12
ribosom bakteri dan enzim yang esensial untuk sintesis protein sehingga sintesis protein terhambat.
•
Menghambat sintesis asam nukleat
4
Mengganggu fungsi dari asam nukleat, menghambat enzim yang berperan dalam sintesis asam nukleat.
4
Agen yang bekerja dengan mekanisme ini adalah kuinolon.
2.4 Metode Ekstraksi
4,5
Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang dapat larut shingga terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair. Simplisia
yang diekstrak mengandung senyawa aktif yang dapat larut dan senyawa yang tidak dapat larut seperti serat, karbohidrat, protein, dan lain-lain.
12
Senyawa aktif yang terdapat pada berbagai simplisia dapat digolongkan ke dalam golongan
minyak astiri, alkaloid, flavonoid, dan lain-lain. Ada beberapa metode yang umum digunakan untuk ekstraksi yaitu:
Ekstraksi dengan Menggunakan Pelarut
11
Cara Dingin
• Maserasi : Maserasi merupakan proses pengekstrakan simplisia dengan menggunakan pelarut dengan beberapa kali pengocokan atau pengadukan pada
temperatur ruangan. Cara ini dapat menarik zat-zat berkhasiat yang tahan pemanasan maupun yang tidak tahan pemanasan.
• Perkolasi: Perkolasi adalah ekstraksi dengan pelarut yang selalu baru sampaisempurna exhaustive extraction yang umumnya dilakukan pada
temperatur ruangan. Ekstraksi ini membutuhkan pelarut yang lebih banyak.
11
11
2.5 Metode Pengujian Antibakteri
2.5.1 Metode Difusi
Pada metode ini, penentuan aktivitas didasarkan pada kemampuan difusi dari zat antimikroba dalam lempeng agar yang telah diinokulasi dengan mikroba
uji. Pengamatan yang akan diperoleh adalah ada atau tidaknya zona hambatan daerah bening yang tidak memperlihatkan adanya pertumbuhan bakteri yang
akan terbentuk di sekeliling zat antimikroba pada masa inkubasi bakteri. Pada metode ini dapat dilakukan dengan 3 cara, yaitu:
13
13
a. Cakram Disc Pada cara ini, digunakan suatu cakram kertas saring paper disc yang
berfungsi sebagai tempat menampung zat antimikroba. Kertas saring yang mengandung zat antimikroba tersebut diletakkan pada lempeng agar yang telah
diinokulasi dengan mikroba uji. Hasil pengamatan yang akan diperoleh adalah ada tidaknya daerah bening yang terbentuk disekeliling kertas cakram yang
menunjukkan zona hambatan pertumbuhan bakteri. Semakin besar zona hambatan yang ditunjukkan semakin besar pula aktivitas zat antimikroba.
13
Tabel 2.1 Klasifikasi Respon Hambat Pertumbuhan Bakteri.
Diameter zona hambat
19
Respon hambat pertumbuhan
20 mm Sangat kuat
10 – 20 mm Kuat
5 – 10 mm Sedang
5 mm Lemah
Sumber : Greenwood yang disitasi oleh Pratama 2005.
b. Cara parit Ditch Suatu lempeng agar yang telah diinokulasi dengan bakteri uji dibuat
sebidang parit. Parit tersebut diisi dengan zat antimikroba, kemudian diinkubasi pada waktu dan suhu optimum yang sesuai untuk mikroba uji. Hasil pengamatan
yang akan diperoleh adalah ada atau tidaknya zona hambatan yang tebentuk disekitar parit. Analog dengan cara cakram, besarnya zona hambat yang
dihasilkan sebanding dengan kemampuan aktivitas dari zat antimikroba yang diujikan.
c. Cara Lubang HoleCup
13
Pada lempeng agar yang telah diinokulasi dengan bakteri uji dibuat suatu lubang yang selanjutnya diisi dengan zat antimikroba uji. Cara ini dapat diganti
dengan meletakkan cawan porselin kecil yang biasa disebut fish spines di atas medium agar. Kemudian cawan-cawan tersebut diisi dengan zat uji. Setelah
inkubasi pada suhu dan waktu optimum yang sesuai dengan mikroba uji,
14
dilakukan pengamatan dengan melihat ada atau tidaknya zona hambatdi sekeliling lubang atau cawan.
13
2.6 Kerangka Teori
Ekstral bawang dayak EleutherinepalmifoliaL. Merr memiliki zat aktif yang dapat bersifat bakteriosidal dan bakteriostatik, diantaranya flavonoid, tanin,
saponin. Sehingga saat dilakukan uji dengan metode disc diffusion akan didapatkan zona hambat.
Ekstrak bawang dayak
Eleutherinep almifoliaL.
Merr
Agen anti mikroba
Biakan Bakteri Escherichia coli
Pertumbuhan
B
akteri Escherichia coliterhambat
Pertumbuh
an
B
akteri Escherichia coli
normal
Terbentuk zona hambat Flavonoid
Membentuk senyawa
kompleks terhadap protein
ekstraseluler Mengganggu
merusak membran sel
bakteri Saponin
Berikatan dgn protein
transmembran pada dinding sel
Mengganggu protein
transmembran rusakperme
abilitas sel Tanin
Menghambat enzim reserve
transkriptse DNA
topoisomerase Pertumbuhan
bakteri terganggu
Tidak terbentuk zona hambat
Kemungkinan bersifat
bakteriostatik dan bakterisidal
15
2.7 Kerangka konsep
2.8 Definisi Operasional
No Variabel
Definisi Alat ukur
Hasil ukur Skala
1 Zona hambat
pertumbuhan Escherichia
coli Zona terang
disekeliling cakram yang
tidak ditemukan
adanya pertumbuhan
E.coli Penggaris
mm Diameter
zona hambat
mm Numerik
Biakan bakteri Escherichia coli
Ekstrak bawang dayak Eleutherine
palmifolia L.Merr Flavonoid
Saponin
Tanin Pertumbuhan
bakteri Escherichia
coli
?
16
BAB 3 RANCANGAN PENELITIAN
3.1 Desain Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian ekperimental laboratorik dengan teknik disc diffusion untuk melihat pengaruh ekstrak bawang dayak Eleutherine
palmifolia L. Merr terhadap pertumbuhan bakteri Escherichia coli.
3.2 Waktu dan Tempat Ekstraksi dan Uji Efektivitas
Penelitian ini dilakukan pada bulan Februari 2013 sampai bulan Agustus 2014 di Laboratorium Fakultas Kedokteran dan Ilmu Kesehatan UIN Syarif
Hidayatullah Jakarta dan proses ekstraksi bawang dayak Eleutherine palmifolia L. Merr dilakukan di Balai Penelitian Tanaman Rempah dan Obat Balittro Jl.
Tentara Pelajar No. 3 Bogor–Jawa Barat 16111 Indonesia.
3.3 Bahan Yang Diuji
Ekstrak bawang dayak Eleutherine palmifolia L. Merr dengan pelarut etanol 96 yang diuji pada biakan bakteri Escherichia coli dengan pengulangan
sebanyak 6 kali.
3.4 Identifikasi Variabel
3.4.1 Variabel Bebas
Ekstrak bawang dayak Eleutherine palmifolia L. Merr dengan pelarut etanol 96 yang dibagi dalam tiga konsentrasi berbeda. Kelompok pertama
dengan konsentrasi 10 mgml, kelompok kedua dengan konsentrasi 20 mgml, kelompok ketiga dengan konsentrasi 40 mgml, satukontrolnegatif dan satu
kontrol positif berupa antibiotik amoksisilin 25µg.
