UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR, SEMI POLAR, DAN NON POLAR DAUN SIRSAK (Annona Uji Sitotoksik Ekstrak Etanol, Fraksi Polar, Semi Polar, dan Non Polar Daun Sirsak (Annona muricata L.) Terhadap Sel HeLa.
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR,
SEMI POLAR, DAN NON POLAR DAUN SIRSAK (Annona
muricata L.) TERHADAP SEL HeLa
SKRIPSI
Oleh:
GESTAN PUPUT HARLINDA
K100130027
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2017
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR,
SEMI POLAR DAN NON POLAR DAUN SIRSAK (Annona
muricata L.) TERHADAP SEL HeLa
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat
Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
GESTAN PUPUT HARLINDA
K100130027
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2017
i
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb
Puji syukur kehadirat Allah SWT atas rahmat serta hidayah-Nya penulis
mampu menyelesaikan skripsi yang berjudul “UJI SITOTOKSIK EKSTRAK
ETANOL, FRAKSI POLAR, SEMI POLAR, DAN NON POLAR DAUN
SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP SEL HeLa”.
Penyusunan penelitian ini dimaksudkan untuk memenuhi salah satu syarat
dalam memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta. Dalam kesempatan ini, perkenankan penulis untuk
menyampaikan rasa terimakasih dan penghargaan kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Anita Sukmawati, Ph.D., Apt. selaku pembimbing akademik.
3. Ibu Maryati, Ph.D., Apt. selaku pembimbing.
4. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St. selaku penguji 1 dan Bapak Andi Suhendi,
M.Sc., Apt. selaku penguji 2.
5. Bapak dan Ibuku tercinta yang senantiasa membimbing dan mendoakan
keberhasilanku dalam menyelesaikan tugas akhir ini.
Wassalamu’alaikum Wr. Wb
Surakarta, 29 Desember 2016
Penulis
iv
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL................................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................. ii
DEKLARASI ......................................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ........................................................................................... iv
DAFTAR ISI ........................................................................................................... v
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ vii
DAFTAR TABEL ................................................................................................ viii
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................... ix
DAFTAR SINGKATAN ........................................................................................ x
ABSTRAK ............................................................................................................. xi
ABSTRACT ............................................................................................................ xii
BAB I. PENDAHULUAN ...................................................................................... 1
A. Latar Belakang Masalah ........................................................................ 1
B. Rumusan Masalah ................................................................................. 2
C. Tujuan Penelitian .................................................................................. 2
D. Tinjauan Pustaka ................................................................................... 3
1. Tumbuhan sirsak (Annona muricata L.) ......................................... 3
2. Kanker serviks ................................................................................. 4
3. Sel HeLa .......................................................................................... 4
E. Landasan Teori ...................................................................................... 5
F. Hipotesis................................................................................................ 6
BAB II. METODE PENELITIAN .......................................................................... 7
A. Kategori dan Rancangan Penelitian ...................................................... 7
B. Variabel Penelitian ................................................................................ 7
C. Alat dan Bahan ...................................................................................... 7
1. Alat .................................................................................................. 7
2. Bahan............................................................................................... 7
D. Tempat Penelitian.................................................................................. 8
E. Jalannya Penelitian ................................................................................ 8
1. Pengumpulan Bahan........................................................................ 8
