Genetic variation and pathological changes of Koi Herpesvirus (KHV) Infection of Cyprinus carpio

VARIASI GENETIK DAN PERUBAHAN PATOLOGIS

INFEKSI

KOI HERPESVIRUS (KHV) PADA

Cyprinus carpio

BUDI SUGIANTI

SEKOLAH PASCA SARJANA

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

BOGOR

2012

✁ ✂✄

YATAAN MENGENAI DISERTASI DAN SUMBER INFORMASI

Dengan ini saya menyatakan bahwa disertasi Variasi Genetik

dan

Perubahan

Patologik Infeksi Koi Herpesvirus (KHV) pada

Cyprinus carpio

adalah karya saya dengan

arahan dari komisi pembimbing dan belum diajukan dalam bentuk apa pun kepada perguruan

tinggi mana pun. Sumber informasi yang berasal atau dikutip dari karya yang diterbitkan

maupun tidak diterbitkan dari penulis lain telah disebutkan dalam teks dan dicantumkan

dalam Daftar Pustaka di bagian akhir disertasi ini.

Bogor, Januari 2012

Budi Sugianti

NRP B161020071

☎

bstract

✆

UDI SUGIANTI. Genetic Variation and Pathological Changes of Koi Herpesvirus (KHV)

Infection of Cyprinus carpio. Under supervision of MARTHEN B.M. MALOLE,

BAMBANG PONTJO P., S. BUDI PRAYITNO, ETTY RIANI.

KHV has made mass mortality in koi and common carp, and spread out to many

countries. In Indonesia, KHV has caused outbreaks of mass mortality in many provinces, and

cause economic losses and significant social matter. The aim of this research are to recognize

and to analyze genetic variation of KHV that infects

✝

y

✞✟ ✠✡☛ ☞

-carpio

and to recognize its

biogeographic distribution in Indonesia as well as to recognize and to analyze tissues

pathological changes which infected by KHV. In this research, the fish that have been used

are koi and common carp which suspected infected by KHV according to the clinical

symptoms derived from 20 provinces in Indonesia. In every fish sample was taken its gill to

PCR examination and then was done sequencing DNA (for KHV positive samples), for

histopathology and immunohistochemistry examination, the organs that were taken: gill,

kidney, spleen, intestine or digestive tract, liver, heart, and brain. Based on the results of

sequencing DNA KHV and phylogenetic tree construction that has been made, there are 17

variants from 18 samples KHV positive was found. Those variants can be grouped into two

clusters the main branch which consisted of group 1 includes variants KHV from South

Kalimantan, Lampung, West Papua, West Kalimantan, West Java, Bali, East Nusa Tenggara.

Then group II consists of KHV variants from North Sumatra, West Kalimantan, West Nusa

Tenggara, Riau, East Kalimantan, and DKI Jakarta.

Related to the infections of KHV

variants on koi and common carp, pathological changes were found in such organs (gill,

spleen, kidney, intestine and digestive tract, liver, heart, and brain). Pathological changes in

gill organ was found proliferation of epithelial cells and fusion of secondary lamella,

hypertrophy epithelial cells of gill lamella, telangiectasis, the inclusion body, edema,

proliferation of hyaline layer and fibrosis at the base of the gills. Spleen pathological change

was found infiltration of inflammatory cells or lymphocytes, appeared MMC, hemorrhage,

congestion, and edema. Kidney pathological change was found hemorrhage, proliferation of

cells in the interstitial, MMC, thickening of the tubule, inflammation of the glomerulus, the

inclusion body, congestion, edema, fibrosis, necrosis of the glomerular. Intestine and

digestive tract was found hemorrhage, enteritis, proliferation, goblet cells, fusion of the villi,

deposit enterolit on gastric, congestion, edema, and necrosis in krypta. Liver pathological

change was found hydropic degeneration, perivascular cuffing, congestion, and fibrosis.

Heart pathological change was found infiltration of inflammatory cells or lymphocytes in the

endocardium, hemorrhage, epicarditis, pericarditis, myocarditis, vacuolization, congestion,

edema, fibrosis, and necrosis.

✌✍✎✏ ✑ ✒✓ ✒✎

✔✕✖✗ ✘✕ ✙✗✚✛✜ ✗✢ ✣✤✥ ✦✤ ✧ ✦ ✙ ★✩ ★✪✦✫ ✬✤ ✩ ✭★✥ ✮ ✯✤✰✤ ✩ ✭✤ ✪✱ ✲✱ ✳ ✦✧ ✗ ✩✴ ★✫✧ ✦ ✵✱ ✦

✶★✥ ✷ ★✧✸ ✦✥✮✧

(

✵ ✶✣

)

✷✤ ✬✤

Cyprinus carpio.

✖ ✦✯✦✹ ✯✦✩✳ ✱ ✲★✰ ✺✚ ✻✜ ✶✼✛ ✔✢✺✢ ✺✚✽✾✽✼✿✔✚✺✔✚✛✙ ✭✾✛✜❀ ✾✭✢✿✘✢ ✔✕✖✗✭ ✻✚❁✗✜ ✛✾

,

✬✤ ✩✼✜✜❁✻✗✚✛✗✢

✵ ✶✣ ✬ ✦✫★✪✤✰ ✮ ✦ ✪ ★✲✤✰ ✹ ★✩★✯✤ ✯✫✤ ✩

y

✫★✹ ✤ ✪✦✤ ✩ ✹✤ ✧✤ ✲ ✷✤ ✬✤ ✳✱ ✲✱✩✳ ✤ ✩ ✦✫✤ ✩ ✹✤ ✧✬✤ ✩ ✫✱ ✦✢ ✣ ✦✥✮✧✦✩ ✦ ✪★✲✤✰ ✪★✥✧ ★✯✤✥ ✬✦✯ ★✥ ✯✤✳✤ ✦ ✩ ★✳✤✥ ✤ ✬✦ ✬✮ ✩ ✦✤✢ ✖ ✦✗ ✩✬✱ ✩ ★✧ ✦✤

,

✵ ✶✣ ✬✦✲✤ ✷✱✥ ✫✤ ✩ ✪★✲✤✰ ✹ ★✩✦✹✯✮ ✲✫✤ ✩ ✤ ✯✤✰

w

✫★✹✤ ✪✦✤ ✩ ✹✤ ✧✤ ✲ ✬✦ ✯✤ ✩✤ ✫

y

✷✥✱ ✸ ✦✩ ✧✦

,

✬✤ ✩✹★✩★✯✤ ✯✫✤ ✩

y

✫★✥ ✮✳✦✤ ✩★✫✱✩✱✹✦✬✤ ✩✧✱✧ ✦✤ ✲

y

✤ ✩✳❂✮ ✫✮ ✷✯ ★✧✤✥✢

✔★✥✫✤ ✦✪✤ ✩ ✬★✩✳ ✤ ✩ ✰ ✤ ✲ ✪★✥ ✧ ★✯✮✪

,

✷★✩ ★✲✦✪✦✤ ✩ ✦✩ ✦ ✯★✥✪✮ ❃✮ ✤ ✩ ✮✩✪✮✫ ✹★✩✳ ★✪✤✰ ✮ ✦ ✬✤ ✩ ✹ ★✩✳ ✤ ✩✤ ✲✦✧ ✦✧ ✸ ✤✥ ✦✤ ✧✦ ✳ ★✩ ★✪✦✫ ✵ ✶✣

y

✤ ✩✳ ✹★ ✩✳ ✦✩ ✴★✫ ✧✦

Cyprinus carpio

✬✤ ✩ ✹ ★✩✳★✪✤✰✮✦ ✧ ★✯✤ ✥✤ ✩ ✯✦✱ ✳ ★✱ ✳✥ ✤ ✴✦✧ ✩✤

y

✬✦ ✗ ✩ ✬✱✩★✧ ✦✤

,

✹★✩✳ ★✪✤✰ ✮ ✦ ✬✤ ✩ ✹★✩✳✤ ✩✤ ✲✦✧✦✧ ✷ ★✥✮✯✤✰✤ ✩ ✷✤ ✪✱ ✲✱ ✳ ✦✧ ✤

j

rin

✳ ✤

n

y

✤

n

✳

t

★

ri

✩✴ ★

k

si

✵ ✶✣

,

✧ ★✤

rt

m

★

n

✳ ★✤✰ ✮ ✦

t

✬✤

n

m

★✩✳✤ ✩✤

lisis

✷ ★

n

y

★✯✤✤

r

n

✵ ✶✣ ✷✤ ✬✤

j

✤

ri

✩✳✤

n

o

✳ ✤

r

n

-organ target yang terinfeksi

KHV.

Dalam penelitian ini, ikan uji yang digunakan adalah ikan mas dan koi yang

diduga positif terinfeksi KHV berdasarkan pada gejala klinis yang berasal dari 20

provinsi di Indonesia.

Pada setiap ikan sampel diambil organ insang untuk

pemeriksaan PCR, dan selanjutnya dilakukan sekuensing DNA (untuk

sampel-sampel positif KHV). Untuk pemeriksaan histopatologi dan uji imunohistokimia,

organ yang diambil terdiri dari insang, ginjal, limpa, usus/saluran pencernaan,

hati, jantung, dan otak. Pemeriksaan sampel dengan metoda PCR dimulai dengan

melakukan ekstraksi DNA KHV dari insang, selanjutnya dilakukan amplifikasi

produk DNA, elektroforesis, serta pengamatan dan dokumentasi.

Hasil

menunjukkan positif KHV jika terlihat ada pita DNA pada ukuran fragmen 290

bp. Uji PCR dilakukan untuk meneguhkan diagnosa KHVD terhadap ikan mas

dan koi sampel yang menunjukkan gejala klinis melalui pengamatan secara

makroskopik.

Selain menggunakan metoda PCR dan DNA

Sequencing,

pemeriksaan KHV juga dilakukan dengan pemeriksaan histopatologik dan uji

imunohistokimia.

Pemeriksaan histopatologik dilakukan untuk mengetahui

perubahan patologik pada organ-organ yang terinfeksi varian-varian KHV, dan

dilakukan dengan menggunakan pewarna rutin hematoksilin eosin (HE).

Selanjutnya, pada uji imunohistokimia dilakukan aplikasi dengan kromogen DAB.

Perubahan warna menjadi cokelat/kecokelatan menunjukkan jaringan positif

terinfeksi KHV.

Analisis data dilakukan menggunakan metode deskriptif kualitatif.

Analisis dilakukan terhadap hasil uji PCR dan imunohistokimia pada ikan-ikan

yang positif KHV. Selanjutnya, hasil sekuensing DNA KHV digunakan sebagai

dasar pembuatan pohon filogenetik. Konstruksi pohon filogenetik dibuat

menggunakan metoda Neighbor Joining dengan 100 x replikasi menggunakan

software

ClustalX. Hasil yang diperoleh dianalisis untuk memberikan gambaran

tentang jarak genetik/kemiripan varian-varian KHV yang ditemukan. Untuk

mengetahui perubahan patologik jaringan yang terinfeksi varian-varian KHV dan

penyebarannya pada organ-organ target, dilakukan pendekatan dengan

pemeriksaan histopatologik dan imunohistokimia.

❄❅❆❇ ❈ ❉

ju

m l

❅❊ ❈ ❅

m

❋ ❉

l

● ❉

r

❍❉

j

❅❅

l

k

lin

is

■❏❑

,

❈ ❉● ❅

n

❅

y

k

▲ ▼ ❈ ❅❋ ❉

m

l

◆❇

t

❉

m

❖ P❅

n

p

o

siti

◗ ■❏❑

m

❉

l

❅

i

lu

❘❙❚ ◆❅❯ ❖❍❅

j

siti

◗

o

p

◆❉

n

❍❅

n

m

❉

t

❱ ◆❅

im

❖❯❱❊

isto

k

im

i

❅ ❲ ❳❉◆❅❯❍P❅

n

4 sampel lainnya menunjukkan hasil negatif dengan

metoda PCR, namun memberikan hasil positif dengan metoda imunohistokimia.

Hal tersebut menunjukkan 4 sampel genom tidak dapat diamplifikasi melalui

PCR. Sampel-sampel genom yang tidak berhasil diamplifikasi adalah genom asal

Jawa Timur, Sumatera Selatan, Gorontalo, dan Sulawesi Utara. Hal yang dapat

menyebabkan kegagalan amplifikasi adalah penggunaan primer kurang spesifik

untuk sampel-sampel genom dari 4 provinsi tersebut. Adanya variasi genetik

KHV yang relatif tinggi atau jarak genetik yang relatif jauh pada sampel-sampel

genom dari 4 lokasi dibandingkan dengan sampel-sampel genom yang berhasil

diamplifikasi, dapat merupakan penyebab kegagalan proses amplifikasi.

Berdasarkan hasil sekuensing DNA KHV dan konstruksi

pohon

filogenetik yang dibuat, ada 17 varian dari 18 sampel positif KHV yang

ditemukan. Varian-varian tersebut dapat dikelompokkan dalam 2

clusters

cabang

utama yang terdiri dari kelompok I meliputi varian-varian KHV yang berasal dari

Kalimantan Selatan, Lampung, Papua Barat, Kalimantan Barat, Jawa Barat, Bali,

Nusa Tenggara Timur, D.I. Yogyakarta, Sumatera Barat, Bengkulu, D.I. Aceh,

dan Kalimantan Timur. Selanjutnya kelompok II terdiri dari varian-varian KHV

yang berasal dari Sumatera Utara, Kalimantan Barat, Nusa Tengara Barat, Riau,

Kalimantan Timur dan DKI Jakarta.

Berkaitan dengan infeksi varian-varian KHV pada ikan mas dan koi,

perubahan patologis yang ditemukan diantaranya terjadi pada organ-organ insang,

limpa, ginjal, usus dan saluran pencernaan, hati, jantung, dan otak. Perubahan

patologis organ insang yang ditemukan antara lain adalah proliferasi sel-sel epitel

lamela sekunder dan fusi lamela, hipertrofi sel-sel epitel lamela insang,

telangiectasis, adanya

inclusion body, edema, proliferasi lapisan hyaline, dan

fibrosis pada pangkal insang. Perubahan patologis organ limpa yang ditemukan

antara lain infiltrasi sel-sel radang/limfosit, tampak MMC, hemoragi, kongesti dan

edema. Perubahan patologis organ ginjal yang ditemukan antara lain hemoragi,

proliferasi sel-sel di interstisial, tampak MMC, penebalan pada tubulus, radang

pada glomerulus, adanya

inclusion body,

kongesti, edema, fibrosis, dan nekrosis

pada glomerulus. Perubahan patologis pada usus/saluran pencernaan yang

ditemukan antara lain adalah hemoragi, enteritis, proliferasi sel-sel goblet, fusi

vili, deposit enterolit pada lambung, kongesti, edema, dan nekrosis pada krypta.

