Produksi Protease Bacillus pumilus yang Diisolasi dari Limbah Cair Tahu dengan Feermentasi Terkontrol
Sei3ala perkara d a p a t kutanggung d i dalam D I A yang memberi
kekuatan kepadaku.
F i l i p i 4 : 13
PRODUKSI PRO TEASE ~ a c i l l u spumilus
YANG DlISOLASl DARl LIMBAH CAlR TAHU
DENGAN FERMENTASI TERKONTROL
Oleh
AMALIA KAWIRA
F 26. 1089
1 9 9 3
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANlAN
INSTITUT PERTANlAN BOGOR
B O G O R
AMALIA
F 261089.
Produksi P r o t e a s e Bac~llos
D i i s o l a s i d a r i Limbah C a i r Tahu d e n g a n
D i bawah b i m b i n g a n Maggy
T.
Fermentasi Terkontrol.
S u h a r t o n o d a n Budiatman S a t i a w i h a r d j a .
KAWIRA
p ~ t m i l u s yang
RINGKASAN
B a k t e r i y a n g d i g u n a k a n d a l a m p e n e l i t i a n i n i a d a l a h H.
p ~ t r n i 1 ~ 1(~y. l ) y a n g d i i s o l a s i d a r i l i m b a h c a i r
tahu
dan t e l a h d i i d e n t i f i k a s i s e c a r a f i s i o l a g i s dan
serta
dilakukan
pencirian
dengan
(LCT)
morfologis
Pulsed-F~eld
Gel
E l e c t r o p h o r e s ~ sy a n g d i l a k u k a n o l e h Likumahwa ( 1 9 9 3 ) .
Media
yang
f e r m e n t a s i yang digunakan a d a l a h media
direkomendasikan
oleh
Mao
(1992)
0 . 5 , d a n 1% s e r t a
dengan
penambahan
kasein
penambahan
g l u k o s a 0 . 5 d a n I % , ampas t a p i o k a 0 . 5 d a n
skim
0.25,
sintetik
LCT
dengan
0 . 5 d a n 1 % .dan k o m b i n a s i g l u k o s a 1%d a n s k i m
I%,
0.5%.
Penggunaan g l u k o s a d i l a k u k a n u n t u k menambah kandungan g u l a
pereduksi
pada
LCT.
S e d a n g k a n ampas
digunakan
s e b a g a i a l t e r n a t i f sumber k a r b o n
s e l a i n g l u k o s a dan k a s e i n .
induksi
sintetik
pada
p r o t e a s e yang
tapioka
dan
skim
dan
nitrogen
Untuk m e n g e t a h u i a d a
tidaknya
dihasilkan
d e n g a n penambahan k a s e i n .
digunakan
Media-media
media
tersebut
digunakan pada f e r m e n t o r dengan i n k u b a t o r bergoyang selama
48
jam p a d a s u h u 3 7 O ~ , 200rpm.
adalah
pengukuran
pH,
Analisis
kekeruhan sel
rang
pada
a k t i v i t a s p r o t e a s e dengan metode Bergmeyer.
610
dilakukan
nm
dan
Media
yang menghasilkan a k t i v i t a s
dicobakan
f e r m e n t o r d e n g a n sistem
batch
terbaik
dan
red-
F e r m e n t a s i d i l a k u k a n s e l a m a 4 8 jam p a d a s u h u 3 7 ' ~ .
batcn.
pH
pada
protease
7, a g i t a s i 4 0 0 rpm.
ted-batch
Adapun a n a l i s i s y a n g d i l a k u k a n
aktivitas
protease
serta
glukosa
dilakukan
m e d i a f e e d p a d a jam ke-20 d e n g a n k e c e p a t a n
penambahan
ml/jam.
Pada s i s t e m
Hasil
metode
pengukuran
penelitian
adalah
Bergmeyer,
menunjukkan
analisis
analisis
kekeruhan s e l
pada
bahwa
20
kadar
610
nm.
