d. Transduser Ugo basille
®
e. Rekorder Ugo basille
®
f. Dua set organ bath volume 20 ml g. Bridge amplifier Ugo basille
®
h. Pipet mikro 100 μl, 1000 μl Eppendorf
®
F. Cara Kerja
1. Penyiapan Larutan Buffer tyrode
Larutan buffer tyrode terdiri atas dua macam larutan, yaitu larutan A dan B. Komposisi larutan dapat dilihat dalam tabel 1 berikut.
Bahan-bahan pada tabel larutan A masing-masing ditimbang, lalu dimasukkan ke dalam labu takar, kemudian dilarutkan dengan akuades
hingga volume 1L. Bahan pada tabel larutan B ditimbang, kemudian dimasukkan ke labu takar, dan dilarutkan dengan akuades hingga volume
1L. Untuk membuat larutan buffer tyrode, dibuat campuran antara 100 ml larutan A, 100 ml larutan B, 1,00 g glukosa, kemudian ditambahkan 800
ml akuades Anonim, 1986.
Tabel 1. Komposisi Buffer tyrode
Komposisi larutan A Komposisi larutan B
Bahan Jumlah
Bahan Jumlah
NaCl KCl
MgCl
2
.6H
2
O CaCl
2
.2H
2
O NaH
2
PO
4
.2H
2
O 80 g
2,00 g 2,14 g
2,64 g 0,65 g
NaHCO3 10 g
2. Penyiapan Larutan Senyawa 1-2,5-dihidroksifenil-3-piridin-2-il-
propenon 10 µM dan 20 µM
Penelitian ini menggunakan sebagai senyawa1-2,5-dihidroksifenil- 3-piridin-2-il-propenon. Larutan stok senyawa obat dibuat dalam
konsentrasi 2 x 10
-3
M. Sebagai senyawa uji, diberikan dalam konsentrasi 10 dan 20 µM. Larutan stok konsentrasi 2 x 10
-3
M ditambahkan sebanyak 100 atau 1000 µL ke dalam organ bath yang telah berisi organ uterus dan
larutan buffer tyrode 20,0 mL untuk mencapai senyawa 1-2,5- dihidroksifenil-3-piridin-2-il-propenon konsentrasi 10 µM dan 20 µM.
3. Pembuatan Larutan Asetilkolin Bromida
Asetilkolin bromida memiliki bobot molekul 240,1 gmol. Digunakan asetilkolin dengan konsentrasi 2 x 10
-1
M dalam akuades sebagai larutan stok asetilkolin. Pengenceran larutan stok asetilkolin
dilakukan dengan cara bertingkat dari larutan stok asetlkolin 2 x 10
-1
M sehingga diperoleh larutan asetilkolin konsentrasi 2 x 10
-2
; 2 x 10
-3
; 2 x 10
-4
dan 2 x 10
-5
M.
4. Preparasi organ Uterus
Digunakan marmut betina yang tidak sedang hamil dengan rentang bobot 400
– 500 g. Marmut dikorbankan dengan cara dislokasi tulang belakang kepala cervix dan selanjutnya, dilakukan pembedahan pada
bagian perut. Kemudian diambil bagian uterusdari perut marmut tersebut sepanjang 2 cm. Uterus yang telah diambil diletakan ke dalam cawan
fiksasi yang telah diisi larutan buffer tyrode, kemudian uterus dibersihkan