Perubahan patologis organ hati yang ditemukan antara lain adalah degenerasi

hidropik,

perivascular cuffing, kongesti, dan fibrosis. Perubahan patologis pada

organ jantung yang ditemukan antara lain adalah infiltrasi sel-sel radang/limfosit

pada endokardium, hemoragi, epikarditis, perikarditis, myokarditis, vakuolisasi,

kongesti, edema, fibrosis, dan nekrosis. Perubahan patologis organ otak yang

ditemukan antara lain adalah hemoragi, vakuolisasi,

perivascular cuffing,

satelitosis, gliosis, kongesti, edema, fibrosis, dan nekrosis.

© Hak Cipta milik IPB, tahun 2012

Hak Cipta dilindungi Undang-undang

1. Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan atau

menyebutkan sumbernya.

a. Pengutipan hanya untuk kepentingan pendidikan, penelitian, penulisan karya

ilmiah, penyusunan laporan, penulisan kritik atau tinjauan suatu masalah.

b. Pengutipan tersebut tidak merugikan kepentingan yang wajar IPB.

2. Dilarang mengumumkan dan memperbanyak sebagian atau seluruh karya tulis

dalam bentuk apapun tanpa izin IPB.

VARIASI GENETIK DAN PERUBAHAN PATOLOGIS INFEKSI

KOI HERPESVIRUS (KHV) PADA

Cyprinus carpio

BUDI SUGIANTI

Disertasi

Sebagai salah satu syarat untuk memperoleh gelar

Doktor pada

Program Studi Sains Veteriner

SEKOLAH PASCA SARJANA

INSTITUT PERTANIAN BOGOR

❨❩❬ ❭❪ ❫❴❵❛❜❛❝ ❫❴❛❬❞❩❡❢❪❢❪❵ ❣❤❡✐❜ ❡❥ ✐❦❧❛♠❛ ❡♥ ❴❬ ❛♦♣q ❴✐♦r❨s❩❢ ✐

❤❡✐t ❡✐q ❡❴✉❪ ❡✈❛❢ ❴♦♣q

❨❩❬ ❭❪ ❫❴❵❛❜❛❝ ❫❴❛❬❞❩❡✇❪①❛

❣❨❡②③✐❤❡ ✐q ✈❛④ ⑤❪♥♣❛⑥❛ ❡❴③ ❤❡✐t ❡✐❦❜❴q❪❵❡❴✈②❬②♦ ♣q⑦✐

⑧⑨ ⑩⑨ ❶❷❸❹ ❺❻❼❽❹ ❸

:

❾❽❻❸ ❽❹❸❿ ❺➀ ❺❼❸ ➁⑩❽➀ ➂❺❻⑨ ➃ ❽➄ ❽➀➂❽❼ ➅ ❶➅➆❸ ➁➇➀ ➈ ❺➁❹ ❸➉➅❸➊ ❺❻➋ ❺❹ ➌❸ ❻⑨❹

(

➉➊ ❾➍➋ ❽⑩❽➎ ➏➐➑ ➒➓➔ →➣↔➑➐➒↕ ➙❽➛ ❽

: B

⑨⑩❸➜⑨ ➆❸ ❽➀❼❸

➙➝ ➂

: B1

61020071

❷❸

s

❺

t

⑨➞⑨❸

➉➅➛❸

s

❸➂❺➛ ➃❸➛➃ ❸➀➆

❷ ❻

.

➟❽❻❼ ➄ ❺➀

B.

➟

.

➟❽❶➅ ❶❺ ➉❺❼⑨ ❽

➂❻➅ ➈

.

❷ ❻

.

⑩ ❻➄➠

B

❽➛➃❽➀ ➆ ➂➅➀ ❼➞ ➅➂

.,

➟➜

., A

➂❾❺❼

.

➂❻➅➈

.

❷ ❻

.

➇ ❻

.

➜

. B

⑨⑩❸➂❻❽➡❸❼➀ ➅➢➟➜➤

.

A

➀➆ ➆ ➅❼ ❽

A

➀➆➆➅❼ ❽

❷ ❻

.

➇ ❻

.

➥❼❼➡ ➝❸ ❽➀ ❸

,

➟➜

.

A

➀➆➆➅❼ ❽

➟❺➀ ➆ ❺❼ ❽➄⑨❸

➉❺❼⑨ ❽ ➂❻➅➆ ❻❽➛ ➜❼⑨ ⑩❸ ❷ ❺➁ ❽➀➜ ❺➁➅ ❶❽➄➂❽❹ ➤ ❽❹❽❻➞ ❽➀ ❽

➜❽❸➀❹❾❺

t

❺❸➀❺

r

r

➂

r

➅➈

.

❷ ❻

.

⑩❻ ➄➠➦ ❽➀ ➃ ❽➀ ➆➂➅➀ ❼➞➅ ➂

.,

➟➜

., A

➂❾❺❼

.

❷ ❻

.

➇ ❻

.

❷ ❽➄ ❻⑨❶➜➡ ❽➄➢➟➜➤

. A

➆ ❻

.

➫ ➭➯➲ ➯➳➯

➵➸➺ ➻➼➻ ➽ ➾➚➪ ➶ ➻➹ ➘➻ ➴➸➽➻➷ ➻ ➬ ➼➼➻➶ ➵➮ ➱✃ ➘➻➹➺ ❐➸ ➼➻➶ ❒➸ ➼➪❒➽➻➶➴➻➹ ❮ ➻➶❒➻❐ ➷➻➹➶➪➷ ➻ ➘➻➶ ❰ ➘➻

Ï➸➶ ➪➹➺➺ ➻➽➸ ➹ ➾➼➪Ï➷➻➽ ➻❐ ❒➸ ➹ ➘➸ ➼➸Ï➻➪➴➻➹➽➸ ➹➸ ➼➪❐ ➪➻➹➷➻➹➽➸ ➹ ➾➼➪Ï➻➹➶➻Ï➪➼➽➸ ➹➸ ➼➪❐ ➪➻➹➪➹ ➪Ð Ñ➪Ï➸❮❐ ➻Ï➪➪➹ ➪

Ò➸❮➪Ï➪➪➹Ó Ô❮ ❒➻Ï➪ ❐➸ ➹❐ ➻➹➺ Õ ➻❮ ➪➻Ï➪ ➺➸ ➹➸❐ ➪➴ ➷➻➹➽ ➸❮ ➾ Ò➻➶➻➹➽➻❐ Ô➼Ô➺ ➪➴ ➪➹Ó➸➴Ï➪➴ Ô ➪➶➸❮➽ ➸ÏÕ ➪❮ ➾Ï

(

Ö× ØÙ ➽ ➻➷➻ ÚÛÜ Ý Þßà á âã ÝÜÞä å æ➹ÓÔ❮ ❒ ➻Ï➪ ❐➸❮Ï➸ Ò➾❐ ➷ ➪➶➻❮ ➻➽ ➴ ➻➹➷➻➽ ➻❐ Ò➸❮ ❒ ➻➹Ó➻➻❐ ➾➹❐ ➾➴ ❒➸➹➺➸ ❒ Ò➻➹➺➴➻➹

➼➻➹➺ ➴ ➻➶

-

➼➻➹➺➴➻➶➽ ➸ ➹ç➸➺ ➻➶➻➹➷ ➻➹➽➸ ➹➺➸ ➹➷ ➻➼➪➻➹➪➹Ó ➸➴Ï➪Ö× Ø➷➪æ➹➷ Ô ➹➸Ï➪➻

.

➱➸❮ ➪❒➻➴ ➻Ï➪➶➷ ➻➹➽ ➸ ➹➺➶➻❮➺➻➻➹➘➻➹➺❐➻➴❐➸❮➹➪➼➻➪➷➪❐ ➾➚ ➾➴ ➻➹➴➸➽➻➷ ➻è➻➽ ➻➴Ñ❮

.

é➻❮❐➶ ➸ ➹è

.

é

.

é➻➼Ô ➼➸ Ï➸ ➼➻➴➾➴ ➸❐ ➾➻➴ Ô ❒ ➪Ï➪➽ ➸ ❒Ò ➪❒Ò ➪➹➺

,

è➻➽ ➻➴ ê❮ ÔÓ

.

Ñ❮

.

➷❮➶Ð è➻❒Ò ➻➹➺ êÔ➹❐➚ Ô✃é➵

.,

➬ ê Ø➸❐

.,

è➻➽➻➴ê❮ ÔÓ

.

Ñ❮

.

æ❮

.

➵

.

è➾➷ ➪ê❮ ➻➘➪❐ ➹Ô

,

é➵ ç

.,

➷ ➻➹æÒ ➾Ñ❮

.

æ❮

.

ë❐❐ ➘ì➪➻➹ ➪é➵

.,

Ï➸ ➼➻➴ ➾➻➹➺➺ Ô❐ ➻➴Ô❒➪Ï➪ ➽➸ ❒ Ò➪❒ Ò➪➹➺

,

➻❐ ➻Ï ➴➸ ➪➴ ➶ ➼➻Ï➻➹ ➷➻➹ ➴ ➸Ï➻Ò➻❮➻➹➹ ➘➻ ➘➻➹➺ ❐➸ ➼➻➶ ❒➸ ❒Ò➸❮➪➴ ➻ ➹ Ò ➪❒ Ò➪➹➺ ➻➹ ✃ ➹➻Ï➸➶➻❐

,

➻❮ ➻➶➻➹✃ ➷➻➹ ➷Ô❮ Ô ➹➺ ➻➹ Ï➸ ➼➻❒ ➻ ➽ ➸❮➸ ➹ ç➻➹ ➻➻➹✃ ➽ ➸ ➼➻➴Ï➻➹➻➻➹ ➷ ➻➹ ➽➸ ➹ ➾➼➪Ï➻➹ ➶➻Ï➪➼ ➽ ➸ ➹➸ ➼➪❐ ➪➻➹ ➪➹ ➪

.

íç➻➽ ➻➹ ❐➸❮➪❒➻➴➻Ï➪➶ ➚➾➺ ➻ ➷ ➪❐ ➾➚ ➾➴ ➻➹ ➴ ➸➽ ➻➷➻Ö➸➽ ➻➼➻ ê➾Ï➻❐ Ö ➻❮ ➻➹❐ ➪➹➻ æ➴ ➻➹ Ò➸Ï➸❮❐ ➻ Ï❐ ➻Ó

,

Ö➸➽ ➻➼➻ è➻➼➻➪ í➚ ➪➵❐ ➻➹➷ ➻❮ Ö ➻❮ ➻➹❐ ➪➹➻ æ➴➻➹ Ò➸Ï➸❮❐ ➻ Ï➸ ➼➾❮ ➾➶ Ï❐ ➻Ó

,

Ï➸❮❐ ➻ ❮➸➴➻➹

-

❮ ➸➴➻➹ ➘➻➹➺ ❐➸ ➼➻➶ ❒➸ ❒ Ò➻➹❐ ➾✃ Ï➸ ➼➻❒➻➽ ➸ ➹➾ ➼➪Ï❒➸ ➹➸❒➽ ➾➶➽➸ ➹➷ ➪➷➪➴ ➻➹Ï➸❮ ❐ ➻❒➸ ➹ ➘➸ ➼➸Ï➻➪➴➻➹➽ ➸ ➹➸ ➼➪❐ ➪➻➹➪➹➪

.

➬➴➶ ➪❮ ➴ ➻❐ ➻ ➽ ➸ ➹➾ ➼➪Ï Ò➸❮➶ ➻❮ ➻➽ Ï➸ ❒ Ô➺➻➽➸ ➹➸ ➼ ➪❐ ➪➻➹ ➪➹➪➷➻➽ ➻❐ Ò➸❮ ❒ ➻➹Ó ➻ ➻❐ Ò➻➺ ➪ ➽ ➸ ➹➺➸ ❒ Ò➻➹➺ ➻➹

➪➼❒➾ ➽ ➸ ➹➺➸❐ ➻➶➾➻➹ ➷➪❒ ➻Ï➻ ➘➻➹➺ ➻➴➻➹ ➷ ➻❐ ➻➹➺ ❐➸❮➾❐ ➻❒ ➻ ➷ ➻➼➻❒ ➽ ➸ ➹➺ ➸❒ Ò➻➹➺➻➹ ➾➽ ➻ ➘➻ ➽➸ ➹ ç➸➺➻➶➻➹

➷ ➻➹➽ ➸ ➹➺ ➸ ➹➷➻➼➪➻➹➽ ➸ ➹ ➘➻➴ ➪❐ ➪➴ ➻➹➷ ➪æ➹➷ Ô ➹➸Ï➪➻

.

èÔ➺ Ô❮

,

î➻➹ ➾➻❮ ➪ïð ñ ï

òó

WAYAT HIDUP

ôõö÷ øùú û ùøüý ùþÿü ö ûù ü ÿü þ✁ü ✂ü ûü ✁ü ö✄✄ ü ø ☎✆

J

ü ö÷ü þ ù ✆ ✝ ✞✟✠ úõ✡ü✄ü ù ü öü ÿ ÿ õøù☛ü ûü þù õöü☛ ✡õþúü÷ûü þü ûü þ ù ✂ü úü ö✄ü ö

(A

ø☛

.)

☞

.

☞ ü✌ ù✍ õû ùö ✎ ù✁ùÿ✍ õú✍õ☛ü

(A

✏üý ✑ûü ö☞

.

✒ü þù✌üý

(I

✡÷ ✑

.

