Isolasi Bacillus thuringiensis Berl. Vol. I. No. I dari Peternakan Ulat Sutera dan Toksisitasnya terhadap Larva Crocidolomia binotalis Zell. dan Spodoptera litura F.
Vol. I. No. I
Hr~ytri,Juni 1994. hlm.21-23
lSSN 0854-8587
Isolasi Bacillus thuringiensis Berl.
dari Peternakan Ulat Sutera dan Toksisitasnya
terhadap Larva Crocidolomia binotalis Zell.
dan Spodoptera litura F.
IMAN RUSMANA DAN RATNA SIR1 HADIOETOMO*
Jurusnn Biulogi FMIPA IPB. Jl. Rcryrc PRjtjaran. Bogor. 16144
Diterima 16 M e i 1994/Di.setujui 20 Juni 1994
In the effort to isolate Bacillus thuringicnsis from sericultural farms, 48 soil samples from
different farms in South Sulrrwesi, Central Java, and East Java were examined. As many as
2813 isolates of spore formem were obtained and when they were examined under the phase
contmst micmmpe, 32 of them showed the formation of crystal proteins. isolates which were
toxic to C. binotalis includes SPC-A 1 1.10h.01, S P G A 12.01.03, S P G A 12.03.0 1, and SPG-A
12.16.01; their toxicity was comparable to that of Thuricide. None of the isolates terted showed
100% mortality to S. lilum. However, SPG-A 1 1.10b.01 8nd SPGA 12.16.0 1 were more toxic
than that of Thuricide. The highest mortality obtained for Stllrum was 65%.
Bacillus f h u r i n g i r n s i ~merupakan bakteri patogen pad.
serangga. S i fat patogenitarnya direbabkan haktzri ini
mnghrsilkm beberap macam toksin ymg bemifat i d -
t i d a l Toksin-toksin tersebut adaluh a-ekriotoksin, aeksotoksin, Jur bcndotoksin (protein krisd) (Dubis h
Lewis. 198 1). Di antara toksin-toksin tersebut. protein
kriatal yang dipnwluksi worr k o m r s i a l untuk insektisida
mik robe.
Di Indonesia inrektiriida m i k r o h e herhahan r k t i f B.
thurlnglcn~lsyang digunakan diimpor J a r i hehcrapr
ncparr: Bely i a (Bactorpcine). Amzrika Scrikat (Dipel).
dan Swiss (Thuricide). Galur B. r h u r l n ~ i e n s l syang
Jipunakm pada inscktiwicl. tersehut dslah R ilturingirnsis var. kurstaki .
Usaha eksplorari Be rhurin~icnsisasli Indonesia pzrlu
Jilakukan k r r e n a B. r h u r i n ~ i c n s i s(protein k r i s t r l n y r )
mrmpunyai spektrum inang yanp nempit. Oleh krrena
itu. p e m k n n t r s c r n seranpga hama yang r J a di Indonesia
iJulnyr m e n g g d a n B. rhun'ngicnris .wl Indonesia.
Padl p n c l i t i a n ini d i l a k u k a n isolasi g a l u r - p r l u r B.
rhun'ngirnrlr &ti tanah t e m p t pemhmgm l i m h h pcr~rn a k r n ulat r u t r a d m uji toksiaitasnya terhrdap larva
Crricldokomln hinoralls Zell. (Lepidopterr : Pyrallidre)
d m S'doprrrcr Ilturct F. ( L g r t k q ~ e t . :Ncnquidu).
Lwlusi &cillus thunngfmslr. Satu gram ctmtoh tuuh
d i r u s p n s i k a n dalsm scmhilan m i l i l i t e r a i r suling steril,
kemudian d i k r i perlakuan renjatan panas dengan subu
80°C t4elrmr 10 mrnit (Rdim, 1972). Susprrrsi teflrebut
diuuxrkan kmri cLur ~ehanydc0.1 ml dari p p c n c e ~
yang sesuai discbarkan pada medium nutrien agar (NA.
pH 7.4) dm diinkuhrsikm p#L. suhu r u n g (27-30°C).
Pengrmatan ini dilakukan terhrdap morfologi koloni
dan rscl sejak dun h a r i inkuhusi. Koloni yang t e r p i ~ h
haik Jan menunjukkan c i r i koloni Bacillus dimurnikm
dcnyan matode pzngprnslln k d r u r pul. d i u m NA.
Penpamatan protein kriutal Jilllrukrn dtngur mengp&an
mikmskop k o n t m i ficiz pui. p e b r u , 1000 Ui.
Biakan murni dirimpan pad. agar miring N A Jengan
ruhu 4°C.
