Korelasi Kadar F2-Isoprostan dan Marker Hepar Pada Pasien Talasemia Beta Mayor BAB 0
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
KORELASI KADAR F2-ISOPROSTAN DAN MARKER HEPAR PADA
PASIEN TALASEMIA BETA MAYOR
KARYA AKHIR
Disusun untuk Memenuhi Sebagian Persyaratan
Mencapai Derajat Dokter Spesialis
Program Studi Patologi Klinik
Oleh
Reshi Sabrang
S971302003
PROGRAM PENDIDIKAN DOKTER SPESIALIS
PATOLOGI KLINIK
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET
SURAKARTA
2016
commit to user
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
commit to user
ii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
commit to user
iii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
commit to user
iv
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR ISI
Halaman Judul …………………………………………………................................
Lembar Pengesahan ………………………………………………….......................
Lembar Persetujuan ……………………………………………………………….
Pernyataan …………………………………………………………….....................
Daftar Isi …………………………………………………………….........................
Daftar Gambar ……………………………………………………….......................
Daftar Tabel ………………………………………………………………...............
Daftar Lampiran …………………………………………………………………...
Daftar Singkatan ……………………………………………………........................
Intisari ……………………………………………………………………………....
Abstract …………………………………………………………………………….
BAB I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang ………………………………….………......................
B. Perumusan Masalah …………………………………….......................
C. Tujuan Penelitian ………………………………………........................
D. Manfaat Penelitian ……………………………………….....................
E. Keaslian Penelitian ………………………………………......................
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA
A. Kajian Teori …………………………………………………………...
1. Talasemia Beta Mayor ……………………………………………
2. Stres Oksidatif ……………………………………..……………….
3. F2-Isoprostan ……………………………………………………….
4. Gangguan Hepar pada Talasemia Beta Mayor ………...................
B. Kerangka Pikir ……………………….………………………………..
C. Hipotesis ………………………………………………………………
BAB III. METODE DAN CARA PENELITIAN
A. Rancangan Penelitian …………………………………….....................
B. Tempat Dan Waktu Penelitian ……………………………………….
C. Subyek Penelitian ……………………………………………………..
D. Bahan dan Alat ……………………………………………………….
E. Cara, Prosedur dan Skema Alur Penelitian …..…………......................
1. Cara Penelitian ……………………………………………………..
2. Prosedur Penelitian …………………………………………………
3. Skema Alur Penelitian ……………………………………………...
F. Identifikasi Variabel Penelitian ……………………………………….
G. Definisi operasional Variabel Penelitian ……………………………..
H. Kontrol Kualitas Internal ……………………………………………..
I. Analisa Statistik ……………………………………….……………….
J. Pertimbangan Etik ……………………………………………………..
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Validitas Uji Analitik ………………………………………………….
1. Uji Presisi …………………………………………………………...
2. Uji Akurasi ……………………………………………………….…
B. Karakteristik Subjek Penelitian …………………………………….…
C. Uji Normalitas Data ………………………………………………...…
D. Analisis Korelatif ……………………………………………………...
BAB V. SIMPULAN DAN SARAN
commit to user
A. Simpulan ………………………………………………………………
v
i
ii
iii
iv
v
vii
viii
ix
x
xii
xiii
1
3
3
4
4
6
6
11
12
17
25
26
27
27
27
29
30
30
30
34
35
35
36
36
37
38
38
39
40
41
42
46
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
B. Saran …………………………………………………………………..
RINGKASAN ……………………………………………….……………………...
DAFTAR PUSTAKA ………………………………………..……………………..
LAMPIRAN ………………………………………………………………………..
commit to user
vi
46
47
52
57
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1.
Gambar 2.
Gambar 3.
Gambar 4.
Gambar 5.
Gambar 6.
Gambar 7.
Gambar 8.
Gambar 9.
Gambar 10.
Gambar 11.
Gambar 12.
Gambar 13.
Gambar 14.
Gambar 15.
Gambar 16.
Gambar 17.
Pembentukan Hidroksi Radikal pada Reaksi Haber-Weiss dan Reaksi
Fenton yang Dikatalisasi Logam ……………………………………..
Proses Peroksidasi Lipid ……………………………………………...
Jalur Oksidasi Asam Arakidonat oleh Radikal Bebas ……………......
Kerangka Pikir ………………………………………………………..
Skema Pemeriksaan 8-IsoPs secara EIA ……………………………..
Skema Alur Penelitian ……………………………………………......
Grafik Korelasi F2-IsoPs dengan AST ……………………………......
