ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ALKALOID DARI DAUN PULE (Alstonia scholaris L.R.Br) SERTA UJI AKTIVITAS ANTIPLASMODIAL SECARA IN VITRO TERHADAP Plasmodium falciparum SKRIPSI

  ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ALKALOID DARI DAUN PULE (Alstonia scholaris L.R.Br) SERTA UJI AKTIVITAS ANTIPLASMODIAL SECARA IN VITRO TERHADAP Plasmodium falciparum SKRIPSI ii

  ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ALKALOID DARI DAUN PULE (Alstonia scholaris L.R.Br) SERTA UJI AKTIVITAS ANTIPLASMODIAL SECARA IN VITRO TERHADAP Plasmodium falciparum

  SKRIPSI Sebagai Salah Satu Syarat untuk Memperoleh Gelar Sarjana Sains Bidang Kimia

  Pada Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Airlangga Disetujui Oleh : Pembimbing I,

  Dr. Pratiwi Pudjiastuti, M.Si NIP. 196102051986012001 Pembimbing II, Dr. Mulyadi Tanjung, M.S

  NIP. 196504221991021001

  LEMBAR PENGESAHAN SKRIPSI Judul :Isolasi dan Identifikasi Senyawa Alkaloid dari Daun Pule (Alstonia scholaris L.R.Br) serta Uji Aktivitas

  Antiplasmodial secara In Vitro terhadap Plasmodium falciparum

  Penyusun : Ratih Dewi Saputri NIM : 080710414 Pembimbing I : Dr. Pratiwi Pudjiastuti, M.Si Pembimbing II : Dr. Mulyadi Tanjung, M.S Tanggal seminar : 28 Juli 2011 Disetujui Oleh :

  

Pembimbing I, Pembimbing II,

Dr. Pratiwi Pudjiastuti, M.Si Dr. Mulyadi Tanjung, M.S

NIP. 196102051986012001 NIP. 196504221991021001

Mengetahui,

  Ketua Departemen Kimia Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Airlangga Dr. Alfinda Novi Kristanti, DEA

  NIP. 196711151991022001 iii Skripsi ini tidak dipublikasikan, namun tersedia di perpustakaan dalam lingkungan Universitas Airlangga. Diperkenankan untuk dipakai sebagai referensi kepustakaan, tetapi pengutipan seijin penulis dan harus menyebutkan sumbernya sesuai kebiasaan ilmiah.

  Dokumen skripsi ini merupakan hak milik Universitas Airlangga iv

  KATA PENGANTAR Assalamualaikum Wr.Wb.

  Segala puji syukur kepada Allah SWT atas segala limpahan berkat dan rahmat-Nya sehingga dapat menyelesaikan penyusunan skripsi dengan judul “ Isolasi

  Dan Identifikasi Senyawa Alkaloid Dari Daun Pule (Alstonia scholaris L.R.Br) Serta Uji Aktivitas Antiplasmodial Secara In Vitro Terhadap Plasmodium falciparum”. Skripsi ini dibuat dalam rangka memenuhi persyaratan akademis pendidikan dalam bidang kimia Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Airlangga.

  Pada kesempatan ini, penyusun menyampaikan ucapan terima kasih kepada :

  1. Ayah, Ibu, dan Kakak yang banyak memberikan do’a, semangat dan dukungan sejak penyusunan dimulai sampai terselesaikannya naskah skripsi ini.

  2. Dr. Pratiwi Pudjiastuti, M.Si Selaku pembimbing I atas bimbingan, saran, nasehat, dan bantuan beliau yag memberikan manfaat dalam penyusunan skripsi ini. 3. .Dr. Mulyadi Tanjung, MS.Selaku pembimbing II atas segala bimbingan, arahan, nasehat dan saran.

  4. Dr. Nanik Siti Aminah, M.Si selaku dosen penguji atas saran dan bimbingannya.

  5. Ibu Alfa Akustia W, S.Si, M.Si selaku dosen penguji atas saran dan bimbingannya. v

  6. Bapak Dr.rer.nat Ganden Supriyanto,M.Sc Selaku dosen wali yang telah memberikan arahan dan nasehat dalam penyusunan skripsi.

  7. Dr. Alfinda Novi Kristanti, DEA selaku Ketua Prodi dan Ketua Departement atas izin dan pemakaian fasilitas laboratorium selama penelitian.

  8. Teman-teman angkatan 2007 yang telah banyak membantu dalam penyelesaian naskah skripsi.

  9. Semua pihak yang telah membantu penyusunan naskah skripsi ini.

  Penyusun menyadari bahwa masih banyak kekurangan yang terdapat dalam penyusunan naskah skripsi. Oleh karena itu, penyusun sangat mengharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun untuk kesempurnaan dalam penulisan skripsi . Semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu pengetahuan.