ôõöû ùûùÿü öúü þ✓ü öü

(

✔✆ ✑û ù✁õ☛✂ ÷ý ûù

J

÷þ÷úü ö

B

÷ û ùûü✏ü ôõþü ùþü ö✠ ✕ü ÿ÷ ø✁ü ú ôõþùÿüöü ö

I

öú ✁ù✁÷ ✁ ôõþ✁ü ö ùü ö

B

✍✄ ✍ þ

(

ø÷ ø÷ú ✁üý÷ö ✆ ✝✖ ✗

),

ûü ö ✂õöû ùûùÿü ö ✂ ü ú✘ü úü þ✓üöü

(

✔✙ ✑ ûù ôþ✍ ✄ þü☛ ✔✁÷ û ù ✒ü öü✓ õ☛ õö

K

õ÷ ü ö✄ü ö ✚ö ù✛ õþ úù✁ü ú

K

ü ✁✍øùÿ

A

✁☛ü

J

ü✏ü

J

ü ÿü þ✁ü

(

ø÷ ø÷ú✁üý ÷ ö✆✝ ✝✟✑

.

✔ õøü ö✓÷✁ö✏ü

✂ ü ûü✁üý ÷ ö✙ ✜ ✜✙ ✠✂ õö÷ øùú ☛õøü ö✓÷✁ÿü ö ÿõ ✂ þ✍✄þü☛ û✍ÿ✁✍ þ

(

✔☎ ✑ ✂ ü ûü ôþ✍ ✄ þü☛ ✔✁÷ûù ✔ü ùö ú ✢õ✁õþ ùöõþ

,

✔õÿ✍ øüý ôü ú ✘ü úü þ✓ü öü

I

öú ✁ù✁÷✁ôõþ✁ü öùü ö✣✍ ✄✍þ

.

✔üü ✁ ùöù ✂õö÷øùú ✡ õÿõþ✓ü ûù ô÷ úü ✁

K

ü þü ö✁ùöü

I

ÿü ö

(

ô÷ ú ÿü þù

), B

ü ûü ö

K

ü þü ö✁ùöü

I

ÿü ö ôõö✄õöûü øùü ö ✒÷ ✁÷ ûü ö

K

õü☛ü öü ö

H

ü ú ùø ôõþùÿü öü ö

(BKI

ô✒

),

ú õ✡ü✄ü ù

K

õ✂ü øü

B

ùûü ö✄ ✔ ùú✁õ☛ ôõþÿü þü ö ✁ùöüü ö

I

ÿü ö✤

D

÷ ü ✡÷üý ü þ✁ùÿ õø ùø☛ùüý ✡õþ✓÷û÷ø ôõþ÷ ✡üýü ö

H

ùú ✁✍✂ ü ✁✍ ø✍ ✄ ù

B

õ✡õ þü✂ü ✥þ✄ üö

I

ÿü ö ✒ü ú ô✍úù ✁ù✌

K

✍ù

H

õþ✂õú✛ùþ÷ú

(KH

✢✑ ✏üö✄

D

ùøü ø÷øùö✁ü ú ÿü öû ù

I

öû✍ ö õú ùüü ÿü öûù✁õþ✡ ù✁ÿü ö✂ ü ûü

J

÷ þöü ø✢õ✁õþùöõþ

I

ö û✍öõú ùü

H

õ☛õþü ✦✍ ü✂ ü ûü ✁üý ÷ ö✙ ✜✆✙

. A

þ✁ùÿ õø øü ùö✡ õþ✓÷û÷ ø

D

õ✁õÿú ù✢ü þùü ú ù

G

õö õ✁ùÿ

K

✍ù

H

õþ✂õú✛ùþ÷ ú ✂ ü ûü ✧★✩ ✪ ✫✬✭ ✮ ✯✰ ✪✩✫✱ ûõö✄ü ö ✒ õ✁✍ ûü ô

C

☞

,

✔ õÿ÷ õö ú ùö✄

D

✎✲✠ ûüö

I

☛ ÷ ö✍ýùú ✁✍ÿù☛ùü ✂ ü ûü ✳ ù✁ùÿ ✒ü ú÷ÿ ✳ þü öú✂✍þ✁ü ú ù

I

ÿü ö û ù

I

ö û✍öõú ùü

,

ü ÿü ö ûù✁õþ✡ ù✁ÿü ö ✂ü ûü

J

÷þöü ø ✢õ✁õþùö õþ ✚öù✛õþú ù✁ü ú ✚ûü ✏ü öü ✂ü ûü ✁üý÷ö ✙ ✜✆✙✤

K

üþ✏ü

-

ÿü þ✏ü ùø☛ùüý ✁õþú õ✡÷ ✁ ☛õþ÷✂ ü ÿü ö✡ü✄ ùü öûüþù✂ þ✍✄þü☛✔ ☎✂õö÷øùú

.

✵✶✷✸ ✶✹✺ ✻✺

✼✽ ✾✽ ✿✽ ❀

❁❂❃

T

❂

R ISI

❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ✴ ❁❂❃

T

❂

R T

❂❅ ❆

L

❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ✴✴✴ ❁❂❃

T

❂

R G

❂

M

❅ ❂

R

❄❄❄ ❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ✴❇ ✺ ❈ ❉❊ ❋✵✶ ✼●❍ ●✶ ❋❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈ ■

❏❄❏❄

L

❑▲❑▼❅◆❖ ❑P ❑◗ ❘❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❏ ❏❄❙❄

T

❚ ❯❚ ❑◗❱◆ ◗◆❖ ✴▲✴❑◗❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❙ ❏❄❲❄

K

◆ ▼ ❑◗❘P❑

P

◆ ❳ ✴P ✴▼ ❑◗❱◆ ◗◆❖ ✴▲✴❑◗❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❲ ❏❄ ❨❄

M

❑◗❩❑❑▲

P

◆ ◗◆❖ ✴▲✴❑◗❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❬ ❏❄ ❬❄

K

◆❭❑▼❚❑◗❪

Novelty

)

❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❫ ❏❄ ❫❄❅❑▲❑❴❑◗❱◆ ◗◆❖ ✴▲✴❑◗❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❫

❏❄ ❵❄

H

✴❛❜▲◆❴✴❴ ❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❫ ✺ ✺ ❈ ✸ ✺ ❋❝✶●✶ ❋❉●✻✸ ✶ ❞✶❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈❈❈ ❈❈

8

❙❄❏❄

K

❑▼ ❑P ▲◆ ▼✴❴▲✴P❡

HV

❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄

8

❙❄❙❄

V

❑▼ ✴❑❴✴

G

◆ ◗◆ ▲✴P❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❏ ❏ ❙❄❲❄

I

◗ ❑◗ ❘❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❏❬ ❙❄ ❨❄

M

◆P❑◗✴❴❳◆❢❑◗❱◆ ▼❚❭❑❣ ❑◗❱❑▲❜❖❜❘✴P

I

◗❩◆P❴✴

KHV

❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❏❫ ❙❄ ❬❄

P

◆ ◗ ❘❑▼❚ ❣

L

✴◗ ❘P❚◗ ❘❑◗❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❙ ❙ ❙❄ ❫❄

S

◆❭❑▼❑◗❤◆❜❘▼❑❩✴❴❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❙❨

III.

BAHAN DAN METODA PENELITIAN ... 29

❲❄❏❄✐❑P ▲❚❁❑◗❥◆ ❳❛❑▲

P

◆ ◗◆❖ ✴▲✴❑◗❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❙❦ ❲❄❙❄❅❑❣ ❑◗❱◆ ◗◆❖ ✴▲✴❑◗❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❙❦

❲❄❙❄❏❄

I

P ❑◗

U

❯✴❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❙❦ ❲❄❙❄❙❄ ❁

N

❂

V

✴▼❚❴ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❙❦ ❲❄❙❄❲❄❅❑❣❑◗❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❙❦

❲❄❙❄❨❄ ❱◆ ▼ ❑❖ ❑▲❑◗❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❲❧

❲❄❲❄

P

▼❜ ❴◆❢❚▼

P

◆ ◗◆❖ ✴▲✴❑◗❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❲❏ ❲❄❲❄❏❄ ❱◆ ◗ ❘❑❳❭✴❖ ❑◗♠❑❳❛◆❖❄❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄❄❄ ❄❄ ❲❏

♣q rq

U

s♦

P

t

R

✉✈✇①②③④ ②✇ ⑤♦✇ ⑥ ⑦

N

⑧qq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ♣ ⑨ ♣ q rq⑩q❶③⑤❷❸✈ ③⑤♦ ⑦

N

⑧qq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ♣ ⑨ ♣ q rq ❹q⑧❺❻ ❼♦❽♦③✈⑤♦⑦

N

⑧qq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ♣ ❾ ♣ q rq ♣q❶❼②③❷❸❿ ❽❿❸②⑤♦⑤qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ♣ ➀

♣ q rqrq

P

②✇ ⑥✈ ❺✈❷✈✇✉✈✇⑦❿ ③④❺②✇❷✈⑤♦qq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ♣ ➀ ♣ q rq ⑨q➁④❸♦❽♦③✈⑤♦⑦

N

⑧q qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ♣ ➀ ♣ q rq ❾q⑧❺❻ ❼♦❽♦③✈⑤♦

Cycling Sequencing

qqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ♣➂ ♣ q rq ➀q➁④❸♦❽♦③✈⑤♦

Cycling Sequencing

qq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ♣➃ ♣ q rq➂q

Sequencing

⑦

N

⑧q qq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ♣➃ ♣q⑨ q

P

②❺ ②❸♦③⑤ ✈✈✇➄♦⑤❷❿❻ ✈❷❿❼❿⑥♦③qq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq r➅ ♣q❾ q

P

②❺ ②❸♦③⑤ ✈✈✇➆ ✈❸♦✇ ⑥✈✇✉②✇ ⑥ ✈✇➇ ②③✇♦③

I

❺❺④✇❿➈♦⑤❷❿ ③♦❺♦✈qqqq qqqq qqqq qq r⑩ ♣q➀ q⑧✇ ✈ ❼♦⑤♦⑤⑦✈❷✈qq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq r❹

IV.

HASIL DAN PEMBAHASAN... 43

rq⑩q

G

②s✈ ❼✈

K

❼♦✇♦⑤ qqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq r♣ rq❹ q

U

s♦

Polymerase Chain Reaction

(P

t

R)

q qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq r➃ rq♣ q

U

s♦

I

❺ ❺④ ✇ ❿ ➈♦⑤❷❿ ③♦❺♦✈qqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ⑨⑩ rq rq

V

✈❸ ♦✈⑤♦

G

②✇②❷♦③✉✈✇① ②➉✈❸✈✇➊②❿⑥❸✈❽♦⑤q qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ⑨ ♣ rq⑨ q

P

②❸④➉✈ ➈✈✇➁✈❷❿❼❿⑥♦③

I

✇❽②③⑤♦

KHV

q qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ⑨ ➀ rq⑨q⑩q

P

②❸④➉✈ ➈✈✇

P

✈❷❿❼❿⑥♦③➁✈ ✉✈

I

✇ ⑤ ✈✇⑥qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ❾ ♣ rq⑨q ❹q

P

②❸④➉✈ ➈✈✇➁✈❷❿ ❼❿⑥♦③➁✈ ✉✈

G

♦✇s✈ ❼q qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq

8

⑩ rq⑨q ♣q

P

②❸④➉✈ ➈✈✇➁✈❷❿ ❼❿⑥♦③➁✈ ✉✈

L

♦❺❻✈qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq

87

rq⑨qrq

P

②❸④➉✈ ➈✈✇➁✈❷❿ ❼❿⑥♦③➁✈ ✉✈

H

✈❷♦qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq

9

r rq⑨q ⑨q

P

②❸④➉✈ ➈✈✇➁✈❷❿ ❼❿⑥♦③➁✈ ✉✈

U

⑤ ④⑤qqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ⑩ ➅❹ rq⑨q ❾q

P

②❸④➉✈ ➈✈✇➁✈❷❿ ❼❿⑥♦③

P

✈ ✉✈

J

✈✇❷④ ✇⑥qq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ⑩ ➅➂ rq⑨q ➀q

P

②❸④➉✈ ➈✈✇➁✈❷❿ ❼❿⑥♦③➁✈ ✉✈

O

❷✈ ③qqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qqqq qq ⑩ ⑩♣

V.

KESIMPULAN DAN SARAN ... 120

5.1. Kesimpulan ... 120

5.2. Saran... 121

➌➍ ➎➏➍➐➏➍➑ ➒ ➓

➔→ ➣↔ ↕➙➛ ↕➜➝➞ ➟ ➙↕➠↔ ↕➟➡ ➢➙➋➤ ↕➜→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→ ➥ ➦

➧→

G

➢➝ ↕➙↕

k

➙➋➜➋↔➨ ↕➩➋↕➜

-v

↕➩➋↕ ➜➫

HV

➡ ↕

d

↕➭➯➲ ➳ ➵➸➺ ➻➼➽ ➳➲ ➵➾→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→

4

➚ ➥ →

J

➞ ➟➙↕

h

➙➪➤ ↕↔➋↔ ↕➟➡➢➙➋

k

↕➜➡➪↔➋

t

➋

f

➫

HV d

➢➜

g

↕➜➟ ➢

t

➪➛ ➢

PCR d

↕➜

➋➟➞➜➪➠➋↔➶➪➤➋➟➋↕→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→ ➚➦

4

→

H

↕↔➋➙↔ ➢

k

➞ ➢➜↔➋➜

g DNA

➫

HV d

↕➩➋➋

k

↕➜↔ ↕➟➡➢➙➡➪↔➋

t

➋

f

➫

HV

→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→ ➚➹ ➚→

J

↕➩↕

k g

➢➜ ➢

t

➋

k d

↕➜↔➋➟➋➙↕➩➋

t

↕↔➨↕➩➋↕➜

-v

↕➩➋↕➜➫

HV

➘↕➜➴

d

➋

t

➢➟➞➤↕➜

d

↕➙↕➟➡ ➢➜ ➢➙➋

t

➋↕➜→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→ ➷➧ ➷→

P

➢➩➞ ➬ ↕

h

↕➜➡↕

t

➪➙➪

g

➋

k

➝ ↕➩➋➜➴↕➜ ➭➯➲➳➵➸➺ ➻➼➽ ➳➲ ➵➾➡➪↔➋

t

➋

f

➫

HV d

➢➜

g

↕➜➞➝➋

PCR

d

↕➜➟➢

t

➪➛ ➢➋➟➟➞ ➜ ➪➠➋↔➶➪➤➋➟➋↕ →→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→ ➷ ➹

7

→

P

➢➩➞ ➬ ↕

h

↕➜➡↕

t

➪➙➪

g

➋

k

➝ ↕➩➋➜➴↕➜➭➯➲ ➳ ➵➸➺➻➼➽ ➳➲➵➾➡ ➪↔➋

t

➋

f

➫

HV d

➢➜

g

↕➜

➟➢

t

➪➛ ➢➋➟ ➟➞➜➪➠➋↔➶➪➤➋➟➋↕→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→→ →→→

7

➧

❐❒❮❰ ❒ÏÐ ❒ÑÒ ❒Ï

ÓÔ ÕÔ ÖÔ ×

Ø Ù ÚÛÜ ÝÞßàáâ➱ ã➱

Herpesviridae

Ù ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ ä åÙ æ➱ç➱èÜ

-

✃➱ç➱èÜéê æëáÜìÝÛçíáîá ÝîáíáïÛ ã

-

ïÛ ãé ðØ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ ñ òÙ óîÛï➱ à➱ßáï➱ôõöî ç➱â ÛçïÛ Ý

y

á Üìí➱íÛïá➱Ü÷çÛ

y

et al.

