BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Escherichia coli
Escherichia coli, yaitu bakteri anaerob fakultatif gram negatif berbentuk batang yang termasuk dalam famili Enterobacteriaceae. Baktei ini merupakan
penghuni normal usus, selain berkembang biak di lingkungan sekitar manusia. Pertama dijumpai pada tahun 1885 Arisman, 2009.
Bakteri Escherichia coli merupakan jasad indikator dalam substrat air dan bahan makanan. Yang mampu memfermentasikan laktosa pada temperatur 37°C
dengan membentuk asam dan gas di dalam waktu jam. Bakteri ini berpotensi patogen karena pada keadaan tertentu dapat menyebabkan diare Suriawiria,
1996. Bakteri Coliform dibedakan menjadi 2, yaitu fekal dan non-fekal. Yang
termasuk kelompok bakteri Coliform fekal adalah Escherichia coli, sedangkan kelompok bakteri Coliform non-fekal adalah E. aerogenes. Untuk membedakan
Escherichia coli dari E. aerogenes dapat dilakukan uji IMViC indol, merah metil, voges-proskauer, sitrat, yaitu uji yang menunjukkan pembentukan indol dari
triptofan, uji merah metil yang menunjukkan fermentasi glukosa menghasilkan asam sampai pH 4,5 sehingga medium akan berwarna merah dengan adanya
merah metil, uji voges-proskauer yang menunjukkan pembentukan asetil metil karbinol dari glukosa, dan uji penggunaan sitrat sebagai sumber karbon. E. coli
mempunyai sifat yang berbeda dengan E. aerogenes karena pada umumnya dapat memproduksi indol dari triptofan, membentuk asam sehingga menurunkan pH
Universitas Sumatera Utara
sampai 4,5, tidak memproduksi asetil metil karbinol, dan tidak dapat menggunakan sitrat sebagai satu-satunya sumber karbon. Sifat-sifat E. coli
lainnya yang penting adalah bakteri ini dapat memfermentasi laktosa dengan memproduksi asam dan gas, mereduksi nitrat menjadi nitrit, bersifat katalase
positif, dan oksidase negatif Fardiaz, 1992. a.
Uji Indol Asam amino triptofan merupakan komponen asam amino yang lazim
terdapat pada protein, sehingga asam amino ini dengan mudah dapat digunakan oleh mikroorganisme akibat penguraian protein. Bakteri Escherichia coli mampu
menggunakan triptofan sebagai sumber karbon. E.coli menghasilkan enzim triptofanase yang mengkatalisasikan penguraian
gugus indol dari triptofan. Dalam media biakan, indol menumpuk sebagai produk buangan, sedangkan bagian lainnya dari molekul triptofan asam piruvat dan
NH
4 +
dapat digunakan untuk memenuhi kebutuhan zat hara mikroorganisme. Reagens bereaksi dengan indol dan menghasilkan senyawa yang tidak larut dalam
air dan berwarna merah pada permukaan medium Widyawati, 2012. b.
Uji Merah Metil Methyl Red Uji merah metil digunakan untuk menentukan adanya fermentasi asam
campuran. Beberapa bakteri memfermentasikan glukosa dan menghasilkan berbagai produk yang bersifat asam sehingga akan menurunkan pH media
pertumbuhannya menjadi 5,0 atau lebih rendah. Penambahan indikator pH merah metil dapat menunjukkan adanya perubahan pH menjadi asam. Merah metil
Universitas Sumatera Utara
berwarna merah pada lingkungan dengan pH 4,4 dan berwarna kuning dalam lingkungan dengan pH 6,2 Widyawati, 2012.
c. Uji Voges-Proskauer
Uji ini digunakan untuk mengidentifikasi mikroorganisme yang memfermentasi karbohidrat menjadi 2,3-butanadiol sebagai produk utama, akan
terjadi penumpukan bahan tersebut dalam media pertumbuhan. Pada penambahan KOH, adanya asetoin ditunjukan adanya perubahan warna menjadi merah muda.
Perubahan warna ini diperjelas dengan penambahan larutan alfa-naftol Widyawati, 2012.
d. Uji Sitrat
Uji Sitrat digunakan untuk melihat kemampuan mikroorganisme menggunakan sitrat sebagai satu-satunya sumber karbon dan energi. Untuk uji ini
dapat digunakan medium sitrat-Koser berupa medium cair atau medium sitrat- Simmons berupa medium padat. Simmon’s citrate agar merupakan medium
sintetik dengan Na sitrat sebagai satu-satunya sumber karbon, NH
4 +
sebagai sumber N dan Brom Thymol Blue sebagai indikator pH, sedangkan medium
sitrat-Koser tidak mengandung indikator. Bila mikroorganisme mampu menggunakan sitrat, maka asam akan dihilangkan dari medium biakan, sehingga
menyebabkan peningkatan pH dan mengubah warna medium dari hijau menjadi biru. Terjadinya perubahan warna dari hijau menjadi biru menunjukan bahwa
mikroorganisme mampu menggunakan sitrat sebagai satu-satunya sumber karbon. Sedangkan pada medium sitrat-Koser kemampuan menggunakan sitrat
Universitas Sumatera Utara
ditunjukkan oleh kekeruhan yang menandakan adanya pertumbuhan Widyawati, 2012.
Sifat-sifat bakteri Coliform dengan Uji IMViC berdasarkan SNI 01-2897- 1992 dapat dilihat pada Tabel 1.
Tabel 1 . Sifat-Sifat Bakteri Coliform dengan Uji IMViC
Indol Merah Metil
Voges Proskauer Sitrat
Type +
+ -
- Typical E.coli
- +
- -
Atypical E.coli +
+ -
+ Typical Intermediate
- +
- +
Atypical Intermediate -
- +
+ Typical E. Aerogenes
+ -
+ +
Atypical E. Aerogenes Yang termasuk E. coli ialah Typical E. coli + + - - dan Atypical E. coli - + - -.
Universitas Sumatera Utara
Daftar APM Coliform Menggunakan 5 Tabung berdasarkan SNI 01-2897-
1992 dapat dilihat pada Tabel 2. Tabel 2.
Daftar APM Coliform Menggunakan 5 Tabung
Kombinasijumlah tabung yang positif
APM100 ml Kombinasijumlah tabung yang positif
APM100 ml 0-0-0
0-0-1 0-1-0
0-2-0 1-0-0
1-0-1 1-1-0
1-1-1 1-2-0
2-0-0 2-0-1
2-1-0 2-1-1
2-2-0 2-3-0
3-0-0 3-0-1
3-1-0 3-1-1
3-2-0 3-2-1
4-0-0 4-0-1
4-1-0 4-1-1
4-1-2 2
2 2
4 2
4 4
6 6
4 7
7 9
9 12
8 11
11 14
14 17
13 17
17 21
26 4-2-0
4-2-1 4-3-0
4-3-1 4-4-0
5-0-0 5-0-1
5-0-2 5-1-0
5-1-1 5-1-2
5-2-0 5-2-1
5-2-2 5-3-0
5-3-1 5-3-2
5-3-3 5-4-0
5-4-1 5-4-2
5-4-3 5-4-4
5-5-0 5-5-1
5-5-2 5-5-3
5-5-4 5-5-5
22 26
27 33
34 23
30 40
30 50
60 50
70 90
80 110
140 170
130 170
220 280
350 240
300 500
900 1600
1600
Universitas Sumatera Utara
2.2 Persyaratan Kualitas Air Bersih