Grafik Korelasi F2-IsoPs dengan ALT ……………………………......
Grafik Korelasi F2-IsoPs dengan GGT …………………………….....
Grafik QC AST …………………………………………………….....
Grafik QC ALT …………………………………………………….....
Grafik QC GGT ……………………………………………………....
Preparasi Larutan-larutan Standar Pemeriksaan 8-IsoPs ……………..
Format Plate Pemeriksaan 8-IsoPs …………………………………...
Reaksi pada Pengukuran AST ………………………………………..
Reaksi pada Pengukuran ALT ………………………………..……....
Reaksi pada Pengukuran GGT …....…………………………………..
commit to user
vii
11
13
15
25
31
34
42
42
42
60
60
60
62
63
64
65
65
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR TABEL
Tabel 1.
Tabel 2.
Tabel 3.
Tabel 4.
Tabel 5.
Tabel 6.
Tabel 7.
Tabel 8.
Tabel 9.
Tabel 10.
Keaslian Penelitian ………….………………………………………
Spesifisitas 8-IsoPs EIA Antiserum ………………..………………..
Hasil Uji Presisi F2-IsoPs dan Marker Hepar ……….……………...
Hasil Uji Akurasi Pemeriksaan Marker Hepar ……………………..
Karakteristik Subjek Penelitian ……………………………………..
Hasil Pengukuran dan Uji Normalitas Variabel Penelitian …………
Korelasi F2-IsoPs dengan Marker Hepar ……………………………
Uji Presisi Within-Run F2-IsoPs ……………………………………..
Uji Presisi Within-Run AST, ALT dan GGT ………………………...
Uji Presisi Between-Day AST, ALT dan GGT ……………………....
commit to user
viii
4
32
38
39
40
41
42
59
59
59
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1.
Lampiran 2.
Lampiran 3.
Lampiran 4.
Lampiran 5.
Lampiran 6.
Lampiran 7.
Hasil Analisis Statistik ……………………………………………….
Tabel Uji Presisi Within-run dan Between-day ……………………...
Grafik Quality Control ……………………………………………....
Prinsip Tiap Parameter Pemeriksaan ………………………………...
Surat Pernyataan Bersedia Berpartisipasi Sebagai Peserta Penelitian .
Ethical Clearance ……………………………………………………
Foto-foto Penelitian …………………………………………..............
commit to user
ix
57
59
60
61
67
69
70
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR SINGKATAN
AA
AChE
ALP
ALT
AST
AU
B0
BHT
Blk
BM
COX
CRP
CV
d%
DAMPs
DFO
DFP
DFX
ECM
EIA
F2-IsoPs
Fe2+
Fe3+
GC-MS
GGT
GPx
GSH
H2O2
HSC
hsCRP
IFCC
IgG
IsoPs
JSCC
L∙
LOO∙
LOOH
MDA
mg
mL
PL
PM/g
MRI
n-3
n-6
NA
NADH
NAD
Asam arakidonat
Acetylcholinesterase
Alkaline phosphatase
Alanine aminotransferase
Aspartate aminotransferase
Absorbance unit
Maximum binding
Butylated hydroxytoluene
Blank
Bone marrow
Cyclooxygenase
C-reactive protein
Coefficient of variation
Bias
Damage associated molecular patterns
Deferoxamine
Deferiprone
Deferasirox
Extracellular matrix
Enzyme immunoassay
F2-isoprostan
Ferrous iron
Ferric iron
Gas chromatography-mass spectrometry
Gamma-glutamyl transferase
Glutathione peroxidase
Glutathione
Hidrogen peroksida
Hepatic stellate cell
High-sensitivity C-reactive protein
International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine
Imunoglobulin G
Isoprostan
Japanese Society of Clinical Chemistry
Carbon-centered lipid radical
Peroxy lipid radical
Hidroperoksida lipid
Malondialdehyde
Miligram
Mililiter
Mikroliter
Mikromol per gram
Magnetic resonance imaging
Omega-3
Omega-6
Nilai aktual
Nicotinamide adenine
dinucleotide
commit
to usertereduksi
Nicotinamide adenine dinucleotide teroksidasi
x
perpustakaan.uns.ac.id
Nm
NSB
O2OH∙
PBS
PFOA
PG
pg
PRC
PRRs
PUFA
QC
ROS
rpm
RSUD
S
SD
SOD
TA
TBA
TBARS
TGF-E
TLR4
TNF-D
U/L
digilib.uns.ac.id
Nanometer
Non-specific binding
Superoxide
Hydroxyl radical
Phosphate buffer solution
Perfluorooctanoic acid
Prostaglandin
Pikogram
Packed red blood cell
Pattern recognition receptors
Polyunsaturated fatty acid
Quality Control
Reactive oxygen species
Rotations per minute
Rumah sakit umum daerah
Standard
Standar deviasi
Superoxide dismutase
Total activity
Thiobarbituric acid
Thiobarbituric acid-reacting substances
Transforming growth factor beta
Toll-like receptor-4
Tumor necrosis factor alpha
Unit per liter
commit to user
xi
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
INTISARI
KORELASI KADAR F2-ISOPROSTAN DAN MARKER HEPAR PADA PASIEN
