TOKSISITAS NEMATODA ENTOMOPATOGEN (Steinernema spp) HASIL BIAKAN PADA MEDIA KUNING TELUR TERHADAP HAMA TANAMAN SAWI (Spodoptera litura).

TOKSISITAS NEMATODA ENTOMOPATOGEN (Steinernema spp)
HASIL BIAKAN PADA MEDIA KUNING TELUR TERHADAP HAMA
TANAMAN SAWI (Spodoptera litura)

SKRIPSI

Oleh :
SITI FADHILAH
NPM : 0725010042

Kepada

FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS PEMBANGUNAN NASIONAL “VETERAN” J AWA TIMUR
SURABAYA
2011

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

TOKSISITAS NEMATODA ENTOMOPATOGEN (Steinernema spp)

HASIL BIAKAN PADA MEDIA KUNING TELUR TERHADAP HAMA
TANAMAN SAWI (Spodoptera litura )

SKRIPSI
Diajukan kepada Progr am Studi Agr oteknologi Fakultas Pertanian
Univer sitas Pembangunan Nasional “Veteran” Jawa Timur
untuk Menyusun Skr ipsi

Oleh :
SITI FADHILAH
NPM : 0725010042
Kepada

FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS PEMBANGUNAN NASIONAL “VETERAN” J AWA TIMUR
SURABAYA
2011

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

TOKSISITAS NEMATODA ENTOMOPATOGEN (Steinernema spp)
HASIL BIAKAN PADA MEDIA KUNING TELUR TERHADAP HAMA
TANAMAN SAWI (Spodoptera litura)
Disusun oleh:
Siti Fadhilah
0625010033
Telah diper tahankan dihadapan dan diter ima oleh Tim Penguji Skr ipsi
Pr ogram Studi Agroteknologi Fakultas Per tanian Univer sitas Pembangunan
Nasional “Veter an” J awa Timur pada tanggal: 21 Desember 2011

Pembimbing
1.Pembimbing Utama

Tim Penguji

1. Ir . Wiwin Windriyanti, MP.
Ir. Wiwin Windr iyanti, MP.
2. Pembimbing Pendamping
2. Ir . Nugrohorini, MP.

Ir. Nugr ohor ini, MP.
3. Ir . Mulyadi, MS.

4. Ir . Sr i Rahayuningtias, MP.
Mengetahui:

Dekan Fakultas Pertanian

Dr. Ir. Ramdan Hidayat, MS.

Ketua Pr ogdi Agr oteknologi

Ir. Mulyadi, MS.

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

Telah Direvisi
Tanggal 21 Desember 2011

Pembimbing Utama

Ir. Wiwin Windr iyanti, MP.

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

Pembimbing Pendamping

Ir. Nugrohorini, MP.

KATA PENGANTAR

Dengan segala puji syukur kehadirat ALLAH SWT atas rahmat dan
karunianya,

sehingga

penulisan

skripsi

dengan

judul:

TOKSISITAS

NEMATODA ENTOMOPATOGEN (Steinernema spp) HASIL BIAKAN
PADA MEDIA KUNING TELUR TERHADAP HAMA TANAMAN SAWI
(Spodoptera litura) dapat dielesaikan.
Penulisan skripsi ini merupakan salah satu persyaratan untuk memperoleh
gelar Sarjana di Fakultas Pertanian, Universitas Pembangunan Nasional “Veteran”
Jawa Timur.
Pada kesempatan ini saya menyampaikan ucapan terima kasih kepada:
1. Ir. Wiwin Windriyanti, MP. selaku Dosen Pembimbing Utama yang telah
memberikan saran, petunjuk, pengarahan dan bimbingan penyusunan
skripsi.
2. Ir. Nugrohorini, MP. selaku Dosen Pembimbing kedua yang telah banyak
memberikan pengarahan dan bimbingan dalam pembuatan skripsi.

3. Dr. Ir. Ramdan Hidayat, MS. selaku Dekan Fakultas Pertanian UPN
“Veteran”Jawa Timur.
4. Ir. Mulyadi, MS. selaku ketua kajur Fakultas Pertanianupn “Veteran”
Jawa Timur.
5. Ayahanda tercinta terima kasih atas dukungan moral, semangat dan
bimbingan.

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

i

6. Teman-teman Agroteknologi angkatan 07 dan senior 06 yang selaku
memberi motivasi.
7. Kakak – kakakku yang tercinta terima kasih atas dukungan dan memberi
semangat tiada hentinya.
8. Temen – temen kost MA 1 FNo. 10 yang selalu memberi dukungan dan
motivasi.
9. Special tanks to for Arif darmawan yang selalu memberi semangat.

Penyusunan skripsi ini, penulis menyadari masih banyak kekurangan dan
kekhilafan dalam hal penulisan, semoga laporan ini bermanfaat bagi
perkembangan ilmu pengetahuan di Fakultas Pertanian.

Surabaya, 12 Desember 2011

Penulis

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

ii

DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR .................................................................................

i

DAFTAR ISI ...............................................................................................

iii

DAFTAR GAMBAR ...................................................................................

v

DAFTAR TABEL ........................................................................................

vi

DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................

viii

I. PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang ..........................................................................

1

1.2. Perumusan Masalah ..................................................................

3

1.3. Tujuan Penelitian ......................................................................

3

II. TINJ AUAN PUSTAKA
2.1. Klaifikasi Botani .......................................................................

4

2.2. Klasifikasi Hama Ulat Grayak (Spodoptera litura) ....................

5

2.3. Morfologi Ulat Grayak (Spodoptera litura) ...............................

6

2.3.1. Telur ...............................................................................

6

2.3.2. Larva ...............................................................................

7

2.3.3. Pupa ................................................................................

8

2.3.4. Imago ..............................................................................

8

2.4. Klasifikasi Nematoda Entomopatogen Steinernema spp. ...........

9

2.4.1. Biologi dan Siklus hidup Nematoda Entomopatogen .......

10

2.4.2. Bakteri Simbion Nematoda Entomopatogen
Steinernema spp ..............................................................