protease
yang
d i h a s i l k a n d i i n d u k s i p a d a m e d i a s i n t e t i k d e n g a n penambahan
0 . 5 % p a d a j a m ke-16 ( 9 . 5 ~ 1 0 - ~~ / 1 0 ~ s e l d) a n
kasein
LCT d e n g a n penambahan k a s e i n 0 . 2 5 % p a d a jam
media
24,
pada
ke-16,
3 2 ( 8 . 3 5 ~ 1 0 - ~ ,4 . 3 7 ~ 1 0 - ~ , 3 . 1 5 x 1 0 - ~ u / 1 0 7 s e l )
dan
s e r t a d e n g a n penambahan k a s e i n 0 . 5 % p a d a jam ke-40 d a n
( 2 . 8 4 ~ 1 0 - ~ , 9.43x10-~ ~ / 1 0 ~ s e l ) . Aktivitas
tertinggi
adalah
media s i n t e t i k
0.033 U/ml
dengan
(
pada
umur
U/ml
penambahan
kasein
jam;
0.25% menjadi
U/ml
penambahan
kasein
p a d a umur 24 j a m ;
0.5% menjadi 0.181 U / m l
16
protease
( 3 . 5 6 x 1 0 - ~ ~ / 1 0 ~ s e lp )a d a umur 4 0
1 . 5 9 x 1 0 - ~ u/107sel)
kasein
tanpa
48
dengan
0.030
penambahan
( 9 . 5 x 1 0 - ~ u/107sel)
pada
j a m ; d e n g a n penambahan k a s e i n 1% m e n j a d i
0.080
( 1 . 4 2 ~ 1 0 - u~/ 1 0 7 s e l )
p a d a umur 3 2 j a m .
Aktivitas
p r o t e a s e t e r t i n g g i p a d a LCT t a n p a penambahan k a s e i n a d a l a h
0.027
U/ml
penambahan
( 2 . 6 5 x 1 0 - ~ u/107sel)
kasein
0.25% menjadi
p a d a umur 3 2 j a m ;
0.054
U/ml
dengan
(4.35~10-~
u / 1 0 7 s e l ) p a d a umur 24 jam; d e n g a n penambahan k a s e i n
0.5%
0.086 U / m 1
menjadi
Aktivitas
protease
t e r t i n g g i p a d a LCT
tanpa
penambahan
g l u k o s a maupun ampas t a p i o k a a d a l a h 0 . 0 2 7 U / m l
~ / l ~ ~ s ep ald)a
umur
32
jam;
t a p i o k a 0 . 5 % menjadi 0.046 U / m l
umur
0.031
16 j a m ;
U/ml
penambahan
U/lOsel)
dengan
(2.65~10-~
penambahan
0 . 5 % menjadi
0.034
U/ml
p a d a umur 32 jam; dengan penambahan
pada
glukosa
( 3 . 4 6 x 1 0 - ~ U/10 7 s e l ) p a d a umur 32
umur 32 jam; dengan
menjadi 0.120 U / m l
dengan
(2.56~10-~
dengan penambahan skim 0 . 5 % m e n j a d i 0 . 3 9 5 U / m l
u/107sel)
pada
1% m e n j a d i
( 3 . 5 3 x 1 0 - ~ ~ / 1 0 ~ s e lp)a d a umur 4 0 jam;
glukosa
ampas
( 4 . 4 2 x 1 0 - ~ u/107sel)
dengan penambahan ampas t a p i o k a
menjadi 0.046 U / m l
penambahan
(1
1%
jam;
(2.92~10-~
skim
( 8 . 8 9 x 1 0 - ~ u / 1 0 7 s e l ) p a d a umur 48
dengan penambahan g l u k o s a 1%d a n skim 0 . 5 % m e n j a d i
U/ml
jam.
( 8 . 8 7 ~ 1 0 - u~/ 1 0 7 s e l ) p a d a umur 8
1%
jam;
0.043
. 7 8 ~ 1 0 -u~/ 1 0 7 s e l ) pada umur 24 jam.
Penggunaan
fermentor
protease
u/107sel).
protease
Sedangkan
protease.
LCT
dengan
penambahan
skim
sistem b a t c h menyebabkan p e n i n g k a t a n
dari
0.385 U/ml
menjadi 1 . 2 6 8
U/ml
0 . 5 % pada
aktivitas
(9.26x10-~
Waktu y a n g d i p e r l u k a n u n t u k mencapai a k t i v i t a s
t e r t i n g g i b e r k u r a n g d a r i 3 2 jam m e n j a d i 20
s i s t e m fed-batch t i d a k
meningkatkan
Aktivitas protease tertingginya
U / m 1 ( 6 . 0 5 x 1 0 - ~ ~ / 1 0 ~ s e lp )a d a umur 20 j a m .
jam.
aktivitas
adalah
0.049
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
PRODUKSI PROTEASE Bacil 1 u s p u m i l us
YANG DIISOLASI DARI LIMBAH CAIR TAHU
DENGAN FERMENTASI TERKONTROL
SKRIPSI
S e b a g a i s a l a h s a t u syarat u n t u k memperoleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN
p a d a JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN d a n G I Z I
Fakultas Teknologi Pertanian
I n s t i t u t P e r t a n i a n Bogor
oleh
AHALIA KAWIRA
F 261089
D i l a h i r k a n p a d a t a n g g a l 1 Maret 1 9 7 1
d i Jakarta
T a n g g a l l u l u s : 27 November 1 9 9 3
Disetujui,
Dosen Pembimbing I
o s e n P e m b i m b i n g I1
Sei3ala perkara d a p a t kutanggung d i dalam D I A yang memberi
kekuatan kepadaku.
