Penyiapan media Sterilisasi botol dan alat Sterilisasi eksplan

xxvii

2. Penyiapan media

Media yang digunakan adalah media MS, B5 dan WPM. Dalam pembuatan media MS, dibuat ¼ liter 250 ml, untuk 10 botol kultur. Pembuatannya dengan cara mencampurkan larutan stok dengan gula 7,5 g kemudian dilarutkan dengan aquades sampai 250 ml. Larutan dikondisikan pada pH 5,8-6,3 dengan menambahkan NaOH untuk menaikkan pH dan HCl untuk menurunkan pH. Larutan ditambah agar-agar 2 g, kemudian diaduk dengan magnetic stirrer dan dipanaskan hingga mendidih. Larutan dituangkan ke dalam botol kultur ± 25 mlbotol, kemudian ditutup dengan plastik PP 0,03 mm dan diikat dengan karet. Hal serupa dilakukan untuk penyiapan media B5 dan WPM, karena ke tiga media ini larutan stoknya berbeda. Media dimasukkan ke dalam autoklaf untuk disterilisasi dengan tekanan 1,5 psi kgcm 2 , pada suhu 120 C selama 45 menit. Botol-botol kultur berisi media selanjutnya disimpan pada rak-rak kultur.

3. Sterilisasi botol dan alat

Alat-alat yang harus disterilkan yaitu botol kultur, petridish, skapel, pinset dan pisau pemes. Alat-alat tersebut dicuci sampai bersih dengan menggunakan sabun cuci kemudian dikeringkan. Setelah kering, baru dimasukkan ke dalam autoklaf pada tekanan 1,5 psi kgcm 2 , pada suhu 120 C selama 45 menit.

4. Sterilisasi eksplan

Eksplan yang digunakan berasal dari bagian tunas pucuk tanaman manggis Garcinia mangostana L.. Tahapan sterilisasi eksplan sebagai berikut : - Tunas eksplan dibersihkan dengan aquadest sampai bersih 2 kali - Masukkan eksplan ke dalam botol berisi deterjen selama + 5 menit - Membersihkan eksplan dengan aquadest sampai bersih 2 kali - Masukkan eksplan ke dalam botol berisi dithane 1,5 gr100 ml selama + 30 menit - Membersihkan eksplan dengan aquadest sampai bersih 2 kali xxviii - Masukkan eksplan ke dalam botol berisi agrept 1 gr100 ml selama 30 menit - Membersihkan eksplan dengan aquadest sampai bersih 2 kali - Masukkan eksplan ke dalam botol berisi dithane 1 gr100 ml selama 30 menit - Membersihkan eksplan dengan aquadest sampai bersih 2 kali - Masukkan eksplan ke dalam botol berisi alcohol 70 selama + 5 menit - Membersihkan eksplan dengan aquadest sampai bersih 2 kali - Masukkan eksplan ke dalam botol berisi Clorox 5,25 selama + 2 menit

5. Penanaman eksplan

Dokumen yang terkait

Pengaruh Pemberian Ekstrak Etanol Kulit Manggis (Garcinia mangostana L) terhadap Perubahan Kadar Enzim AST, ALT serta Perubahan Makroskopik dan Histopatologi Hati Mencit Jantan (Mus musculus L) strain DDW setelah diberi Monosodium Glutamate (MSG) diban

1 68 118

Pengaruh Penambahan Ekstrak Kulit Manggis (Garcinia X Mangostana L.) Terhadap Nilai Spf Krim Tabir Surya Kombinasi Avobenson Dan Oktil Metoksisinamat

4 100 106

Daya Hambat Ekstrak Etanol Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana L.) Terhadap Bakteri Enterococcus faecalis Sebagai Alternatif Bahan Medikamen Saluran Akar (In Vitro)

3 289 97

Daya Antibakteri Ekstrak Kulit Buah Manggis (Garcinia Mangostana Linn.) pada bakteri Streptococcus mutans sebagai Bahan Alternatif Medikamen Saluran Akar dengan Metode Dilusi In Vitro

6 111 48

Pengaruh Ekstrak Kulit Manggis (Garcinia mangostana L.) terhadap Gambaran Histopatologis Lambung Tikus (Rattus norvegicus L.) Jantan yang Dipapari Kebisingan

2 103 56

Daya Antibakteri Ekstrak Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana L) terhadap Fusobacterium nucleatum sebagai Bahan Alternatif Medikamen Saluran Akar secara in Vitro

8 89 59

Efek Antibakteri Ekstrak Etanol Kulit Buah Manggis (Garcinia mangostana L) terhadap Enterococcus faecalis sebagai Bahan Medikamen Saluran Akar (Secara In Vitro)

2 96 63

Evaluasi Lahan Untuk Pengembangan Tanaman Manggis (Garcinia mangostana L.) di Kabupaten Mandailing Natal

4 42 82

KAJIAN KONSENTRASI BAP DAN NAA TERHADAP MULTIPLIKASI TANAMAN Artemisia annua L. SECARA IN VITRO

2 12 61

KAJIAN MACAM EKSPLAN DAN KONSENTRASI IBA TERHADAP MULTIPLIKASI TANAMAN MANGGIS (Garcinia mangostana L.) SECARA IN VITRO

0 7 54