12

2.4.3. Mekanisme Patogenesitas Nematoda Entomopatogen ......

13

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

iii

2.5. Kandungan Kuning Telur ..........................................................

14

2. 6. Hipotesis ..................................................................................

15

III. BAHAN ALAT DAN METODE PENELITIAN
3.1. Tempat dan Waktu .........................................................................

16

3.2. Bahan .............................................................................................

16

3.3. Alat ................................................................................................

16

3.4. Pelaksanaan Penelitian ...................................................................

17

3.4.1. Pembuatan Media Biakan Nematoda Entomopatogen ............

17

3.4.2. Pembuatan Media Cair Yeast Salt .........................................

18

3.4.3. Inokulasi Bakteri Simbion dan Nematoda Entomopatogen pada
Media Spon ..........................................................................
3.4.4. Panen Nematoda Entomopatogen .........................................

18
20

3.5. Aplikasi Nematoda Entomopatogen pada Larva Spodoptera litura
Instar Dua .....................................................................................
3.6. Rancangan Percobaan ...................................................................

21
22

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN
I. Hasil Analisis Statistik Kematian Larva Spodoptera litura
Hari Setelah Aplikasi HSA ........................................................

24

4.1.Histogram Mortalitas Larva Spodoptera litura Akibat Serangan
Steinernema spp.Isolat Lokal ...............................................
26
II. Pembahasan ..............................................................................

27

V. KESIMPULAN
A. KESIMPULAN ............................................................................
B. SARAN ......................................................................................

33
33

DAFTAR PUSTAKA .................................................................................

34

LAMPIRAN ................................................................................................

39

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

iv

DAFTAR GAMBAR

No

Teks

Halaman

1. Telur (Spodoptera litura) .................................................................

6

2. Larva Instar 2 (Spodoptera litura.) ...................................................

6

3. Larva (Spodoptera litura) Instar 3 dan 4 ...........................................

7

4. Morfologi (Spodoptera litura) Pupa, Imago Jantan dan Betina...........

8

5. Morfologi nematoda Steinernema spp. ..............................................

10

6. Siklus Hidup Juvenil Infektif Instar Dua ..........................................

11

7. Media Kuning Telur dalam Tabung Erlenmeyer ...............................

14

8. Bakteri Xenorhabdus spp. yang di Shaker Selama 24 Jam .................

16

9. Media Kuning Telur yang di Tumbuhi Nematoda Entomopatogen ....

17

10. Tahapan Panen Nematoda Entomopatogen Steinernema spp. ............

18

11. Memasukkan Larva Spodoptera litura kedalam Vial ........................

19

12. Denah Percobaan Penelitian ..............................................................

20

13. Histogram Mortalitas Larva Spodoptera litura Akibat Serangan spp. Isolat
Steinernema Lokal ............................................................................
22
14. Larva yang Sehat dan Larva yang Tidak Sehat yang Sudah Terserang
Steinernema spp. ..............................................................................

29

15. Larva Spodoptera litura yang Terserang Steinernema spp.
Tinggal Kutikula ..............................................................................

30

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

v

DAFTAR TABEL
1. Hasil Analisis Statistik Kematian Larva Spodoptera litura HSA
(Hari Setelah Aplikasi) ...............................................................

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

vi

21

DAFTAR LAMPIRAN
1. Analisis Sidik Ragam Kematian Larva Spodoptera litura pada
Pengamatan Jam ke 24 .....................................................................

36

2. Analisis Sidik Ragam Kematian Larva Spodoptera litura pada
Pengamatan Jam ke 48 .....................................................................

36

3. Analisis Sidik Ragam Kematian Larva Spodoptera litura pada
Pengamatan Jam ke 72 .....................................................................

37

4. Analisis Sidik Ragam Kematian Larva Spodoptera litura pada
Pengamatan Jam ke 96 .....................................................................

37

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

vii

ABSTRACK

Tanaman sawi yang terserang oleh hama Spodoptera litura diindonesia
sangat merugikan. Selama ini pengendalian yang dilakukan dengan pestisida
kimia yang berdampak negatif baik bagi lingkungan maupun manusia.
Pengendalian agensia hayati merupakan salah satu pengendalian yang rama
lingkungan dan peluang untuk dikembangkan di Indonesia.
Mekanisme larva S. litura saat keluar dari telur, larva hidup bergerombol
disekitar daun sampai dengan instar ke-3, pada fase ini larva memakan daun
sampai instar ke- 4 kemudian larva menyebar ke bagian tanaman atau tanaman
sekitarnya sampai meninggalkan sisa - sisa epidermis bagian atas atau transparan
sampai tinggal tulang – tulang daun.
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Kesehatan Tanaman UPN
“Veteran” Surabaya Jawa Timur, penelitian ini dimulai pada bulan Mei sampai
Juli 2011. Penyebab kematian larva S. litura yang disebabkan nematoda
entomopatogen yaitu ketika nematoda mempenetrasi atau melukai secara
langsung kedalam tubuh serangga inang, maka nematoda akan mengeluarkan
toksin yaitu bakteri Xenorhabdus spp. didalam tubuh larva yang menyebabkan
kematian dengan cepat 24-48 jam. Tingkat kematian larva Spodoptera. litura
akibat serangan nematoda entomopatogen Steinernema spp. dari beberapa
konsentrasi yaitu: 50, 100, 200, 400 dan 800 IJ/ml bahwa pada konsentrasi 800
IJ/ml menunjukkan yang tertinggi yaitu 90% pada hari ke 4 setelah aplikasi
(HSA).

