Analisa trigliserida beberapa jenis minyak dengan HPLC (High performance liquid chromatography)
'"ebaLb
besarlah kusih lkchan
kepada M t a ,
k e s d a a n ny a
s e l a m a - Z a m a mycr,
ACjLZah lkchan 4
M a z m u r 11 7:2 @I@
RXIIWM< DENGAN MPLC
RFORMANCCCli:
Oleh
LINDA LESTARI
FAKULTAS TEWOLOGI I'ER'L',4NIAl\l
INSTITUT PER'T,\NTAN 130(;0ii
E(3C;Olt
terbalik pertiisahan dilakukan dengar) mengguriakan kolorn ODS Hyperst1
dengan detektor UV pada 210 nm. Elusi diiakukan secara isokratik selarna 90
~nenitdengan fase gerak asetonitril:2-propaml heksirn daliim perbanciii~ga:~
70:20:10.
Dari liasil pemisahan yanr diperoleh dengan rner~rru~lakarl rrletotlz
HPLC argentometrr. kromatogram unttlk rrlaslng-mastrie harripel piltla h-or,tlrsl
analisa yang sarna berbeda ontuk setiap kali ulangiin.
EIal
irii
inr~r~gktrl
disebabkan karena adanya ion perak di dalarn sistern sehingga kor~disikolorn
titlak stabil. Oleh karena itu, metotle ini tidak dlgunakar~padir tahap anal~sa
selanjutnya,
sedangkan untuk
metode HPLL'
fase terbalrk
drperolel~
krornatograni dengan profil yang sangat mirip deogarr pustaka, sehingga
metode ini dianggap lebih cocok untuk analisa trigliserida minyak.
Dari kromatogram sampel yang diperoleh untuk masing-masing sarilpel
trigliserida minyak, dapat diperkirakan kemungkinan komponen asarrt lemak
yang terkandung di dalamnya yaitu dengan membandingkan waktu retensi
relatif dengart waktu retensi relatif dari pustaka.
Dari liasil peniisahan yang dilakukan dapat diperkirakan bahwa minyak
kapang dait boruge oil merupakan sumber GLA yartg cukup potensial, di
mana GLA terutama terdistribusi pada posisi sn-2 dan sn-3, sedangkan pada
posisi sn-1 sangat jarang.
Kandungan asam leniak terbanyak yang rnungiriri
terdapat dalam horuga oil adalah asam linoleat dan GLA, sedartgkan pada miriyak
kaparig adalali asarn oleat dan asam lemak jaiuh, yang ditur!jukltan ole!r cukup
tingginya respnn delektor du-i peak-peak yang diper-krrakan rnengarlcl~rng asarn
l m a k yang bersiu~gkutan.
Pada min,'aI< sawit, kandungan asam lemak jenr~hyang rnungkin ada
lebih b e s x dwipada asam lemak tidak jenuhnya, di mana asam it~nalijenuh rang
terbanyak adalah asam palmitat dan miristat, sedangltan asalrr lemak tidak jenuh
tlmgan jttrnlah rang terbesar adalah asam oleat dan linoleilt
ANALISA TRIGLISERDA BEBERAPA .JEMS
MINYAK DENGAN HPLC (HIGH PERFORMANCE
UQUID CHROMATOGRAPHI?
Oleh
LINDA LESTARI
F 30.1551
Sebagai saiah satu syarat untuk rnernperoleh gelar
SARJANA T E K N O L O G I PERTANIAN
pada Jurusan 'I eknologi Pangan dan Gizi
Fakultas Teknologi Pe~tanian
Institut Pertmian Bogor
JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN DAN GIZ1
FAICULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
INSTITUT PERTANTAN BOGOR
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANLAN
ANALISA TRIGLISERIDA BEBE
A JENIS
nimuuuAK DENGAN HPLC (HIGH PERFORMANCE
LIQUID CHROMATOGRAPHY)
0 leh
LINDA LESTARI
F 30.1551
SKRIPSI
Sebagai saiah satu syarat untu!i memperoleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN
pada Jurusan Tehologi Pangan dan Gizi
Fakultas Teknologi Pertmian
Institut Pertanian Bogor
Dilahirkan pada tanggal 28 Oktober 1975
di Jakarta
Tansal lulus : 25 Oktober 1997
KkTA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Tuhan Ynng Maha Kuasa atas serala
karunia dan rahmat-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan karya ilmizh ini dengart
baik
Dalan~me~~yelesaikan
tugas alhir ini penuiis banyak mendapat dukungan dari
berbagai pihak.
Pada kesempatan ini rasa terima kasih yar~gmendalarn penulis
sampaikan kepada :
1. Dr. Ir. Slamet Budijanto, MSc. sel&l dosen pembimbing yang selama ini telah
banyak memberikan bimbingan, arahan d m bantuan moral kepada penulis.
2.
Ir. Ni Luh Puspitasari, MSc. selaku dosen pembimbing yang telah banyak
memberikan bantuan moril dan rnateriil serta dengan sabar membimbing dan
mengarahkan penulis selama mengerjakan tugas akhir ini.
3.
Dr.
Ir. Punviyatno Hariyadi, MSc dan Dr. 11. I-I. Anton Apriyantono, A'IS selalni
dosen penguji atas segala petunjuk, saran dan bimbingan yang diberikan kepada
penulis dalam rnenyelesaikan tugas akhir ini.