øå ù ùå úÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ Ø Ø ûÙ óÝçá ÝÛì➱íáïáççÛîã➱ßáï➱ ✃➱çÞïíÛÜìáÜìÛÜèâ íïüý þÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ Øÿ

Ù ÷Û✁á ãáßã➱Ü➱ï➱ß áÜ

y

áÜìÝÛçïÛçáÜìéê æÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙåù ✂Ù ✄áç➱ÜìáÜ➱ÜïáÜì

y

áÜìÝÛç➱Ü àÛßï➱éê æÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ åØ ÿÙ ýÛßçèî ï➱➱ßáÜ☎îÛÜì ìÞÜ Ý➱ÜìáÜß Þ ã➱ Ý

b

áì➱áÜ✃ÛÜÝçá ã➱ßáÜíáç➱áÜ Þï

ß Û ✁áç➱ÜìáÜ➱ïÝ✆âÞïÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ ò

äÙ

B

Û

b

Ûçáîá

b

ÛÜÝÞßíáÜîèï➱ï➱è çìáÜ➱Ü ÝÛçÜá ã➱ßáÜÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ ò ñÙ ÷Û✁á ãáßã➱Ü➱ï➱ß áÜâáïïáâîÛ ã

y

áÜìÝÛçíÞìáÝÛç➱Ü àÛßï➱éê æüÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙû û ØùÙêáï➱ ãîÛâÛç➱ßïááÜ➱ß áÜïáâîÛ ãíÛÜìáÜâ Û ÝèíáôõöÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ Ø

ØØÙêáï➱ ãîÛâÛç➱ßïááÜíÛÜìáÜâ Û ÝèíÛ➱ââÞÜè✆ ➱ïÝèß ➱â ➱áÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ å

ØåÙôè✆èÜà➱ ãèìÛÜ Û Ý➱ßéê æÙ ÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ✂ù

ØòÙôè✆èÜà➱ ãèìÛÜ Û Ý➱ßéê æÙ ÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ✂Ø

ØûÙôÛ ÝáïÛ

b

áçáÜ✝➱è ìÛè ìçá à➱ïâèãÛßÞãÛçéê æí➱✞Üí èÜÛï➱áÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ ✂ ò Ø Ùôçèã➱ àÛçáï➱ïÛ ã✟ïÛ ãÛî➱ ÝÛ ã

lamella

ïÛßÞÜíÛçøá

)

íáÜÛíÛâ áø

b)

îáíá➱ÜïáÜìÙÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ ✂ ✂

Ø✂Ù✞Üà➱ ãÝçáï➱ïÛ ã✟ïÛ ãçáíáÜìîáíá➱ÜïáÜì ÙÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ ✂ ✂

ØÿÙôçèã➱ àÛçáï➱ïÛ ã✟ïÛ ãÛî➱ ÝÛ ã

lamella

ïÛßÞÜíÛçîáíá➱ÜïáÜìÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ ✂ ÿ Ø ä Ù

Telangiectasis

îáíá➱Üïá ÜìÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ ✂ ÿ ØñÙôÛçïÛÜàçÛß ÞÛÜï➱ß Û✁áí➱áÜîÛçÞ✝ á✆áÜîá Ýèãè ì➱ï✁áç➱ÜìáÜ➱ÜïáÜìÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ äù

å ùÙôÛÜ Û

b

á ãáÜãÞâ ÛÜ ÝÞ✝ÞãÞï íáÜÜÛßçèï➱ïÝÞ✝ Þ ãÞïÙ Ù ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ äò åØÙêáÛâèçáì✆➱îáíáì➱Ü✁á ãÙÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ äû

ååÙ✞Üà➱ ãÝçáï➱✠ ✠õîáíáì➱Ü✁á ã ÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ äû

åòÙ

Inclusion body

øá

)

íáÜÜ Ûßçèï➱ïø

b)

îáíáì➱Ü✁á ãÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ ä åûÙé èÜìÛïÝ➱îáíáì➱Ü✁á ãÙ Ù ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ ä

å ÙôÛçïÛÜàçÛß ÞÛÜï➱ß Û✁áí➱áÜîÛçÞ✝ á✆áÜîá Ýèãè ì➱ï✁áç➱ÜìáÜì➱Ü✁á ãÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ ä✂

å✂Ù✞Üà➱ ãÝçáï➱

MMC

îáíáã➱âîáÙÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ ñØ åÿÙé èÜìÛïÝ➱

íáÜ➱Üà➱ ãÝçáï➱✠✠õîáíá ã➱âîá ÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ ñå åä ÙôÛÜ ➱Üìß á ÝáÜáß Ý➱ ✃➱ Ýáïã➱â àèï➱ Ýîáíá

ã➱âîáÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙÙÙ ÙÙ

☛ ☞✌✍✎✏✑ ✎✒ ✓✏ ✎✔ ✕ ✎✒✑ ✖

✔ ✎✗✘✙✖✘

n

✚✎

r

✕✛ ✘✜ ✘

n

✚✘✢✖

lo

to

s

✗✘

r

✖✒✢✘

n

l

✖

m

✚ ✘ ✌ ✌✌ ✌✌ ☞✣ ✣✤✌✥✦✧ ★

v

✩✪ ✫

u

l

✩✧✫

u

ffing

✚ ✘✙✘✜ ✘✬✖✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✤✤ ✣✭✌✮✎✢✎✒✎✏✘✑✖✜✖✙✏✯✚✖✔✰✘

)

✱✔ ✯ ✒✢✎✑✬✖✰

b)

✱✖✒ ✓✖✲✬✏✘✑ ✖✳✳✴✰✵

)

✱✚✘✙ ✘

✜✘✬✖✌ ✭ ✤✤ ✣☛ ✌✍✎✏✑ ✎✒✓✏ ✎✔ ✕ ✎✒✑ ✖✔✎✗✘✙✖✘✒✚✎✏✕✛ ✘✜ ✘✒✚ ✘✬✯ ✲✯✢✖✑✗✘✏ ✖✒✢✘✒✜✘✬✖✌ ✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✤✭

✣✣ ✌✍✏✯✲✖✓✎✏✘✑ ✖✑ ✎✲✶ ✑✎✲

goblet

✚✘✙ ✘✕✑ ✕✑✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✤✷ ✣ ✸✌✹✙✎✺✘✚✘✙ ✘✑✘✲✕✏✘✒✚✎✒✵ ✎✏✒✘✘✒✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✤✷

✣ ✷✌

Fusi vili

✚ ✘✙✘✕✑ ✕✑✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✤✻ ✣✻✌

Haemoraghi

✚✘✙ ✘✑✘✲✕✏✘✒✚✎✒✵ ✎✏✒✘✘✒✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✤✻ ✣✼✌✍✎✏✑ ✎✒✓✏ ✎✔ ✕ ✎✒✑ ✖✔✎✗✘✙✖✘✒✚✎✏✕✛ ✘✜ ✘✒✚ ✘✬✯ ✲✯✢✖✑✗✘✏ ✖✒✢✘✒✕ ✑✕ ✑✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✤✼

✣✽✌

Epikarditis

✚✘✙ ✘✗✘✒✬✕ ✒✢✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✭✤ ✣ ☞✌✾✯✒✢✎✑✬✖✚✘✙ ✘✗✘✒✬✕ ✒✢✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✭✤

✸✤✌

Vakuolisasi

✚ ✘✙✘✗✘✒✬✕✒✢✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✭✭ ✸✭✌

Miokarditis

✚ ✘✙✘✗✘✒✬✕✒✢✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✭✭ ✸☛ ✌✍✎✏✑ ✎✒✓✏ ✎✔ ✕ ✎✒✑ ✖✔✎✗✘✙✖✘✒✚✎✏✕✛ ✘✜ ✘✒✚ ✘✬✯ ✲✯✢✖✑✗✘✏ ✖✒✢✘✒✗✘✒✬✕ ✒✢✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✭☛

✸✣ ✌

Kongesti

✚✘✙ ✘✯✬✘✔ ✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✭✷ ✸✸✌

Gliosis

✚✘✙ ✘✯✬✘✔ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✭✷ ✸✷✌✿✒ ✓✖✲✬✏✘✑ ✖✑ ✎✲✏✘✙✘✒✢✰

mononuclear perivascular cuffing)

✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✭✻ ✸✻✌

Nekrosis

✚ ✘✙✘✯✬✘✔ ✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✭✻ ✸✼✌✍✎✏✑ ✎✒✓✏ ✎✔ ✕ ✎✒✑ ✖✔✎✗✘✙✖✘✒✚✎✏✕✛ ✘✜ ✘✒✚ ✘✬✯ ✲✯✢✖✑✗✘✏ ✖✒✢✘✒✯✬✘✔ ✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌✌✌ ✌✌ ✭ ✭✼

❀

.

❁ ❂❃❄❅❆ ❇❈ ❇❅❃

1

.

❉❊ ❋● ❍● ■

❏ ❑▲● ▼● ◆❖

Salah satu spesies ikan yang cukup luas dibudidayakan dan dipelihara di

Indonesia adalah ikan mas dan koi (

P

y

◗ ❘ ❙❚❯ ❱ ❲❳ ❘◗❙❨

) karena mempunyai nilai

ekonomi yang tinggi. Ikan mas dibudidayakan untuk tujuan konsumsi, sedangkan

ikan koi dipelihara karena keindahannya. Tingginya permintaan dunia maupun

domestik terhadap ikan-ikan tersebut, membawa konsekuensi meningkatnya

lalulintas ikan mas dan koi, baik antar negara maupun antar area di dalam wilayah

negara Indonesia.

Salah satu resiko meningkatnya perdagangan ikan adalah terbawanya

hama dan penyakit ikan berbahaya yang apabila tidak dilakukan

tindakan-tindakan pencegahan penyebarannya, maka dapat menyebabkan kerugian

ekonomi yang tidak kecil. Pada bulan Maret tahun 2002, dilaporkan telah terjadi

wabah kematian masal pada ikan mas dan koi yang menyebabkan kerugian

ekonomi dan sosial yang cukup besar. Serangan pertama kali terjadi di Blitar

Jawa Timur. Wabah terjadi pada ikan koi yang baru datang dari Surabaya. Ikan

koi ini diimpor dari Cina ke Surabaya melalui Hong Kong kurang lebih pada

bulan Desember 2001-Januari 2002 (Sunarto

❩❬❳❭❪

, 2004). Pada waktu yang tidak

terlalu lama sejak kejadian pertama kalinya di Blitar, wabah penyakit ini

dilaporkan telah menyebar di beberapa lokasi pembudidayaan maupun

penampungan ikan mas dan koi di beberapa provinsi. Umumnya, wabah terjadi

setelah hujan deras dengan total kematian mencapai 80-95%. Ikan yang sakit

memperlihatkan gejala klinis antara lain kerusakan insang, pendarahan pada

pangkal dan ujung sirip serta permukaan tubuh,

❫ ❴❵ ❛❜❵ ❜

y

❜

s

, sering juga

ditemukan adanya kulit yang melepuh. Agen penyakit ini diketahui sangat ganas

dan cepat menular, baik melalui ikan-ikan yang terinfeksi maupun media air

pemeliharaan ikan yang terkontaminasi (Sunarto

❜

t

❝❞❡

, 2005, Taukhid

❜❢ ❝❞❡

,

2004).

Hasil penelitian yang telah dilakukan oleh Tim Badan Riset Kelautan dan

Perikanan (BRKP) dengan Network of Aquaculture Centres in Asia-Pacific

(NACA) menemukan beberapa bukti ilmiah yang mendukung bahwa wabah ini

disebabkan oleh koi herpesvirus (KHV) (Sunarto

❜❢ ❝❞❡

, 2004). KHV merupakan

salah satu anggota Herpesviridae yang menyerang ikan mas dan koi di banyak

negara dan telah menimbulkan kerugian ekonomi yang cukup besar (Perelberg

❜❢

❝❞

., 2003). Selain Indonesia, beberapa negara yang dilaporkan telah terserang

wabah penyakit KHV yaitu Israel, Amerika Serikat, beberapa negara Eropa,

Afrika Selatan, Cina, Taiwan, dan Jepang (Hedrick

❜❢❝❞

., 2005).

Koi herpes virus disease (KHVD) telah menjadi wabah pada ikan mas dan

koi hampir di seluruh Indonesia. Namun demikian, hingga saat ini data dan

informasi tentang variasi genetik KHV dan wilayah persebarannya di Indonesia

masih terbatas. Demikian pula halnya dengan informasi tentang perubahan

patologis infeksinya pada ikan mas dan koi, padahal data dan informasi tersebut

sangat diperlukan untuk mengembangkan langkah-langkah pencegahan dan

pengendalian infeksi KHV di Indonesia. Oleh karena itu, diperlukan penelitian

untuk menggali informasi tentang hal tersebut di atas.

❣❤ ✐❤ ❥❦❧

u

♠♥♦♣♥♣qr

t

r ♠♥

1. Menganalisis variasi genetik KHV yang menginfeksi

st ✉ ✈✇① ②

y

③④ ✉t✈⑤ ⑥

2. Memetakan sebaran biogeografis variasi genetik KHV di Indonesia.

3. Menganalisis perubahan patologis jaringan

s⑦t✉ ✈✇①② ③④ ✉t✈⑤

yang terinfeksi

KHV.

4.

Menganalisis penyebaran KHV pada jaringan organ-organ pada

s⑦t✉✈✇① ②

③④✉t ✈⑤

yang terinfeksi KHV.