F i l i p i 4 : 13
PRODUKSI PRO TEASE ~ a c i l l u spumilus
YANG DlISOLASl DARl LIMBAH CAlR TAHU
DENGAN FERMENTASI TERKONTROL
Oleh
AMALIA KAWIRA
F 26. 1089
1 9 9 3
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANlAN
INSTITUT PERTANlAN BOGOR
B O G O R
AMALIA
F 261089.
Produksi P r o t e a s e Bac~llos
D i i s o l a s i d a r i Limbah C a i r Tahu d e n g a n
D i bawah b i m b i n g a n Maggy
T.
Fermentasi Terkontrol.
S u h a r t o n o d a n Budiatman S a t i a w i h a r d j a .
KAWIRA
p ~ t m i l u s yang
RINGKASAN
B a k t e r i y a n g d i g u n a k a n d a l a m p e n e l i t i a n i n i a d a l a h H.
p ~ t r n i 1 ~ 1(~y. l ) y a n g d i i s o l a s i d a r i l i m b a h c a i r
tahu
dan t e l a h d i i d e n t i f i k a s i s e c a r a f i s i o l a g i s dan
serta
dilakukan
pencirian
dengan
(LCT)
morfologis
Pulsed-F~eld
Gel
E l e c t r o p h o r e s ~ sy a n g d i l a k u k a n o l e h Likumahwa ( 1 9 9 3 ) .
Media
yang
f e r m e n t a s i yang digunakan a d a l a h media
direkomendasikan
oleh
Mao
(1992)
0 . 5 , d a n 1% s e r t a
dengan
penambahan
kasein
penambahan
g l u k o s a 0 . 5 d a n I % , ampas t a p i o k a 0 . 5 d a n
skim
0.25,
sintetik
LCT
dengan
0 . 5 d a n 1 % .dan k o m b i n a s i g l u k o s a 1%d a n s k i m
I%,
0.5%.
Penggunaan g l u k o s a d i l a k u k a n u n t u k menambah kandungan g u l a
pereduksi
pada
LCT.
S e d a n g k a n ampas
digunakan
s e b a g a i a l t e r n a t i f sumber k a r b o n
s e l a i n g l u k o s a dan k a s e i n .
induksi
sintetik
pada
p r o t e a s e yang
tapioka
dan
skim
dan
nitrogen
Untuk m e n g e t a h u i a d a
tidaknya
dihasilkan
d e n g a n penambahan k a s e i n .
digunakan
Media-media
media
tersebut
digunakan pada f e r m e n t o r dengan i n k u b a t o r bergoyang selama
48
jam p a d a s u h u 3 7 O ~ , 200rpm.
adalah
pengukuran
pH,
Analisis
kekeruhan sel
rang
pada
a k t i v i t a s p r o t e a s e dengan metode Bergmeyer.
610
dilakukan
nm
dan
Media
yang menghasilkan a k t i v i t a s
dicobakan
f e r m e n t o r d e n g a n sistem
batch
terbaik
dan
red-
F e r m e n t a s i d i l a k u k a n s e l a m a 4 8 jam p a d a s u h u 3 7 ' ~ .
batcn.
pH
pada
protease
7, a g i t a s i 4 0 0 rpm.
ted-batch
Adapun a n a l i s i s y a n g d i l a k u k a n
aktivitas
protease
serta
glukosa
dilakukan
m e d i a f e e d p a d a jam ke-20 d e n g a n k e c e p a t a n
penambahan
ml/jam.
Pada s i s t e m
Hasil
metode
pengukuran
penelitian
adalah
Bergmeyer,
menunjukkan
analisis
analisis
kekeruhan s e l
pada
bahwa
20
kadar
610
nm.
