using the Yeast Estrogen Screen (YES) Assay.

  Methods: The study was conducted using by Yeast Estrogen Screen (YES) Assay.

  The test is performed in vitro, the controls used 17-β-estradiol and genistein were

• 4 -6 -8 -10 -12 -14 -16

  made with a concentration 10 M, 10 M, 10 M, 10 M, 10 M, 10 M, 10

• 5 -7 -9 -11

  M in DMSO and genistein with a concentration 10 M, 10 M, 10 M, 10 M, 10

  13 -15 -17

  M, 10 M, dan 10 M Samples ethyl acetate fraction and water fraction leaf

  Acanthus ilicifolius L. is made with a concentration of 50ug/ml, 100ug/ml,

  200µg/ml, 400ug/ml, 800ug/mL, 1000 µg/mL, 1200 µg/mL, 1600 µg/mL and 2000µg/ml in DMSO.

  Results: EC50 of 17-β-estradiol YES-hERα is no response, where as in the YES-

  9

• 17

  hERβ is 2,0094x10 M. EC50 of genistein YES-hERα is 7,8219x10 M, where as in the YES-hERβ is no response. EC50 in ethyl acetate fraction of the YES- hERα is 28712 µg/ml , where as the YES-hERβ is 1327 µg/ml. EC50 in water fraction YES-hERα and YES-hERβ is no response.

  Conclusion: Ethyl acetate fraction of the leaf Acanthus ilicifolius L. had estrogen

  activity but lower than the fraction of leaf water weeds that do not have estrogen activity. The content of the compound in the ethyl acetate fraction include alkaloids, flavonoids, terpenoids, tannins and saponins, while the water fraction leaf weeds including flavonoids and tannins.

  Keywords: Yeast Estrogen Screen Assay, Acanthus ilicifolius, estrogenic

  MOTTO “...

istaii’nu bisshobri wassholat innallaha ma asshobiriin...” artinya Mohonlah

pertolongan dengan sabar dan shalat, sesungguhnya Allah adalah beserta orang-orang yang sabar (Al Baqarah : 153)

  Karena suatu cita-cita yang tinggi tidak akan pernah dicapai tanpa kita sabar dalam berjuang, sabar dalam berkorban, sabar dalam menderita dan sabar dalam menunggu hasil. Dengan shalat ketenangan pun datang. Tidak perlu ada yang kita takutkan? karenaAllah beserta kita.

  Dalam hidupku tidak ada kata “masa depan”, hanyalah ada kata “lakukan yang terbaik pada detik ini, menit ini, jam ini dan hari ini dengan Taqwa dan Memohon ampunan kepada Allah SWT”

  Karena sebaik-baiknya bekal hidup di dunia dan akhirat adalah Taqwa kepada Allah SWT dan karena ajal tak mengenal usia maka mohonlah ampunan setiap saat kepada Allah SWT.

  “Hasil adalah suatu usaha dan doa yang kita lakukan”

  Keduanya berbanding lurus, apabila hasil tidak memuaskan mungkin usaha dan doa bahkan keduanya yang kita lakukan tidak sepenuhnya bersungguh-sungguh.

  PERSEMBAHAN Skripsi ini saya persembahkan untuk kedua Orang Tua dan Alm. Adik saya serta pada kesempatan ini, selebihnya saya ingin mengucapkan Terimakasih kepada teman-teman saya. Hanya kepada Allah SWT, sembah sujud syukur ini kupersembahkan. Karena dengan izin-Nya saya diberi nikmat kesehatan jasmani dan rohani, kemudahan berpikir, kesabaran dan kelapangan hati dalam mengerjakan skripsi ini. Ampuni hamba Yaa Allah, dalam mengerjakan skripsi ini hamba lalaikan Dhuha- Mu, Dzikir-Mu dan Al Quran-Mu

  Syukron Yaa Allah, saya telah dilahirkan dari rahim seorang Ibu Aat Djumiati yang Sholehah. UntukIbu, Ibu, dan Ibu...terimakasih atas kasih sayang, doa dan ilmu agama yang selalu engkau berikan selama perjalanan hidupku dalam menempuh pendidikan.

  Syukron Yaa Allah, saya memiliki seorang Bapak Endang Iriyanto. Untuk Bapak, terimakasih atas rasa tanggung jawab, semangat, motivasi dan modal pendidikan yang selalu engkau berikan selama hidupku ini. Semangat Bapak akan selalu aa tiru.

  Syukron Yaa Allah, saya pernah memiliki seorang Adik Alm. Erika Oktaviani.

