Jenis dan Rancangan Penelitian Variabel dan Definisi Operasional 1. Variabel penelitian

34

BAB III METODE PENELITIAN

A. Jenis dan Rancangan Penelitian

Penelitian uji toksisitas Subkronik daun sirsak Annona muricata L.: kajian terhadap sistem hematologi pada tikus jantan dan betina termasuk penelitian eksperimental murni dengan menggunakan rancangan penelitian acak, lengkap, pola searah.

B. Variabel dan Definisi Operasional 1. Variabel penelitian

a. Variabel bebas Dosis infusa daun sirsak. Dosis infusa daun sirsak adalah sejumlah mg serbuk daun sirsak dalam bentuk sediaan infusa, tiap satuan kilogram berat badan subyek uji. b. Variabel tergantung Sistem hematologi subyek uji kadar hemoglobin, eritrosit, hematokrit, leukosit, MCV, MCH, MCHC, RDW, trombosit, hitung jenis limfosit, hitung jenis monosit, hitung jenis neutrofil, hitung jenis eosinofil, hitung jenis basofil, LED jam I dan LED jam II. Efek yang ditimbulkan pada perubahan range kadar sistem hematologi setelah pemberian infusa daun sirsak menjadi parameter penilaian secara kuantitatif. c. Variabel pengacau terkendali 1 Hewan uji Hewan uji terdiri dari tikus putih jantan dan betina galur Sprague Dawley, berat badan 170-280 gram, berumur 2-3 bulan, keadaan fisik berstatus sehat, diperoleh dari Laboratorium Farmakologi dan Toksikologi, Fakultas Farmasi, Universitas Sanata Dharma, Yogyakarta. 2 Bahan uji Daun sirsak yang dipilih adalah daun antara pucuk dan pangkal daun, memiliki warna yang hijau dan segar. Daun sirsak yang diperoleh dari Jalan Kaliurang, Km 10, Sleman-Propinsi Daerah Istimewa Yogyakarta pada bulan Mei-Juni, 2012. d. Variabel pengacau tak terkendali Keadaan fisiologi dan patologi hewan uji: walaupun keadaan fisik subjek uji dalam keadaan sehat, hal ini belum menjamin bahwa sistem hematologi juga berstatus sehatnormal.

2. Definisi Operasional

a. Infusa daun sirsak Infusa daun sirsak diperoleh dengan cara merebus serbuk kering daun sirsak sebanyak 6,0 gram dalam pelarut aquadest 100,0 ml pada suhu 90 C selama 15 menit, kemudian disaring menggunakan kain flannel. b. Uji ketoksikan subkronis Uji ketoksikan Subkronis merupakan uji ketoksikan infusa daun sirsak yang diberikan sekali sehari selama 30 hari secara per oral. c. Sistem hematologi Sistem hematologi mencakup komponen-komponen darah rutin lengkap meliputi kadar hemoglobin, kadar eritrosit, kadar hematokrit, leukosit, MCV, MCH, MCHC, RDW, trombosit PLT, hitung jenis limfosit, monosit, neurofil, eosinofil, basofil, LED jam I, dan LED jam II.

C. Alat dan Bahan Penelitian 1. Alat penelitian