2. Pembuatan Serbuk ........................................................................... 8
3. Ekstraksi .......................................................................................... 8
v
4. Optimasi Fase Gerak ....................................................................... 9
5. Fraksinasi ........................................................................................ 9
6. Uji Sitotoksik ................................................................................ 10
7. Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ............................................ 12
F. Analisa Data ........................................................................................ 13
1. Uji Sitotoksik ................................................................................ 13
2. Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ............................................ 14
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN.............................................................. 15
A. Ekstraksi .............................................................................................. 15
B. Fraksinasi ............................................................................................ 15
C. Uji Sitotoksik ...................................................................................... 17
D. Uji Kromatografi Lapis Tipis .............................................................. 22
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................. 24
A. KESIMPULAN ................................................................................... 24
B. SARAN ............................................................................................... 24
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 25
vi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Skema uji sitotoksik ekstrak etanol, fraksi polar, semipolar, nonpolar
daun sirsak ...........................................................................................12
Gambar 2. Profil KLT ekstrak etanol daun sirsak pada UV 254 nm dengan fase
gerak n-heksan:etil asetat (5:5) (A), (6:4) (B), (7:3) (C), (8:2) (D),
(9:1) (E) ...............................................................................................16
Gambar 3. Profil KLT ekstrak etanol daun sirsak pada UV 366 nm dengan fase
gerak n-heksan:etil asetat (5:5) (A), (6:4) (B), (7:3) (C), (8:2) (D),
(9:1) (E) ...............................................................................................16
Gambar 4. Profil KLT penggolongan fraksi ekstrak etanol daun sirsak dilihat
pada sinar UV 254 nm (A) dan 366 nm (B) ........................................17
Gambar 5. Pengaruh perlakuan 500 g/mL ekstrak etanol (B) terhadap
morfologi sel HeLa dibandingkan dengan sel tanpa perlakuan (A)
dan sel setelah diberi reagen MTT (C) ................................................18
Gambar 6. Pengaruh perlakuan ekstrak etanol daun sirsak terhadap sel HeLa ....19
Gambar 7. Pengaruh perlakuan 500 g/mL fraksi polar (A), semi polar (B), dan
non polar (C) daun sirsak terhadap morfologi sel HeLa dibandingkan
dengan sel tanpa perlakuan (D). Anak panah menunjukkan sel yang
hidup. Pengaruh perlakuan fraksi polar, semi polar dan non polar
daun sirsak terhadap sel HeLa menunjukkan tingkat kematian sel
rendah. .................................................................................................21
Gambar 8. Profil KLT ekstrak etanol daun sirsak dengan fase gerak nheksan:etil asetat (6:4) sebelum diberi pereaksi dilihat pada sinar
tampak (A), UV 254 nm (B), UV 366 nm (C), setelah diberi peraksi
Dragendorff (D), FeCl3 (E), sitroborat (F), anisaldehid (G) ...............22
vii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Reagen deteksi senyawa.......................................................................... 14
Tabel 2. Rendemen hasil maserasi dan remasi ekstrak etanol daun sirsak ........... 15
Tabel 3. Rendemen pada fraksi polar, semi polar, dan non polar daun sirsak ...... 17
Tabel 4. Pengaruh perlakuan ekstrak etanol daun sirsak terhadap sel HeLa ........ 18
Tabel 5. Pengaruh perlakuan fraksi polar daun sirsak terhadap sel HeLa ............ 20
Tabel 6. Pengaruh perlakuan fraksi semi polar daun sirsak terhadap sel HeLa .... 20
Tabel 7. Pengaruh perlakuan fraksi non polar daun sirsak terhadap sel HeLa ..... 21
Tabel 8. Deteksi golongan senyawa ekstrak etanol daun sirsak dengan berbagai
pereaksi semprot ......................................................................................22
Tabel 9. Absorbansi kontrol sel dan media ........................................................... 36
Tabel 10. Absorbansi kontrol pelarut .................................................................... 36
Tabel 11. Absorbansi ekstrak etanol ..................................................................... 36