  Yaa Allah terima segala amal ibadahnya, tempatkan di Surga-Mu, ampuni dosanya, bebaskan dari siksa kubur-Mu, pedihnya sakaratul maut-Mu dan siksa api neraka-Mu. Maafkan Aa belum bisa menjadi Kakak yang dewasa selama hidupmu.

  Syukron Yaa Allah, saya memiliki kekasih Irma Prastika. Untuk Irma, terimakasih atas segala bantuan tenaga pikiran, motivasi dan perhatian yang selalu diberikan kepada mamas disaat titik jenuh serta kondisi lelah. Syukron Yaa Allah, Engkau telah menghadirkan sahabat dan teman yang selalu membantu dan memotivasi selama ini. Yaa Allah, berkahi selalu kesehatan serta limpahkan kesuksesan dunia dan akhirat kepada sahabat dan teman saya. Aamiin. Terimakasih untuk sahabat saya Sacandra Aji Rivaldi. Terimakasih untuk partner penelitian saya Hari, Dian, Dina, Karimah dan Desi. Terimakasih untuk teman- teman saya Mba Anggriyana, Mba Maretha, Mba Wina, Mas Bangkit, Gilang, Rizka Dewi, Bety, Mey, Agil, Restu, Roni, Yadi, Yusron, Kokom, Meidyawati,

  Grah, Tika, Caca, Sinty, Dinar, Egar, Hafid

  PRAKATA

  Alhamdulillah, segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah-Nya sehingga penulis mampu menyelesaikan skripsi ini yang berjudul “Penentuan Aktivitas Esterogenik Fraksi Etil Asetat Dan Fraksi Air Daun Jeruju (Acanthus ilicifolius L.) Menggunakan

  Yeast Estrogen Screen (YES) Assay”. Skripsi ini disusun guna memenuhi

  persyaratan untuk mencapai derajat Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

  Dalam kesempatan ini penulis mengucapkan terima kasih kepada Ibu Binar Asrining Dhiani, M.Sc., Apt dan Ibu Susanti, M.Phil., Apt yang telah berkenan membimbing dan mengarahkan penulis dalam menyelesaikan skripsi ini. Ucapan terima kasih dan penghargaan juga penulis sampaikan kepada :

  1. Drs. H. Syamsuhadi Irsyad, S.H., M.H selaku Rektor Universitas Muhammadiyah Purwokerto.

  2. Dr. Nunuk Aries Nurulita, M.Si., Apt sebagai Dekan dari Fakultas Farmasi.

  3. Retno Wahyuningrum, M.Si., Apt sebagai Dosen Pembimbing Akademik.

  4. Rochmadi, Amd. sebagai Laboran Biologi Farmasi dari Fakultas Farmasi.

  5. Kurniawan, M.Si sebagai Laboran Mikrobiologi dari Fakultas Keguruan Ilmu Pendidikan.

  6. Semua dosen dan karyawan Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto yang telah memberikan bekal bagi kehidupan.

  7. Endang Irianto dan Aat Djumiati selaku orangtua atas bimbingannya dengan penuh kesabaran serta kasih sayang yang sangat besar, juga dukungan yang disertai doa yang mengiringi setiap langkah perjalananku.

  8. Teman-teman Farmasi Sains dan Obat Alam dan Farmasi angkatan 2010 terima kasih dukungannya, selalu tetap semangat.

  9. Semua pihak yang telah membantu penulis dalam menulis skripsi ini.

  Besar harapan penulis, penulisan skripsi ini dapat bermanfaat. Penulis menyadari sepenuhnya bahwa tanpa bantuan dari berbagai pihak penyusunan skripsi ini tidak akan berjalan baik. Semoga skripsi ini dapat berguna untuk setiap orang yang membacanya. Aamiin.

  Purwokerto, Agustus 2014 Penulis

RIWAYAT HIDUP

  Nama : Ergia Adang Sugiantoro NIM / Angkatan : 1008010016 / 2010 Tempat / Tanggal Lahir : Cirebon / 8 Mei 1992 Jenis Kelamin : Laki-laki Agama : Islam Alamat : Jl. Cipto MK, No. 104B RT 04 /RW 03 Kota

  Cirebon, Propinsi Jawa Barat Riwayat Pendidikan :

