BAB IV ANALISIS KUALITATIF PROTEIN
TUJUAN :
Mengetahui prinsip dasar uji kualitatif protein
Mengetahui perbedaan prinsip dari masing-masing metode
A. Pre-lab
1. Bagaimana prinsip analisis protein dengan metode ninhidrin? Prinsip analisis protein dengan ninhidrin yaitu mengidentifikasi adanya protein
dalam suatu bahan dimana asam amino bebas asam amino dimana gugus aminonya tidak terikat akan bereaksi dengan ninhidrin dan membentuk
senyawa kompleks berwarna ungu. Reaksi dinyatakan positif jika terjadi perubahan warna larutan sampel menjadi ungu, dan reaksi dinyatakan negatif
jika tidak terjadi perubahan warna.Finar, 2008 2. Bagaimana prinsip analisis protein dengan metode biuret?
Uji Biuret didasarkan pada reaksi antara ion Cu
2+
dan ikatan peptide dalam suasanabasa. Warna kompleks ungu menunjukkan adanya protein. Intensitas
warna yang dihasilkan merupakan ukuran jumlah ikatan peptida yang ada dalam protein. Ion Cu
2+
dari pereaksi Biuret dalam suasana basa akan bereaksi dengan polipeptida atau ikatan-ikatan peptide yang menyusun protein, dan membentuk
senyawa kompleks berwarna ungu atau violet. Reaksi ini positif terhadap dua buah ikatan peptide atau lebih, tetapi negative untuk asam amino bebas atau
ikatan peptida. Protein melarutkan hidroksida tembaga untuk membentuk kompleks warna. Reaksi pembentukan warna ini dapat terjadi pada senyawa
yang mengandung dua gugus karbonil yang berikatan dengan nitrogen atau atom karbon Sunarya et al., 2007.
3. Mengapa pengujian protein selalu dilakukan pada kondisi alkalibasa? Karena dalam suasana basa, CuSO
4
bereaksi dengan senyawa yang mengandung dua atau lebih ikatan peptida membentuk kompleks berwarna
ungu. Reaksi positif tersebut terjadi dengan adanya perubahan warna menjadi ungu atau merah muda akibat terjadinya persenyawaan antara cadangan N dari
peptida dan O dari air. Warna yang terjadi tergantung dari panjangnya ikatan peptida. Bila ikatan peptida panjang akan berwarna ungu, sebaliknya bila
pendek warnanya menjadi merah mudaRiswiyanto, 2010.
B. Diagram Alir 1. Uji Ninhidrin
Kategori