protease
yang
d i h a s i l k a n d i i n d u k s i p a d a m e d i a s i n t e t i k d e n g a n penambahan
0 . 5 % p a d a j a m ke-16 ( 9 . 5 ~ 1 0 - ~~ / 1 0 ~ s e l d) a n
kasein
LCT d e n g a n penambahan k a s e i n 0 . 2 5 % p a d a jam
media
24,
pada
ke-16,
3 2 ( 8 . 3 5 ~ 1 0 - ~ ,4 . 3 7 ~ 1 0 - ~ , 3 . 1 5 x 1 0 - ~ u / 1 0 7 s e l )
dan
s e r t a d e n g a n penambahan k a s e i n 0 . 5 % p a d a jam ke-40 d a n
( 2 . 8 4 ~ 1 0 - ~ , 9.43x10-~ ~ / 1 0 ~ s e l ) . Aktivitas
tertinggi
adalah
media s i n t e t i k
0.033 U/ml
dengan
(
pada
umur
U/ml
penambahan
kasein
jam;
0.25% menjadi
U/ml
penambahan
kasein
p a d a umur 24 j a m ;
0.5% menjadi 0.181 U / m l
16
protease
( 3 . 5 6 x 1 0 - ~ ~ / 1 0 ~ s e lp )a d a umur 4 0
1 . 5 9 x 1 0 - ~ u/107sel)
kasein
tanpa
48
dengan
0.030
penambahan
( 9 . 5 x 1 0 - ~ u/107sel)
pada
j a m ; d e n g a n penambahan k a s e i n 1% m e n j a d i
0.080
( 1 . 4 2 ~ 1 0 - u~/ 1 0 7 s e l )
p a d a umur 3 2 j a m .
Aktivitas
p r o t e a s e t e r t i n g g i p a d a LCT t a n p a penambahan k a s e i n a d a l a h
0.027
U/ml
penambahan
( 2 . 6 5 x 1 0 - ~ u/107sel)
kasein
0.25% menjadi
p a d a umur 3 2 j a m ;
0.054
U/ml
dengan
(4.35~10-~
u / 1 0 7 s e l ) p a d a umur 24 jam; d e n g a n penambahan k a s e i n
0.5%
0.086 U / m 1
menjadi
Aktivitas
protease
t e r t i n g g i p a d a LCT
tanpa
penambahan
g l u k o s a maupun ampas t a p i o k a a d a l a h 0 . 0 2 7 U / m l
~ / l ~ ~ s ep ald)a
umur
32
jam;
t a p i o k a 0 . 5 % menjadi 0.046 U / m l
umur
0.031
16 j a m ;
U/ml
penambahan
U/lOsel)
dengan
(2.65~10-~
penambahan
0 . 5 % menjadi
0.034
U/ml
p a d a umur 32 jam; dengan penambahan
pada
glukosa
( 3 . 4 6 x 1 0 - ~ U/10 7 s e l ) p a d a umur 32
umur 32 jam; dengan
menjadi 0.120 U / m l
dengan
(2.56~10-~
dengan penambahan skim 0 . 5 % m e n j a d i 0 . 3 9 5 U / m l
u/107sel)
pada
1% m e n j a d i
( 3 . 5 3 x 1 0 - ~ ~ / 1 0 ~ s e lp)a d a umur 4 0 jam;
glukosa
ampas
( 4 . 4 2 x 1 0 - ~ u/107sel)
dengan penambahan ampas t a p i o k a
menjadi 0.046 U / m l
penambahan
(1
1%
jam;
(2.92~10-~
skim
( 8 . 8 9 x 1 0 - ~ u / 1 0 7 s e l ) p a d a umur 48
dengan penambahan g l u k o s a 1%d a n skim 0 . 5 % m e n j a d i
U/ml
jam.
( 8 . 8 7 ~ 1 0 - u~/ 1 0 7 s e l ) p a d a umur 8
1%
jam;
0.043
. 7 8 ~ 1 0 -u~/ 1 0 7 s e l ) pada umur 24 jam.
Penggunaan
fermentor
protease
u/107sel).
protease
Sedangkan
protease.
LCT
dengan
penambahan
skim
sistem b a t c h menyebabkan p e n i n g k a t a n
dari
0.385 U/ml
menjadi 1 . 2 6 8
U/ml
0 . 5 % pada
aktivitas
(9.26x10-~
Waktu y a n g d i p e r l u k a n u n t u k mencapai a k t i v i t a s
t e r t i n g g i b e r k u r a n g d a r i 3 2 jam m e n j a d i 20
s i s t e m fed-batch t i d a k
meningkatkan
Aktivitas protease tertingginya
U / m 1 ( 6 . 0 5 x 1 0 - ~ ~ / 1 0 ~ s e lp )a d a umur 20 j a m .
jam.
aktivitas
adalah
0.049
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
PRODUKSI PROTEASE Bacil 1 u s p u m i l us
YANG DIISOLASI DARI LIMBAH CAIR TAHU
DENGAN FERMENTASI TERKONTROL
SKRIPSI
S e b a g a i s a l a h s a t u syarat u n t u k memperoleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN
p a d a JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN d a n G I Z I
Fakultas Teknologi Pertanian
I n s t i t u t P e r t a n i a n Bogor
oleh
AHALIA KAWIRA
F 261089
D i l a h i r k a n p a d a t a n g g a l 1 Maret 1 9 7 1
d i Jakarta
T a n g g a l l u l u s : 27 November 1 9 9 3
Disetujui,
Dosen Pembimbing I
o s e n P e m b i m b i n g I1
kekuatan kepadaku.
