Dikeringkan pada Suhu 105
o
C
Tidak Apakah Eceng Gondok
Sudah Kering Ya
Dilakukan Analisa Kadar Lignin-Selulosa Sampel Biologi
Data Kadar Lignin-Selulosa Sampel Biologi
Gambar 3.2 Skema Praperlakuan Biologi
3.4.3 Penyiapan Inokulum Cair
Prosedur penyiapan inokulum cair mikroba adalah sebagai berikut: 1. Seratus mililiter media cair media cair ini terdiri dari sukrosa 22 wv,
NH
4 2
SO
4
1 wv, KH
2
PO
4
1wv Junior dkk, 2009, api bunsen, dan kawat ose disiapkan.
2. pH media cair diatur dengan HCl hingga pH=3.
Universitas Sumatera Utara
Universitas Sumatera Utara
3. Ujung kawat ose dicelupkan ke dalam alkohol 96 lalu dipanaskan pada api bunsen sampai berwarna merah.
4. Biakan Aspergillus nigerdan Trichoderma reeseidari media PDA diambil dengan menggunakan kawat ose lalu dicelupkan beberapa saat pada media
cair hingga tampak keruh. 5. Media cair ditutup dengan kapas dan diinkubasi pada suhu ± 30°C selama
48 jam. 6. Pekerjaan ini dilakukan di ruang aseptic Sa’adah Z dkk, 2010.
3.4.4 Produksi Enzim Selulase
Prosedur sistematis fermentasi untuk produksi enzim selulase adalah sebagai berikut:
1. Eceng gondok dari dua perlakuan berbeda masing-masing diatur kelembabannya.
2. Aquadest ditambahkan dalam eceng gondok hingga didapat moisture content 65, 70, 75, 80, 85.
3. Eceng gondok 10 gram dimasukkan ke dalam beaker glass 250 ml sesuai variabel moisture contentkelembaban yang telah diaturdan waktu
fermentasi ditambah 30 ml komposisi nutriri medium Mandel Weber. 4. pH diatur hingga pH=5 lalu media disterilkan di dalam autoclave pada
suhu 120ºC selama 15 menit. 5. Media yang telah disterilkan kemudian didinginkan.
Universitas Sumatera Utara
Universitas Sumatera Utara
6. Suspensi spora ditambahkan dengan konsentrasi 15 ww Junior dkk, 2009.
7. Media diinkubasi pada suhu ±30
o
C dengan waktu fermentasi hari 3, 5, 7, 8, 9Oberoi dkk, 2010.
3.4.5 Pengambilan Enzim
Prosedur pengambilan enzim dari hasil fermentasi adalah sebagai berikut: 1. Hasil fermentasi diekstrak dengan aquadest dengan perbandingan 5 bagian
aquadest per 1 bagian massa. 2. Endapan dan cairan hasil fermentasi dipisahkan dengan menggunakan
centrifuge dengan kecepatan 2500 rpm selama 15 menit.
3. Cairan yang diperoleh kemudian diambil untuk diuji aktivitas enzimnya Sa’adah Z dkk, 2010.
3.5 Analisis