4.
Mama dan papa tercinta atas kasih sayangnya yang tulus dan
dengan penuh
kesabaran selalu mendorong dan memberikan semangat serta do'a kepada pen~tlis
dalam mensgapai cita-cita
5.
Kakak-kakakh dan adikku yang tercinta : Yeni, Trisulo, Mery dan Dewi atas
segala dorongan, bantuan, dan do'anya selama ini.
6 . Teman-teman kost "REGINA" : Kak Neni, Shirley, Ermq Diara, Dewi, Joe,
E l i n d q Wati, Ice, Endah, Idq Oca, Nan% Lina Vera, Anne, Ade, AIdq Inla,
Silvi, Ida, Om Jujun, Tante Eka, Jimmy dan D ~ a natas bantuan dan dorongan dan
doanya selama penulis belajar di TF'G.
7.
Teman-teman seperjuangan : Dinar, Dina, Martha, Fera, Mely, Ria, Rini, Kak
Linda, Kak Gina dan Mbak Evi atas segala nasihat, dorongan, pertghiburan, dan
kenangan manis selamapenulis belajar di LPB.
8.
Abangku yang baik Ji.Jon MarantikaNapitupuiu atas segala bantuan, dorongan dan
do'a yang diberikan selama ini.
9.
Rekan-rekan satu tim : Dina, Wayan, Ika, David dan Kurnia atas bantuan dan
dorongannya
10. Rekan-rekan selaboratorium : Ci Y e ~ y ,Bu Efi, Mas Anton, k'antt, Stlmi, Neni,
Helmi, Eli, Desi, Sherly, Tatik, Bora, Fajar dkk atas bantuan dan dorongannya
11. Staf laboratorium : Mas Taufik, h&ak Antin, Mbak Ari, Mbak Sri, Bik Omah, Pak
Rojak dan seluruh karyawan di lin&ungan FATETA dan PAU atas segala banhian
dan kemudahan yang diberikan kepada penulis.
12. Serta semoa pihak yang tidak dapat disebutkan sahi persatu yang telah rnembarthr
dan mendukung penulis selama ini.
Penulis menyadari tulisan ini jauh dari sernpuma, ole11 karena itu masulkan
d m saran yang berguna sanga! diharapkan untuk perbaikan di~nasayang &an datang.
Semoga karya kecil ini besar manfaatnya bagi sernua pihak yang rnemerlu~kannya.
Bogor, Oktober 1997
Penulis
DAFTAR IS1
Hal
KATA PENGANTAR....................................................................................................
i
...
DAFTAR IS1.................................................................................................................
111
DAFTAR TABEL.........................................................................................................
,v
DAFTAR GM4BAR..................................................................................................
..vi
DAFTAR LAMPIRAN.........................................
..
........V I I
L PENDAHULUAN.....................................................................................................1
E TINJAUAN PUSTAKA..................................
3
A. LEhlAK..........................................................
B. h4INYAK KELAPA S A W.........
C. h W A K IKAN... ................................................................................................
Y
D. L E h M haKROBA...........................................................................................11
E. BOR4GE OIL......................
F. ANALISA TRIGLISERlCDA DENGAN HPL
a.EAHAN DAN ~ETODE..........................
A. BAHAN DAN ALAT... ..................................................................................... . I 8
B. h r n O D E P E N E L r n
9
. . . .
1. Purifikast trtgltsertda ..................................................................................... 20
2. Penentuan metode analisa dengan I-LPLC..................................................
22
3 . A i d i s a trigliserida beberapajenis minyak dengart HPLC................
.
......... 23
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN......................
A PURIFIKASI TRIGLISERIDA DENGAN KLT.
B. PENENTUAN METODE ANALISA DENGAN HPLC ......................................28
C. ANALSA TRIGLISERIDA BEBERAPA JENIS
MINYAK DENGAN RP-HPLC........
32
V . KESJMPULAN DAN SARAN.....................................................................................
48
A.
KESIMPULAN......................................................................................................
48
B. SARAN...............................................................
DAFTAR PUSTAKA...................................................
LAAQIRAN .................................................................
0
13x1
Tabel 1. Komposisi asam lemak dari minyak kelapa sawit kasar (CPO) ...................8
Tabel 2. Kandungan asam lemak n-3 pada minyak ikan tuna.................................... 11
Tabel 3. Komposisi asam lemak dari minyak kapangMovriereiin isnbeilina ........... 13
Tabel 4. Komposisi asam lemak dari borage or1.............................................. 14
Tabel 5. Kondisi a ~ a l i s a T A Gminyak dengan RP-HPLC
d a HPLC
~
argentometri
19
Tabel 6 . Nilai Rfmasing-masing komponen lipid standar .................................... . ...25
Tabel 7. Nilai Rfdari TAG beberapajenis minyak hasil petnisahari KLT............. . .27
Tabel 8. Perkiraan distribusi asam lemak pang mungkin terdapat
pada trigliserida borage oil.......
8
Tabel 9. Perkiraan distribusi asam lemak yang mungkin terdapat
pada trigliseridaminyak kapang...............