F i l i p i 4 : 13
PRODUKSI PRO TEASE ~ a c i l l u spumilus
YANG DlISOLASl DARl LIMBAH CAlR TAHU
DENGAN FERMENTASI TERKONTROL
Oleh
AMALIA KAWIRA
F 26. 1089
1 9 9 3
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANlAN
INSTITUT PERTANlAN BOGOR
B O G O R
AMALIA
F 261089.
Produksi P r o t e a s e Bac~llos
D i i s o l a s i d a r i Limbah C a i r Tahu d e n g a n
D i bawah b i m b i n g a n Maggy
T.
Fermentasi Terkontrol.
S u h a r t o n o d a n Budiatman S a t i a w i h a r d j a .
KAWIRA
p ~ t m i l u s yang
RINGKASAN
B a k t e r i y a n g d i g u n a k a n d a l a m p e n e l i t i a n i n i a d a l a h H.
p ~ t r n i 1 ~ 1(~y. l ) y a n g d i i s o l a s i d a r i l i m b a h c a i r
tahu
dan t e l a h d i i d e n t i f i k a s i s e c a r a f i s i o l a g i s dan
serta
dilakukan
pencirian
dengan
(LCT)
morfologis
Pulsed-F~eld
Gel
E l e c t r o p h o r e s ~ sy a n g d i l a k u k a n o l e h Likumahwa ( 1 9 9 3 ) .
Media
yang
f e r m e n t a s i yang digunakan a d a l a h media
direkomendasikan
oleh
Mao
(1992)
0 . 5 , d a n 1% s e r t a
dengan
penambahan
kasein
penambahan
g l u k o s a 0 . 5 d a n I % , ampas t a p i o k a 0 . 5 d a n
skim
0.25,
sintetik
LCT
dengan
0 . 5 d a n 1 % .dan k o m b i n a s i g l u k o s a 1%d a n s k i m
I%,
0.5%.
Penggunaan g l u k o s a d i l a k u k a n u n t u k menambah kandungan g u l a
pereduksi
pada
LCT.
S e d a n g k a n ampas
digunakan
s e b a g a i a l t e r n a t i f sumber k a r b o n
s e l a i n g l u k o s a dan k a s e i n .
induksi
sintetik
pada
p r o t e a s e yang
tapioka
dan
skim
dan
nitrogen
Untuk m e n g e t a h u i a d a
tidaknya
dihasilkan
d e n g a n penambahan k a s e i n .
digunakan
Media-media
media
tersebut
digunakan pada f e r m e n t o r dengan i n k u b a t o r bergoyang selama
48
jam p a d a s u h u 3 7 O ~ , 200rpm.
adalah
pengukuran
pH,
Analisis
kekeruhan sel
rang
pada
a k t i v i t a s p r o t e a s e dengan metode Bergmeyer.
610
dilakukan
nm
dan
Media
yang menghasilkan a k t i v i t a s
dicobakan
f e r m e n t o r d e n g a n sistem
batch
terbaik
dan
red-
F e r m e n t a s i d i l a k u k a n s e l a m a 4 8 jam p a d a s u h u 3 7 ' ~ .
batcn.
pH
pada
protease
7, a g i t a s i 4 0 0 rpm.
ted-batch
Adapun a n a l i s i s y a n g d i l a k u k a n
aktivitas
protease
serta
glukosa
dilakukan
m e d i a f e e d p a d a jam ke-20 d e n g a n k e c e p a t a n
penambahan
ml/jam.
Pada s i s t e m
Hasil
metode
pengukuran
penelitian
adalah
Bergmeyer,
menunjukkan
analisis
analisis
kekeruhan s e l
pada
bahwa
20
kadar
610
nm.
protease
yang
d i h a s i l k a n d i i n d u k s i p a d a m e d i a s i n t e t i k d e n g a n penambahan
0 . 5 % p a d a j a m ke-16 ( 9 . 5 ~ 1 0 - ~~ / 1 0 ~ s e l d) a n
kasein
LCT d e n g a n penambahan k a s e i n 0 . 2 5 % p a d a jam
media
24,
pada
ke-16,
3 2 ( 8 . 3 5 ~ 1 0 - ~ ,4 . 3 7 ~ 1 0 - ~ , 3 . 1 5 x 1 0 - ~ u / 1 0 7 s e l )
dan
s e r t a d e n g a n penambahan k a s e i n 0 . 5 % p a d a jam ke-40 d a n
( 2 . 8 4 ~ 1 0 - ~ , 9.43x10-~ ~ / 1 0 ~ s e l ) . Aktivitas
tertinggi
adalah
media s i n t e t i k
0.033 U/ml
dengan
(
pada
umur
U/ml
penambahan
kasein
jam;
0.25% menjadi
U/ml
penambahan
kasein
p a d a umur 24 j a m ;
0.5% menjadi 0.181 U / m l
16
protease
( 3 . 5 6 x 1 0 - ~ ~ / 1 0 ~ s e lp )a d a umur 4 0
1 . 5 9 x 1 0 - ~ u/107sel)
kasein
tanpa
48
dengan
0.030
penambahan
( 9 . 5 x 1 0 - ~ u/107sel)
pada
j a m ; d e n g a n penambahan k a s e i n 1% m e n j a d i
0.080
( 1 . 4 2 ~ 1 0 - u~/ 1 0 7 s e l )
p a d a umur 3 2 j a m .
