b. Suhufermentasi: ±30°C Juhasz, 2005; Deshpande dkk, 2012; Ilyas, 2011.
c. pH fermentasi: 5 Juhasz, 2005.
3.4 Prosedur
Percobaan
Penelitian ini terdiri dari beberapa tahapan dimulai dari persiapan bahan baku dan mikroba, produksi enzim selulase dengan metode fermentasi padat hingga
pengambilan enzim. Berikut ini adalah prosedur sistematis dari pengerjaan masing- masing tahapan.
3.4.1 Pembenihan Mikroba
Prosedur untuk pembenihan mikroba adalah sebagai berikut: 1. Mikroba yang digunakan adalah Aspergillus niger dan Trichoderma
reesei . Pembenihan dilakukan pada media PDA Potato Dextrose Agar
secara zig-zag dengan menggunakan kawat inokulasi di dalam cawan petri secara aseptik.
2. Mikroba diinkubasi pada suhu ± 30°C selama 72 jam.
3.4.2 Praperlakuan Eceng Gondok
Prosedur praperlakuan eceng gondok adalah sebagai berikut: 1. Praperlakuan fisik
a. Eceng gondok dipotong-potong dengan pisau, dikeringkan dalam oven, lalu dianalisa kadar lignin dan selulosa awal.
Universitas Sumatera Utara
Universitas Sumatera Utara
b. Eceng gondok dilumatkan dengan penggerus, diautoclave suhu 120
o
C selama 15 menit lalu dikeringkan, lalu dianalisa kadar lignin dan
selulosa akhir. c. Eceng gondok ditambahkan aquadest untuk diatur kelembabannya.
2. Praperlakuan biologi a. Eceng gondok dipotong-potong dengan pisau, dilumatkan dengan
penggerus. Dianalisa kadar lignin dan selulosa awal. b. Eceng gondok disterilkan dengan autoclave suhu 120
o
C selama 15 menit, lalu didinginkan.
c. Eceng gondok didegradasi lignin dengan jamur pelapuk putihdengan penambahan nutrisi pada suhu kamar selama 7 hari. Dicuci,
dikeringkan, lalu dianalisa kadar lignin dan selulosa akhir. d. Eceng gondok diatur kelembabannya.
Skema praperlakuan fisik dan biologi ditunjukkan oleh Gambar 3.1 dan 3.2.
Mulai
Eceng GondokDi Cuci
Di Cacah
Universitas Sumatera Utara
Universitas Sumatera Utara
Dikeringkan pada Suhu 105
o
C
Apakah Eceng Gondok Tidak
Sudah Kering Ya
Dilakukan Analisa Kadar Lignin-Selulosa Sampel Awal
Di Gerus
Dilakukan Analisa Kadar Lignin-Selulosa Sampel Fisik
Data Kadar Lignin-Selulosa Sampel Fisik
Gambar 3.1 Skema PraperlakuanFisik Mulai
Disterilkan Bubuk Eceng Gondok pada T = 121
o
C selama 15 menit
Di Fermentasi oleh Jamur Pelapuk Putih selama 7 hari
Di Cuci
Universitas Sumatera Utara
Universitas Sumatera Utara
Universitas Sumatera Utara
Dikeringkan pada Suhu 105
o
C
Tidak Apakah Eceng Gondok
Sudah Kering Ya
Dilakukan Analisa Kadar Lignin-Selulosa Sampel Biologi
Data Kadar Lignin-Selulosa Sampel Biologi
Gambar 3.2 Skema Praperlakuan Biologi
3.4.3 Penyiapan Inokulum Cair