41
Tabel 10. Perkiraan distribusi asam lemak yang mungkin terdapat
. . .
pada trtgltserxdaminyak sawit ................................................................... 42
Tabel 11. Perkiraan distribusi asam lemak yang rnungkirt terdapat
pada trigliserida minyak ikan tuna
46
'"ebaLb
besarlah kusih lkchan
kepada M t a ,
k e s d a a n ny a
s e l a m a - Z a m a mycr,
ACjLZah lkchan 4
M a z m u r 11 7:2 @I@
RXIIWM< DENGAN MPLC
RFORMANCCCli:
Oleh
LINDA LESTARI
FAKULTAS TEWOLOGI I'ER'L',4NIAl\l
INSTITUT PER'T,\NTAN 130(;0ii
E(3C;Olt
terbalik pertiisahan dilakukan dengar) mengguriakan kolorn ODS Hyperst1
dengan detektor UV pada 210 nm. Elusi diiakukan secara isokratik selarna 90
~nenitdengan fase gerak asetonitril:2-propaml heksirn daliim perbanciii~ga:~
70:20:10.
Dari liasil pemisahan yanr diperoleh dengan rner~rru~lakarl rrletotlz
HPLC argentometrr. kromatogram unttlk rrlaslng-mastrie harripel piltla h-or,tlrsl
analisa yang sarna berbeda ontuk setiap kali ulangiin.
EIal
irii
inr~r~gktrl
disebabkan karena adanya ion perak di dalarn sistern sehingga kor~disikolorn
titlak stabil. Oleh karena itu, metotle ini tidak dlgunakar~padir tahap anal~sa
selanjutnya,
sedangkan untuk
metode HPLL'
fase terbalrk
drperolel~
krornatograni dengan profil yang sangat mirip deogarr pustaka, sehingga
metode ini dianggap lebih cocok untuk analisa trigliserida minyak.
Dari kromatogram sampel yang diperoleh untuk masing-masing sarilpel
trigliserida minyak, dapat diperkirakan kemungkinan komponen asarrt lemak
yang terkandung di dalamnya yaitu dengan membandingkan waktu retensi
relatif dengart waktu retensi relatif dari pustaka.
Dari liasil peniisahan yang dilakukan dapat diperkirakan bahwa minyak
kapang dait boruge oil merupakan sumber GLA yartg cukup potensial, di
mana GLA terutama terdistribusi pada posisi sn-2 dan sn-3, sedangkan pada
posisi sn-1 sangat jarang.
Kandungan asam leniak terbanyak yang rnungiriri
terdapat dalam horuga oil adalah asam linoleat dan GLA, sedartgkan pada miriyak
kaparig adalali asarn oleat dan asam lemak jaiuh, yang ditur!jukltan ole!r cukup
tingginya respnn delektor du-i peak-peak yang diper-krrakan rnengarlcl~rng asarn
l m a k yang bersiu~gkutan.
Pada min,'aI< sawit, kandungan asam lemak jenr~hyang rnungkin ada
lebih b e s x dwipada asam lemak tidak jenuhnya, di mana asam it~nalijenuh rang
terbanyak adalah asam palmitat dan miristat, sedangltan asalrr lemak tidak jenuh
tlmgan jttrnlah rang terbesar adalah asam oleat dan linoleilt
ANALISA TRIGLISERDA BEBERAPA .JEMS
MINYAK DENGAN HPLC (HIGH PERFORMANCE
UQUID CHROMATOGRAPHI?
Oleh
LINDA LESTARI
F 30.1551
Sebagai saiah satu syarat untuk rnernperoleh gelar
SARJANA T E K N O L O G I PERTANIAN
pada Jurusan 'I eknologi Pangan dan Gizi
Fakultas Teknologi Pe~tanian
Institut Pertmian Bogor
JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN DAN GIZ1
FAICULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
INSTITUT PERTANTAN BOGOR
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANLAN
ANALISA TRIGLISERIDA BEBE
A JENIS
nimuuuAK DENGAN HPLC (HIGH PERFORMANCE
LIQUID CHROMATOGRAPHY)
0 leh
LINDA LESTARI
F 30.1551
SKRIPSI
Sebagai saiah satu syarat untu!i memperoleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN
pada Jurusan Tehologi Pangan dan Gizi
Fakultas Teknologi Pertmian
Institut Pertanian Bogor
Dilahirkan pada tanggal 28 Oktober 1975
di Jakarta
Tansal lulus : 25 Oktober 1997
KkTA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Tuhan Ynng Maha Kuasa atas serala
karunia dan rahmat-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan karya ilmizh ini dengart
baik
Dalan~me~~yelesaikan
tugas alhir ini penuiis banyak mendapat dukungan dari
berbagai pihak.
Pada kesempatan ini rasa terima kasih yar~gmendalarn penulis
sampaikan kepada :
1. Dr. Ir. Slamet Budijanto, MSc. sel&l dosen pembimbing yang selama ini telah
banyak memberikan bimbingan, arahan d m bantuan moral kepada penulis.
2.
Ir. Ni Luh Puspitasari, MSc. selaku dosen pembimbing yang telah banyak
memberikan bantuan moril dan rnateriil serta dengan sabar membimbing dan
mengarahkan penulis selama mengerjakan tugas akhir ini.
3.
Dr.
Ir. Punviyatno Hariyadi, MSc dan Dr. 11. I-I. Anton Apriyantono, A'IS selalni
dosen penguji atas segala petunjuk, saran dan bimbingan yang diberikan kepada
penulis dalam rnenyelesaikan tugas akhir ini.
4.
