Kajian Keberadaan Peptida Berasa Gurih yang Diperoleh dari Hasil Fermentasi Kecap Kedelai Kuning

KAJIAN KEBERADAAN PEPTIPA BERASA GURIH
HASlL FERMEN~ASI
c'L.. 4
KECAP
.. . KWELAI KUNING

Oleh :
HANIFAH NURYANI LlOE
96.1 9411PN

PROGRAM PASCA SARJANA
INSTITUT PERTANIAN BOGOR

2001

Hanifah Nuryani Lioe. 96.194nPN. Kajian Kebemdaan Peptida Berasa Gurih yang
Diperoleh dari Hasil Fermentasi Kecap Kedelai Kining. Di bawah bimbingan Anton
Apriyantono, Dedi Fardiaz dan Budiatman Satiawihardja.

RINGKASAN
Penelitian ini merupakan kelanjutan dari penelitian yang telah dilakukan

oleh Setyaningsih ( I 998) untuk mengetahui keberadaan peptida berasa gurih yang

terdapat datam Fraksi EM < 500 Da dari hasil fermentasi kecap kedelai kuning.

Dalam penelitian yang telah dilakukan ini, Fraksi BM < 500 Da difraksinasi lebih

lanjut menggunakan kromatografi filtrasi gel Sephadex G-25 superfine menghasilkan
empat fraksi berbeda yang disebut Fraksil, Fraksi 2, Fraksi 3 dan Fraksi 4.
Pengamatan yang dilakukan terhadap fraksi-fraksi tersebut adalah kadar garam,
total peptida teriarut, kadar asam L-glutamat bebas, kadar a-amino nitrogen,
komposisi asam amino, profil CE (capillary zone electrophoresis) dan analisis
sensori dengan uji QDA terhadap atribut rasa asin dan rasa gurih yang dilakukan
oleh 14 orang panelis terlatih. Uji sensori tersebut dilakukan terhadap larutan sampel

baik tanpa penambahan garam maupun dengan penambahan garam untuk
memperoleh konsentrasi garam NaCl yang sama dalam setiap fraksi yaitu sebesar

59.9 mgtlO mi.
Fraksi BM < 500 Da setelah difraksinasi dengan kolom Sephadex G-25


superfine terpisah menjadi empat fraksi, disebut Fraksi 1 sampai Fraksi 4. Dari hasil

pemisahan dari 1.0 gram Fraksi BM < 500 Da kering beku diperoleh 87 mg Fraksi
1, 781 mg Fraksi 2, 19 mg Fraksi 3 dan 13 mg Fraksi 4. Semua garam terkumpul

dalarn Fraksi 2 d ~ n g a npersentase 82.61 % wlw. Kandungan total peptida terlarut
dalam berat masing-masing fraksi tersebut adalah 10.7 mg pada Fraksi 1, 11.1 mg

pada Fraksi 2, 7.6 mg pada Fraksi 3 dan 2.9 mg pada Fraksi 4.

Total kandungan asam amino masing-masing fraksi berbeda, yaitu 37.0
mg pada Fraksi I,52.0 mg pada Fraksi 2, 2.0 mg pada Fraksi 3 dan 1.6 mg pada
Fraksi 4. Fraksi 1 mengandung asam amino utama asam glutamat, aspartat dan

asam amino basa lisin. Fraksi ini mengandung asam glutamat bebas jauh lebih
tinggi daripada fraksi lainnya. Fraksi 2 mengandung asam amino terbanyak asam

glutamat, aspartat dan asam amino hidrofobik leusin. Fraksi 3 mengandung asam

amino terbanyak fenilalanin dan tirosin yang keduanya merupakan asam amino

aromatik serta leusin, sedangkan Fraksi 4 mengandung asam amino hidrofobik dan
hidrofilik daiam jumlah yang hampir sama banyaknya.
Pada kadar peptida terlarut 1.0 mg peptidalloml, Fraksi 2 memiliki
intensitas rasa gurih lebih dari separuh intensitas rasa gurih Fraksi 1 yang

rnempunyai skor rasa gurih tertinggi dengan kadar peptida terlarut 10.0 mgll 0 mi.
Dengan demikian pada kadar peptida terlarut yang sama dengan Fraksi 1, yaitu 10.0
mg peptidallo ml, Fraksi 2 tentu memiliki skor rasa gurih yang lebih tinggi daripada
Fraksi 1. Hal ini terdapat pula pada hasil pengujian sensori dengan kadar garam

yang disamakan, sebesar 59.9 mg1lO ml. Padahal kadar asarn glutamat bebas
Fraksi 2 relatif lebih rendah daripada Fraksi 1, sementara total peptida terlarut Fraksi
2 relatif sama dengan Fraksi 1.