Aktivitas
p r o t e a s e t e r t i n g g i p a d a LCT t a n p a penambahan k a s e i n a d a l a h
0.027
U/ml
penambahan
( 2 . 6 5 x 1 0 - ~ u/107sel)
kasein
0.25% menjadi
p a d a umur 3 2 j a m ;
0.054
U/ml
dengan
(4.35~10-~
u / 1 0 7 s e l ) p a d a umur 24 jam; d e n g a n penambahan k a s e i n
0.5%
0.086 U / m 1
menjadi
Aktivitas
protease
t e r t i n g g i p a d a LCT
tanpa
penambahan
g l u k o s a maupun ampas t a p i o k a a d a l a h 0 . 0 2 7 U / m l
~ / l ~ ~ s ep ald)a
umur
32
jam;
t a p i o k a 0 . 5 % menjadi 0.046 U / m l
umur
0.031
16 j a m ;
U/ml
penambahan
U/lOsel)
dengan
(2.65~10-~
penambahan
0 . 5 % menjadi
0.034
U/ml
p a d a umur 32 jam; dengan penambahan
pada
glukosa
( 3 . 4 6 x 1 0 - ~ U/10 7 s e l ) p a d a umur 32
umur 32 jam; dengan
menjadi 0.120 U / m l
dengan
(2.56~10-~
dengan penambahan skim 0 . 5 % m e n j a d i 0 . 3 9 5 U / m l
u/107sel)
pada
1% m e n j a d i
( 3 . 5 3 x 1 0 - ~ ~ / 1 0 ~ s e lp)a d a umur 4 0 jam;
glukosa
ampas
( 4 . 4 2 x 1 0 - ~ u/107sel)
dengan penambahan ampas t a p i o k a
menjadi 0.046 U / m l
penambahan
(1
1%
jam;
(2.92~10-~
skim
( 8 . 8 9 x 1 0 - ~ u / 1 0 7 s e l ) p a d a umur 48
dengan penambahan g l u k o s a 1%d a n skim 0 . 5 % m e n j a d i
U/ml
jam.
( 8 . 8 7 ~ 1 0 - u~/ 1 0 7 s e l ) p a d a umur 8
1%
jam;
0.043
. 7 8 ~ 1 0 -u~/ 1 0 7 s e l ) pada umur 24 jam.
Penggunaan
fermentor
protease
u/107sel).
protease
Sedangkan
protease.
LCT
dengan
penambahan
skim
sistem b a t c h menyebabkan p e n i n g k a t a n
dari
0.385 U/ml
menjadi 1 . 2 6 8
U/ml
0 . 5 % pada
aktivitas
(9.26x10-~
Waktu y a n g d i p e r l u k a n u n t u k mencapai a k t i v i t a s
t e r t i n g g i b e r k u r a n g d a r i 3 2 jam m e n j a d i 20
s i s t e m fed-batch t i d a k
meningkatkan
Aktivitas protease tertingginya
U / m 1 ( 6 . 0 5 x 1 0 - ~ ~ / 1 0 ~ s e lp )a d a umur 20 j a m .
jam.
aktivitas
adalah
0.049
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
PRODUKSI PROTEASE Bacil 1 u s p u m i l us
YANG DIISOLASI DARI LIMBAH CAIR TAHU
DENGAN FERMENTASI TERKONTROL
SKRIPSI
S e b a g a i s a l a h s a t u syarat u n t u k memperoleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN
p a d a JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN d a n G I Z I
Fakultas Teknologi Pertanian
I n s t i t u t P e r t a n i a n Bogor
oleh
AHALIA KAWIRA
F 261089
D i l a h i r k a n p a d a t a n g g a l 1 Maret 1 9 7 1
d i Jakarta
T a n g g a l l u l u s : 27 November 1 9 9 3
Disetujui,
Dosen Pembimbing I
o s e n P e m b i m b i n g I1
Sei3ala perkara d a p a t kutanggung d i dalam D I A yang memberi
kekuatan kepadaku.