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

1

I. PENDAHULUAN

A. Tanaman Sawi
1. Klasifikasi Tanaman Sawi
Menurut Margiyanto (2007) tanaman sawi (Brassica juncea L.) masih satu
famili dengan kubis - krop, bunga kul, broccoli dan lobak yakni famili cruciferae
(brassicaceae) oleh karena itu sifat morfologis tanamannya hampir sama, terutama
pada sistem perakaran, struktur batang, bunga, buah (polong) maupun bijinya.
Sawi termasuk dalam kelompok tanaman sayuran daun, sawi hijau bisa
dikonsumsi dalam bentuk mentah sebagai lalapan maupun dalam bentuk olahan
dalam berbagai macam masakan. Klasifikasi tanaman sawi sebagai berikut :
Divisi

: Spermatophyta

Kelas

: Angiospermae

Sub-kelas

: Dicotyledonae

Ordo

: Papavorales

Famili

: Brassicaceae

Genus

: Brassica

Spesies

: Brassica juncea L.

B. Hama Ulat Grayak Spodoptera litura
1. Klasifikasi Hama Ulat Grayak Spodoptera litura
Menurut Santoso (2009) hama Spodoptera litura

merupakan hama

penting pada tanaman kelompok Brassicaceae. Ulat ini dikenal dengan nama
latin Spodoptera litura. S. litura merupakan hama dalam budidaya tanaman sawi,
Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

2

larva yang bersembunyi dalam tanah untuk menghindari sinar matahari. Hama ini
bersifat polyphag dengan reproduksi tinggi dan penyebarannya sangat luas seperti
dibeberapa negara Asia, Africa, Australia dan New Zealand.
Sistematika hama ulat grayak S. litura adalah sebagai berikut (Hartati,
2009) :
Kingdom

:Animalia

Filum

:Arthropoda

Kelas

:Insekta

Ordo

:Lepidoptera

Famili

:Noctuidae

Subfamili

:Amphipyrinae

Genus

:Spodoptera

Spesies

: Spodoptera litura F

2. Morfologi Ulat Gr ayak Spodoptera litura
Menurut Abel (2010) hama ulat grayak S. litura mempunyai siklus hidup
sebagai berikut: telur berbentuk bulat dengan bagian datar melekat pada daun
yang terletak dalam kelompok, tiap kelompok tersusun dari 2 - 4 lapisan masing masing berisi 25 - 500 butir dan kelompok telur tertutup oleh bulu – bulu pendek
berwarna putih seperti mutiara yang mempunyai umur 3 - 4 hari (Gambar 1).

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

3

Gambar 1. Telur S. litura (Anonim, 2008)
Larva S. litura mempunyai 4 instar, rata – rata mempunyai umur 20 - 26
hari. Larva instar pertama tubuh larva berwarna hijau kuning panjang 2,00 - 2,74
mm dan tubuh berbulu – bulu halus, kepala berwarna hitam dengan lebar 0,2 - 0,3
mm (Gambar 2). Larva instar kedua tubuh yang berwarna hijau dengan panjang
3,75 - 10,00 mm. Bulu – bulunya tidak terlihat dan pada ruas abdomen pertama
terdapat garis hitam meningkat pada bagian dorsal terdapat garis putih memanjang
dari toraks hingga ujung abdomen (Silihi, 2010)

Gambar 2. Larva Instar 2 S. litura. (Zunida, 2011)

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

4

Yaksan (2010) melaporkan bahwa larva instar ketiga memiliki panjang tubuh
8,0 – 15,0 mm dengan lebar kepala 0,5 – 0,6 mm, pada bagian kiri dan kanan
abdomen terdapat garis zig - zag berwarna putih dan bulatan hitam sepanjang tubuh.
Instar keempat panjang tubuh 13 - 20 mm, warna bervariasi yaitu hitam, hijau,
keputihan, hijau kekuningan atau hijau keunguan (Gambar 3).

(a)

(b)

Gambar 3. Larva S. litura. (Anonim 2009)
(a) Larva Instar 3 (b) Larva Instar 4
Penelitian yang pernah dilakukan oleh Marwoto dan Suharsono (2008)
bahwa larva berkepompong dalam tanah kemudian membentuk pupa yang
berwarna coklat kemerahan dengan panjang sekitar 1,6 cm dan berumur 8 – 11
hari. Pabbage, Adnan dan Pratiwi (2006) melaporkan bahwa sayap ngengat bagian
depan berwarna coklat atau keperak - perakan dan juga ditemukan spot - spot
berwarna hitam dengan strip - strip putih dan kuning. Sayap belakang biasanya
berwarna putih, imago jantan memiliki panjang tubuh 1,7 cm dan imago betina
1,4 cm umur imago berkisar 4 – 6 hari (Gambar 4).

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

5

(a)

(b)

(c)

Gambar 4. Morfologi Spodoptera litura. (Anonim, 1999)
(a) Pupa (b) Imago Jantan (c) Imago Betina
3. Gejala Serangan
Gejala yang ditimbulkan larva S. litura dengan ngengat meletakkan telur
dibawah daun sejak tanaman menghasilkan 4 – 5 daun. Saat keluar dari telur,
larva hidup bergerombol disekitar daun sampai dengan instar ke-3, pada fase ini
larva memakan daun sampai instar ke- 4 kemudian larva menyebar ke bagian
tanaman atau tanaman sekitarnya sampai meninggalkan sisa - sisa epidermis
bagian atas atau transparan sampai tinggal tulang - tulang daun dan larva yang
dewasa memakan tulang daun, hama ini juga memakan tunas dan bunga (Rauf,
1999).