Mama dan papa tercinta atas kasih sayangnya yang tulus dan
dengan penuh
kesabaran selalu mendorong dan memberikan semangat serta do'a kepada pen~tlis
dalam mensgapai cita-cita
5.
Kakak-kakakh dan adikku yang tercinta : Yeni, Trisulo, Mery dan Dewi atas
segala dorongan, bantuan, dan do'anya selama ini.
6 . Teman-teman kost "REGINA" : Kak Neni, Shirley, Ermq Diara, Dewi, Joe,
E l i n d q Wati, Ice, Endah, Idq Oca, Nan% Lina Vera, Anne, Ade, AIdq Inla,
Silvi, Ida, Om Jujun, Tante Eka, Jimmy dan D ~ a natas bantuan dan dorongan dan
doanya selama penulis belajar di TF'G.
7.
Teman-teman seperjuangan : Dinar, Dina, Martha, Fera, Mely, Ria, Rini, Kak
Linda, Kak Gina dan Mbak Evi atas segala nasihat, dorongan, pertghiburan, dan
kenangan manis selamapenulis belajar di LPB.
8.
Abangku yang baik Ji.Jon MarantikaNapitupuiu atas segala bantuan, dorongan dan
do'a yang diberikan selama ini.
9.
Rekan-rekan satu tim : Dina, Wayan, Ika, David dan Kurnia atas bantuan dan
dorongannya
10. Rekan-rekan selaboratorium : Ci Y e ~ y ,Bu Efi, Mas Anton, k'antt, Stlmi, Neni,
Helmi, Eli, Desi, Sherly, Tatik, Bora, Fajar dkk atas bantuan dan dorongannya
11. Staf laboratorium : Mas Taufik, h&ak Antin, Mbak Ari, Mbak Sri, Bik Omah, Pak
Rojak dan seluruh karyawan di lin&ungan FATETA dan PAU atas segala banhian
dan kemudahan yang diberikan kepada penulis.
12. Serta semoa pihak yang tidak dapat disebutkan sahi persatu yang telah rnembarthr
dan mendukung penulis selama ini.
Penulis menyadari tulisan ini jauh dari sernpuma, ole11 karena itu masulkan
d m saran yang berguna sanga! diharapkan untuk perbaikan di~nasayang &an datang.
Semoga karya kecil ini besar manfaatnya bagi sernua pihak yang rnemerlu~kannya.
Bogor, Oktober 1997
Penulis
DAFTAR IS1
Hal
KATA PENGANTAR....................................................................................................
i
...
DAFTAR IS1.................................................................................................................
111
DAFTAR TABEL.........................................................................................................
,v
DAFTAR GM4BAR..................................................................................................
..vi
DAFTAR LAMPIRAN.........................................
..
........V I I
L PENDAHULUAN.....................................................................................................1
E TINJAUAN PUSTAKA..................................
3
A. LEhlAK..........................................................
B. h4INYAK KELAPA S A W.........
C. h W A K IKAN... ................................................................................................
Y
D. L E h M haKROBA...........................................................................................11
E. BOR4GE OIL......................
F. ANALISA TRIGLISERlCDA DENGAN HPL
a.EAHAN DAN ~ETODE..........................
A. BAHAN DAN ALAT... ..................................................................................... . I 8
B. h r n O D E P E N E L r n
9
. . . .
1. Purifikast trtgltsertda ..................................................................................... 20
2. Penentuan metode analisa dengan I-LPLC..................................................
22
3 . A i d i s a trigliserida beberapajenis minyak dengart HPLC................
.
......... 23
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN......................
A PURIFIKASI TRIGLISERIDA DENGAN KLT.
B. PENENTUAN METODE ANALISA DENGAN HPLC ......................................28
C. ANALSA TRIGLISERIDA BEBERAPA JENIS
MINYAK DENGAN RP-HPLC........
32
V . KESJMPULAN DAN SARAN.....................................................................................
48
A.
KESIMPULAN......................................................................................................
48
B. SARAN...............................................................
DAFTAR PUSTAKA...................................................
LAAQIRAN .................................................................
0
13x1
Tabel 1. Komposisi asam lemak dari minyak kelapa sawit kasar (CPO) ...................8
Tabel 2. Kandungan asam lemak n-3 pada minyak ikan tuna.................................... 11
Tabel 3. Komposisi asam lemak dari minyak kapangMovriereiin isnbeilina ........... 13
Tabel 4. Komposisi asam lemak dari borage or1.............................................. 14
Tabel 5. Kondisi a ~ a l i s a T A Gminyak dengan RP-HPLC
d a HPLC
~
argentometri
19
Tabel 6 . Nilai Rfmasing-masing komponen lipid standar .................................... . ...25
Tabel 7. Nilai Rfdari TAG beberapajenis minyak hasil petnisahari KLT............. . .27
Tabel 8. Perkiraan distribusi asam lemak pang mungkin terdapat
pada trigliserida borage oil.......
8
Tabel 9. Perkiraan distribusi asam lemak yang mungkin terdapat
pada trigliseridaminyak kapang...............