TALASEMIA BETA MAYOR
Reshi Sabrang*, JB Suparyatmo#, Yuwono Hadisuparto#
*Program Pendidikan Dokter Spesialis Patologi Klinik Fakultas Kedokteran
Universitas Sebelas Maret/Rumah Sakit Umum Daerah Dr. Moewardi di Surakarta
#
Bagian Patologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret/
Rumah Sakit Umum Daerah Dr. Moewardi di Surakarta
Transfusi darah pada talasemia beta mayor dapat menyebabkan iron overload,
menimbulkan stres oksidatif pada hepar yang membentuk produk peroksidasi seperti F2isoprostan (F2-isoPs), yang merupakan marker stres oksidatif. Aspartate
aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT) dan gamma-glutamyl
transferase (GGT) adalah marker kerusakan hepar. Tujuan penelitian ini untuk
mengetahui korelasi antara kadar F2-IsoPs dan kadar marker hepar khususnya AST, ALT
dan GGT pada talasemia beta mayor.
Penelitian ini merupakan penelitian cross sectional di RSUD Dr Moewardi
Surakarta dan di laboratorium rujukan pada bulan Mei-Juni 2016. Subjek penelitian
adalah penderita talasemia beta mayor di bagian Ilmu Kesehatan Anak RSUD Dr
Moewardi Surakarta. Analisis korelatif menggunakan uji Spearman, bermakna jika p
digilib.uns.ac.id
KORELASI KADAR F2-ISOPROSTAN DAN MARKER HEPAR PADA
PASIEN TALASEMIA BETA MAYOR
KARYA AKHIR
Disusun untuk Memenuhi Sebagian Persyaratan
Mencapai Derajat Dokter Spesialis
Program Studi Patologi Klinik
Oleh
Reshi Sabrang
S971302003
PROGRAM PENDIDIKAN DOKTER SPESIALIS
PATOLOGI KLINIK
FAKULTAS KEDOKTERAN UNIVERSITAS SEBELAS MARET
SURAKARTA
2016
commit to user
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
commit to user
ii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
commit to user
iii
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
commit to user
iv
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR ISI
Halaman Judul …………………………………………………................................
Lembar Pengesahan ………………………………………………….......................
Lembar Persetujuan ……………………………………………………………….
Pernyataan …………………………………………………………….....................
Daftar Isi …………………………………………………………….........................
Daftar Gambar ……………………………………………………….......................
Daftar Tabel ………………………………………………………………...............
Daftar Lampiran …………………………………………………………………...
Daftar Singkatan ……………………………………………………........................
Intisari ……………………………………………………………………………....
Abstract …………………………………………………………………………….
BAB I. PENDAHULUAN
A. Latar Belakang ………………………………….………......................
B. Perumusan Masalah …………………………………….......................
C. Tujuan Penelitian ………………………………………........................
D. Manfaat Penelitian ……………………………………….....................
E. Keaslian Penelitian ………………………………………......................
BAB II. TINJAUAN PUSTAKA
A. Kajian Teori …………………………………………………………...
1. Talasemia Beta Mayor ……………………………………………
2. Stres Oksidatif ……………………………………..……………….
3. F2-Isoprostan ……………………………………………………….
4. Gangguan Hepar pada Talasemia Beta Mayor ………...................
B. Kerangka Pikir ……………………….………………………………..
C. Hipotesis ………………………………………………………………
BAB III. METODE DAN CARA PENELITIAN
A. Rancangan Penelitian …………………………………….....................
B. Tempat Dan Waktu Penelitian ……………………………………….
C. Subyek Penelitian ……………………………………………………..
D. Bahan dan Alat ……………………………………………………….
E. Cara, Prosedur dan Skema Alur Penelitian …..…………......................
1. Cara Penelitian ……………………………………………………..
2. Prosedur Penelitian …………………………………………………
3. Skema Alur Penelitian ……………………………………………...
F. Identifikasi Variabel Penelitian ……………………………………….
G. Definisi operasional Variabel Penelitian ……………………………..
H. Kontrol Kualitas Internal ……………………………………………..
I. Analisa Statistik ……………………………………….……………….
J. Pertimbangan Etik ……………………………………………………..
BAB IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Validitas Uji Analitik ………………………………………………….