A. Nematoda Entomopatogen Steinernema spp.
Menurut Wales (2011) menyatakan nematoda berasal dari bahasa Yunani
yaitu won ode artinya cacing. Nematoda entomopatogen (NEP) adalah organisme
yang memparasit tubuh serangga sehingga menyebabkan kematian pada serangga
inang.
Indonesia memiliki potensi agensia hayati yang banyak diantaranya yaitu
pengendalian hayati, merupakan upaya pengendalian hama dengan memanfaatkan
Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

6

musuh alami serangga sehingga mampu menekan kerusakan yang ditimbulkan
oleh organisme tersebut. Musuh alami hama yang ada di lapang jumlahnya sangat
banyak baik dari golongan serangga, jamur, bakteri maupun nematoda. Salah
satunya nematoda entomopatogen Steinernema spp. yang digunakan sebagai
agensia hayati untuk pengendalian hama utama tanaman sawi, nematoda parasit
dapat dijumpai disetiap jengkal tanah di indonesia mulai dari pantai sampai
pegunungan (Sulistyanto, 2009).
Menurut pendapat Sanjaya (2005) salah satu nematoda entomopatogen
yang sudah banyak dikenal adalah Steinernema spp. bersifat mempunyai inang
yang luas dan mampu membunuh hama dalam waktu yang relatif singkat yaitu 24
- 48 jam. Klasifikasi nematoda sebagai berikut:
Filum

: Nematelminthes

Kelas

: Secerneteae Syn Phasmidae

Ordo

:Dorylaimida

Famili

:Steinernematidae

Genus

:Steinernema

Spesies

: Steinernema spesies.

1. Biologi dan Siklus hidup Nematoda Entomopatogen.
Nematoda Entomopatogen Steinernema spp. paling banyak terdapat di
tanah selain itu mampu hidup di permukaan daun, tempat-tempat yang banyak
mengandung bahan organik, air tawar dan air laut. (Gambar 5) di dalam tanah
nematoda hidup dengan cara memanfaatkan bahan organik atau memakan

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

7

serangga – serangga atau organisme lain. Nematoda entomopatogen dapat
berkembang biak didalam tubuh serangga secara cepat yaitu dapat menghasilkan 2
sampai 3 generasi. Siklus hidup nematoda dari telur menjadi dewasa memerlukan
waktu kurang lebih 14 hari. (Fedrianto dan Riyanto, 2009)

Gambar 5. Morfologi nematoda Steinernema spp. (Anonim 2011)
Seperti yang diutarakan Soeyoko (1999) apabila terdapat nutrisi yang
melimpah maka siklus hidupnya nematoda bisa lebih cepat dan sebaliknya apabila
tidak tersedia nutrisi yang cukup maka daur hidup nematoda bisa lebih lama.
Organisme ini bisa bertahan di dalam tanah, dalam

jangka waktu tertentu.

Steinernema spp. akan melakukan migrasi ke tempat lain apabila tidak ada
persediaan makanan yang cukup. Perpindahan nematoda dari suatu tempat ke
tempat lain melalui bantuan air, angin atau terbawa oleh alat-alat pertanian.
Nematoda Entomoatogen Steinernema spp. bersifat amphigonus yaitu
mempunyai individu jantan dan betina serta dapat kawin untuk menghasilkan
generasi baru. Telur dapat diletakkan didalam lingkungan atau di dalam tubuh
serangga inang. Juvenil infektif biasanya melakukan ganti kulit didalam telur

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

8

yang ditetaskan dari telur adalah infektif juvenil stadia kedua (Gambar 6),
nematoda mengalami empat kali stadia sebelum menjadi dewasa. Nematoda ini
berkembang sangat cepat menjadi dewasa, kawin dan menghasilkan telur. (Anaf,
2009)

Gambar 6. Siklus Hidup Jufenil Infektif Instar Dua Steinernema spp.
(Fedriyanto dan Riyanto, 2009)
Infeksi dilakukan pada stadium larva instar III atau juvenil infektif (JI)
terjadi melalui mulut, anus, spirakel, atau penetrasi langsung membran
intersegmental yang lunak. Setelah mencapai haemocoel serangga maka, bakteri
simbion yang dibawa akan dilepaskan ke dalam haemolim untuk berkembang biak
dan memproduksi toksin yang mematikan serangga. Nematoda sendiri mampu
menghasilkan toksin yang mematikan. Sehingga serangga yang terinfeksi dapat
mati dalam waktu 24 – 48 jam setelah infeksi. (Anonim, 2010)
2. Bakteri Simbion Nematoda Entomopatogen Steinernema spp.
Menurut Ratnaningrum (2008) nematoda entomopatogen Steinernema
spp. memiliki hubungan yang khas dengan satu jenis bakteri tertentu, yaitu bakteri

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

9

Xenorhabdus spp. Bakteri gram negatif yang bersimbiosis dengan nematoda
entomopatogen Steinernema spp. nematoda dan bakteri bersifat mutualisme
(saling menguntungkan) dimana nematoda mendapatkan nutrisi yang dihasilkan
oleh bakteri yaitu protein sedangkan bakteri merasa terlindungi oleh nematoda.
Simbiosis tersebut terdapat didalam intestine nematoda dan berperan untuk
mengendalikan serangan hama.
Keuntungan satu sama lain dengan bakteri Xenorhabdus yaitu dimana
bakteri tidak dapat hidup kalau tidak ada nematoda. Hubungan mutualistik ini
memberikan beberapa keuntungan bagi nematoda di antaranya yaitu: dapat
membunuh inang dengan cepat. Serta menyediakan nutrisi dan lingkungan yang
cocok bagi perkembangan nematoda. Bakteri simbion juga mampu memproduksi
senyawa anti biotik yang dapat menghambat perkembangan mikro organisme
sekunder yang ada dalam tubuh inang. Bagi bakteri simbion nematoda dapat
melindungi bakteri dari kondisi ekstrim. (Wartono, 2009)
Menurut pendapat Kusuma (2008) Nematoda entomopatogen Steinernema
spp. bersimbiosis dengan bakteri Xenorhabdus spp. didalam tubuhnya yang
besifat racun. Bakteri tersebut mempunyai ciri – ciri bentuk morfologi koloni
bulat mengkilat cembung tetapi agak rata, bakteri tersebut yang dapat mematikan
serangga dari ordo Lepidoptera seperti S.litura. Jika nematoda langsung
mempenetrasi serangga inang maka nematoda akan lebih cepat mengeluarkan
racun kedalam tubuh serangga inang.