41
Tabel 10. Perkiraan distribusi asam lemak yang mungkin terdapat
. . .
pada trtgltserxdaminyak sawit ................................................................... 42
Tabel 11. Perkiraan distribusi asam lemak yang rnungkirt terdapat
pada trigliserida minyak ikan tuna
46
besarlah kusih lkchan
kepada M t a ,
k e s d a a n ny a
s e l a m a - Z a m a mycr,
ACjLZah lkchan 4
M a z m u r 11 7:2 @I@
RXIIWM< DENGAN MPLC
RFORMANCCCli:
Oleh
LINDA LESTARI
FAKULTAS TEWOLOGI I'ER'L',4NIAl\l
INSTITUT PER'T,\NTAN 130(;0ii
E(3C;Olt
terbalik pertiisahan dilakukan dengar) mengguriakan kolorn ODS Hyperst1
dengan detektor UV pada 210 nm. Elusi diiakukan secara isokratik selarna 90
~nenitdengan fase gerak asetonitril:2-propaml heksirn daliim perbanciii~ga:~
70:20:10.
Dari liasil pemisahan yanr diperoleh dengan rner~rru~lakarl rrletotlz
HPLC argentometrr. kromatogram unttlk rrlaslng-mastrie harripel piltla h-or,tlrsl
analisa yang sarna berbeda ontuk setiap kali ulangiin.
EIal
irii
inr~r~gktrl
disebabkan karena adanya ion perak di dalarn sistern sehingga kor~disikolorn
titlak stabil. Oleh karena itu, metotle ini tidak dlgunakar~padir tahap anal~sa
selanjutnya,
sedangkan untuk
metode HPLL'
fase terbalrk
drperolel~
krornatograni dengan profil yang sangat mirip deogarr pustaka, sehingga
metode ini dianggap lebih cocok untuk analisa trigliserida minyak.
Dari kromatogram sampel yang diperoleh untuk masing-masing sarilpel
trigliserida minyak, dapat diperkirakan kemungkinan komponen asarrt lemak
yang terkandung di dalamnya yaitu dengan membandingkan waktu retensi
relatif dengart waktu retensi relatif dari pustaka.
Dari liasil peniisahan yang dilakukan dapat diperkirakan bahwa minyak
kapang dait boruge oil merupakan sumber GLA yartg cukup potensial, di
mana GLA terutama terdistribusi pada posisi sn-2 dan sn-3, sedangkan pada
posisi sn-1 sangat jarang.
Kandungan asam leniak terbanyak yang rnungiriri
terdapat dalam horuga oil adalah asam linoleat dan GLA, sedartgkan pada miriyak
kaparig adalali asarn oleat dan asam lemak jaiuh, yang ditur!jukltan ole!r cukup
tingginya respnn delektor du-i peak-peak yang diper-krrakan rnengarlcl~rng asarn
l m a k yang bersiu~gkutan.
Pada min,'aI< sawit, kandungan asam lemak jenr~hyang rnungkin ada
lebih b e s x dwipada asam lemak tidak jenuhnya, di mana asam it~nalijenuh rang
terbanyak adalah asam palmitat dan miristat, sedangltan asalrr lemak tidak jenuh
tlmgan jttrnlah rang terbesar adalah asam oleat dan linoleilt
ANALISA TRIGLISERDA BEBERAPA .JEMS
MINYAK DENGAN HPLC (HIGH PERFORMANCE
UQUID CHROMATOGRAPHI?
Oleh
LINDA LESTARI
F 30.1551
Sebagai saiah satu syarat untuk rnernperoleh gelar
SARJANA T E K N O L O G I PERTANIAN
pada Jurusan 'I eknologi Pangan dan Gizi
Fakultas Teknologi Pe~tanian
Institut Pertmian Bogor
JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN DAN GIZ1
FAICULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
INSTITUT PERTANTAN BOGOR
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANLAN
ANALISA TRIGLISERIDA BEBE
A JENIS
nimuuuAK DENGAN HPLC (HIGH PERFORMANCE
LIQUID CHROMATOGRAPHY)
0 leh
LINDA LESTARI
F 30.1551
SKRIPSI
Sebagai saiah satu syarat untu!i memperoleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN
pada Jurusan Tehologi Pangan dan Gizi
Fakultas Teknologi Pertmian
Institut Pertanian Bogor
Dilahirkan pada tanggal 28 Oktober 1975
di Jakarta
Tansal lulus : 25 Oktober 1997
KkTA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Tuhan Ynng Maha Kuasa atas serala
karunia dan rahmat-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan karya ilmizh ini dengart
baik
Dalan~me~~yelesaikan
tugas alhir ini penuiis banyak mendapat dukungan dari
berbagai pihak.
Pada kesempatan ini rasa terima kasih yar~gmendalarn penulis
sampaikan kepada :
1. Dr. Ir. Slamet Budijanto, MSc. sel&l dosen pembimbing yang selama ini telah
banyak memberikan bimbingan, arahan d m bantuan moral kepada penulis.
2.
Ir. Ni Luh Puspitasari, MSc. selaku dosen pembimbing yang telah banyak
memberikan bantuan moril dan rnateriil serta dengan sabar membimbing dan
mengarahkan penulis selama mengerjakan tugas akhir ini.
3.
Dr.
Ir. Punviyatno Hariyadi, MSc dan Dr. 11. I-I. Anton Apriyantono, A'IS selalni
dosen penguji atas segala petunjuk, saran dan bimbingan yang diberikan kepada
penulis dalam rnenyelesaikan tugas akhir ini.
4.
Mama dan papa tercinta atas kasih sayangnya yang tulus dan
dengan penuh
kesabaran selalu mendorong dan memberikan semangat serta do'a kepada pen~tlis
dalam mensgapai cita-cita
5.