F i l i p i 4 : 13
PRODUKSI PRO TEASE ~ a c i l l u spumilus
YANG DlISOLASl DARl LIMBAH CAlR TAHU
DENGAN FERMENTASI TERKONTROL
Oleh
AMALIA KAWIRA
F 26. 1089
1 9 9 3
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANlAN
INSTITUT PERTANlAN BOGOR
B O G O R
AMALIA
F 261089.
Produksi P r o t e a s e Bac~llos
D i i s o l a s i d a r i Limbah C a i r Tahu d e n g a n
D i bawah b i m b i n g a n Maggy
T.
Fermentasi Terkontrol.
S u h a r t o n o d a n Budiatman S a t i a w i h a r d j a .
KAWIRA
p ~ t m i l u s yang
RINGKASAN
B a k t e r i y a n g d i g u n a k a n d a l a m p e n e l i t i a n i n i a d a l a h H.
p ~ t r n i 1 ~ 1(~y. l ) y a n g d i i s o l a s i d a r i l i m b a h c a i r
tahu
dan t e l a h d i i d e n t i f i k a s i s e c a r a f i s i o l a g i s dan
serta
dilakukan
pencirian
dengan
(LCT)
morfologis
Pulsed-F~eld
Gel
E l e c t r o p h o r e s ~ sy a n g d i l a k u k a n o l e h Likumahwa ( 1 9 9 3 ) .
Media
yang
f e r m e n t a s i yang digunakan a d a l a h media
direkomendasikan
oleh
Mao
(1992)
0 . 5 , d a n 1% s e r t a
dengan
penambahan
kasein
penambahan
g l u k o s a 0 . 5 d a n I % , ampas t a p i o k a 0 . 5 d a n
skim
0.25,
sintetik
LCT
dengan
0 . 5 d a n 1 % .dan k o m b i n a s i g l u k o s a 1%d a n s k i m
I%,
0.5%.
Penggunaan g l u k o s a d i l a k u k a n u n t u k menambah kandungan g u l a
pereduksi
pada
LCT.
S e d a n g k a n ampas
digunakan
s e b a g a i a l t e r n a t i f sumber k a r b o n
s e l a i n g l u k o s a dan k a s e i n .
induksi
sintetik
pada
p r o t e a s e yang
tapioka
dan
skim
dan
nitrogen
Untuk m e n g e t a h u i a d a
tidaknya
dihasilkan
d e n g a n penambahan k a s e i n .
digunakan
Media-media
media
tersebut
digunakan pada f e r m e n t o r dengan i n k u b a t o r bergoyang selama
48
jam p a d a s u h u 3 7 O ~ , 200rpm.
adalah
pengukuran
pH,
Analisis
kekeruhan sel
rang
pada
a k t i v i t a s p r o t e a s e dengan metode Bergmeyer.
610
dilakukan
nm
dan
Media
yang menghasilkan a k t i v i t a s
dicobakan
f e r m e n t o r d e n g a n sistem
batch
terbaik
dan
red-
F e r m e n t a s i d i l a k u k a n s e l a m a 4 8 jam p a d a s u h u 3 7 ' ~ .
batcn.
pH
pada
protease
7, a g i t a s i 4 0 0 rpm.
ted-batch
Adapun a n a l i s i s y a n g d i l a k u k a n
aktivitas
protease
serta
glukosa
dilakukan
m e d i a f e e d p a d a jam ke-20 d e n g a n k e c e p a t a n
penambahan
ml/jam.
Pada s i s t e m
Hasil
metode
pengukuran
penelitian
adalah
Bergmeyer,
menunjukkan
analisis
analisis
kekeruhan s e l
pada
bahwa
20
kadar
610
nm.
protease
yang
d i h a s i l k a n d i i n d u k s i p a d a m e d i a s i n t e t i k d e n g a n penambahan
0 . 5 % p a d a j a m ke-16 ( 9 . 5 ~ 1 0 - ~~ / 1 0 ~ s e l d) a n
kasein
LCT d e n g a n penambahan k a s e i n 0 . 2 5 % p a d a jam
media
24,
pada
ke-16,
3 2 ( 8 . 3 5 ~ 1 0 - ~ ,4 . 3 7 ~ 1 0 - ~ , 3 . 1 5 x 1 0 - ~ u / 1 0 7 s e l )
dan
s e r t a d e n g a n penambahan k a s e i n 0 . 5 % p a d a jam ke-40 d a n
( 2 . 8 4 ~ 1 0 - ~ , 9.43x10-~ ~ / 1 0 ~ s e l ) . Aktivitas
tertinggi
adalah
media s i n t e t i k
0.033 U/ml
dengan
(
pada
umur
U/ml
penambahan
kasein
jam;
0.25% menjadi
U/ml
penambahan
kasein
p a d a umur 24 j a m ;
0.5% menjadi 0.181 U / m l
16
protease
( 3 . 5 6 x 1 0 - ~ ~ / 1 0 ~ s e lp )a d a umur 4 0
1 . 5 9 x 1 0 - ~ u/107sel)
kasein
tanpa
48
dengan
0.030
penambahan
( 9 . 5 x 1 0 - ~ u/107sel)
pada
j a m ; d e n g a n penambahan k a s e i n 1% m e n j a d i
0.080
( 1 . 4 2 ~ 1 0 - u~/ 1 0 7 s e l )
p a d a umur 3 2 j a m .