1. Uji Presisi …………………………………………………………...
2. Uji Akurasi ……………………………………………………….…
B. Karakteristik Subjek Penelitian …………………………………….…
C. Uji Normalitas Data ………………………………………………...…
D. Analisis Korelatif ……………………………………………………...
BAB V. SIMPULAN DAN SARAN
commit to user
A. Simpulan ………………………………………………………………
v
i
ii
iii
iv
v
vii
viii
ix
x
xii
xiii
1
3
3
4
4
6
6
11
12
17
25
26
27
27
27
29
30
30
30
34
35
35
36
36
37
38
38
39
40
41
42
46
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
B. Saran …………………………………………………………………..
RINGKASAN ……………………………………………….……………………...
DAFTAR PUSTAKA ………………………………………..……………………..
LAMPIRAN ………………………………………………………………………..
commit to user
vi
46
47
52
57
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR GAMBAR
Gambar 1.
Gambar 2.
Gambar 3.
Gambar 4.
Gambar 5.
Gambar 6.
Gambar 7.
Gambar 8.
Gambar 9.
Gambar 10.
Gambar 11.
Gambar 12.
Gambar 13.
Gambar 14.
Gambar 15.
Gambar 16.
Gambar 17.
Pembentukan Hidroksi Radikal pada Reaksi Haber-Weiss dan Reaksi
Fenton yang Dikatalisasi Logam ……………………………………..
Proses Peroksidasi Lipid ……………………………………………...
Jalur Oksidasi Asam Arakidonat oleh Radikal Bebas ……………......
Kerangka Pikir ………………………………………………………..
Skema Pemeriksaan 8-IsoPs secara EIA ……………………………..
Skema Alur Penelitian ……………………………………………......
Grafik Korelasi F2-IsoPs dengan AST ……………………………......
Grafik Korelasi F2-IsoPs dengan ALT ……………………………......
Grafik Korelasi F2-IsoPs dengan GGT …………………………….....
Grafik QC AST …………………………………………………….....
Grafik QC ALT …………………………………………………….....
Grafik QC GGT ……………………………………………………....
Preparasi Larutan-larutan Standar Pemeriksaan 8-IsoPs ……………..
Format Plate Pemeriksaan 8-IsoPs …………………………………...
Reaksi pada Pengukuran AST ………………………………………..
Reaksi pada Pengukuran ALT ………………………………..……....
Reaksi pada Pengukuran GGT …....…………………………………..
commit to user
vii
11
13
15
25
31
34
42
42
42
60
60
60
62
63
64
65
65
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR TABEL
Tabel 1.
Tabel 2.
Tabel 3.
Tabel 4.
Tabel 5.
Tabel 6.
Tabel 7.
Tabel 8.
Tabel 9.
Tabel 10.
Keaslian Penelitian ………….………………………………………
Spesifisitas 8-IsoPs EIA Antiserum ………………..………………..
Hasil Uji Presisi F2-IsoPs dan Marker Hepar ……….……………...
Hasil Uji Akurasi Pemeriksaan Marker Hepar ……………………..
Karakteristik Subjek Penelitian ……………………………………..
Hasil Pengukuran dan Uji Normalitas Variabel Penelitian …………
Korelasi F2-IsoPs dengan Marker Hepar ……………………………
Uji Presisi Within-Run F2-IsoPs ……………………………………..
Uji Presisi Within-Run AST, ALT dan GGT ………………………...
Uji Presisi Between-Day AST, ALT dan GGT ……………………....
commit to user
viii
4
32
38
39
40
41
42
59
59
59
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1.
Lampiran 2.
Lampiran 3.
Lampiran 4.
Lampiran 5.
Lampiran 6.
Lampiran 7.
Hasil Analisis Statistik ……………………………………………….
Tabel Uji Presisi Within-run dan Between-day ……………………...
Grafik Quality Control ……………………………………………....
Prinsip Tiap Parameter Pemeriksaan ………………………………...
Surat Pernyataan Bersedia Berpartisipasi Sebagai Peserta Penelitian .