Dengan demikian diduga kuat peptida atau

campuran peptida berasa gurih yang berperan dalam mernberikan rasa gurih Fraksi
2. Keberadaan peptida berasa gurih dalam Fraksi 2 juga didukung oleh profil CE

dengan terdeteksinya lebih banyak peak yang tidak mengandung asam amino

aromatik, yaitu peak 4,5, 6 dan 7, diantaranya peak 5 merupakan peak yang paling
kuat terdeteksi pada panjang gelombang pengukuran 190

- 600 nm. Spektrurn

penyerapan panjang gelombang keernpat peak tersebut menunjukkan adanya
penyerapan relatif tinggi pada 214 nm. Meskipun dalam Fraksi BM < 500 Da selain
mengandung asam amino bebas dan peptida, juga mengandung senyawa lain
terutarna asam organik yang mempunyai penyerapan tinggi pada panjang
gelornbang 200-208 nm, akan tetapi penyerapan tinggi pada panjang gelombang
214 nm-khasmenandakan adanya ikatan peptida.

Fraksi 3 juga diduga mempunyai peptida berasa gurih.

lni disebabkan

intensitas rasa gurih Fraksi 3 masih cukup tinggi dibandingkan Fraksi 1, padahal

asam glutamat bebas tidak terdeteksi dalam Fraksi 3. Diduga peptida berasa gurih
tersebut adalah peptida yang muncul sebagai peak 5 yang juga terdapat dalam

Fraksi 2.
Setelah penambahan garam NaCl sebesar 59.9 mgllO ml, intensitas

rasa gurih Fraksi 1, Fraksi 3 dan Fraksi 4 umumnya meningkat, terutama pada
Fraksi 3 yang peningkatannya terlihat jelas. Diduga terdapat efek sinergis antara
peptida dengan garam NaCl dalam mernberikan rasa gurih Fraksi 3.

Dari peneliin ini dapat disirnpulkan bahwa peptida bema gurih diduga
a

terdapat dalam fraksi BM < 500 Da, khususnya terdapat dalam Fraksi 2 dan Fraksi

3. Peptida tersebut diduga muncul sebagai peak 4, 5,7 dan 9 yang hanya tersusun
darj asam amino

non aromatik seperti yang terlihat dalam profil CE fraksi tersebut,

diantaranya peak 5 terdeteksi sangat kuat sebagai peptida yang tidak rnengandung
asam amino aromatik.


W l A N KEBERADAAN PEPTIDA BERASA GURlH

YANG DIPE~OLEHDARI
HASlL FERMENTASI KECAP KEDELAI KUN1NG

Oleh :

HANIFAH NURYANI LlOE

IPN 96.194

Thesis sebagai salah satu syarat untuk
memperoleh gelar Magister Sains pada Program Pasca Sarjana

lnstitut Pertanian Bogor

PROGRAM STUD1 ILMU PANGAN

PROGRAM PASCA SARJANA
INSTlTUT PERTANIAN BOGOR

2001

Judul Thesis

: KAJIAN KEBERADAAN PEPTIDA BERASA GURIH
YANG DIPEROLEH DAR1 HASlL FERMENTASI KECAP

KEDELAI KUNING
Nama Mahasiswa

: Hanifah Nuryani Lioe

Nomor Pokok

: 96.19411PN

1. Komisi Pembimbing

Dr. Ir. ~ n t u n
Aprivantono, MS

Ketua

Anggota

2. Ketua Program Studi llmu Pangan

Tanggal lulus: 11 Desember 2000

Anggota

KATA PEMGANTAR

Segala puji dan syukur dipersembahkan ke hadirat Allah SWT yang telah
memberikan kekuatan dan kemarnpuan kepada penuljs dalam rnenyelesaikan tugas
akhir program magister sains di Program Studi ilmu Pangan, Program Pascasajana,
1PB, Bogor. Thesis ini disusun berdasarkan penelitian mengenai fraksi peptida yang

terdapat dalam fraksi berberat molekuf kurang dari 500 dalton yang telah diperoleh

oleh Setyaningsih (1998) dari hasil fermentast kecap kedelai kuning.

Hasil karya ini tidak terlepas dari besarnya bantuan dan kerjasama
berbagai pjhak. Oleh karena itu penulis menyampaikan penghargaan dan terima
kasih yang tidak terhingga kepada:

Bapak Dr. Ir. Anton Apriyantono, MS yang telah memberikan bimbingan dan
dorongan dari awal penemuan ide hingga selesainya studi di S2.