Tabel 12. Absorbansi fraksi polar ......................................................................... 36
Tabel 13. Absorbansi fraksi semi polar................................................................. 37
Tabel 14. Absorbansi fraksi non polar .................................................................. 37
viii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Perhitungan hasil rendemen............................................................. 29
Lampiran 2. Perhitungan kepadatan sel HeLa ..................................................... 32
Lampiran 3. Perhitungan seri konsentrasi ekstrak etanol, fraksi polar, semi polar
dan non polar daun sirsak ................................................................ 33
Lampiran 4. Data uji sitotoksik dengan Metode MTT pada 96-well plate
menggunakan ELISA reader ........................................................... 35
Lampiran 5. Data uji sitotoksik ekstrak etanol, fraksi polar, semi polar dan non
polar daun sirsak (Annona Muricata l.) terhadap sel HeLa ............. 36
Lampiran 6. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan ekstrak
etanol daun sirsak............................................................................. 38
Lampiran 7. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan fraksi
polar daun sirsak .............................................................................. 40
Lampiran 8. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan fraksi
semi polar daun sirsak...................................................................... 42
Lampiran 9. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan fraksi non
polar daun sirsak .............................................................................. 44
Lampiran 10. Perhitungan IC50 ekstrak etanol daun sirsak ................................... 46
ix
DAFTAR SINGKATAN
DMSO
: Dimethyl Sulfoxide
ELISA
: Enzim Linked Immunosorbent Assay
FBS
: Fetal Bovine Serum
HCl
: Hidrogen Chlorida
HPV
: Human Papilloma Virus
IC
: Inhibitory Concentration
KCV
: Kromatografi Cair Vakum
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
Rb
: Retinoblastoma
RPMI
: Roswell Park Memorial Institue
SDS
: Sodium Dodecyl Sulphate
x
ABSTRAK
Berdasarkan data yang ada, kanker merupakan penyebab kematian di
dunia. Oleh karena itu perlu dilakukan eksplorasi bahan alam untuk pengobatan
kanker. Salah satu tanaman yang berpotensi untuk dikembangkan sebagai
antikanker adalah daun sirsak (Annona muricata L.). Kandungan asetogenin pada
daun sirsak memiliki aktivitas sitotoksik. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanol, fraksi polar, semi polar dan non polar
daun sirsak terhadap sel HeLa, serta mengetahui golongan senyawa yang
terkandung dalam ekstrak atau fraksi yang paling aktif.
Pada penelitian ini ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi dengan
pelarut etanol 96%. Fraksinasi dilakukan dengan metode Kromatografi Cair
Vakum (KCV) dengan fase gerak n-heksan:etil asetat (5:5, 6:4, 6,5:3,5, 7:3, 8:2).
Uji sitotoksik menggunakan metode MTT assay dengan seri konsentrasi 500; 250;
125 dan 62,5 g/mL. Untuk mengetahui golongan senyawa yang terkandung
dalam ekstrak atau fraksi yang paling aktif digunakan uji Kromatografi Lapis
Tipis (KLT) dan disemprot dengan reagen semprot Dragendorff, FeCl3, sitroborat
dan anisaldehid.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun sirsak memiliki
aktivitas sitotoksik moderat terhadap sel HeLa dengan IC50 286,283 g/mL. Hasil
uji KLT menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun sirsak mengandung alkaloid,
polifenol, flavonoid dan saponin.
Kata kunci: Annona muricata L., sel HeLa, MTT assay, sitotoksik
xi
ABSTRACT
According to the existing data, cancer is the leading cause death in the
world. Therefore need to be explorate natural substances for cancer medication.
One of potential plant is soursop leaf (Annona muricata L.). Acetogenin substance
in soursop leaf has cytotoxic activity. The purpose of this research is to know the
cytotoxic effect of etanol extract, polar, semipolar and non polar fraction of
soursop leaf to HeLa cell line, and to know the compound in the extract or
fraction that most active.
In this research the extraction is use maceration method with etanol 96%
as solvent. Fractionationis use vacuum liquid chromatography (VLC) method with
n-heksan : etil asetat as mobile phase (5:5, 6:4, 6,5:3,5, 7:3, 8:2). The cytotoxic
test was conducted by MTT assay with concentration 500, 250, 125, and 62,5
µg/mL. To determine the class of compounds that contained in extracts or
fractions of the most active is use Thin Layer Chromatography (TLC).
Result showed that ethanol extract had moderate cytotoxic effects on HeLa
cell line with IC50 286,283 μg/mL. Substance compounds in etanol extract of
soursop leaf are alkaloid, polivenol, flavonoid, and saponin.