⑧⑨ ⑩⑨ ❶❷❸❹❺❻ ❼❹❽❷❾❿ ❼❿ ❸❹❺ ❽❷❺ ❷➀❿➁❿❹❺

KHV diketahui telah menyebabkan kematian masal pada golongan ikan

mas (

s ⑦t ✉ ✈✇①② ③④ ✉t✈⑤ ③④✉t ✈⑤

) dan koi (

s ⑦t ✉ ⑦✇① ② ③④ ✉t ✈⑤ ➂⑤ ✈

). Virus ini telah

tersebar terutama di Amerika Utara , Eropa, Israel, dan Asia. Di Indonesia, wabah

kematian masal pada ikan mas dan koi akibat KHV pertama kali dilaporkan

terjadi pada tahun 2002, yang menyebabkan kerugian ekonomi dan sosial yang

cukup besar. Serangan pertama kali terjadi di Blitar Jawa Timur, kemudian

dengan cepat menyebar ke tempat-tempat pembudidayaan maupun penampungan

ikan mas dan koi di banyak provinsi. Berdasarkan hasil pemantauan hama dan

penyakit ikan karantina (HPIK) yang dilakukan unit-unit pelaksana teknis (UPT)

karantina ikan di Indonesia, pada tahun 2010 KHV ditemukan pada 17 provinsi di

Indonesia (Pusat Karantina Ikan, 2010).

Sesuai dengan Keputusan Menteri Kelautan dan Perikanan Republik

Indonesia No. Kep.03/MEN/2010 tentang Penetapan Jenis-jenis Hama dan

Penyakit Ikan Karantina, Golongan, Media Pembawa, dan Sebarannya, KHV

merupakan salah satu jenis HPIK dari golongan virus yang dicegah masuk dan

tersebarnya ke/di dalam wilayah Republik Indonesia. Selain itu,

penyakit akibat

⑤ ⑥⑦ ⑧⑨⑩❶❷ ❸❹❺⑩⑨ ❻ ❼❽❻ ❾ ❽ ❿❸➀➁➂⑩⑨ ➃ ➄➁➂ ⑩⑨ ❻ ➅❽ ➆➇➈ ➉ ➇➈ ➊ ❻ ➅ ❽ ➋➉➌➌➈ ➊ ❹❻ ➍ ❽ ❾⑨➇➎⑩ ❹❽

⑤➏ ➏➏ ❽ ➐➊ ➀ ➀ ➈ ➉⑨❶➊➑❸❶ ❸⑩ ➀ ❸❹ ➒➉❸ ➓

u

s

rin

p

y

➔→ ➣ ↔↕

o

❻ ➊ ➀ ➀ ➉➁ ❸➊❶⑩➙ ➛❸❶➂ ❺❸➑➑ ➊ ❹➙ ➀➒❸❹ ➙❸➀⑩➊ ➀⑩ ❽ ➜➝➞

l

➟➠ ➝➣➟➡➢ ➢➤➔ ➟➥↕

sh

➦→ ➧➟

h

o

l

➨ ➩➫➨ ➭ ➯ ➲➨ ➭ ➳➟

⑧⑨ ➉➉➒➀ ❻ ➵ ❽❿❽❻ ➸ ❽➄❽ ⑧ ➇❶⑩➑❻ ➊ ❹➙ ➺ ❽➻ ❽ ➆⑨ ❹➀❶ ➉ ❹❽ ⑤➏➏➼ ❽ ➽ ➾➚↕➔→➞ ➽➔ ➣➤➪↕

i

➤➶ ➹

o

l

❽ ➘➇➴ ➑❸➀➂⑩➙➴➎❼➷ ➷➑⑩❶ ➉ ❹➊❹➙➺➊ ❹❺ ⑩➬➉➈➷➊ ❹➎❽ ➮❹❺➑➊ ❹➙❽ ➱➼⑦➷❽

⑧ ➇➙ ➙❸❹❺❶ ➉ ❹❻➅❽✃❽ ❻ ❼❽ ✃⑨ ➉❺➙➊➂➑ ➊ ❹➙ ❼❽➐❽ ⑧➊➒ ➒⑩➃➐➁➒⑩➑➑⑩➷❻ ⑤➏ ➏⑥❽ ❾➂ ⑩ ❸❹❶⑩ ➀❶ ❸❹⑩

➉➌ ➁➊⑨ ❹ ❸❐➉⑨ ➉ ➇➀ ➌ ❸➀➂ ❒ ➀❶⑨➇➁❶ ➇⑨⑩ ➊ ❹➙ ➌ ➇ ❹➁❶ ❸➉ ❹➀ ➊ ❹➙ ❶➂ ⑩ ⑨⑩➑➊❶ ❸➉ ❹➀ ➛❸❶➂ ➙❸⑩❶ ❽

➡➔

t

→➟ ➦❮➹

sio

l

➟❰ ➔→Ï➚➟ ❰ ➝

p

p

l

➟ÐÑÒ ➭➫Ñ Ó ➭ Ô➟

➬➊➴➊ ❹➊ ❻➮❽➐❽❻⑤➏➏ ➏❽ ➬⑩➑➑➇➑➊⑨ ➙⑩ ❺⑩ ❹⑩⑨➊❶ ❸➉❹➊ ❹➙❸❹➌❸➑❶⑨➊❶ ❸➉❹ ❽Õ⑩❶⑩⑨❸❹➊⑨ ➎ ➘➊ ❶➂ ➉➑➉❺ ➎

➬➉➑➑⑩❺ ⑩ ➉➌ Õ⑩❶⑩⑨ ❸❹➊⑨➎ ➄➁ ❸⑩ ❹➁⑩ ➊ ❹➙ ➐⑩➙❸➁ ❸❹⑩ ❽ ➬⑩ ❹❶⑨➊➑ ➺ ➇❷ ➉ ❹ ➄❶➊❶⑩

➍ ❹ ❸❐⑩⑨ ➀ ❸❶➎ ❽

➬ ➑➊ ➇➙❸➊ ❻ ➵ ❽❻ ⑥Ö Ö× ❽ ➻➊➁➂➛⑩ ❸➀ ❐➉❹ ➊ ❹❶ ❸➒➉⑨➷⑩⑨ ❹ ❺⑩ ❺⑩ ❹ ➙➊ ➀ ➬❸➷⑨ ❸❹⑩ ➋⑩⑨➷⑩ ➀❐❸⑨ ➇ ➀➃

⑦ Ø ➓

y

➋Õ➃⑦ Ù ➴⑩ ❸✃➊ ⑨➷➌ ⑩ ❹Ø➓

s

u

rin

yp

➔→➣ ↔↕

o

Ù❻ Ú⑩⑨❶ ❸⑩⑨➊⑨❷❶➑❸➁❷ ⑩ ❹ ❿➊➒➇➑❶➊❶

➙⑩ ⑨ ➺ ➇➙➛❸❺ ➃➐➊Û❸➈❸➑➊ ❹➀➃➍ ❹ ❸❐⑩⑨ ➀ ❸❶➊❶➐➇ ❹➁➂ ⑩ ❹❽

➬➉➀❶⑩ ➀ ❻ ⑧❽ ❻ Õ❽➄❽ ➅➊ Ü❻ ⑧ ❽ ➐❸➁➂ ⑩➑❻ ➵ ❽ ❿➉ ➇⑨ ❹ ❸⑩⑨ ❻ ➐❽ ❾➂ ❸⑨❸➉❹ ❻ ➺ ❽ ➵ ❸➑➑⑩❶ ❻ ➸ ❽ ➐➊ ➀❶ ❻ ❿❽

➺ ❸⑩➌ ➌⑨ ❸❺❻ ➐❽ ⑧⑨ ⑩➈ ➉ ❹❶ ❻ ❼❽ Õ➊ ❹➙⑩⑨➷ ➑➊ ➀ ➀➁➂ ⑩ ❹ ❽ ⑥ÖÖ ➏❽ ❾➂ ⑩ ➈➊ Ü➉⑨ ➷➉⑨ ❶➊➑ ➉➌

⑩ ❹❶⑨➎ ➒➉❸ ➂⑩⑨➷⑩ ➀❐❸⑨➇➀ ❸❹ ➓

yp

rin

u

s

➔→ ➣ ↔↕

o

❸➀ ❶➂⑩ ➀➒❸❹❽ Ý➟ Þ↕

ro

l

➟ ➚➤ ↕➫ ➨ ➨ ➯➭ßÝÞà➟ Ô➯Ò Ô ➳ ➲Ô➭❽

Ú⑩ ➀➊ ❹❶ ❸➀ ❻➄❽❻❿❽❼➁ ➉ ❹⑩ ❻➄❽á❸❷❷ ➊ ❻➐❽Ú⑩➌➑➉⑨❸➉❻➸ ❽➺ ❽➘❽ ❿⑩⑨❹➊ ❹➙⑩❷ ❻➬❽ ➄➊⑨➊ ➀â➇⑩❶⑩➊ ❹➙

➵ ❽ Ú⑩ ➐⑩❶⑨ ➉❽ ⑥Ö Ö➏ ❽ ➵➑➎➁ ➉➂❸➀❶ ➉➁➂ ⑩➈ ❸➁➊➑ ➀❶ ➇➙➎ ➉➌ ❶➂⑩ ❶ ➉➊➙➌❸➀➂ ã→ ➞

o

➪→ ➧➣→➔

h

u

s

➚↕➚→➔

tylu

s

Ø➄➁➂⑩ ❸➙⑩⑨ ❻⑤×Ö⑤Ù ➀❶ ➉➈ ➊➁➂ ❽ ❰ ➔

i

➾

n

ti

→➽→➣↕Ï → ÓÒ ➫ ➳➨➳➲ ➳ ➯➳❽

❿➉➛➛⑩ ➊❶➂⑩⑨ ❻ ❿❽➄ ⑤➏➼➼❽ ❾⑨ ➇⑩➮❹❶⑩⑨ ➉➑❸❶➂❶ ➆➌ ❾➂⑩ ➄➈➊➑➑ ä❹❶⑩ ➀❶ ❸❹⑩ å ❸❶➂ ➅ ⑩➷➉⑨❶ ➀ ➆➌

❾➂⑨⑩⑩ ➬➊ ➀⑩ ➀ ❽ ➥➣➤æç❮➾ è➾↔→ ➣ ➧➾➾

m

n

t

➤é ➓❮➾➔→

i

m

l

➦→➧

h

o

l

➤➶➹ê

n

iv

➾

rsity

➤é ë➾➾➚➢➟

➵ ❸➑➊➙❻ ➆❽ ❻ ➄❽ ì➇ ❹❻ ✃❽⑧ ❽ ❼❹➙⑨⑩⑩ ❻ ➐❽❼❽ ❼➙ ➒❸➀ ➉❹ ❻ ❼❽ á➑➉❶➒❸❹❻ ➋❽ ⑧⑩⑨➁ ➉❐❸⑩⑨ ❻ ❼❽

➮➑➙➊⑨ ❻ ➅❽➘❽ ➋⑩➙⑨❸➁➒❽ ⑥ÖÖ⑥❽ ä❹ ❸❶ ❸➊➑ ➁➂➊⑨ ➊➁❶⑩⑨ ❸➀❶ ❸➁ ➀➉➌ ➒➉❸ ➂ ⑩⑨➷⑩ ➀❐❸⑨ ➇➀ ➊ ❹➙

➙⑩❐⑩➑➉➷➈ ⑩ ❹❶ ➉➌ ➊ ➷➉➑➎➈⑩⑨ ➊ ➀⑩ ➁➂ ➊ ❸❹ ⑨⑩➊ ➁❶ ❸➉❹ ➊ ➀ ➀➊➎ ❶ ➉ ➙⑩❶⑩➁❶ ❶➂ ⑩ ❐❸⑨➇➀ ❸❹

➒➉❸❻ ➓

yp

rin

u

s

➔→ ➣ ↔↕

o

ko

i

❽ è➢➾→➢➾

i

s

➤é ➡í ➝→➧

i

➔ î ➣➶→Ï ↕

sm

➢Ð Þ➤ ➞➟ ï➭➫ ➨ Ô➨ ➲ ➨Ô➭ Ð➯ ÔÔ ➯➟

➵ ❸➑➊➙❻ ➆❽❻ ➄❽ ì➇❹ ❻ ➐❽ ❼❽ ❼➙ ➒❸➀ ➉❹ ❻ ✃❽ å➊ ➎ ❻ ➻ ❽ ➋❽ å❸➑➑❸❶ ➀❻ ➋❽ ⑧⑩⑨➁ ➉❐❸⑩⑨ ❻ ➅❽➘❽

➋⑩➙⑨ ❸➁➒❽ ⑥ÖÖ⑦❽ ➐➉➑⑩➁ ➇➑➊⑨ ➁ ➉➈➷➊⑨❸➀➉ ❹ ➉➌ ❸➀➉➑➊❶⑩ ➀ ➉➌ ➊ ❹ ⑩➈⑩⑨ ❺ ❸❹❺ ➌ ❸➀➂

➷➊❶➂ ➉❺⑩ ❹ ❻➒➉❸➂⑩⑨➷⑩ ➀❐❸⑨➇➀ ❻➊ ❹➙❶➂ ⑩⑩➌➌ ⑩➁❶➉➌➛➊❶⑩⑨❶⑩➈➷⑩⑨➊❶ ➇⑨ ⑩➉ ❹➈ ➉⑨❶➊➑❸❶➎

➉➌ ⑩Û ➷⑩⑨❸➈⑩ ❹❶➊➑➑➎ ❸❹➌ ⑩➁❶⑩➙ ➒➉ ❸❽ Ý➤ ➝ ➣Ï →➞ ➤é ð➾Ï➾➣→ ➞ Þ↕➤➶ ➹

ro

l

ñ➯Ô ÔÒòÐ ➭ïÐ ➯ÑÑ ➨ ➯ÑÑ ➭➟

➵ ❸➑➊➙❻ ➆❽❻➄❽ì➇ ❹❻ ❿❽➸ ❽á❽ Õ⑩⑨❺➊⑨ ➊ ❻➬❽➐❽➺⑩ ➇❶⑩ ❹⑩❺ ❺⑩⑨ ❻➋❽⑧⑩⑨➁ ➉❐❸⑩ ⑨ ❻➅❽➘❽ ➋⑩➙⑨ ❸➁➒❽