Pengujian Toksisitas B. thurfngiensis pvda Larva
Scranggn Sasaron. Daun mkanan sorangpa (daun mwi
untuk C. binoralis dan daun talas untuk S. liturn) y m g
digunakan herukuran 5 cm x 5 cm. Scmentara itu untuk
setirp i w l a t uji Jiriapkan rus nnsi protein krirtrl k r cclmpur kpn, ymg dibuhuhi 4S"
loo I a ~ Triton
m
8- 1956
untuk memhantu meratakan dan rnelekatkan sporr dan
pratein kristal p d a pwmuluur Aun. Pot0ng.n dam rwii
maring-wing dicclupkan ke &lam rurpenri. k e r n d i m
dikcringudarakan. Scbagri kontrol Jiyunakan potoatan
h u n y ~ dicelupkm
g
ke-&lam Nurn'cni Broth &rile
Penyujian ini dilakukan dcngan t i y a ulrnpan, ~ t i a p
ulangan diyunakan 20 l a r v a inotar p e r t a m b c ~ m u rutu
f
hari. L.rva-Innpa terwhut ditemptkq dalrm -wan pdri
yang tcluh d i h r i kc-*
wrap JIII daun yang IR10 dihtri
p r l a k w n . Mortalitas larva diamati s i t i a p hari selamr
e m p t had.
-
B A H A N DAN METODE
Pcngamhilvn Cantoh Tanah. Sehanyrk kurang lchih
100 gram ccnrtch tan& Jiamhil J.ri tempt pemburngan
limhrh petcrnrltm ulrt nutem pul. k&lrrmn 12-20 cm,
kemudian dimrsukkan kc h l a m kantung-kurtuny plwtik.
klunrhnya dikumpulkan 48 scmtoh cMlh &ri pmpimi
Sulawesi Selatan ( 3 5 contoh tanah). Jaw. Tenprh (4
concoh tmrh) h.Jaw. Tirnur ( 9 conttb d).
tlASlL.
Jumivh Contoh Twnvh ywng Diperiksu. Dart 4 8
contoh tanah yang Jtperiksa. scmuanyr mcnunjukkmn
adany. hakteri yang b e r c i r i - c ~ rpcnuc
i
Bacillus. A k a n
t c t a p i . hanya pad. 2 I contc~htanrh ( 4 3 . 7 5 56 ) yang
menunjukkan adunya tanda protein k r i s t a l yang n~crupa-
Hr~ytri,Juni 1994. hlm.21-23
lSSN 0854-8587
Isolasi Bacillus thuringiensis Berl.
dari Peternakan Ulat Sutera dan Toksisitasnya
terhadap Larva Crocidolomia binotalis Zell.
dan Spodoptera litura F.
IMAN RUSMANA DAN RATNA SIR1 HADIOETOMO*
Jurusnn Biulogi FMIPA IPB. Jl. Rcryrc PRjtjaran. Bogor. 16144
Diterima 16 M e i 1994/Di.setujui 20 Juni 1994
In the effort to isolate Bacillus thuringicnsis from sericultural farms, 48 soil samples from
different farms in South Sulrrwesi, Central Java, and East Java were examined. As many as
2813 isolates of spore formem were obtained and when they were examined under the phase
contmst micmmpe, 32 of them showed the formation of crystal proteins. isolates which were
toxic to C. binotalis includes SPC-A 1 1.10h.01, S P G A 12.01.03, S P G A 12.03.0 1, and SPG-A
12.16.01; their toxicity was comparable to that of Thuricide. None of the isolates terted showed
100% mortality to S. lilum. However, SPG-A 1 1.10b.01 8nd SPGA 12.16.0 1 were more toxic
than that of Thuricide. The highest mortality obtained for Stllrum was 65%.
Bacillus f h u r i n g i r n s i ~merupakan bakteri patogen pad.
serangga. S i fat patogenitarnya direbabkan haktzri ini
mnghrsilkm beberap macam toksin ymg bemifat i d -
t i d a l Toksin-toksin tersebut adaluh a-ekriotoksin, aeksotoksin, Jur bcndotoksin (protein krisd) (Dubis h
Lewis. 198 1). Di antara toksin-toksin tersebut. protein
kriatal yang dipnwluksi worr k o m r s i a l untuk insektisida
mik robe.
Di Indonesia inrektiriida m i k r o h e herhahan r k t i f B.
thurlnglcn~lsyang digunakan diimpor J a r i hehcrapr
ncparr: Bely i a (Bactorpcine). Amzrika Scrikat (Dipel).
dan Swiss (Thuricide). Galur B. r h u r l n ~ i e n s l syang
Jipunakm pada inscktiwicl. tersehut dslah R ilturingirnsis var. kurstaki .