  Surabaya, Juli 2011 Penyusun, Ratih Dewi Saputri v

  Ratih Dewi Saputri, 2011, ISOLASI DAN IDENTIFIKASI SENYAWA ALKALOID DARI DAUN PULE(Alstonia scholaris L.R.Br) SERTA UJI AKTIVITAS ANTIPLASMODIAL SECARA in vitro TERHADAP Plasmodium falciparum, skripsi ini dibawah bimbingan Dr. Pratiwi Pudjiastuti, M.Si dan Dr. Mulyadi Tanjung, M.S, Departemen Kimia Fakultas Sains dan Teknologi Universitas Airlangga ABSTRAK

  Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi senyawa alkaloid dari daun pule (Alstonia scholaris L.R.Br) yang mempunyai aktivitas sebagai antiplasmodial terhadap Plasmodium falciparum. Ekstrak alkaloid diekstraksi dengan metode maserasi menggunakan pelarut diklorometana dalam suasana basa pada suhu kamar. Pemisahan ekstrak alkaloid dengan kromatografi kolom menghasilkan senyawa alkaloid indol. Berdasarkan data spektroskopi 1H-NMR, 13C-NMR, IR, dan UV-Vis diketahui senyawa alkaloid tersebut mempunyai kerangka aspidodasikarpin. Uji aktifitas antiplasmodial senyawa alkaloid dari daun Alstonia scholaris terhadap Plasmodium falciparum secara in vitro memperlihatkan aktivitas yang tinggi dengan nilai IC sebesar 1,926

  50 μg/ml, sehingga senyawa alkaloid tersebut aktif sebagai antiplasmodial.

  Kata Kunci : Alstonia scholaris L.R.Br., Kerangka aspidodasikarpin, antiplasmodial, Plasmodium falciparum. vi

  Ratih Dewi Saputri, 2011, ISOLATION AND IDENTIFICATION ALKALOID COMPOUND FROM THE LEAVES of Alstonia scholaris L.R.Br (PULE’S) AND THE ACTIVITY AS ANTIPLASMODIAL in vitro AGAINST Plasmodium falciparum, this final project is guidance by Dr.

  Pratiwi Pudjiastuti, M.Si and Dr. Mulyadi Tanjung,M.S, Chemistry Department Faculty of Science and Technology Airlangga University ABSTRACT The objective of this research are to know result the alkaloid isolated from the leaves of pule (Alstonia scholaris L.R.Br) used as an antiplasmodial against

  Plasmodium falciparum. Alkaloid extract obtained by maceration method using dichloromethane solvent under alkaline conditions at room temperature. Extract alkaloid separation by column chromatography to result indole alkaloid compound. Based on data from the 1H-NMR, 13C-NMR, IR, and UV-Vis spectroscopy, alkaloid compounds are known to have aspidodasikarpin skeleton. Antiplasmodial activity of alkaloid compounds from Alstonia scholaris leaves tests against Plasmodium falciparum in vitro to show high activity with IC of

  50 1,926 μg/ml So the alkaloids from the leaves of Alstonia scholaris LRBr. is active as an antiplasmodial.

  Keyword : Alstonia scholaris L.R.Br., aspidodasikarpin skeleton, antiplasmodial, in vitro, Plasmodium falciparum vi

DAFTAR ISI

  1 H dan

  30

  30 3.2.1 Bahan Penelitian......................................................................

  30 3.2 Bahan dan Alat Penelitian ................................................................

  30 3.1 Tempat dan Waktu Penelitian...........................................................

  27 BAB III METODE PENELITIAN ...................................................................

  25 2.8.4 Siklus Hidup Plasmodium falciparum.....................................

  24 2.8.3 Morfologi Plasmodium falciparum..........................................

  24 2.8.2 Plasmodium falciparum...........................................................

  24 2.8.1 Penyakit Malaria......................................................................

  22 2.8 Tinjauan tentang Malaria..................................................................

  

13

C-NMR, IR, dan UV-Vis Alkaloid indol...................................................................................................

  vii

  Halaman LEMBAR JUDUL………..……………........................................................... i LEMBAR PERNYATAAN……………........................................................... ii LEMBAR PENGESAHAN……………........................................................... iii LEMBAR PEDOMAN PENGGUNAAN SKRIPSI……………...................... iv KATA PENGANTAR....................................................................................... v ABSTRAK……………..................................................................................... vi DAFTAR ISI..................................................................................................... vii DAFTAR TABEL…......................................................................................... viii DAFTAR GAMBAR......................................................................................... ix DAFTAR LAMPIRAN..................................................................................... x BAB I PENDAHULUAN..................................................................................

  2.6 Ekstraksi Alkaloid Alstonia................................................................ 21

  20

  6 2.5 Bioaktivitas Alkaloid Alstonia sebagai Antimalaria……………….

  6 2.4 Alkaloid Alstonia...............................................................................

  5 2.3 Fitokimia Alstonia.............................................................................

  5 2.2 Alstonia scholaris...............................................................................

  5 2.1 Alstonia .......................................................................................

  3 BAB II TINJAUAN PUSTAKA.......................................................................

  3 1.4 Manfaat Penelitian.............................................................................

  3 1.3 Tujuan Penelitian…...........................................................................

  1 1.2 Rumusan Masalah.............................................................................

  1 1.1 Latar Belakang..................................................................................

  2.7 Analisis Spektroskopi

  vii 3.2.2 Bahan Kimia............................................................................