ô õö ÷øù ÷úûü ÷ýþÿ ✁ û ý✂ ÷✄þ ÷☎ ✆

y

p

rin

u

s

✝✞ ✟ ✠✡

o

ko

i

ÿ☛ ÿ☛ ☛ ÷☛ ☛ ÷☎ ☞✁ ú÷ÿ✌þûü÷ ✍ÿ✎üÿ ý✏✑✒ ✓ ✔

i

✕ ✖✞✕ ✖

s

✗ ✘✙✚ ✛✞✜ ✝

i

✢✟✣✞✤✡

sm

s

✥✗ ✦✧★ ✩✪✫ ✬✭ ✫ ✮ ✬✯✰ ✩ ✩✱ ✧ ✲úÿ✁✳✴✓✵✓✳ ✵✓ ✶✷ û☛ ✳✸✓✹✓ ✵ÿ✏ÿþ úÿ✳✺✓✶✓ ✲ú✻ ✂✂✳✼✓ ✲✻✻☎ ✽û ý✓ õ✾ ✾õ✓ ✿÷þ ÷✄þû ✻ý ✻ ✂

❀ ✻û ❁ ÷úù÷☛ ❂û ú✷ ☛ ✿❃✼û ýþû☛ ☛ ✷ ÷☛ ✻✂û ý✂ ÷✄þ ÷☎ ✂û☛❁✓ ❄✗ ✛✟✤✞✦✗ ✘ ❅✡

sh

✔

i

✕ ✖✞✕ ✖

s

✰✩✩✰ ✯✰ ❆ ✯✫✬✫ ✫ ✬ ✮✧

✲÷✁ ÷ú✳ ❇✓✺✓✳✺✓❇✓✸ ✽ÿ ý÷ù✻÷✳ ✶✓❃✓ ❃÷✓ô❈❈ ❉✓ ❇û☛ þ ✻✻❊✁ÿ ý☎✷þ úÿ☛þ ú✷ ✄þ✷ ú ÷ ✻✂þ❁÷

❁÷ùÿþ ✻ùÿ ý✄ ú÷ÿ☛ ✻✂ þ❁ ÷ þû❊ ÷ú ✂û☛ ❁✳ ❋● ✟✗✝

y

s

u

yn

✘✞ ❍✦

o

rsk

ii

✓ ❄✗ ✛✟✤✞✦ ✗ ✘ ■✗✣❏

o

rp

h

o

l

✰ ✰ ✬✪✭ ❑ ✫✩✩ ✧

✲✻ ✻☎✽û ý✳ ✼✓✳ õ✾ ✾▲✓ ✿û ✂ ✂÷ú÷ýþûÿ ✿ûÿ❊ ý ✻☛ û☛ ▼ ✸◆✑ ❂ ☛✓ ❖ ❇◆ û ý ❖ ✻û✓ ❅✡

sh

❋✖✞✦

th

P✖

w

sl

✖

tt

✖✟✯✙❅◗ ❘❅❋◗✧❑✫✪✫ ✯✭ ✪✫ ❑ ✧

❇÷☎úû✄ ❀✳ ✒✓✏✓✳ ❙✓ ✲ûÿ☎ ✳ ✸✓ ❚✷ý✳ ✺✓◆✓ ✸ùÿ ý❊ ÷ý☞÷ú❊✳ ✲✓✿✓ ✶ ÿ úþ ✁✳ ✒ ✓✴✓

❃✻ ú☎❁ ÿ✷☛ ÷ý✳ ✶✓✺✓ ❖ ÷☞ ✷☛ ✳ ❇✓ ❯ ÷ú✄ ✻❂ û ÷ú✳ ✼✓ ✹☎ ÿ ú✓ õ✾✾ ✾✓ ✼ ❁ ÷úù÷☛ ❂û ú✷ ☛

ÿ☛ ☛ ✻✄ûÿþ ÷ ✽ûþ❁ üÿ☛ ☛ ü✻úþÿ ûþ✁ ✻ ✂ ❱✷❂÷ýû ÷ ÿ ý☎ ÿ☎✷þ ❀✻û✳ ÿ ☛ þ úÿû ý ✻ ✂ ÿ

✄ ✻üü✻ý✄ÿ úù✓ ❄✗ ✛✟✤✞✦✙✚ ✛✞✜✝

i

✙✤✡✞✦

m

❋✖✞✦

t

❍✯✫✰ ✯✱ ✱ ❆ ✬✧

❇÷☎úû✄ ❀✳ ✒ ✓ ✏✓✳ ❙✓ ✲ûÿ☎✳ ✸✓ ✑✓ ❚✷ ý✳ ✍✓✸✓ ✶ ✄☎ ✻ ✽÷✳ ✍✓❯✓ ✴ÿþ ❲ ÷❀✳ ✲✓ ❙✓ ❖ ÷ ÷✁✳

✶✓✼✓ ✼☎❀û☛ ✻ ý✓ õ✾✾❳✓ ❨ ýûþûÿ û☛ ✻ÿþû ✻ý ÿ ý☎ ✄❁ÿ úÿ✄þ ÷úû ❲ÿþû ✻ ý ✻✂ ÿ ❁÷úù÷☛✌

û ❀ ÷❂û ú✷☛ ❩❖ ❇◆❬ ✂ú✻ü ❖ ✻ûÿ ý☎ ✑✻üü✻ý ✑ÿ úù✓ ✿÷ùÿ úþü ÷ýþ ✻✂✶ ÷☎ û✄û ý ÷

ÿ ý☎ ✹ùû☎÷üû ✻ ✻❊ ✁✳ ✸✄❁✻✻ ✻✂ ◆÷þ ÷úû ýÿ ú✁ ✶ ÷☎ û✄û ý÷✳ ❭ýû❂÷ú☛ ûþ✁ ✻✂

✑ÿû ✂✻ úýûÿ✳ ✿ÿ❂û☛ ✳ ✑ÿû ✂✻ úýûÿ✓ ❪ù✓

❇û ýþ ✻ý✳ ✿✓✹✓ ÿ ý☎ ✿✓✺✓ ✵ÿ✷ú÷ý✳ ô❈❈✾✓ ❨ ýþ÷❊ úÿþû❂÷ ❁ û☛þ ✻ùÿþ❁✻✻❊û✄ÿ ÿù ù ú ✻ÿ✄❁÷☛ þ ✻

☎÷þ ÷✄þû ý❊÷✂ ✂÷✄þ☛✻ ✂÷ý❂ û ú✻ ýü÷ýþÿ ☛þ ú÷☛ ☛ ✻ú☛✻ý✂û☛ ❁ ÷☛✓ ✙❫✧❅ ✡✕❍✧◗✗✝✧◗

ym

p

✮✪❆✫ ★★✧

❇✻ ✻÷✳ ✿✓✳ ✿✓ ❯✷ ✄ ❀÷✳ ✏✓ ❯ ✷ ú❊ ÷☛ ☛✳ ❨✓ ✴÷ ☞ ✁✓ õ✾✾ô✓ ✔✕ ✖✞✕ ✖

i

s

✗✘✆✞✟ ✠✞✤● ✢

t

❍✖

r

✆

yp

rin

i

●❅✡✕❍✖

s

✓ ❴û☛ ❁û ý❊ ❃÷✽☛❯ ✻ ✻❀☛✳❯ÿ✄ ❀✽÷ ✸✄û ÷ý✄ ÷✵þ☎✓ ✵ ✻ ý☎✻ý✓ ❨ ✻✷ ❲÷✳ ✶✓✳ ✼✓ ✿û☛ ❁ ✻ ý✳ ✍✓ ❖ÿ❁ ÿ ý✳ ✶✓ ❖ ✻þ ÷ú✓ õ✾ ✾❉✓ ✑✁ù úû ýû☎ ❁ ÷ úù ÷☛ ❂ û ú✷ ☛ ✌ ▲

❩ ✑✁ ❇◆✌▲❬ ☞÷ÿ ú☛ ❊÷ý÷☛ ✻ ✂ ❊÷ý÷þû✄ÿ ✁ ☎û☛ þ ÿ ýþ ÿ ú❊ ÷ ✿❃✼ ❂û ú✷☛ ÷☛✓ ❅❵❛◗

❜✖

tt

✧❆✮ ✩✪ ✱✱ ✬❑❝✮✧

❨☛ ❁û ✻ ❀ÿ ✳ ✍✓✳ ✶✓ ❚✻☛ ❁ û ❲✷ü û✳✸✓ ❨ ❲✷ üû✳❖✓ ✸✷ ❲✷❀û✳ ❇✓ ✸✷ ❲✷ ❀û✳❖✓ ❖ ✻ ❲ÿ ✽ÿ✳ ✶✓ ✼ úÿû✳

❖✓ ❃✻☞ ✷☛ ÿ ✽ÿ✳ ❚✓ ✶ ✻ úûþÿ✳ ✶✓ ❖ÿþ ✻✳ ✍✓ ❇✻☛ ❁û ý ✻✳ ✍✓ ❨û☎ ÿ✳ ❖✓ ❖ ✻☛✷ ❊ ÷✳ ❇✓

❖ûü ✷ úÿ✓ õ✾ ✾❳✓ ✿÷þ ÷✄þû ✻ýÿ ý☎ ☛ ÷✎✷ ÷ý✄ ÷ÿ ýÿ✁☛ û☛ ✻ ✂✿❃✼ ù ✻✁ü ÷ úÿ☛ ÷ÿ ý☎

ü ÿ❱ ✻ú÷ý❂ ÷✻ù÷ù ú✻þ ÷û ý❊ ÷ý ÷☛û ý ❀✻û ❁÷úù÷☛❂ û ú✷☛ ÷☛ ☎÷úû❂÷☎ ✂ ú✻ü ✆

rin

u

s

yp

✝✞✟✠✡

o

û ý ✲✷ ýüÿ ù ú ÷✂÷✄þ✷ú÷✳ ✺ ÿùÿ ý✓ ✥ ✖

t

✖

ri

✤✞ ✟❏ ■✝ ✟✗ ❞✡

i

o

l

✗✣❏✫✫✩❡✰ ✩ ✩❆❢ ✰✬ ❑ ❑✧

❖❁✻û☎ û ý✳ ✹✓❯✓ õ✾ ✾❪✓ ✸þ✷☎ û ÷☛ ✻ý❖ ✻û ❇÷úù÷☛ ❂û ú✷ ☛ ✿û☛ ÷ÿ☛ ÷❙✄✄✷úú÷☎ û ý❨ ý☎✻ý ÷☛ûÿ✓

✵ÿ☞✻úÿþ ✻ú✁ ✻ ✂ ❴û☛ ❁ ✏ÿþ❁✻✻❊✁ ✲úÿ☎ ✷ÿþ ÷ ✸✄❁✻✻ ✻ ✂ ❯û ✻ú ÷☛ ✻✷ ú✄ ÷☛ ✶û ÷

❤ ✐❥ ❦❧♠♥♦ ♣qr st ❧✉ ♣✈ ♣♦r ❦✇♠ ♣♦ r ① ✉②③♠♥ ✉♥ r ④ ③⑤♦ ♣✉ ③qr s⑥ ♦♥ t⑦ ❧r ⑧②✇ ♦ q③t ♣qr ⑨✈♣⑩⑩ r ❶ ❧♠ ♣qr

❷♣⑩♥ ✉❸ ❹❺③ ⑥③t ③⑩ ❧❻✈ ③✉⑤ ❧❼ ⑤❺③ ⑥♣❽③❾⑤ ♣t ③ ⑤♦♥ q⑤ ♣✉ ⑩♥♦t♥⑩ ⑨✇ ♦ ❧❻③♥ ✉ q♥⑤❼♣❾❺

❿

S

ilu

ru

s g

la

n

is

➀❸ ➁➂ ➃➄➃➅

i

m

o

➆

isto

l

➇ ➈➉ ➃➅ ➊➋ ➌➍ ➎➇➈➉ ➃➅

o

l

➏➇ ➐➍➂➃➑ ➇ ➒ ➓➔➂➔➂➃➍ ➎

ri

→➔➣➉↔

i

➂➔➅↕ ➙➛➜ ➝ ➝➞ ➟➅➜➅➠ ➡➠ ➠➡➢➛

jo

u

➍➂➃➑➃➍ ➄

i

↔

l

➔ ➟➤

❦✇❻③♦✈ ♥ ✉r ❶❸ ➥❸ ♥ ✉⑥ ➦❸➦❸ ❦✇ ♠✈ ♣✉♥ r ❤ ➧➧ ➨❸ ❹❺③ ✇ ⑩⑤♦♥❾⑤♦✇ q⑤✇ ♦ ③ ❧❼ ⑤❺③ ♣✉⑤ ③❾⑤ ♣✉♥⑩

