II.4 Metode tidak langsung untuk penentuan vitamin
II.4.1 Metabolit pemuatan uji
Tes ini telah sangat populer di masa lalu. Ini adalah sebuah assay tidak langsung yang menentukan aktivitas vitamin digunakan sebagai kofaktor untuk metabolit tertentu.
Langkah-langkah yang terlibat adalah sebagai berikut : - Pasien diberikan secara oral besar, diukur dosis metabolit tertentu yang digunakan oleh
vitamin menarik untuk konversi. - Darah atau urin sampel diperoleh dari pasien setelah ~ 6 jam menelan.
- Metabolit yang sama diukur dalam sampel ini: Peningkatan metabolit di atas kisaran normal menunjukkan kekurangan vitamin
Secara signifikan mengurangi metabolit menunjukkan aktivitas vitamin yang normal Misal : Tryptophan adalah metabolit pemuatan untuk vit B6-dan Histidin adalah untuk folat
Keuntungan menggunakan metode metabolit pemuatan uji adalah - Metode Murah
- Efek samping Minimum Kerugian menggunakan metode metabolit pemuatan uji adalah
- Metode tidak langsung - In-vivo karena itu tidak dapat diandalkan karena gangguan oleh faktor-faktor lain
- Tidak berlaku untuk semua vitamin - Invasif
II.4.2 Uji aktivasi enzim eritrosit
- Hemolysates seluruh darah atau RBC disiapkan - Aktivitas enzim di bawah pengaruh langsung dari vitamin bunga diukur. Aktivitas enzim ini
dikenal sebagai Activity Koefisien AC. - Sejumlah vitamin jenuh tertentu ditambahkan.
- Aktivitas enzim ini diukur kembali dan dibandingkan dengan aktivitas enzim sebelum penambahan.
- Peningkatan AC menunjukkan kekurangan vitamin. Dalam kasus vitamin normal atau bahkan vitamin jenuh, AC tidak akan berubah.
- Misal : Kegiatan transketolase diukur untuk mengevaluasi tingkat tiamin, Glutathione reduktase diukur untuk mengevaluasi riboflavin status dan aspartat transaminase AST
aktivitas diukur untuk analisis vit B6-
II.4.3 Uji fragilitas eritrosit
Digunakan khusus untuk penilaian tingkat vitamin-E. Vitamin ini bertanggung jawab untuk stabilitas membran RBC.
Langkah-langkah yang terlibat: - Sampel Pasien dibagi menjadi dua aliquot.
- Sel darah merah dalam satu aliquot dicuci dengan 2 H
2
O
2
membran racun radikal bebas, sedangkan sel darah merah dari 2 aliquot dicuci dengan dist. H
2
O. - Setelah 3 jam inkubasi, hemoglobin diukur di kedua aliquot.
- Jika hemolisis sel darah merah dalam aliquot 1 dicuci dengan H
2
O
2
adalah 20 lebih dari hemolisis dalam 2 aliquot sel darah merah dicuci dengan dist.H
2
O, ini akan menunjukkan kekurangan vitamin-E.
II.4.4 prothrombin Waktu
Kategori