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

10

3. Mekanisme Patogenesitas Nematoda Entomopatogen
Mekanisme patogenesitas nematoda entomopatogen terhadap hama
melalui tiga tahapan yaitu: invasi, evasi, dan toksikogenitas. Invasi adalah
nematoda menyerang hama dengan cara nematoda masuk ke dalam tubuh larva
serangga melalui lubang alami seperti spirakel, anus, atau termakan oleh larva
serangga. Evasi merupakan proses nematoda melepaskan bakteri simbionnya ke
dalam tubuh larva serangga inang. Toksikogenitas yaitu dimana bakteri simbion
yang dikeluarkan Steinernema spp. menyebabkan kelumpuhan syaraf tubuh pada
otot – otot serangga inang yang menyebabkan kematian. (Chaerani dan Nurbaeti
2007)
Dalam waktu 1 - 2 hari larva mati larva yang mati biasanya ditunjukkan
dengan gejala yang khas yaitu warna permukaan tubuh larva sehat yang semula
berwarna hijau terang akan berubah coklat kekuningan semakin lama warna tubuh
menjadi coklat kehitaman, tubuh larva lembek dan sedikit mengeluarkan cairan
tetapi tidak berbau busuk. Setelah larva mati nematoda memperbanyak diri
dengan memanfaatkan nutrisi yang ada di dalam tubuh larva. Selanjutnya induk
nematoda menghasilkan 2 - 3 generasi baru di dalam tubuh inang. Setelah nutrisi
dalam tubuh larva habis, maka nematoda melakukan migrasi keluar dari tubuh
larva dan mencari inang lain. (Uhan, 2008)

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

11

4. Kandungan Kuning Telur
Menurut Aisah (2009) kuning telur atau dalam bahasa inggris disebut
dengan egg yolk merupakan sumber utama dari beberapa vitamin dan mineral.
Kuning telur juga banyak mengandung lemak, kolesterol dan protein. Perlu
diketahui, setiap kuning telur yang masih mentah mengandung 355 kalori,
sebagaimana diketahui bahwa bobot rata-rata satu kuning telur adalah 20 gr.
Selain dapat menambah darah dan kandungan vitamin A pada kuning telur juga
dapat mengobati sakit tenggorokan, batuk, luka paru-paru, ginjal dan kencing
manis. Adapun nilai gizi kuning telur sebagai berikut:
Table 1. Kandungan Kuning Telur dalam Satu Butir Telur Ayam Kampung
Bahan

Nilai

Satuan

Air

5,7

gr

Protein

10,8

gr

Karbohidrat

0,7

gr

Vitamin B20

23

mg

Vitamin B10

2

mg

Besi

100

mg

Asam Nikotenat

0,2

mg

Fosfor

0,2

mg

Kalsium

147

mg

Potasium

17

mg

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

12

Asam Pantotenat

2

gr

Sulfat

149

mg

Vitamin A

311

mg

Vitamin D

100

mg

D. Hipotesis
Semakin tinggi konsentrasi Steinernema spp. semakin tinggi toksisitas
nematoda terhadap hama S. litura.

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

1

II. TINJ AUAN PUSTAKA

A. Tanaman Sawi
1. Klasifikasi Tanaman Sawi
Menurut Margiyanto (2007) tanaman sawi (Brassica juncea L.) masih satu
famili dengan kubis - krop, bunga kul, broccoli dan lobak yakni famili cruciferae
(brassicaceae) oleh karena itu sifat morfologis tanamannya hampir sama, terutama
pada sistem perakaran, struktur batang, bunga, buah (polong) maupun bijinya.
Sawi termasuk dalam kelompok tanaman sayuran daun, sawi hijau bisa
dikonsumsi dalam bentuk mentah sebagai lalapan maupun dalam bentuk olahan
dalam berbagai macam masakan. Klasifikasi tanaman sawi sebagai berikut :
Divisi

: Spermatophyta

Kelas

: Angiospermae

Sub-kelas

: Dicotyledonae

Ordo

: Papavorales

Famili

: Brassicaceae

Genus

: Brassica

Spesies

: Brassica juncea L.

B. Hama Ulat Grayak Spodoptera litura
1. Klasifikasi Hama Ulat Grayak Spodoptera litura
Menurut Santoso (2009) hama Spodoptera litura

merupakan hama

penting pada tanaman kelompok Brassicaceae. Ulat ini dikenal dengan nama
latin Spodoptera litura. S. litura merupakan hama dalam budidaya tanaman sawi,

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

2

larva yang bersembunyi dalam tanah untuk menghindari sinar matahari. Hama ini
bersifat polyphag dengan reproduksi tinggi dan penyebarannya sangat luas seperti
dibeberapa negara Asia, Africa, Australia dan New Zealand.
Sistematika hama ulat grayak S. litura adalah sebagai berikut (Hartati,
2009) :
Kingdom

:Animalia

Filum

:Arthropoda

Kelas

:Insekta

Ordo

:Lepidoptera

Famili

:Noctuidae

Subfamili

:Amphipyrinae

Genus

:Spodoptera

Spesies

: Spodoptera litura F

2. Morfologi Ulat Gr ayak Spodoptera litura
Menurut Abel (2010) hama ulat grayak S. litura mempunyai siklus hidup
sebagai berikut: telur berbentuk bulat dengan bagian datar melekat pada daun
yang terletak dalam kelompok, tiap kelompok tersusun dari 2 - 4 lapisan masing masing berisi 25 - 500 butir dan kelompok telur tertutup oleh bulu – bulu pendek
berwarna putih seperti mutiara yang mempunyai umur 3 - 4 hari (Gambar 1).