Keywords: Annona muricata L., HeLa cell line, MTT assay, cytotoxic
xii
SEMI POLAR, DAN NON POLAR DAUN SIRSAK (Annona
muricata L.) TERHADAP SEL HeLa
SKRIPSI
Oleh:
GESTAN PUPUT HARLINDA
K100130027
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2017
UJI SITOTOKSIK EKSTRAK ETANOL, FRAKSI POLAR,
SEMI POLAR DAN NON POLAR DAUN SIRSAK (Annona
muricata L.) TERHADAP SEL HeLa
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai derajat
Sarjana Farmasi (S. Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
GESTAN PUPUT HARLINDA
K100130027
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2017
i
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum Wr. Wb
Puji syukur kehadirat Allah SWT atas rahmat serta hidayah-Nya penulis
mampu menyelesaikan skripsi yang berjudul “UJI SITOTOKSIK EKSTRAK
ETANOL, FRAKSI POLAR, SEMI POLAR, DAN NON POLAR DAUN
SIRSAK (Annona muricata L.) TERHADAP SEL HeLa”.
Penyusunan penelitian ini dimaksudkan untuk memenuhi salah satu syarat
dalam memperoleh gelar Sarjana Farmasi di Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta. Dalam kesempatan ini, perkenankan penulis untuk
menyampaikan rasa terimakasih dan penghargaan kepada:
1. Bapak Azis Saifudin, Ph.D., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
2. Ibu Anita Sukmawati, Ph.D., Apt. selaku pembimbing akademik.
3. Ibu Maryati, Ph.D., Apt. selaku pembimbing.
4. Ibu Ratna Yuliani, M.Biotech.St. selaku penguji 1 dan Bapak Andi Suhendi,
M.Sc., Apt. selaku penguji 2.
5. Bapak dan Ibuku tercinta yang senantiasa membimbing dan mendoakan
keberhasilanku dalam menyelesaikan tugas akhir ini.
Wassalamu’alaikum Wr. Wb
Surakarta, 29 Desember 2016
Penulis
iv
DAFTAR ISI
HALAMAN JUDUL................................................................................................ i
HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................. ii
DEKLARASI ......................................................................................................... iii
KATA PENGANTAR ........................................................................................... iv
DAFTAR ISI ........................................................................................................... v
DAFTAR GAMBAR ............................................................................................ vii
DAFTAR TABEL ................................................................................................ viii
DAFTAR LAMPIRAN .......................................................................................... ix
DAFTAR SINGKATAN ........................................................................................ x
ABSTRAK ............................................................................................................. xi
ABSTRACT ............................................................................................................ xii
BAB I. PENDAHULUAN ...................................................................................... 1
A. Latar Belakang Masalah ........................................................................ 1
B. Rumusan Masalah ................................................................................. 2
C. Tujuan Penelitian .................................................................................. 2
D. Tinjauan Pustaka ................................................................................... 3
1. Tumbuhan sirsak (Annona muricata L.) ......................................... 3
2. Kanker serviks ................................................................................. 4
3. Sel HeLa .......................................................................................... 4
E. Landasan Teori ...................................................................................... 5
F. Hipotesis................................................................................................ 6
BAB II. METODE PENELITIAN .......................................................................... 7
A. Kategori dan Rancangan Penelitian ...................................................... 7
B. Variabel Penelitian ................................................................................ 7
C. Alat dan Bahan ...................................................................................... 7
1. Alat .................................................................................................. 7
2. Bahan............................................................................................... 7
D. Tempat Penelitian.................................................................................. 8
E. Jalannya Penelitian ................................................................................ 8
1. Pengumpulan Bahan........................................................................ 8