Kakak-kakakh dan adikku yang tercinta : Yeni, Trisulo, Mery dan Dewi atas
segala dorongan, bantuan, dan do'anya selama ini.
6 . Teman-teman kost "REGINA" : Kak Neni, Shirley, Ermq Diara, Dewi, Joe,
E l i n d q Wati, Ice, Endah, Idq Oca, Nan% Lina Vera, Anne, Ade, AIdq Inla,
Silvi, Ida, Om Jujun, Tante Eka, Jimmy dan D ~ a natas bantuan dan dorongan dan
doanya selama penulis belajar di TF'G.
7.
Teman-teman seperjuangan : Dinar, Dina, Martha, Fera, Mely, Ria, Rini, Kak
Linda, Kak Gina dan Mbak Evi atas segala nasihat, dorongan, pertghiburan, dan
kenangan manis selamapenulis belajar di LPB.
8.
Abangku yang baik Ji.Jon MarantikaNapitupuiu atas segala bantuan, dorongan dan
do'a yang diberikan selama ini.
9.
Rekan-rekan satu tim : Dina, Wayan, Ika, David dan Kurnia atas bantuan dan
dorongannya
10. Rekan-rekan selaboratorium : Ci Y e ~ y ,Bu Efi, Mas Anton, k'antt, Stlmi, Neni,
Helmi, Eli, Desi, Sherly, Tatik, Bora, Fajar dkk atas bantuan dan dorongannya
11. Staf laboratorium : Mas Taufik, h&ak Antin, Mbak Ari, Mbak Sri, Bik Omah, Pak
Rojak dan seluruh karyawan di lin&ungan FATETA dan PAU atas segala banhian
dan kemudahan yang diberikan kepada penulis.
12. Serta semoa pihak yang tidak dapat disebutkan sahi persatu yang telah rnembarthr
dan mendukung penulis selama ini.
Penulis menyadari tulisan ini jauh dari sernpuma, ole11 karena itu masulkan
d m saran yang berguna sanga! diharapkan untuk perbaikan di~nasayang &an datang.
Semoga karya kecil ini besar manfaatnya bagi sernua pihak yang rnemerlu~kannya.
Bogor, Oktober 1997
Penulis
DAFTAR IS1
Hal
KATA PENGANTAR....................................................................................................
i
...
DAFTAR IS1.................................................................................................................
111
DAFTAR TABEL.........................................................................................................
,v
DAFTAR GM4BAR..................................................................................................
..vi
DAFTAR LAMPIRAN.........................................
..
........V I I
L PENDAHULUAN.....................................................................................................1
E TINJAUAN PUSTAKA..................................
3
A. LEhlAK..........................................................
B. h4INYAK KELAPA S A W.........
C. h W A K IKAN... ................................................................................................
Y
D. L E h M haKROBA...........................................................................................11
E. BOR4GE OIL......................
F. ANALISA TRIGLISERlCDA DENGAN HPL
a.EAHAN DAN ~ETODE..........................
A. BAHAN DAN ALAT... ..................................................................................... . I 8
B. h r n O D E P E N E L r n
9
. . . .
1. Purifikast trtgltsertda ..................................................................................... 20
2. Penentuan metode analisa dengan I-LPLC..................................................
22
3 . A i d i s a trigliserida beberapajenis minyak dengart HPLC................
.
......... 23
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN......................
A PURIFIKASI TRIGLISERIDA DENGAN KLT.
B. PENENTUAN METODE ANALISA DENGAN HPLC ......................................28
C. ANALSA TRIGLISERIDA BEBERAPA JENIS
MINYAK DENGAN RP-HPLC........
32
V . KESJMPULAN DAN SARAN.....................................................................................
48
A.
KESIMPULAN......................................................................................................
48
B. SARAN...............................................................
DAFTAR PUSTAKA...................................................
LAAQIRAN .................................................................
0
13x1
Tabel 1. Komposisi asam lemak dari minyak kelapa sawit kasar (CPO) ...................8
Tabel 2. Kandungan asam lemak n-3 pada minyak ikan tuna.................................... 11
Tabel 3. Komposisi asam lemak dari minyak kapangMovriereiin isnbeilina ........... 13
Tabel 4. Komposisi asam lemak dari borage or1.............................................. 14
Tabel 5. Kondisi a ~ a l i s a T A Gminyak dengan RP-HPLC
d a HPLC
~
argentometri
19
Tabel 6 . Nilai Rfmasing-masing komponen lipid standar .................................... . ...25
Tabel 7. Nilai Rfdari TAG beberapajenis minyak hasil petnisahari KLT............. . .27
Tabel 8. Perkiraan distribusi asam lemak pang mungkin terdapat
pada trigliserida borage oil.......
8
Tabel 9. Perkiraan distribusi asam lemak yang mungkin terdapat
pada trigliseridaminyak kapang...............