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

3

Gambar 1. Telur S. litura (Anonim, 2008)
Larva S. litura mempunyai 4 instar, rata – rata mempunyai umur 20 - 26
hari. Larva instar pertama tubuh larva berwarna hijau kuning panjang 2,00 - 2,74
mm dan tubuh berbulu – bulu halus, kepala berwarna hitam dengan lebar 0,2 - 0,3
mm (Gambar 2). Larva instar kedua tubuh yang berwarna hijau dengan panjang
3,75 - 10,00 mm. Bulu – bulunya tidak terlihat dan pada ruas abdomen pertama
terdapat garis hitam meningkat pada bagian dorsal terdapat garis putih memanjang
dari toraks hingga ujung abdomen (Silihi, 2010)

Gambar 2. Larva Instar 2 S. litura. (Zunida, 2011)

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

4

Yaksan (2010) melaporkan bahwa larva instar ketiga memiliki panjang tubuh
8,0 – 15,0 mm dengan lebar kepala 0,5 – 0,6 mm, pada bagian kiri dan kanan
abdomen terdapat garis zig - zag berwarna putih dan bulatan hitam sepanjang tubuh.
Instar keempat panjang tubuh 13 - 20 mm, warna bervariasi yaitu hitam, hijau,
keputihan, hijau kekuningan atau hijau keunguan (Gambar 3).

(a)

(b)

Gambar 3. Larva S. litura. (Anonim 2009)
(a) Larva Instar 3 (b) Larva Instar 4
Penelitian yang pernah dilakukan oleh Marwoto dan Suharsono (2008)
bahwa larva berkepompong dalam tanah kemudian membentuk pupa yang
berwarna coklat kemerahan dengan panjang sekitar 1,6 cm dan berumur 8 – 11
hari. Pabbage, Adnan dan Pratiwi (2006) melaporkan bahwa sayap ngengat bagian
depan berwarna coklat atau keperak - perakan dan juga ditemukan spot - spot
berwarna hitam dengan strip - strip putih dan kuning. Sayap belakang biasanya
berwarna putih, imago jantan memiliki panjang tubuh 1,7 cm dan imago betina
1,4 cm umur imago berkisar 4 – 6 hari (Gambar 4).

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

5

(a)

(b)

(c)

Gambar 4. Morfologi Spodoptera litura. (Anonim, 1999)
(a) Pupa (b) Imago Jantan (c) Imago Betina
3. Gejala Serangan
Gejala yang ditimbulkan larva S. litura dengan ngengat meletakkan telur
dibawah daun sejak tanaman menghasilkan 4 – 5 daun. Saat keluar dari telur,
larva hidup bergerombol disekitar daun sampai dengan instar ke-3, pada fase ini
larva memakan daun sampai instar ke- 4 kemudian larva menyebar ke bagian
tanaman atau tanaman sekitarnya sampai meninggalkan sisa - sisa epidermis
bagian atas atau transparan sampai tinggal tulang - tulang daun dan larva yang
dewasa memakan tulang daun, hama ini juga memakan tunas dan bunga (Rauf,
1999).

A. Nematoda Entomopatogen Steinernema spp.
Menurut Wales (2011) menyatakan nematoda berasal dari bahasa Yunani
yaitu won ode artinya cacing. Nematoda entomopatogen (NEP) adalah organisme
yang memparasit tubuh serangga sehingga menyebabkan kematian pada serangga
inang.
Indonesia memiliki potensi agensia hayati yang banyak diantaranya yaitu
pengendalian hayati, merupakan upaya pengendalian hama dengan memanfaatkan

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

6

musuh alami serangga sehingga mampu menekan kerusakan yang ditimbulkan
oleh organisme tersebut. Musuh alami hama yang ada di lapang jumlahnya sangat
banyak baik dari golongan serangga, jamur, bakteri maupun nematoda. Salah
satunya nematoda entomopatogen Steinernema spp. yang digunakan sebagai
agensia hayati untuk pengendalian hama utama tanaman sawi, nematoda parasit
dapat dijumpai disetiap jengkal tanah di indonesia mulai dari pantai sampai
pegunungan (Sulistyanto, 2009).
Menurut pendapat Sanjaya (2005) salah satu nematoda entomopatogen
yang sudah banyak dikenal adalah Steinernema spp. bersifat mempunyai inang
yang luas dan mampu membunuh hama dalam waktu yang relatif singkat yaitu 24
- 48 jam. Klasifikasi nematoda sebagai berikut:
Filum

: Nematelminthes

Kelas

: Secerneteae Syn Phasmidae

Ordo

:Dorylaimida

Famili

:Steinernematidae

Genus

:Steinernema

Spesies

: Steinernema spesies.

1. Biologi dan Siklus hidup Nematoda Entomopatogen.
Nematoda Entomopatogen Steinernema spp. paling banyak terdapat di
tanah selain itu mampu hidup di permukaan daun, tempat-tempat yang banyak
mengandung bahan organik, air tawar dan air laut. (Gambar 5) di dalam tanah
nematoda hidup dengan cara memanfaatkan bahan organik atau memakan

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

7

serangga – serangga atau organisme lain. Nematoda entomopatogen dapat
berkembang biak didalam tubuh serangga secara cepat yaitu dapat menghasilkan 2
sampai 3 generasi. Siklus hidup nematoda dari telur menjadi dewasa memerlukan
waktu kurang lebih 14 hari. (Fedrianto dan Riyanto, 2009)

Gambar 5. Morfologi nematoda Steinernema spp. (Anonim 2011)
Seperti yang diutarakan Soeyoko (1999) apabila terdapat nutrisi yang
melimpah maka siklus hidupnya nematoda bisa lebih cepat dan sebaliknya apabila
tidak tersedia nutrisi yang cukup maka daur hidup nematoda bisa lebih lama.
Organisme ini bisa bertahan di dalam tanah, dalam

jangka waktu tertentu.