2. Pembuatan Serbuk ........................................................................... 8
3. Ekstraksi .......................................................................................... 8
v
4. Optimasi Fase Gerak ....................................................................... 9
5. Fraksinasi ........................................................................................ 9
6. Uji Sitotoksik ................................................................................ 10
7. Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ............................................ 12
F. Analisa Data ........................................................................................ 13
1. Uji Sitotoksik ................................................................................ 13
2. Uji Kromatografi Lapis Tipis (KLT) ............................................ 14
BAB III. HASIL DAN PEMBAHASAN.............................................................. 15
A. Ekstraksi .............................................................................................. 15
B. Fraksinasi ............................................................................................ 15
C. Uji Sitotoksik ...................................................................................... 17
D. Uji Kromatografi Lapis Tipis .............................................................. 22
BAB IV. KESIMPULAN DAN SARAN ............................................................. 24
A. KESIMPULAN ................................................................................... 24
B. SARAN ............................................................................................... 24
DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................... 25
vi
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Skema uji sitotoksik ekstrak etanol, fraksi polar, semipolar, nonpolar
daun sirsak ...........................................................................................12
Gambar 2. Profil KLT ekstrak etanol daun sirsak pada UV 254 nm dengan fase
gerak n-heksan:etil asetat (5:5) (A), (6:4) (B), (7:3) (C), (8:2) (D),
(9:1) (E) ...............................................................................................16
Gambar 3. Profil KLT ekstrak etanol daun sirsak pada UV 366 nm dengan fase
gerak n-heksan:etil asetat (5:5) (A), (6:4) (B), (7:3) (C), (8:2) (D),
(9:1) (E) ...............................................................................................16
Gambar 4. Profil KLT penggolongan fraksi ekstrak etanol daun sirsak dilihat
pada sinar UV 254 nm (A) dan 366 nm (B) ........................................17
Gambar 5. Pengaruh perlakuan 500 g/mL ekstrak etanol (B) terhadap
morfologi sel HeLa dibandingkan dengan sel tanpa perlakuan (A)
dan sel setelah diberi reagen MTT (C) ................................................18
Gambar 6. Pengaruh perlakuan ekstrak etanol daun sirsak terhadap sel HeLa ....19
Gambar 7. Pengaruh perlakuan 500 g/mL fraksi polar (A), semi polar (B), dan
non polar (C) daun sirsak terhadap morfologi sel HeLa dibandingkan
dengan sel tanpa perlakuan (D). Anak panah menunjukkan sel yang
hidup. Pengaruh perlakuan fraksi polar, semi polar dan non polar
daun sirsak terhadap sel HeLa menunjukkan tingkat kematian sel
rendah. .................................................................................................21
Gambar 8. Profil KLT ekstrak etanol daun sirsak dengan fase gerak nheksan:etil asetat (6:4) sebelum diberi pereaksi dilihat pada sinar
tampak (A), UV 254 nm (B), UV 366 nm (C), setelah diberi peraksi
Dragendorff (D), FeCl3 (E), sitroborat (F), anisaldehid (G) ...............22
vii
DAFTAR TABEL
Tabel 1. Reagen deteksi senyawa.......................................................................... 14
Tabel 2. Rendemen hasil maserasi dan remasi ekstrak etanol daun sirsak ........... 15
Tabel 3. Rendemen pada fraksi polar, semi polar, dan non polar daun sirsak ...... 17
Tabel 4. Pengaruh perlakuan ekstrak etanol daun sirsak terhadap sel HeLa ........ 18
Tabel 5. Pengaruh perlakuan fraksi polar daun sirsak terhadap sel HeLa ............ 20
Tabel 6. Pengaruh perlakuan fraksi semi polar daun sirsak terhadap sel HeLa .... 20
Tabel 7. Pengaruh perlakuan fraksi non polar daun sirsak terhadap sel HeLa ..... 21
Tabel 8. Deteksi golongan senyawa ekstrak etanol daun sirsak dengan berbagai
pereaksi semprot ......................................................................................22
Tabel 9. Absorbansi kontrol sel dan media ........................................................... 36
Tabel 10. Absorbansi kontrol pelarut .................................................................... 36
Tabel 11. Absorbansi ekstrak etanol ..................................................................... 36
