mL buffer Fosfat. Selanjutnya dilakukan penghitungan populasi bakteri yang tumbuh dengan metode hitung cawan. Bakteri yang mampu membentuk biofilm
dengan baik akan mampu menempel pada substrat yaitu usus.
6. Uji Patogenisitas Bakteri Kandidat Probiotik
Uji patogenisitas dilakukan untuk melihat apakah bakteri yang diberikan bersifat patogen atau tidak terhadap udang. Uji ini dilakukan dengan cara
menyuntikkan bakteri kandidat probiotik secara intramuskular dengan konsentrasi 10
6
CFUml sebanyak 0,1 mlekor. Udang dipelihara selama 7 hari dan diamati kelangsungan hidupnya setiap hari. Pada akhir pemeliharaan tingkat
kelangsungan hidup udang dihitung dan dibandingkan dengan kontrol yakni udang yang disuntik dengan larutan fisiologis. Kandidat probiotik yang akan
digunakan adalah bakteri yang tidak bersifat patogen yang tidak menyebabkan udang sakit dan mati pada saat uji patogenitas ini.
Uji Pakan Percobaan pada Udang Vaname
Pakan yang digunakan yaitu pakan komersial Tabel 1 dan ditambahkan kandidat probiotik. Sebelum dicampurkan ke dalam pakan dilakukan kultur cair
bakteri kandidat probiotik yang ditempatkan dalam shaker dengan suhu 29°C dengan kecepatan 180 rpm dan dilakukan pemanenan sesuai waktu pencapaian
fase eksponensial. Hasil kultur bakteri yang didapat dipindahkan ke dalam tabung ulir dan disentrifuse selama 15 menit dengan kecepatan 4000 rpm. Hasil endapan
bakteri probiotik inilah yang dicampurkan ke dalam pakan. Probiotik sebanyak 10gkg Wang et al. 2007 ditambahkan ke dalam pakan dengan cara
disemprotkan secara merata menggunakan spuit dengan menambahkan 2 kuning telur.
Tabel 1. Komposisi proksimat pakan komersil yang digunakan
Komposisi Proksimat
Kandungan
Protein 32 Lemak 5
Serat 4 Abu 15
Air 11
Komposisi : Fish meal, shrimp meal, squid meal, soybean meal, wheat flour, soy lecithin, squid oil, fish oil, immune stimulant, vitamin, mineral, anti mold and
anti oksidant Sumber : Luxindo 39 3A
Pakan yang diberikan pada percobaan ini terdiri dari : A: Pakan komersial yang ditambah isolat terbaik penghasil amilase isolat
M2 B: Pakan komersial yang ditambah isolat terbaik penghasil lipase isolat
Z3 C: Pakan komersial yang ditambah isolat terbaik penghasil protease isolat
K9 D: Pakan komersial yang ditambah isolat terbaik penghasil amilase, lipase
dan protease S3 E: Pakan komersial yang tidak ditambahkan probiotik
Selanjutnya pakan ini diberikan pada udang selama percobaan pemeliharaan untuk selanjutnya dilakukan :
1. Uji Pertumbuhan