Steinernema spp. akan melakukan migrasi ke tempat lain apabila tidak ada
persediaan makanan yang cukup. Perpindahan nematoda dari suatu tempat ke
tempat lain melalui bantuan air, angin atau terbawa oleh alat-alat pertanian.
Nematoda Entomoatogen Steinernema spp. bersifat amphigonus yaitu
mempunyai individu jantan dan betina serta dapat kawin untuk menghasilkan
generasi baru. Telur dapat diletakkan didalam lingkungan atau di dalam tubuh
serangga inang. Juvenil infektif biasanya melakukan ganti kulit didalam telur

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

8

yang ditetaskan dari telur adalah infektif juvenil stadia kedua (Gambar 6),
nematoda mengalami empat kali stadia sebelum menjadi dewasa. Nematoda ini
berkembang sangat cepat menjadi dewasa, kawin dan menghasilkan telur. (Anaf,
2009)

Gambar 6. Siklus Hidup Jufenil Infektif Instar Dua Steinernema spp.
(Fedriyanto dan Riyanto, 2009)
Infeksi dilakukan pada stadium larva instar III atau juvenil infektif (JI)
terjadi melalui mulut, anus, spirakel, atau penetrasi langsung membran
intersegmental yang lunak. Setelah mencapai haemocoel serangga maka, bakteri
simbion yang dibawa akan dilepaskan ke dalam haemolim untuk berkembang biak
dan memproduksi toksin yang mematikan serangga. Nematoda sendiri mampu
menghasilkan toksin yang mematikan. Sehingga serangga yang terinfeksi dapat
mati dalam waktu 24 – 48 jam setelah infeksi. (Anonim, 2010)
2. Bakter i Simbion Nematoda Entomopatogen Steinernema spp.
Menurut Ratnaningrum (2008) nematoda entomopatogen Steinernema
spp. memiliki hubungan yang khas dengan satu jenis bakteri tertentu, yaitu bakteri

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

9

Xenorhabdus spp. Bakteri gram negatif yang bersimbiosis dengan nematoda
entomopatogen Steinernema spp. nematoda dan bakteri bersifat mutualisme
(saling menguntungkan) dimana nematoda mendapatkan nutrisi yang dihasilkan
oleh bakteri yaitu protein sedangkan bakteri merasa terlindungi oleh nematoda.
Simbiosis tersebut terdapat didalam intestine nematoda dan berperan untuk
mengendalikan serangan hama.
Keuntungan satu sama lain dengan bakteri Xenorhabdus yaitu dimana
bakteri tidak dapat hidup kalau tidak ada nematoda. Hubungan mutualistik ini
memberikan beberapa keuntungan bagi nematoda di antaranya yaitu: dapat
membunuh inang dengan cepat. Serta menyediakan nutrisi dan lingkungan yang
cocok bagi perkembangan nematoda. Bakteri simbion juga mampu memproduksi
senyawa anti biotik yang dapat menghambat perkembangan mikro organisme
sekunder yang ada dalam tubuh inang. Bagi bakteri simbion nematoda dapat
melindungi bakteri dari kondisi ekstrim. (Wartono, 2009)
Menurut pendapat Kusuma (2008) Nematoda entomopatogen Steinernema
spp. bersimbiosis dengan bakteri Xenorhabdus spp. didalam tubuhnya yang
besifat racun. Bakteri tersebut mempunyai ciri – ciri bentuk morfologi koloni
bulat mengkilat cembung tetapi agak rata, bakteri tersebut yang dapat mematikan
serangga dari ordo Lepidoptera seperti S.litura. Jika nematoda langsung
mempenetrasi serangga inang maka nematoda akan lebih cepat mengeluarkan
racun kedalam tubuh serangga inang.

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

10

3. Mekanisme Patogenesitas Nematoda Entomopatogen
Mekanisme patogenesitas nematoda entomopatogen terhadap hama
melalui tiga tahapan yaitu: invasi, evasi, dan toksikogenitas. Invasi adalah
nematoda menyerang hama dengan cara nematoda masuk ke dalam tubuh larva
serangga melalui lubang alami seperti spirakel, anus, atau termakan oleh larva
serangga. Evasi merupakan proses nematoda melepaskan bakteri simbionnya ke
dalam tubuh larva serangga inang. Toksikogenitas yaitu dimana bakteri simbion
yang dikeluarkan Steinernema spp. menyebabkan kelumpuhan syaraf tubuh pada
otot – otot serangga inang yang menyebabkan kematian. (Chaerani dan Nurbaeti
2007)
Dalam waktu 1 - 2 hari larva mati larva yang mati biasanya ditunjukkan
dengan gejala yang khas yaitu warna permukaan tubuh larva sehat yang semula
berwarna hijau terang akan berubah coklat kekuningan semakin lama warna tubuh
menjadi coklat kehitaman, tubuh larva lembek dan sedikit mengeluarkan cairan
tetapi tidak berbau busuk. Setelah larva mati nematoda memperbanyak diri
dengan memanfaatkan nutrisi yang ada di dalam tubuh larva. Selanjutnya induk
nematoda menghasilkan 2 - 3 generasi baru di dalam tubuh inang. Setelah nutrisi
dalam tubuh larva habis, maka nematoda melakukan migrasi keluar dari tubuh
larva dan mencari inang lain. (Uhan, 2008)

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

11

4. Kandungan Kuning Telur
Menurut Aisah (2009) kuning telur atau dalam bahasa inggris disebut
dengan egg yolk merupakan sumber utama dari beberapa vitamin dan mineral.
Kuning telur juga banyak mengandung lemak, kolesterol dan protein. Perlu
diketahui, setiap kuning telur yang masih mentah mengandung 355 kalori,
sebagaimana diketahui bahwa bobot rata-rata satu kuning telur adalah 20 gr.
Selain dapat menambah darah dan kandungan vitamin A pada kuning telur juga
dapat mengobati sakit tenggorokan, batuk, luka paru-paru, ginjal dan kencing
manis. Adapun nilai gizi kuning telur sebagai berikut:
Table 1. Kandungan Kuning Telur dalam Satu Butir Telur Ayam Kampung
Bahan