Aktivitas
p r o t e a s e t e r t i n g g i p a d a LCT t a n p a penambahan k a s e i n a d a l a h
0.027
U/ml
penambahan
( 2 . 6 5 x 1 0 - ~ u/107sel)
kasein
0.25% menjadi
p a d a umur 3 2 j a m ;
0.054
U/ml
dengan
(4.35~10-~
u / 1 0 7 s e l ) p a d a umur 24 jam; d e n g a n penambahan k a s e i n
0.5%
0.086 U / m 1
menjadi
Aktivitas
protease
t e r t i n g g i p a d a LCT
tanpa
penambahan
g l u k o s a maupun ampas t a p i o k a a d a l a h 0 . 0 2 7 U / m l
~ / l ~ ~ s ep ald)a
umur
32
jam;
t a p i o k a 0 . 5 % menjadi 0.046 U / m l
umur
0.031
16 j a m ;
U/ml
penambahan
U/lOsel)
dengan
(2.65~10-~
penambahan
0 . 5 % menjadi
0.034
U/ml
p a d a umur 32 jam; dengan penambahan
pada
glukosa
( 3 . 4 6 x 1 0 - ~ U/10 7 s e l ) p a d a umur 32
umur 32 jam; dengan
menjadi 0.120 U / m l
dengan
(2.56~10-~
dengan penambahan skim 0 . 5 % m e n j a d i 0 . 3 9 5 U / m l
u/107sel)
pada
1% m e n j a d i
( 3 . 5 3 x 1 0 - ~ ~ / 1 0 ~ s e lp)a d a umur 4 0 jam;
glukosa
ampas
( 4 . 4 2 x 1 0 - ~ u/107sel)
dengan penambahan ampas t a p i o k a
menjadi 0.046 U / m l
penambahan
(1
1%
jam;
(2.92~10-~
skim
( 8 . 8 9 x 1 0 - ~ u / 1 0 7 s e l ) p a d a umur 48
dengan penambahan g l u k o s a 1%d a n skim 0 . 5 % m e n j a d i
U/ml
jam.
( 8 . 8 7 ~ 1 0 - u~/ 1 0 7 s e l ) p a d a umur 8
1%
jam;
0.043
. 7 8 ~ 1 0 -u~/ 1 0 7 s e l ) pada umur 24 jam.
Penggunaan
fermentor
protease
u/107sel).
protease
Sedangkan
protease.
LCT
dengan
penambahan
skim
sistem b a t c h menyebabkan p e n i n g k a t a n
dari
0.385 U/ml
menjadi 1 . 2 6 8
U/ml
0 . 5 % pada
aktivitas
(9.26x10-~
Waktu y a n g d i p e r l u k a n u n t u k mencapai a k t i v i t a s
t e r t i n g g i b e r k u r a n g d a r i 3 2 jam m e n j a d i 20
s i s t e m fed-batch t i d a k
meningkatkan
Aktivitas protease tertingginya
U / m 1 ( 6 . 0 5 x 1 0 - ~ ~ / 1 0 ~ s e lp )a d a umur 20 j a m .
jam.
aktivitas
adalah
0.049
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
PRODUKSI PROTEASE Bacil 1 u s p u m i l us
YANG DIISOLASI DARI LIMBAH CAIR TAHU
DENGAN FERMENTASI TERKONTROL
SKRIPSI
S e b a g a i s a l a h s a t u syarat u n t u k memperoleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN
p a d a JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN d a n G I Z I
Fakultas Teknologi Pertanian
I n s t i t u t P e r t a n i a n Bogor
oleh
AHALIA KAWIRA
F 261089
D i l a h i r k a n p a d a t a n g g a l 1 Maret 1 9 7 1
d i Jakarta
T a n g g a l l u l u s : 27 November 1 9 9 3
Disetujui,
Dosen Pembimbing I
o s e n P e m b i m b i n g I1