  1. Perguruan Tinggi : Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah Purwokerto (Angkatan 2010)

  2. SMA / Tahun Lulus : SMF Muhammadiyah 1 Cirebon / Tahun 2010

  3. SMP / Tahun Lulus : SMP Negeri 2 Cirebon / Tahun 2007

  4. SD / Tahun Lulus : SD Kartika III-6 Cirebon / Tahun 2004 Organisasi :

  1. Pengurus Badan Eksekutif Mahasiswa (BEM) 2011

  2. Anggota Ikatan Senat Mahasiswa Farmasi Se-Indonesia (ISMAFARSI) Joglosepur 2011

  Prestasi :

  1. Mendapat dana hibah PKM-K tahun 2011

  2. Mendapat dana hibah PKM-GT tahun 2013

  3. Mendapat beasiswa BBM Universitas Muhammadiyah Purwokerto tahun 2013

  4. Asisten Praktikum Farmakologi dan Toksikologi, Asisten Praktikum Mikrobiologi dan Virologi, Asisten Praktikum Biokimia, Asisten Praktikum Farmakognosi, Asisten Praktikum Analisis Instrument I, Asisten Praktikum Analisis Farmasi, Asisten Praktikum Biofarmasetika, Asisten Praktikum Farmakoterapi II.

  DAFTAR ISI halaman

  HALAMAN JUDUL ....................................................................................... i HALAMAN PENGESAHAN ........................................................................ ii HALAMAN PERSETUJUAN ....................................................................... iii HALAMAN PERNYATAAN ........................................................................ iv

  INTISARI ........................................................................................................ v ....................................................................................................... vi

  ABSTRACT

  MOTTO .......................................................................................................... vii HALAMAN PERSEMBAHAN ..................................................................... viii PRAKATA ...................................................................................................... ix RIWAYAT HIDUP ........................................................................................ xi DAFTAR ISI ................................................................................................... xii DAFTAR TABEL ........................................................................................... xv DAFTAR GAMBAR ...................................................................................... xvi DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................... xvii

  BAB 1. PENDAHULUAN A. Latar Belakang Masalah ............................................................. 1 B. Perumusan Masalah.................................................................... 3 C. Tujuan Penelitian........................................................................ 3 D. Manfaat Penelitian...................................................................... 3 BAB 2. TINJAUAN PUSTAKA A. Tanaman Jeruju .......................................................................... 4

  1. Karakteristik Umum Tanaman ...................................... ........ 4

  2. Sistematika Tanaman ............................................................. 5

  3. Habitat Tanaman .......................................................... ......... 5

  4. Kandungan Kimia Tanaman ......................................... ......... 6

  5. Kegunaan dan Khasiat Tanaman ................................... ........ 6

  B. Bioassay untuk Penentuan Aktivitas Esterogenik ...................... 7

  C. Hormon Estrogen ....................................................................... 8

  1. Definisi ........................................................................ .......... 8

  2. Senyawa Aktivitas Estrogenik ............................................... 8

  3. Gangguan Kekurangan Hormon Estrogen ............................. 8

  4. Reseptor Estrogen .................................................................. 8

  D. Kromatografi Lapis Tipis ........................................................... 9

  1. Definisi dan Prinsip KLT ...................................................... 9

  2. Fase Diam (lapisan penjerap) ................................................ 9

  3. Fase Gerak (pelarut pengembang) ......................................... 9

  4. Bejana Pemisah, Penjenuhan, Aras Pengirisan ...................... 10

  5. Deteksi Senyawa .................................................................... 10

  6. Penilaian Kromatogram ......................................................... 11

  BAB 3. METODE PENELITIAN A. Jenis dan Racangan Penelitian.................................................... 12 B. Variabel Penelitian ..................................................................... 12 C. Definisi Variabel Operasional ................................................... 12 D. Waktu dan Tempat Penelitian ................................................... 13 E. Bahan dan Alat .......................................................................... 14 F. Cara Penelitian ........................................................................... 14 G. Analisis Hasil ............................................................................. 17 BAB 4. HASIL DAN PEMBAHASAN A. Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Jeruju........................................ 18 B. Pembuatan Fraksi Etil Asetat dan Fraksi Air Daun Jeruju .......... 18 C. Penentuan Aktivitas Estrogenik Menggunakan Yeast Estrogen Screen (YES) Assay ............................................. 19

  1. Aktivitas Estrogenik Estradiol dan Genistein ........................... 19

  2. Aktivitas Estrogenik Fraksi Etil Asetat dan Fraksi Air Daun Jeruju .............................................................................. 22

  D. Identifikasi Golongan Senyawa dari Fraksi Etil Asetat Daun Jeruju dengan Menggunakan Metode KLT ........................ 24

  E. Identifikasi Golongan Senyawa dari Fraksi Air Daun Jeruju dengan Menggunakan Metode KLT ........................ 33