3.3 Prosedur
3.3.1 Pembuatan Media 1. Media Lauryl Sulfit Broth Tebal
Ditimbang seksama media Lauryl Broth sebanyak 106,8 gr. Dimasukkan kedalam beker gelas, dilarutkan kedalam aquadest.sebanyak 1 liter.
Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan kedalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham masing-
masing 5 ml. Disterilkan didalam autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121
o
C selama 15 menit, setelah dingin disimpan ditempat yang bersih dan kering.
2. Pembuatan Media Lauryl Sulfit Broth Tipis
Ditimbang seksama media Lauryl Broth sebanyak 35,6 gr. Dimasukkan kedalam beker gelas, dilarutkan kedalam aquadest.sebanyak 1 liter. Dimasukkan
magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan kedalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham masing-masing 10 ml. Disterilkan
didalam autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121
o
C selama 15 menit, setelah dingin disimpan ditempat yang bersih dan kering.
3. Media EC Broth
Ditimbang seksama media EC Broth sebanyak 37 gr. Dimasukkan kedalam beker gelas, dilarutkan kedalam aquadest.sebanyak 1 liter.
Dimasukkan magnetic stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan kedalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham
Universitas Sumatera Utara
masing-masing 10 ml. Disterilkan didalam autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121
o
C selama 15 menit, setelah dingin disimpan ditempat yang bersih dan kering.
4. Media Tryptone
Ditimbang seksama media Tryptone sebanyak 15 gr. Dimasukkan kedalam beker gelas, dilarutkan kedalam aquadest.sebanyak 1 liter. Dimasukkan magnetic
stirrer. Dipanaskan diatas hot plate sampai larut. Dimasukkan kedalam tabung reaksi yang telah berisi tabung durham masing-masing 10 ml. Disterilkan didalam
autoklaf dengan tekanan 1 atm pada suhu 121
o
C selama 15 menit, setelah dingin disimpan ditempat yang bersih dan kering.
3.3.2 Uji Perkiraan
a Disiapkan sebanyak 5 tabung reaksi yang telah berisi media Lauryl Broth
tebal dan sebanyak 10 tabung reaksi yang telah berisi media Lauryl Broth tipis.
b Tabung kemudian disusun pada rak tabung, masing-masing diberi tanda
sebagai berikut: •
Nomor sampel •
Volume sampel c
Sampel dikocok terlebih dahulu agar homogen
Universitas Sumatera Utara
d Dimasukkan sampel dengan cara dipipet sebanyak 10 ml kedalam tabung
berisi Lauryl Broth tebal. Kemudian, 1 ml kedalam tabung Lauryl Broth tipis sebanyak 5 tabung, dan sisanya 0,1 ml atau 2 tetes.
e Masukkan seluruh tabung kedalam inkubator pada suhu 35
o
C selama 2x24 jam.
f Selanjutnya, diamati pembentukan gas yang terjadi didalam tabung
durham. g
Catat tabung yang dinyatakan positif dengan terbentuknya gas. Selanjutnya dilakukan uji penegasan.
3.3.3 Uji Penegasan
Kategori