Ethical Clearance ……………………………………………………
Foto-foto Penelitian …………………………………………..............
commit to user
ix
57
59
60
61
67
69
70
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
DAFTAR SINGKATAN
AA
AChE
ALP
ALT
AST
AU
B0
BHT
Blk
BM
COX
CRP
CV
d%
DAMPs
DFO
DFP
DFX
ECM
EIA
F2-IsoPs
Fe2+
Fe3+
GC-MS
GGT
GPx
GSH
H2O2
HSC
hsCRP
IFCC
IgG
IsoPs
JSCC
L∙
LOO∙
LOOH
MDA
mg
mL
PL
PM/g
MRI
n-3
n-6
NA
NADH
NAD
Asam arakidonat
Acetylcholinesterase
Alkaline phosphatase
Alanine aminotransferase
Aspartate aminotransferase
Absorbance unit
Maximum binding
Butylated hydroxytoluene
Blank
Bone marrow
Cyclooxygenase
C-reactive protein
Coefficient of variation
Bias
Damage associated molecular patterns
Deferoxamine
Deferiprone
Deferasirox
Extracellular matrix
Enzyme immunoassay
F2-isoprostan
Ferrous iron
Ferric iron
Gas chromatography-mass spectrometry
Gamma-glutamyl transferase
Glutathione peroxidase
Glutathione
Hidrogen peroksida
Hepatic stellate cell
High-sensitivity C-reactive protein
International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine
Imunoglobulin G
Isoprostan
Japanese Society of Clinical Chemistry
Carbon-centered lipid radical
Peroxy lipid radical
Hidroperoksida lipid
Malondialdehyde
Miligram
Mililiter
Mikroliter
Mikromol per gram
Magnetic resonance imaging
Omega-3
Omega-6
Nilai aktual
Nicotinamide adenine
dinucleotide
commit
to usertereduksi
Nicotinamide adenine dinucleotide teroksidasi
x
perpustakaan.uns.ac.id
Nm
NSB
O2OH∙
PBS
PFOA
PG
pg
PRC
PRRs
PUFA
QC
ROS
rpm
RSUD
S
SD
SOD
TA
TBA
TBARS
TGF-E
TLR4
TNF-D
U/L
digilib.uns.ac.id
Nanometer
Non-specific binding
Superoxide
Hydroxyl radical
Phosphate buffer solution
Perfluorooctanoic acid
Prostaglandin
Pikogram
Packed red blood cell
Pattern recognition receptors
Polyunsaturated fatty acid
Quality Control
Reactive oxygen species
Rotations per minute
Rumah sakit umum daerah
Standard
Standar deviasi
Superoxide dismutase
Total activity
Thiobarbituric acid
Thiobarbituric acid-reacting substances
Transforming growth factor beta
Toll-like receptor-4
Tumor necrosis factor alpha
Unit per liter
commit to user
xi
perpustakaan.uns.ac.id
digilib.uns.ac.id
INTISARI
KORELASI KADAR F2-ISOPROSTAN DAN MARKER HEPAR PADA PASIEN
TALASEMIA BETA MAYOR
Reshi Sabrang*, JB Suparyatmo#, Yuwono Hadisuparto#
*Program Pendidikan Dokter Spesialis Patologi Klinik Fakultas Kedokteran
Universitas Sebelas Maret/Rumah Sakit Umum Daerah Dr. Moewardi di Surakarta
#
Bagian Patologi Klinik Fakultas Kedokteran Universitas Sebelas Maret/
Rumah Sakit Umum Daerah Dr. Moewardi di Surakarta
Transfusi darah pada talasemia beta mayor dapat menyebabkan iron overload,
menimbulkan stres oksidatif pada hepar yang membentuk produk peroksidasi seperti F2isoprostan (F2-isoPs), yang merupakan marker stres oksidatif. Aspartate
aminotransferase (AST), alanine aminotransferase (ALT) dan gamma-glutamyl
transferase (GGT) adalah marker kerusakan hepar. Tujuan penelitian ini untuk
mengetahui korelasi antara kadar F2-IsoPs dan kadar marker hepar khususnya AST, ALT
dan GGT pada talasemia beta mayor.
Penelitian ini merupakan penelitian cross sectional di RSUD Dr Moewardi
Surakarta dan di laboratorium rujukan pada bulan Mei-Juni 2016. Subjek penelitian
adalah penderita talasemia beta mayor di bagian Ilmu Kesehatan Anak RSUD Dr
Moewardi Surakarta. Analisis korelatif menggunakan uji Spearman, bermakna jika p