Usaha eksplorari Be rhurin~icnsisasli Indonesia pzrlu
Jilakukan k r r e n a B. r h u r i n ~ i c n s i s(protein k r i s t r l n y r )
mrmpunyai spektrum inang yanp nempit. Oleh krrena
itu. p e m k n n t r s c r n seranpga hama yang r J a di Indonesia
iJulnyr m e n g g d a n B. rhun'ngicnris .wl Indonesia.
Padl p n c l i t i a n ini d i l a k u k a n isolasi g a l u r - p r l u r B.
rhun'ngirnrlr &ti tanah t e m p t pemhmgm l i m h h pcr~rn a k r n ulat r u t r a d m uji toksiaitasnya terhrdap larva
Crricldokomln hinoralls Zell. (Lepidopterr : Pyrallidre)
d m S'doprrrcr Ilturct F. ( L g r t k q ~ e t . :Ncnquidu).
Lwlusi &cillus thunngfmslr. Satu gram ctmtoh tuuh
d i r u s p n s i k a n dalsm scmhilan m i l i l i t e r a i r suling steril,
kemudian d i k r i perlakuan renjatan panas dengan subu
80°C t4elrmr 10 mrnit (Rdim, 1972). Susprrrsi teflrebut
diuuxrkan kmri cLur ~ehanydc0.1 ml dari p p c n c e ~
yang sesuai discbarkan pada medium nutrien agar (NA.
pH 7.4) dm diinkuhrsikm p#L. suhu r u n g (27-30°C).
Pengrmatan ini dilakukan terhrdap morfologi koloni
dan rscl sejak dun h a r i inkuhusi. Koloni yang t e r p i ~ h
haik Jan menunjukkan c i r i koloni Bacillus dimurnikm
dcnyan matode pzngprnslln k d r u r pul. d i u m NA.
Penpamatan protein kriutal Jilllrukrn dtngur mengp&an
mikmskop k o n t m i ficiz pui. p e b r u , 1000 Ui.
Biakan murni dirimpan pad. agar miring N A Jengan
ruhu 4°C.
Pengujian Toksisitas B. thurfngiensis pvda Larva
Scranggn Sasaron. Daun mkanan sorangpa (daun mwi
untuk C. binoralis dan daun talas untuk S. liturn) y m g
digunakan herukuran 5 cm x 5 cm. Scmentara itu untuk
setirp i w l a t uji Jiriapkan rus nnsi protein krirtrl k r cclmpur kpn, ymg dibuhuhi 4S"
loo I a ~ Triton
m
8- 1956
untuk memhantu meratakan dan rnelekatkan sporr dan
pratein kristal p d a pwmuluur Aun. Pot0ng.n dam rwii
maring-wing dicclupkan ke &lam rurpenri. k e r n d i m
dikcringudarakan. Scbagri kontrol Jiyunakan potoatan
h u n y ~ dicelupkm
g
ke-&lam Nurn'cni Broth &rile
Penyujian ini dilakukan dcngan t i y a ulrnpan, ~ t i a p
ulangan diyunakan 20 l a r v a inotar p e r t a m b c ~ m u rutu
f
hari. L.rva-Innpa terwhut ditemptkq dalrm -wan pdri
yang tcluh d i h r i kc-*
wrap JIII daun yang IR10 dihtri
p r l a k w n . Mortalitas larva diamati s i t i a p hari selamr
e m p t had.
-
B A H A N DAN METODE
Pcngamhilvn Cantoh Tanah. Sehanyrk kurang lchih
100 gram ccnrtch tan& Jiamhil J.ri tempt pemburngan
limhrh petcrnrltm ulrt nutem pul. k&lrrmn 12-20 cm,
kemudian dimrsukkan kc h l a m kantung-kurtuny plwtik.
klunrhnya dikumpulkan 48 scmtoh cMlh &ri pmpimi
Sulawesi Selatan ( 3 5 contoh tanah). Jaw. Tenprh (4
concoh tmrh) h.Jaw. Tirnur ( 9 conttb d).
tlASlL.
Jumivh Contoh Twnvh ywng Diperiksu. Dart 4 8
contoh tanah yang Jtperiksa. scmuanyr mcnunjukkmn
adany. hakteri yang b e r c i r i - c ~ rpcnuc
i
Bacillus. A k a n
t c t a p i . hanya pad. 2 I contc~htanrh ( 4 3 . 7 5 56 ) yang
menunjukkan adunya tanda protein k r i s t a l yang n~crupa-