③❻♣⑤❺③⑩ ♣✇ ✈ ♣✉❼♣❾❺③❾➩♣⑤❺⑥ ♣❼❼③♦ ③✉⑤⑤➫❻③❾❧❼❼③ ③⑥♣✉❽❸➏➤ ➭➉

sh

➯➉➤➅

o

l

➡ ➡➲➠ ➞➠ ➳ ➠ ➵↕ ➤

➸③③❾❧ ✉r ➺❸ ➻❸r ❹❸①❸ ➸③ ③❾❧ ✉r ➼❸➼❸ ④♥❻♥♦❧❸ ❤➧ ➽❥ ❸ ➾➔

xt

➌➇ ➇ ➚ ➇ ➒

h

isto

l

➇ ➈ ➎ ❸ ➪❸❶❸ ①♥✇✉⑥③♦❾➺❧✈❻♥ ✉➫❸ ④❺♣⑩♥⑥③⑩❻❺♣♥❸

❷♥⑩ ❧⑩ ③r❷❸ ❶❸ ❤ ➧➽ ➽ ❸ ➓➉

ro

l

➇ ➈➉➤ ④✇❾♥⑤➼✉⑤♥♦ ➶ ✉♣t ③♦❾♣⑤♥❾ ➥✉❾⑤ ♣⑤✇⑤④ ③♦⑤♥ ✉♣♥ ✉❶ ❧❽❧♦❸ ❶❧❽❧♦❸ ❤ ❤ ✐❺⑩✈❸

❷♣⑤ q❺③⑩⑩ r④❸➹❸r❤➧ ❥➘❸ ➁➾➔

xt

➌➇➇➚➇➒➴➔➂➔ ➍ ➃➑➷➬➎➇➈➎

sio

l

❸ ❷q⑧♦♥➩➹ ♣⑩⑩❶❧ ❧⑦➺❧❸ ➥✉❸r➮ ③➩➱ ❧♦ ⑦❸

❷♣♦r ➥❸➹❸♥ ✉⑥ ➼❸➺ ❺♥ ✉ ✉♥❸ ✐✃❤❤ ❸ ➸♣t ③♦ ❧❼⑤❺③①✉ ❧➩ ❹♦ ❧✇⑤ r ❐↔

h

izo

t

➬➇➍ ➃❒ ↔

u

rvi

➒

ro

n

s

➹ ③q⑦ ③⑩❮➼❺♣❾⑤ ❧q❺③✈ ♣q♥⑩ ❾⑤✇ ⑥➫❸ ❰

n

t

➤➅➏➤➯➉

o

l

➤Ï ➬➔

m

➤➅ Ð➲➙Ð ➞ Ð

❷♣➫♥♠♥ ⑦♣r ❹❸r ➱❸ ❦✇ ♠✇➫♥ r ①❸ ➱♥❾✇ ✈ ❧⑤ ❧r ❷❸ ➱♥❾✇⑥ ♥ r ❹❸ ❦❧Ñ♥➫♥❾❺♣❸ ✐✃ ✃➽ ❸

➹ ♣❾⑤ ❧❻♥⑤❺❧⑩ ❧❽♣q♥⑩ ♥ ✉⑥ ✇ ⑩⑤♦♥❾⑤♦✇q⑤✇♦ ♥⑩ ❼③♥⑤✇ ♦ ③❾ ❧❼ ❦❧♣ ❺③♦❻③❾t♣♦ ✇❾ ❿❦➹➦ ➀Ò

♣✉❼③q⑤ ③⑥ q♥♦❻ Ï

yp

rin

u

s

↔➃➍Ó➉➇➅ ♥ ✉⑥ ⑤❺③✈ ❧♦❻❺❧⑩ ❧❽ ➫♥ ✉⑥✈ ❧♦❻❺❧❽③✉ ③❾♣❾❧❼ ❦➹➦❸ Ô

i

Õ➔➃Õ➔

s

➇➒➁Ö➐➃➄↔

i

×➍ ➈➃➂➉

sm

s

➓➇ ➑➤ ➞➝➲➠ ➳➠➠➅➜➝➝ ➞➤

❷✇ ⑩♥⑥ ✉ ❧❸ ✐ ✃✃ ✐❸ ➾➔

kn

o

l

➇➈➉ Ø➔

k

➃➎➃Õ➃ ➴➔

n

➔

tik

➃ ❸ ④✇❾⑤♥ ⑦♥ ➪♣♦♥✇❾♥❺♥ ❷✇⑥ ♥❸ Ù♥ ⑦♥♦⑤♥❸

Ú❺r ❷❸Ù❸r①❸Ù❸rÙ✇✉❽r❹❸Ù❸➺ ❺❧♣r➻ ❸❦♣✈ r❦❸ ➦❸➻♥ ②③✉⑥ ♦♥ ✉ r➱❸Ù❸ ❦♣✈ r❷❸➼❸ ④♥♦ ⑦♥ ✉⑥

①❸❦❸ ➺ ❺✇✉❸ ✐✃ ✃❤ ❸ ➼ t ♣♦♥⑩ ⑥♣❾③♥❾③ ❧qq✇ ♦♦ ♣✉❽ ♣✉ q✇⑩⑤✇ ♦ ③⑥ q♥♦❻ ➺➫❻♦♣✉✇❾

↔➃➍Ó➉

o

♣✉❦❧♦ ③♥❸➭➉

sh

➷➃➬➤

t

↕➢➅➠ ➡ ➙ ➳➠ Ð➠➤ Ú➥⑨❸ ✐✃❤ ✃❸ ➁Ö➐ ➃➄

i

↔➁➂➉➃ ➑

m

➆➔➃➑

th

Ï➇➣➔ ➤ Ú➥⑨❸④ ♥♦ ♣❾❸

④ ③♦ ③⑩Ñ③♦❽r ➼❸r ❷❸ ①✈ ♣♦ ✉ ❧ tr ❷❸ ➹✇⑤ ❧♦♥ ✉ r ➼❸ Û♣♥✈ ♥ ✉⑤ r ➱❸ ❶ ③②③♦ ♥ ✉❧ r ❷❸ ❦❧⑤⑩ ③♦❸

✐ ✃✃Ü❸ ⑨❻♣⑥③✈ ♣❧⑩ ❧❽♣q♥⑩ ⑥ ③❾q♦ ♣❻⑤ ♣❧✉ ❧❼ ♥ ✉③➩ t♣♦♥⑩ ⑥♣❾③♥❾③ ♥❼❼⑩ ♣q⑤ ♣✉❽

q✇ ⑩⑤✇♦ ③⑥Ï

yp

rin

u

s

↔➃➍Ó➉

o

♣✉➥❾♦ ♥ ③⑩❸ ❰ Õ➍ ➃➔

li

➏➤ ➁Ö➐ ➃➤

t

➯ ➃➋➣➈➔ ➬➤

i

Ð Ð➅ Ð ➠ ➜➤ ④ ♣⑦♥♦❾⑦➫r ⑨r➼❸ ➻❧✉ ③✉rÙ❸ ➼ Ñ♦♥✈❧➩♣⑤❾r ❶❸ ➸③ t♥ t ♣Ò① ♣t♥ ✉r ❷❸ ➹✇⑤ ❧♦♥ ✉ r➱❸ ①❺♥❻♣♦ ♥ r

✐ ✃✃➨❸ ④♥⑤❺❧❽③✉③❾♣❾ ❧❼ ♥ q✇⑤ ③ t♣♦ ♥⑩ ⑥ ♣❾③♥❾③ ♣✉⑥ ✇ q③⑥ ♣✉ ❼♣❾❺ Ñ➫ q♥ ♦❻

♣✉⑤ ③♦❾⑤ ♣⑤ ♣♥⑩✉③❻❺♦♣⑤ ♣❾♥ ✉⑥ ❽♣⑩⑩✉ ③q♦ ❧❾♣❾t♣♦ ✇❾ ❸➏➤ ➓➉

ro

l

➤ ➙➞➲➵Ð➡ ➡➳Ð➠ ➤

④♦ ♣q③r ①❸➼❸r ➸❸ ❷❸ ➪♣⑩❾❧ ✉❸ ❤➧ ➧ ✐❸ Ï

lin

i

↔➃➑ Ï➇ ➂↔➔

p

ts

➇➒ Ô

i

Õ➔➃Õ➔

s

➷➍ ➇↔➔ Õ Õ➔

s

❸ ❷❧❾ Ñ➫➱ ③♥♦❶ ❧ ❧⑦ r➥✉ q❸

④✇❾♥⑤ ❦♥♦♥ ✉⑤ ♣✉♥➥⑦♥ ✉❸ ✐ ✃✃Ý❸ ④♦❧❾③⑥✇ ♦ Ú❻③♦ ♥❾♣❧ ✉♥⑩①⑤♥ ✉⑥ ♥♦ ❦♥♦♥ ✉⑤ ♣✉♥ ➥⑦♥ ✉❸

④✇❾♥⑤ ❦♥♦♥ ✉⑤ ♣✉♥ ➥⑦♥ ✉❸ Ù♥ ⑦♥♦ ⑤♥❸

Þ ßà áâã äåæäç äè åéèäêë äè ì ß íÞíì áîåäï äîçäðã îñ äç ðäò äïäè ó îè ô äëéå éë äè ë äçäèåéè ä

õöá êæ÷ ì áâã äå æäçäèåéèä êëäè ø æîòîèåîçéäè æîùäâ åäè ï äè áîçéëäèäè ø

úäë äçåäì

û îéü îùø ýìþì äèïÿ ìÿ ì ç ä✁ éùùì Þ ✂ ✄✂ ì ☎åç â✆åâ çî äèï ✆äçñ ✝ ðô ïç äåî ð éã å✝✆ð îòéã åçô

✝üåð îéè åîã åéèîéèåîèåîùî✝ã åîäèã ó î✆éîã ì ✞✟✠✟ ✡

o

h

rp

o

l

☛☞ ✌✍✎✏ ✎ ✎☞ ✑✟ û éùîôø þìû ìø ß íí✒ì ✠

o

l

✓✔

u

l

✕ ✖✗✘✙✚✓✛✜ ✢

l

io

m

✛✣✤ ✥ ✣✓✔

tio

u

s

✦

i

✧✓✕ ✧✓

s

ì ÿ ☎★ áçîã ã ì

þäã ðéè ✩ å✝è ø✪ýì

û ✝ñîçåã øû ìúìøß ííÞ ì ✫✙

sh

✬✕ ✭

h

o

l

✛✜✢ ì ð éçï✮ïéåé✝è ì þì✯ì☎äâè ï îçã ì ✰✝èï✝è ì û ✝ñ ñ éè ã ø ☎ì✰ìø û ì☎ì ý✝åçäè ø ✱ ì æâ òäç ì Þ✂ ✂ ✲ ì ✬✛✔✓

k

t

✳

o

m

✘✕✥✙

o

n

to

✬✕ ✭

h

o

l

✛✜ ✙✔

✴✕ ✧✙

s

✛✣✦

i

✧✓✕✧✓ ì þì✯ì☎äâè ï îçãý✝ò óäè ôø áðéùäï îùóð éäì

û ✝ã îèëçäè✵ø ✪ìø ✯ì✶ì æùâ óóø úìáì îéüëîø ö ì ✶çäè✵✝✷ø ✪ì ✸é✆ð åè î çø ìýì

★îååîèùîéåîçøþì✸â✆ðã ì

ßí í✹ ì êïîèåéü é✆äåé✝è ✝ü îè✁îù✝ó îó ç✝ åîéè ó✺û✸✹Þ ✝üë ✝éð îçó îã✁éçâã ì ✞✛✻✖✥✕✼✛ ✣✽✓ ✥✓ ✖✕✼✾✙

ro

l

✛✜ ✢✿ ✌ ✑✑❀ ❁✡ ❀ ❂✡❀❂☞ ❂ ✑✑✟ ☎äè✝ø ★ìø ì êå✝ø úìæâ çéåäø ☎ì★é✷äø ì êéï äì ßí í✄ ì ✪éä✩ è ✝ã éã ✝ü æ✝ éöî çó îã✁éçâã

õ æö✱÷ ✪éã îäã îéè úäóäèì ✴✻✼✟

l

✫✙ ✧❃✟❄✓ ✧✟ ❅✜✓ ✥✟ ❆✻✘ ✘✼✓

m

✓

n

t

❇✛✟ ✌✡ ❈ ❂ ❉☞ ✏✡ ✌ ✑✑❊✟

☎äèåîçø ûì★ìø Þ ✂ ✹ ✲ì ★✝çó ð✝ ù✝✩ ô äè ï éè è îç✁ äåé✝è ✝ü åðî ü éã ð ð îäçå✟ ❅✚✟

v

❅✥✕ ✭✟ ✗❋●✖ ✢✟

o

l

✳✓

ll

✴✙✟

o

l

☛ ❂ ❀❈✡ ❀ ❂✍☛ ✑✌✟

☎ð äóéçäø ❍ìø ❍ì ★ä✩îèø ì ■äëø ★ì æ✝ åùîçø ✶ì ö â ùäåäø ✯ì✰ì ☎é✁äè ì ß íí ✲ì

✪éüüîçîèåéäù ç îã éã åäè ✆î å✝ ë✝ é ð îç óîã ✁ éçâã õ æö✱÷❏ ✆äçó éè åîçã åéåéäù è îó ðçéåéã

äèï✩ éùùèî✆ç✝ã éã✁éç âã õý ❑✶✱÷äò ✝è ✩✆✝ òò✝è ✆ äçóõ✳

yp

rin

u

s

✔✕ ✖ ✘✙

o

✰ì÷ ã åçäéè ã äè ï✆ç✝ãã ñçîïã ì ❅▲✻✕✔✻✖✓

u

lt

✌✏❈✿ ✌✑ ✑❈ ❁☛ ☛☛✟

☎▼äü îéø ✪ì ☎ìø ☎âùéã åé✝è✝ì Þ ✂✂íì ✠✛✖ ✣

o

l

✛✜ ✙ ✚✕✥❅✥✕✭

o

m

i

✤✕✥

k

ì ✸äë âùåäã áîçéë äè äè êè ã åéåâ åáîçåäèéäè✯✝✩ ✝ çì ✯✝✩ ✝ çì

☎ù✝ äè îø ✮ì Þ ✂✂✒ì ❅✥✕ ✭

o

m

y

✕ ✥✚ ✬❃✢✛✜✢

l

sio

❅✥ ✗✕ ✧ ✢ ◆✓✕✖ ✥✓

r

ì ú✝èîã äèï ✯äçåùîåå áâñ ùéã ðîçãø êè ✆ì☎âïñ â çô ì

☎â ïé✝è ✝ø úìø ✯ì æâçè éäï ðéø ÿ ìö îèïç ä✷äèø ✯ì ✪▼éò äè å✝ ç✝ì ß íí❖ì ✤

lm

u

✬✕✭

o

l

✛✜✙ ì áîèîçñ éå ✯â ëâæîï ✝ë åîçäè✮ ✶ýì úäë äçåäì

☎âè äçå✝ø ÿ ì ß íí✒ì ✮óé ïîò é✝ ù✝✩é óîè ô äë éå ë✝ é ðîçó îã ✁ éçâã õæö✱÷ ï é êèï✝è îã éäì

✰äñ✝ç äå✝çéâ òû éã îå æîã îðäåäè êëäè ø ✯äï äè ûéã îå æîùäâåäè ï äè áîçéëäèäèì

úäë äçåäì ✂ð ùòì

☎âè äçå✝øÿ ìø ÿ ì û âëô äè éø ì êåäòéì ß íí ✲ì êè ï ✝èîã éäè îPóîçéîè✆î ✝è åð î✝ âåñçîäë