Bapak Prof. Dr. Ir. Dedi Fardiaz, MSc. Dan

Bapak Dr. Ir. Budiatman

Satiawihardja, MSc. yang telah mernberikan bimbingan dan dukungan dalam
menyelesaikan penelitian serta saran-saran yang sangat bermanfaat untuk

penyernpurnaan thesis ini.
Seluruh pengajar di Program Studi llmu Pangan, PPS-IPB yang telah membekali
penulis dengan berbagai ilmu yang lebih spesifik terutama dalam bidang Kimia

Pangan.
Dr. J.M. Ames dan E.L. Inns dari Department of Food Science and Technology,


University of Reading, Inggris yang telah rnembantu dalam analisis
menggunakan Capillary Zone Electrophoresis, serta Bapak Kosasih dari
Laboratorium Terpadu IPB, Bogor yang telah membantu dalam analisis
komposisi asam amino.
Para panelis, baik panelis terlatih maupun panelis yang terlibat pada tahap
seleksi dan pelatihan yang telah rela menyediakan waktu dan memberikan
kemampuannya dalam analisis sensori.

Lembaga yang memberikan beasiswa, yaitu BPPS yang telah menyediakan
dana studi S2 secara lengkap, serta Yayasan Bung Hatb, Yayasan Orbit dan

Yayasan Supersemar yang telah memberikan dana penelitian.

Suami teminta Ir. Yodfiatlinda yang telah memben'kan semangat dan dorongan
kgpada penulis untuk mengambil studi di S2 dan menyeresaikannya, tidak
dilupakan anak-anakku tercinta Ihsan dan Fathya yang telah dikorbankan
waktunya untuk bersama dengan penulis.
lbuku tersayang Thong Fung Moy yang telah banyak memberikan doa agar
penulis dapat segera menyelesaikan studi, demikian pula dengan mertua, kakak,

adik dan ipar.

Teman-teman seperjuangan di IPN, baik angkatan 96 yaitu Muti, Ndaru, Iping,
dkk. maupun angkatan 97 yaitu Bapak Nyoman,

Bu Rini,

Bu Ani, Bu Susi, Bu

Ririn, dll. yang memberikan keakraban selama masa perkuliahan dan penelitian.
Teknisi labratorium, yaitu Bapak Taufik, Mba' Sri, Mba' Antin, Bapak Sobirin,
Bapak Gatot, Bu Rubiah, Bapak Mulyono, Bapak Koko, Bapak Dunung dan

Bapak Edi yang telah memberikan bantuan dan kerjasama.
Pihak lainnya yang telah membantu penulis dalam menyelesaikan tugas akhir.
Penulis berharap thesis ini dapat bermanfaat dalam membantu
perkembangan penelitian di bidang flavor makanan khususnya dan ilmu pangan
pada umumnya. Penutis menyadari masih banyak kekurangan dalam penulisan,

oleh karena itu kritik dan saran terhadap thesis ini akan diterima dengan tangan
terbuka.

Bogor, April 2001

Penulis

DAFTAR IS1

Halaman

I.

I1 .

I II .

KATA PENGANTAR..........................................................

i

DAFTAR IS1 .....................................................................

iii

DAFTAR TABEL ...............................................................

V

DAFTAR GAMBAR............................................................

vi

DAFTAR IAMPIRAN.........................................................

viii

PENDAHULUAN...............................................................

1

A . LATAR BELAKANG .....................................................

1

B. TUJUAN DAN MANFAAT PENELITIAN............................

3

C . HlPOTESlS

3

TINJAUAN PUSTAKA........................................................

4

A . PROTElN KEDELAI ....................................................

4

8. FERMENTASI KECAP KEDELAI.....................................

6

C . PEPTIDA....................................................................
O . ISOLASl PEPTIDA.......................................................

8
10

BAHAN DAN METODE......................................................

18

A . TEMPAT DAN WAKTU................................................

18

B. BAHAN DAN ALAT ...............................

......................

C. METODE PENELITIAN.................................................
1 . Fermentasi Kecap Kedelai Kuning...............................
2. Fraksinasi dengan Ultrafiltrasi....................................
3 . Fraksinasi dengan Kromatografi Filtrasi Gel..................
4. Karakterisasi Kimia Fraksi Hasil Fraksinasi Fraksi BM <

500 Da............................

..

............................

5. Karakteristik Sensori Fraksi Hasil Fraksinasi Fraksi BM <

500 Da .................................................................
1V.

HAStL DAN PEMBAHASAN................................................

A . FRAKSI HASlL FRAKSINASI FRAKSI BM < 500 Da ...........
B. KOMPOSIS1ASAM AMINO FRAKSI HASlL FRAKS1NASI

FRAKSI BM < 500 Da...................................................

iii

18

20
20

22
23

..

V.

C. PROF1t CAPILLARY ZONE ELECTROPHORESIS (PROFIL
CE)...........................................................................
D. KARAKTERISTIK SENSOR1 FRAKSI HASlL FRAKSlNASl
FRAKSI BM < 500 Da ...................................................
KESIMPULAN DAN SARAN ................................................
A . KESIMPULAN..................... ........................................
B. S A W N ......................................................................
OAFTAR PUSTAKA...........................................................
LAMPIRAN......................................................................

46

56
62

62
63

64
70