Tabel 12. Absorbansi fraksi polar ......................................................................... 36
Tabel 13. Absorbansi fraksi semi polar................................................................. 37
Tabel 14. Absorbansi fraksi non polar .................................................................. 37
viii
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Perhitungan hasil rendemen............................................................. 29
Lampiran 2. Perhitungan kepadatan sel HeLa ..................................................... 32
Lampiran 3. Perhitungan seri konsentrasi ekstrak etanol, fraksi polar, semi polar
dan non polar daun sirsak ................................................................ 33
Lampiran 4. Data uji sitotoksik dengan Metode MTT pada 96-well plate
menggunakan ELISA reader ........................................................... 35
Lampiran 5. Data uji sitotoksik ekstrak etanol, fraksi polar, semi polar dan non
polar daun sirsak (Annona Muricata l.) terhadap sel HeLa ............. 36
Lampiran 6. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan ekstrak
etanol daun sirsak............................................................................. 38
Lampiran 7. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan fraksi
polar daun sirsak .............................................................................. 40
Lampiran 8. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan fraksi
semi polar daun sirsak...................................................................... 42
Lampiran 9. Perhitungan persentase sel hidup akibat perlakuan dengan fraksi non
polar daun sirsak .............................................................................. 44
Lampiran 10. Perhitungan IC50 ekstrak etanol daun sirsak ................................... 46
ix
DAFTAR SINGKATAN
DMSO
: Dimethyl Sulfoxide
ELISA
: Enzim Linked Immunosorbent Assay
FBS
: Fetal Bovine Serum
HCl
: Hidrogen Chlorida
HPV
: Human Papilloma Virus
IC
: Inhibitory Concentration
KCV
: Kromatografi Cair Vakum
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
Rb
: Retinoblastoma
RPMI
: Roswell Park Memorial Institue
SDS
: Sodium Dodecyl Sulphate
x
ABSTRAK
Berdasarkan data yang ada, kanker merupakan penyebab kematian di
dunia. Oleh karena itu perlu dilakukan eksplorasi bahan alam untuk pengobatan
kanker. Salah satu tanaman yang berpotensi untuk dikembangkan sebagai
antikanker adalah daun sirsak (Annona muricata L.). Kandungan asetogenin pada
daun sirsak memiliki aktivitas sitotoksik. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui efek sitotoksik ekstrak etanol, fraksi polar, semi polar dan non polar
daun sirsak terhadap sel HeLa, serta mengetahui golongan senyawa yang
terkandung dalam ekstrak atau fraksi yang paling aktif.
Pada penelitian ini ekstraksi dilakukan dengan metode maserasi dengan
pelarut etanol 96%. Fraksinasi dilakukan dengan metode Kromatografi Cair
Vakum (KCV) dengan fase gerak n-heksan:etil asetat (5:5, 6:4, 6,5:3,5, 7:3, 8:2).
Uji sitotoksik menggunakan metode MTT assay dengan seri konsentrasi 500; 250;
125 dan 62,5 g/mL. Untuk mengetahui golongan senyawa yang terkandung
dalam ekstrak atau fraksi yang paling aktif digunakan uji Kromatografi Lapis
Tipis (KLT) dan disemprot dengan reagen semprot Dragendorff, FeCl3, sitroborat
dan anisaldehid.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun sirsak memiliki
aktivitas sitotoksik moderat terhadap sel HeLa dengan IC50 286,283 g/mL. Hasil
uji KLT menunjukkan bahwa ekstrak etanol daun sirsak mengandung alkaloid,
polifenol, flavonoid dan saponin.
Kata kunci: Annona muricata L., sel HeLa, MTT assay, sitotoksik
xi
ABSTRACT
According to the existing data, cancer is the leading cause death in the
world. Therefore need to be explorate natural substances for cancer medication.
One of potential plant is soursop leaf (Annona muricata L.). Acetogenin substance
in soursop leaf has cytotoxic activity. The purpose of this research is to know the
cytotoxic effect of etanol extract, polar, semipolar and non polar fraction of
soursop leaf to HeLa cell line, and to know the compound in the extract or
fraction that most active.
In this research the extraction is use maceration method with etanol 96%
as solvent. Fractionationis use vacuum liquid chromatography (VLC) method with
n-heksan : etil asetat as mobile phase (5:5, 6:4, 6,5:3,5, 7:3, 8:2). The cytotoxic
test was conducted by MTT assay with concentration 500, 250, 125, and 62,5
µg/mL. To determine the class of compounds that contained in extracts or
fractions of the most active is use Thin Layer Chromatography (TLC).
Result showed that ethanol extract had moderate cytotoxic effects on HeLa
cell line with IC50 286,283 μg/mL. Substance compounds in etanol extract of
soursop leaf are alkaloid, polivenol, flavonoid, and saponin.
Keywords: Annona muricata L., HeLa cell line, MTT assay, cytotoxic
xii