✝ü ë✝ é ðîç óîã ✁éçâã éè ë ✝ é äè ï ✆äçó õ✳

s

u

rin

yp

✔✕✖✘✙

o

÷ ì ✴✻✼✟

l

✫✙ ✧❃✟ ❄✓ ✧✟ ❅✜✓ ✥✟❆✻✘ ✘✼✓✓

m

n

t

❇✛✟ ✌✡ ☛ ❈ ✌☛✡✌ ✑✑ ❈✟

◗ ❘❙ ❚❯❱ ❲❳❨❩❬ ❭❪❬ ❫ ❲❯❴❵ ❛❜❬ ❭❪ ❝❯❴❞ ❲❱ ❛❬ ❡❪ ❢❩ ❣❤❵ ❲❳❞ ❲❱❛❬ ✐❪ ❚❯❥ ❳ ❛❞ ❲❜ ❛❬ ❦ ❪ ❧❲❳ ❜❣❱❛❲❬ ✐❪

✐❯♠ ❛❱❨❩❬ ♥❪❝ ❪ ❭♦ ❯❱♦ ❥ ❳❛❞ ❩❱❩❬ ♣❪ ✐❪q❲❤ ❲❳❛r ❯❬ s ❛❜ ❩❜ ❩❬ ♥❪ ✐❣❳❜ ❛❴❛❲t❲❱ ❬♥❪

❝❯❴♠ ❩❱ ❩❬ ❚❪✉❪ q❳❲❞❛❨❱❩❪

❘✈ ✈✇❪ ♣ ❛❣①❜❛❱②❣❤ ❨❛♦ ❲❨❛❩❱❤ ❩❱ ❲❤ ❣❳❛❩ ❯❤ ❜ ❛❤❣❲❤ ❣ ❩ ❯❨r ❳❣❲❴ ❲♠ ❩❱ ♦ ❢❩ ❛ ❲❱❜ ③❩♠♠❩❱ ③❲❳❥ ④⑤

u

s

p

rin

y

⑥⑦ ⑧ ⑨⑩

o

❶ ❛❱ ❡❱ ❜ ❩❱❣❤ ❛❲❪ ❷

n

q❪ s ❲①❴❣❳❬ ❝❪ ❦ ❣❤❨❣❳ ❲❱❜ ❸ ❪❧❪ ✉❩❱ ❜ ❲❜❹❝❣❲❱ ❨❲❤ ❩ ④❣❜ ❤❶❪ ❺

i

❻ ❼⑦❻❼

s in

❽ ❻⑩⑦❾ ❽❿➀⑦ ⑥

u

lt

➀⑧❼ ➁➂

p

p

➃ ➄ ➅➆ ➇➄ ➈➆ ➃ ➉⑩

sh

➊❼⑦➋

th

➌ ❼⑥

ti

➍❾ ➂ ❽

si

⑦❾ ➉⑩❻➎ ❼

ri

❼

s

➌➍⑥

i

❼➂

ty

➏ ⑦❾⑩

l

⑦➃

❚♠❛❨❵❬ ✉❪➐ ❪❬ ❚❪ ❭❪ ❚♠❛❨❵ ❬ ✉❪ ❫ ❣❱ ♦ ➑❲❳❩ ❣❱ ❴ ❯①❪ ◗ ➒➒ ◗ ❪ ❧❳ ❩❤ ❤ ♠❩❳❥ ❵ ❩①❩♦ ❞ ❲❱ ❜

❨❩❥ ❩♦ ❳❲❥ ❵ ❞ ❩➓ ❨❵❣ ❲❜❯①❨ ❛❱ ❨❣❤ ❨❛❱❲① ❨❳ ❲➔ ❨ ❩ ➓ ❨❵❣ ❨❛①❲❥❛❲❱ ➓❛❤❵ ❬ →⑧❼➍⑥

h

ro

m

is

n

ilo

ti

⑥

u

s

❪⑤❼

ll

➃➣

i

❻ ❻➃→⑧↔⑦❾ ❻ ➃➂➄↕ ↕➙➅➛ ➜➇➈➝➈ ➃

❫❲❴❲❤❵ ❛♠❲❬ ♣❪❬ ❫ ❪ ✐❛r❛❞ ❲ ❪ ◗ ➒➒✇❪ ➞

n

➞

tl

➟

s

➠

ish

➡

isto

lo

➢

y

❬ ➤⑦➋

o

rm

⑦❾ ➥ ➦⑦➧➍↔⑩⑥⑦➋

h

o

l

➉❼⑦➧➀⑧❼

s

❪ ❚❣➔ ❩❱ ❜➨❜ ❛❨❛❩❱❪ ❢❩ ❜❲❱❤❵ ❲❦❨❜ ❪ ❫ ❩❴❞ ❩ ❪

❫❲❯❴❵ ❛❜❬ ❫ ❪ ❚❯♠ ❛❲❨❛❬ ❡❪ ❢❩❣❤❵ ❲❳❞ ❲❱❛❪ ❘✈ ✈✇❪ q❣❱♦❲❳❯❵ ❚❯❵❯ ❭❛❳❜ ❲❱❫ ❩❨❲① ✉❲❵❲❱

➩❳♦ ❲❱ ❛❴ ❫ ❣❳①❲❳❯❨❫❣❳❵❲❜❲❥ q❲❨❩♦❣❱ ❛❤ ❛❨❲❤ ❢❩❛✐❣❳❥❣❤②❛❳❯ ❤ ❥ ❲❜ ❲❡❴ ❲❱ ❸ ❲❤ ❪

✉❲①❲❛❝❛❤❣❨q❣❳❛❴❲❱❲❱✉❯ ❜❛❜ ❲❞ ❲❭❛❳❫❲t❲❳❬ ✉❩♦ ❩ ❳❪

❫❲❯❴❵ ❛❜❬ ❭❪ ❚❯❱❲❳❨❩❬ ❡❪ ❢❩ ❣❤❵❲❳❞ ❲❱ ❛❬ ✐❪ ❚❯❥❳❛❞ ❲❜ ❛❬ ❦❪ ❧❲❳❜ ❣❱ ❛❲❪ ❘✈ ✈➫ ❪ ❚❨❳ ❲❨❣♦ ❛

❥❣❱♦❣❱ ❜ ❲①❛❲❱ ❥❣❱ ❞ ❲❴❛❨ ❴ ❩❛ ❵❣❳❥❣❤②❛❳❯ ❤ ④❢✐➭❶ ❥❲❜❲ ❛❴ ❲❱ ♠❲❤ ❜❲❱ ❴❩ ❛❪

❦ ❲r ❩❳ ❲❨❩❳❛❯♠ ❝❛❤❣❨ ❢❣❤ ❣❵ ❲❨❲❱ ❡❴❲❱ ❬ ✉❲❜ ❲❱ ❝ ❛❤ ❣❨ ❢❣①❲❯❨❲❱ ❜ ❲❱ q❣❳❛❴ ❲❱ ❲❱ ❬

➐ ❲❴ ❲❳❨❲❪ ➏ ⑦ ➯⑦➋⑦➎ ➥⑩ ⑨ ⑧❼❻❼⑦❻⑩

n

t

⑦❾

k

⑨⑦➥⑦ ➲

p

rksh

o

o

⑨❼❾↔❼❾ ➥⑦➋

i

⑦❾ ⑨❼

n

y

⑦➯

it

➳

o

i

➊❼⑧⑨❼

sviru

s

➵ ➳➊➁ ➸ ⑨⑦➥⑦ ➺➀ ➥⑩➥⑦➻⑦

i

⑦❾

k

⑦ ⑩

r t

⑦➼⑦ ⑧➂ ➽➍↔➍⑧ ➅➾ ➌ ❼

p

t

❼

m

➺❼

r

➅➝ ➝➜➃

❫❳❯❱ ❬ ➚❬ ➐ ❬ ❫❳❣♠❥ ❞❬ ❘✈ ✈➫ ❪ ➉➀❾➥⑦ ➪❼

n

t

⑦➋ ➽⑦ ⑥

t

❼

ri

⑦➋ ➶❼

n

❼⑥

ti

s

❪ ✉①❲➔ ❴ t❣①① q❯ r①❛❤❵ ❛❱ ♦ ❪ ➩➹➓❩❳ ❜❬➘ ❢❪ ❘➴❙❥❪

➭ ❣♦ ♦ ❣❨❛❬ ❭❪❬ ❭❪❝❩ t①❣ ❳❤ ❩❱ ❬ ❧❪❝❲❜ ❲❣①❛❬ ❚❪❭❳ ❳❛♦❵❛❬③❪♥❩♠❣❱ ❣♦❵ ❛❱❛❪ ◗ ➒➒ ➒ ❪ q❩ ❤ ❨❹

❵❲❨➔❵ ❛❱ ♦ ❜ ❣②❣①❩❥ ♠ ❣❱❨ ❩ ➓ ❨❵❣♦❯❨ ❲❱❜①❲❨❣❳❲① ♠ ❯ ❤➔①❣ ❛❱ ❨❵ ❣ ❤ ❩①❣❪ ➷➃ ➉⑩❻ ➎➃

➽⑩

o

l

➃ ➆ ➂➜ ➜ ➇↕➆➃

➭ ❛➔ ❣❱❨❛❱ ❛❬ ③❪❭❪❬ ❡❪✉❪ ♣ ❳ ❲❱➔❵❣❤➔❵ ❛❱❛❹ ➭❛➔ ❣❱❨❛❱ ❛❬ ❸ ❪❫ ❪ ✉❩♠r❩❱ ❲❨❩❬ ✉❪ ✉❣❳ ❨❩①❯➔➔ ❛❬

❚❪❧❪ ❦❛♠❲❬ ❭❪❚❪ ❚❲❱❨❩❤ ❪ ❘✈✈ ✇❪ ❸ ❩ ❳❥❵❩①❩♦ ❛➔ ❲① ❚❨❯ ❜❞ ❩ ➓ ❨❵ ❣ ❦ ❛②❣❳ ❛❱ ❨❵ ❣

❫❣①❣❩ ❤ ❨→⑧❼➍⑥

h

ro

m

is n

⑥

ilo

ti

u

s

➃ ❷➃

t

n

➷➃➏

o

rp

h

o

➃➂

l

➅➈➵➈➸➙➅➄➄ ➇ ➅➄↕➂ ➅➝ ➝➆ ➃ s ❲❜❲❬ ❚❪❬❸ ❪ ❚❵ ❛♠❲♠ ❩❨❩❬ ➩❪ ❢❯ ❳❲❨❲❬ ❢❪ ✐❲❨❲❛❬ ❢❪➬❯❲❤ ❲❪ ❘✈ ✈➮❪ ✐❛❤❨❩❥ ❲❨❵ ❩①❩♦ ❞

❩ ➓ ❲❳❨❛➓❛➔ ❛❲① ❛❱ ➓ ❣➔ ❨❛❩❱ ❩ ➓ ❴❩ ❛ ❵ ❣❳❥❣❤②❛❳❯ ❤ ❜ ❛❤❣❲❤ ❣❪ ③❵ ❯①❲①❩❱♦❴❩ ❳❱ ➘❱❛②❪

♣ ❲➔ ❪❩ ➓➭ ❣❨❪❚➔ ❪❬ ✉❲❱♦❴❩ ❴❬❫❵❲❛①❲❱ ❜ ❪

s ❲♦❱❣❳❬ ➨❪❢❪❬❸ ❪➐ ❪ ✐❣t①❣❨❨❪ ❘✈✈➫❪ ➽⑦⑥

si

➁⑩↔➻

ro

lo

❪ ❚❣➔ ❩❱ ❜ ➨❜❛❨❛❩❱ ❪

✉①❲➔ ❴t❣①① q❯ r①❛❤❵ ❛❱ ♦③❩♠❥❲❱❞ ❪ ➩➹➓❩ ❳❜ ❪ ➫➫✈❥❪

s ❲①❴❣❳❬ q❪➐ ❪❬ ❘✈✈ ✈❪ ❡❱❨❳❩ ❜❯➔ ❨❛❩❱ ❨❩ ➭ ❛❳ ❩①❩♦ ❞ ❪ ③❚❡❝➩ ❫ ❳ ❩❥❛➔ ❲① ❭♦ ❳ ❛➔ ❯①❨❯ ❳❣❬

✃ ❐❒ ❮❰ÏÐ ÑÒÓ Ô ÕÖ ÕÓ ❐×× × Õ ØÙÏ ÑÚÛÏ❰ Ò ÑÜÝÞ ÑßÝ ÙÏ Ùà áÙâãÝ Ò❰ÏÝä â ÑÚåÝÙäÕ æç èé ê ë ÒÙÜÝÚ❰Ï

ìàÒÝÚÛÏåÛÒÑÓ èäÞÒÙ ÙÒ ÙÙ ÜÝÏÏ áÓíÛ ÑÑäîÏ❰äÞ ÓìÛîå Ò❰ÏÝ❰ Õ

❮❰Ïåï ÑÐ Ó ëÕ ð ÕÓ ñÕê Õ ò ÑÏÏ ÑáÓ óÕØ Õ çå ÙäÑÓ ò Õ ❮❰ áÓ ôÕ õ❰äîÙäÓ õ Õ öÛ ÐÛ Þ❰Ó èÕ

õÝ ÒÙä ÙÓ ëÕ ìÙÐÝÓ ìÕÔ Õ ó❰ãÝîÙäÓ éÕÖ Õ õ ÑÞ ÒÝÚÐ Õ ❐× × ÷ Õ ò ÙÝ ø ÑÒÜ ÑîãÝ ÒÛî

Ò ÑÜÒÑîÑä åî ❰ åø Ý ÒÞ Ú áÜ ÒÝäÝÞ ø ÑÒ ÜÑîãÝ ÒÛî ùæáõúû üý Ýä åøÑ â❰ ßÝÏ á

þÿ ✁ ÿ

sviri

✂✄ ÿ Õ ☎✆ ✝ ✞✄ ✟✆ ✠✡ ÿ✞ ÿ ✄✟☛☞✆ ✌✍

ro

l

✎✏✑✑✒✓✔✕✖✔✗✖✒✘ ✗ ✖✖ ✙✚ ❮❰îÝå ÙÓ ✃✛✛ ✛ Õ ✜ÿ

tu

n

ju

k

✢ÿ

kn

is

✣✄ ✌✞✆✤✄

i

✥

lin

is

✂✄ ✞✜✄✦✆✌☞

o

l

s

✁ ✄ ✂✄✧✄ ✞

k

Õ ÖÛî❰å