41
Tabel 10. Perkiraan distribusi asam lemak yang mungkin terdapat
. . .
pada trtgltserxdaminyak sawit ................................................................... 42
Tabel 11. Perkiraan distribusi asam lemak yang rnungkirt terdapat
pada trigliserida minyak ikan tuna
46
'"ebaLb
besarlah kusih lkchan
kepada M t a ,
k e s d a a n ny a
s e l a m a - Z a m a mycr,
ACjLZah lkchan 4
M a z m u r 11 7:2 @I@
RXIIWM< DENGAN MPLC
RFORMANCCCli:
Oleh
LINDA LESTARI
FAKULTAS TEWOLOGI I'ER'L',4NIAl\l
INSTITUT PER'T,\NTAN 130(;0ii
E(3C;Olt
terbalik pertiisahan dilakukan dengar) mengguriakan kolorn ODS Hyperst1
dengan detektor UV pada 210 nm. Elusi diiakukan secara isokratik selarna 90
~nenitdengan fase gerak asetonitril:2-propaml heksirn daliim perbanciii~ga:~
70:20:10.
Dari liasil pemisahan yanr diperoleh dengan rner~rru~lakarl rrletotlz
HPLC argentometrr. kromatogram unttlk rrlaslng-mastrie harripel piltla h-or,tlrsl
analisa yang sarna berbeda ontuk setiap kali ulangiin.
EIal
irii
inr~r~gktrl
disebabkan karena adanya ion perak di dalarn sistern sehingga kor~disikolorn
titlak stabil. Oleh karena itu, metotle ini tidak dlgunakar~padir tahap anal~sa
selanjutnya,
sedangkan untuk
metode HPLL'
fase terbalrk
drperolel~
krornatograni dengan profil yang sangat mirip deogarr pustaka, sehingga
metode ini dianggap lebih cocok untuk analisa trigliserida minyak.
Dari kromatogram sampel yang diperoleh untuk masing-masing sarilpel
trigliserida minyak, dapat diperkirakan kemungkinan komponen asarrt lemak
yang terkandung di dalamnya yaitu dengan membandingkan waktu retensi
relatif dengart waktu retensi relatif dari pustaka.
Dari liasil peniisahan yang dilakukan dapat diperkirakan bahwa minyak
kapang dait boruge oil merupakan sumber GLA yartg cukup potensial, di
mana GLA terutama terdistribusi pada posisi sn-2 dan sn-3, sedangkan pada
posisi sn-1 sangat jarang.
Kandungan asam leniak terbanyak yang rnungiriri
terdapat dalam horuga oil adalah asam linoleat dan GLA, sedartgkan pada miriyak
kaparig adalali asarn oleat dan asam lemak jaiuh, yang ditur!jukltan ole!r cukup
tingginya respnn delektor du-i peak-peak yang diper-krrakan rnengarlcl~rng asarn
l m a k yang bersiu~gkutan.
Pada min,'aI< sawit, kandungan asam lemak jenr~hyang rnungkin ada
lebih b e s x dwipada asam lemak tidak jenuhnya, di mana asam it~nalijenuh rang
terbanyak adalah asam palmitat dan miristat, sedangltan asalrr lemak tidak jenuh
tlmgan jttrnlah rang terbesar adalah asam oleat dan linoleilt
ANALISA TRIGLISERDA BEBERAPA .JEMS
MINYAK DENGAN HPLC (HIGH PERFORMANCE
UQUID CHROMATOGRAPHI?
Oleh
LINDA LESTARI
F 30.1551
Sebagai saiah satu syarat untuk rnernperoleh gelar
SARJANA T E K N O L O G I PERTANIAN
pada Jurusan 'I eknologi Pangan dan Gizi
Fakultas Teknologi Pe~tanian
Institut Pertmian Bogor
JURUSAN TEKNOLOGI PANGAN DAN GIZ1
FAICULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN
INSTITUT PERTANIAN BOGOR
BOGOR
INSTITUT PERTANTAN BOGOR
FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANLAN
ANALISA TRIGLISERIDA BEBE
A JENIS
nimuuuAK DENGAN HPLC (HIGH PERFORMANCE
LIQUID CHROMATOGRAPHY)
0 leh
LINDA LESTARI
F 30.1551
SKRIPSI
Sebagai saiah satu syarat untu!i memperoleh gelar
SARJANA TEKNOLOGI PERTANIAN
pada Jurusan Tehologi Pangan dan Gizi
Fakultas Teknologi Pertmian
Institut Pertanian Bogor
Dilahirkan pada tanggal 28 Oktober 1975
di Jakarta
Tansal lulus : 25 Oktober 1997
KkTA PENGANTAR
Puji syukur penulis panjatkan ke hadirat Tuhan Ynng Maha Kuasa atas serala
karunia dan rahmat-Nya, sehingga penulis dapat menyelesaikan karya ilmizh ini dengart
baik
Dalan~me~~yelesaikan
tugas alhir ini penuiis banyak mendapat dukungan dari
berbagai pihak.
Pada kesempatan ini rasa terima kasih yar~gmendalarn penulis
sampaikan kepada :
1. Dr. Ir. Slamet Budijanto, MSc. sel&l dosen pembimbing yang selama ini telah
banyak memberikan bimbingan, arahan d m bantuan moral kepada penulis.
2.
Ir. Ni Luh Puspitasari, MSc. selaku dosen pembimbing yang telah banyak
memberikan bantuan moril dan rnateriil serta dengan sabar membimbing dan
mengarahkan penulis selama mengerjakan tugas akhir ini.
3.
Dr.
Ir. Punviyatno Hariyadi, MSc dan Dr. 11. I-I. Anton Apriyantono, A'IS selalni
dosen penguji atas segala petunjuk, saran dan bimbingan yang diberikan kepada
penulis dalam rnenyelesaikan tugas akhir ini.
4.