  45 4.4.1 Analisis spektroskopi ultraviolet senyawa hasil isolasi...........

  39 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN............................................................

  42

  4.1 Skrining Alkaloid dari Tumbuhan Alstonia scholaris …………....... 42

  4.2 Ekstraksi senyawa alkaloid…………. ……....................................... 42 4.3 Isolasi dan Pemurnian Senyawa Alkaloid …….…………...............

  43 4.3.1 Identifikasi Titik Leleh Senyawa Murni……………………..

  45 4.4 Analisis Spektroskopi…………………….. ………………….........

  45 4.4.2 Analisis spektroskopi inframerah senyawa hasil isolasi..........

  37 3.5.6 Evaluasi Hasil Uji Efek Antiplasmodial..................................

  45 4.4.3 Analisis spektroskopi NMR senyawa hasil isolasi...................

  46 4.5 Hasil Uji Aktivitas Antiplasmodial…… ……………………….......

  49 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN............................................................

  53 5.1 Kesimpulan ………………………………………………………..

  53 5.2 Saran ……………………………………………………………….

  53 DAFTAR PUSTAKA.....................................................................................…

  38 3.5.7 Analisis Data............................................................................

  37 3.5.5 Uji aktivitas in vitro.................................................................

  30 3.2.3 Alat Penelitian..........................................................................

  33 3.4 Identifikasi Isolat…………..............................................................

  31 3.3 Penyiapan Bahan...............................................................................

  31 3.3.1 Penyediaan Bahan Penelitian...................................................

  31 3.3.2 Pembuatan Pereaksi Meyer......................................................

  31 3.3.3 Pembuatan Reagen Dragendorf...............................................

  32 3.3.4 Pembuatan ekstrak Alkaloid....................................................

  32 3.3.5 Pemisahan dan Pemurnian senyawa alkaloid………………..

  33 3.4.1 Identifikasi dengan Spektroskopi UV-Vis................................

  36 3.5.4 Subbiakan.................................................................................

  33 3.4.2 Identifikasi dengan Spektroskopi Inframerah..........................

  34 3.4.3 Identifikasi dengan Spektroskopi RMI....................................

  34 3.5 Prosedur Uji Aktivitas Antiplasmodial In Vitro................................

  34 3.5.1 Persiapan Medium...................................................................

  34 3.5.2 Persiapan Eritrosit 50 %...........................................................

  35 3.5.3 Prosedur Kultur Biakan.............................................................

  54 LAMPIRAN

  DAFTAR TABEL

  Tabel Judul Tabel Halaman

  2.1 Metode ekstraksi senyawa alkaloid pada tumbuhan

  21 Alstonia.……………….......................................................

  1

  13

  4.1 Data spektrum H-NMR dan C-NMR alkaloid indol

  48 senyawa B dengan senyawa narelin …………………..

  1

  4.2 Data spektrum H-NMR monoterpen indol senyawa B

  48 dengan senyawa alschomine......................................

  viii

  ix DAFTAR GAMBAR

  23 2.17 Plasmodium falciparum ........................................................

  4.5 Grafik Hubungan Antara Dosis Ekstrak Alkaloid Daun Alstonia scholaris dengan Prosentase Penghambatan P.falciparum……………………………………………………

  49

  47 4.4 Kerangka molekul senyawa fraksi B……………………..

  44 4.3 Alkaloid Indol senyawa fraksi B………………………….

  4.2 Uji kemurnian senyawa alkaloid dengan KLT……………

  44

  4.1 Analisis KLT hasil kromatografi kolom grafitasi…………

  29

  2.22 Daur Hidup P. falciparum…………………………………

  27

  26 2.21 Bentuk gametosit P. falciparum ...........................................

  26 2.20 Bentuk skizon P. falciparum .................................................

  25 2.19 Bentuk trofozoit P. falciparum .............................................

  24 2.18 Bentuk cincin P. falciparum .................................................

  2.16 Senyawa akuamiginon……………………………………

  Gambar Judul Gambar Halaman 2.1 Kerangka dasar senyawa alkaloid monoterpen indol .......

  13 2.8 Kerangka narelin….................................................................

  7 2.2 Kerangka ajmalicin..……………………………………...

  8 2.3 Kerangka kuran……………..................................................

  9 2.4 Kerangka akuamillin……………………………................

  11 2.5 Kerangka aspidodasikarpin....................................................

  12 2.6 Kerangka ajmalin………........................................................

  12 2.7 Kerangka ekitamin……..........................................................

  14 2.9 Kerangka stemadenin..............................................................

  19

  14 2.10 Kerangka secoangustibilosin…..............................................

  15 2.11 Kerangka kordilofolan……....................................................

  16 2.12 Kerangka makrolin..................................................................

  17 2.13 Kerangka alsmaporazin...........................................................

  18 2.14 Kerangka korinante.................................................................

  19 2.15 Kerangka bis monoterpen indol.............................................

  51

  x

  

DAFTAR LAMPIRAN

Nomor Judul

  1. Spektrum senyawa fraksi B

  2. Analisis Probit ekstrak alkaloid daun Alstonia scholaris