2. Bahan
Bahan yang digunakan dalam penelitian ini adalah daun lidah buaya sebanyak 4 kg yang dikeringkan menggunakan oven kemudian diblender
untuk dijadikan serbuk, etanol 96 sebagai pelarut saat pembuatan stock ekstrak, dan aquadest 100 ml sebagai pengencer stock ekstrak untuk
mendapat konsentrasi yang diinginkan. Penelitian ini juga memerlukan pelet kelinci dalam bentuk padat sebagai makanan larva. Pakan berupa
pelet kelinci digunakan untuk menghindari terjadinya kekeruhan pada tempat pertumbuhan larva.
D. Populasi dan Sampel
1.
Populasi
Populasi yang digunakan dalam penelitian ini adalah larva instar III Aedes aegypti. Telur nyamuk ini diperoleh dari Loka Litbang P2B2 Ciamis
dalam bentuk kering dengan media kertas saring.
2. Sampel
Sampel yang digunakan dalam penelitian ini adalah larva instar III Aedes aegypti, karena larva instar III berukuran besar 4-5mm sehingga lebih
mudah diamati dibandingkan dengan larva instar I atau II. Larva instar IV berukuran lebih besar dibandingkan larva instar III, namun waktu yang
dibutuhkan oleh larva instar IV untuk berkembang menjadi nyamuk dewasa lebih cepat yaitu 1 hari. Oleh karena itu dipilih larva instar III yang
berukuran cukup besar dan memiliki waktu lebih lama untuk berkembang menjadi nyamuk dewasa 3 hari4320 menit.
a. Kriteria Inklusi
1 Larva Aedes aegypti instar III
2 Larva begerak aktif
b. Kriteria Eksklusi
1 Larva sudah mati sebelum pengujian
c. Besar Sampel
Berdasarkan acuan WHO 2005 untuk penelitian yang menggunakan larva nyamuk dibutuhkan jumlah larva 20-30 ekor untuk tiap kelompok
perlakuan dengan pengulangan sebanyak 4-5 kali, maka pada penelitian ini dibutuhkan total larva sebanyak 480 larva dengan rincian sebagai
berikut:
Tabel 1. Jumlah sampel yang digunakan pada penelitian
Perlakuan Jumlah larva x jumlah
pengulangan Total
Kontrol - : 0 20 larva x 4
80 larva Perlakuan I : 1
20 larva x 4 80 larva
Perlakuan II : 0,75 20 larva x 4
80 larva Perlakuan III : 0,5
20 larva x 4 80 larva
Perlakuan IV : 0,25 20 larva x 4
80 larva Kontrol + : Abate
20 larva x 4 80 larva
Jumlah total larva yang dipakai dalam penelitian
480 larva
d. Tahapan Penentuan Larva Instar III adalah sebaga berikut:
1 Memilih larva yang berumur 4-5 hari sejak telur direndam dalam
air. 2
Memilih larva berukuran sedang 4-5mm. 3
Melihat duri dada pada larva sudah mulai jelas, larva yang memiliki duri dada sudah sangat jelas dan banyak disingkirkan, karena
kemungkinan larva tersebut adalah larva instar IV. 4
Melihat corong pada kepala larva berwarna kecoklatan, larva yang memiliki corong berwarna coklat kehitaman disingkirkan, karena
kemungkinan larva tersebut adalah larva instar IV.
E. Prosedur Penelitian