Mama dan papa tercinta atas kasih sayangnya yang tulus dan
dengan penuh
kesabaran selalu mendorong dan memberikan semangat serta do'a kepada pen~tlis
dalam mensgapai cita-cita
5.
Kakak-kakakh dan adikku yang tercinta : Yeni, Trisulo, Mery dan Dewi atas
segala dorongan, bantuan, dan do'anya selama ini.
6 . Teman-teman kost "REGINA" : Kak Neni, Shirley, Ermq Diara, Dewi, Joe,
E l i n d q Wati, Ice, Endah, Idq Oca, Nan% Lina Vera, Anne, Ade, AIdq Inla,
Silvi, Ida, Om Jujun, Tante Eka, Jimmy dan D ~ a natas bantuan dan dorongan dan
doanya selama penulis belajar di TF'G.
7.
Teman-teman seperjuangan : Dinar, Dina, Martha, Fera, Mely, Ria, Rini, Kak
Linda, Kak Gina dan Mbak Evi atas segala nasihat, dorongan, pertghiburan, dan
kenangan manis selamapenulis belajar di LPB.
8.
Abangku yang baik Ji.Jon MarantikaNapitupuiu atas segala bantuan, dorongan dan
do'a yang diberikan selama ini.
9.
Rekan-rekan satu tim : Dina, Wayan, Ika, David dan Kurnia atas bantuan dan
dorongannya
10. Rekan-rekan selaboratorium : Ci Y e ~ y ,Bu Efi, Mas Anton, k'antt, Stlmi, Neni,
Helmi, Eli, Desi, Sherly, Tatik, Bora, Fajar dkk atas bantuan dan dorongannya
11. Staf laboratorium : Mas Taufik, h&ak Antin, Mbak Ari, Mbak Sri, Bik Omah, Pak
Rojak dan seluruh karyawan di lin&ungan FATETA dan PAU atas segala banhian
dan kemudahan yang diberikan kepada penulis.
12. Serta semoa pihak yang tidak dapat disebutkan sahi persatu yang telah rnembarthr
dan mendukung penulis selama ini.
Penulis menyadari tulisan ini jauh dari sernpuma, ole11 karena itu masulkan
d m saran yang berguna sanga! diharapkan untuk perbaikan di~nasayang &an datang.
Semoga karya kecil ini besar manfaatnya bagi sernua pihak yang rnemerlu~kannya.
Bogor, Oktober 1997
Penulis
DAFTAR IS1
Hal
KATA PENGANTAR....................................................................................................
i
...
DAFTAR IS1.................................................................................................................
111
DAFTAR TABEL.........................................................................................................
,v
DAFTAR GM4BAR..................................................................................................
..vi
DAFTAR LAMPIRAN.........................................
..
........V I I
L PENDAHULUAN.....................................................................................................1
E TINJAUAN PUSTAKA..................................
3
A. LEhlAK..........................................................
B. h4INYAK KELAPA S A W.........
C. h W A K IKAN... ................................................................................................
Y
D. L E h M haKROBA...........................................................................................11
E. BOR4GE OIL......................
F. ANALISA TRIGLISERlCDA DENGAN HPL
a.EAHAN DAN ~ETODE..........................
A. BAHAN DAN ALAT... ..................................................................................... . I 8
B. h r n O D E P E N E L r n
9
. . . .
1. Purifikast trtgltsertda ..................................................................................... 20
2. Penentuan metode analisa dengan I-LPLC..................................................
22
3 . A i d i s a trigliserida beberapajenis minyak dengart HPLC................
.
......... 23
IV. HASIL DAN PEMBAHASAN......................
A PURIFIKASI TRIGLISERIDA DENGAN KLT.
B. PENENTUAN METODE ANALISA DENGAN HPLC ......................................28
C. ANALSA TRIGLISERIDA BEBERAPA JENIS
MINYAK DENGAN RP-HPLC........
32
V . KESJMPULAN DAN SARAN.....................................................................................
48
A.
KESIMPULAN......................................................................................................
48
B. SARAN...............................................................
DAFTAR PUSTAKA...................................................
LAAQIRAN .................................................................
0
13x1
Tabel 1. Komposisi asam lemak dari minyak kelapa sawit kasar (CPO) ...................8
Tabel 2. Kandungan asam lemak n-3 pada minyak ikan tuna.................................... 11
Tabel 3. Komposisi asam lemak dari minyak kapangMovriereiin isnbeilina ........... 13
Tabel 4. Komposisi asam lemak dari borage or1.............................................. 14
Tabel 5. Kondisi a ~ a l i s a T A Gminyak dengan RP-HPLC
d a HPLC
~
argentometri
19
Tabel 6 . Nilai Rfmasing-masing komponen lipid standar .................................... . ...25
Tabel 7. Nilai Rfdari TAG beberapajenis minyak hasil petnisahari KLT............. . .27
Tabel 8. Perkiraan distribusi asam lemak pang mungkin terdapat
pada trigliserida borage oil.......
8
Tabel 9. Perkiraan distribusi asam lemak yang mungkin terdapat
pada trigliseridaminyak kapang...............
41
Tabel 10. Perkiraan distribusi asam lemak yang mungkin terdapat
. . .
pada trtgltserxdaminyak sawit ................................................................... 42
Tabel 11. Perkiraan distribusi asam lemak yang rnungkirt terdapat
pada trigliserida minyak ikan tuna
46