Nilai

Satuan

Air

5,7

gr

Protein

10,8

gr

Karbohidrat

0,7

gr

Vitamin B20

23

mg

Vitamin B10

2

mg

Besi

100

mg

Asam Nikotenat

0,2

mg

Fosfor

0,2

mg

Kalsium

147

mg

Potasium

17

mg

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

12

Asam Pantotenat

2

gr

Sulfat

149

mg

Vitamin A

311

mg

Vitamin D

100

mg

D. Hipotesis
Semakin tinggi konsentrasi Steinernema spp. semakin tinggi toksisitas
nematoda terhadap hama S. litura.

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

1

III. METODE PENELITIAN

A. Tempat dan Waktu
Penelitian dilaksanakan di Laboratorium Kesehatan Tanaman, dimulai
pada bulan Mei sampai Juli 2011. Penelitian terdiri dari dua tahap yaitu
pembiakan, perbanyakan masal nematoda Steinernema spp, dan pemberian pakan
pada S. litura.
B. Bahan-Bahan yang digunakan
Bahan-bahan yang digunakan untuk pembiakan dan perbanyakan
nematoda Steinernema spp, adalah kuning telur ayam kampung, nutrient broth,
yeast extract, minyak jagung, aquadest, spon, kapas steril, kertas saring steril,
tanaman sawi, S. litura dan nematoda Steinernema spp.
C. Alat-alat yang digunakan
Alat yang digunakan sebagai pembiakan dan perbanyakan yaitu:
mikroskop, autoclaf, pipet ependof, laminar flow, beaker glass, tabung erlenmeyer
ukuran 250, 500, 1000 ml, bunsen, korek, label, gunting, hand caunter, counting
dist, cater, bak ukuran 30x50 cm, cawan petri, spreyer, buku dan alat tulis.

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

2

D. Pelaksanaan Penelitian
1. Pembuatan Media Biakan dan Per banyakan Masal Nematoda
Entomopatogen Steinernema spp. Secar a Invitro.
Perbanyakan

nematoda

entomopatogen

dilakukan

secara

invitro.

Perbanyakan dilakukan dengan pembuatan media untuk biakan yaitu bahan –
bahan yang digunakan adalah: 9 kuning telur ayam kampung, Nutrient Broth 3,6
gr, Yeast extract 1,8 gr, Minyak jagung 45 ml, Aquadest 20 ml dan Spon 18 gr.
Bahan – bahan tersebut dimasukkan kedalam air mendidih, diaduk sampai merata
kemudian angkat. Spon dimasukkan kedalam bak yang berisi bahan – bahan dan
diremas – remas. Media spon dimasukkan kedalam tabung Erlenmeyer ukuran
1000 ml, lalu ditutup dengan kapas dan dilapisi dengan aluminium foil atau kertas
(Gambar 7) kemudian media disterilkan dalam autoclave selama 30 menit dengan
suhu 121 oC dengan tekanan 1,5 atm.

Gambar 7. Media Kuning Telur dalam Tabung Erlenmeyer 1000 ml.

2. Pembuatan Media Cair Yeast Salt

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

3

Menyiapkan bahan – bahan yang digunakan antara lain: dipostassium
phosphate (K2HPO4) 0,5 gram, ammonium phosphate (NH4 H2PO4) 0,5 gram,
magnesium sulphate (MgSO4). Air (7H2O) 0,2 gram, Bactro Yeast Extract 5
gram, natrium klorida (NaCl) 5 gram, dan aquadest 1 liter. Semua bahan – bahan
tersebut dicampurkan dan diaduk hingga homogen kemudian direbus hingga
mendidih. media yang sudah mendidih dituangkan kedalam Erlenmeyer 250 ml
ditutup dengan kapas dan dilapisi alumunium foil atau kertas kemudian disterilkan
dalam autoclaf selama 30 menit pada suhu 121 oC (hitungan waktu dimulai ketika
tekanan autoclaf mencapai 1,5 atm).

3. Inokulasi Bakter i Simbion dan Nematoda Entomopatogen pada
Media Spon
Bakteri simbion diperoleh dari hasil isolasi bakteri dari dalam tubuh
serangga yang telah dibiakkan dalam media Yeast salt. Hasil biakan bakteri
kemudian dikocok dalam shaker selam 24 jam. (Gambar 8)

Gambar 8. Bakteri Xenorhabdus spp. Yang Dishaker Selama 24 Jam.

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

4

Setelah media spon disterilkan, selanjutnya media dalam tiap tabung
Erlenmeyer 1000 ml diinokulasi dengan bakteri simbion Xenorhabdus spp.
kemudian diinkubasi selama 24 jam. Setelah 24 jam media spon yang telah berisi
bakteri simbion diinokulasikan nematoda entomopatogen jenis Steinernema spp.
Nematoda jenis Steinernema spp. diinokulasikan pada media spon yang berisi
bakteri Xenorhabdus. Tabung Erlenmeyer yang berisi nematoda dalam media
spon ditutup menggunakan kapas steril dan alumunium foil atau kertas kemudian
disimpan dengan suhu 25 oC selama 14 – 21 hari. Selama masa penyimpanan
diketahui didalam tabung erlenmeyer setelah tiga hari muncul nematoda
entomopatogen Steinernema spp. Membentuk jala – jala didalam erlenmeyer.
(Gambar 9)

Gambar 9. Media Kuning Telur yang ditumbuhi Nematoda Entomopatogen
Steinernema spp.

4. Panen Nematoda Entomopatogen.

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

5

Cara panen nematoda Steinernema spp. yang disimpan dalam median spon
selama 14 – 21 hari dengan suhu 25 oC, keluarkan spon yang telah ditumbuhi
nematoda Steinernema spp. dari erlenmeyer 1000 ml dan diletakkan dalam bak
ukuran 30x50 cm. Setelah itu spon diremas perlahan – lahan

selanjutnya

diendapkan selama 2 jam. (Gambar 10) Setelah 2 jam, suspensi hasil endapan
dituang dalam spon ukuran 14x25 cm dan disimpan dalam suhu 18 oC.

Gambar 10. Pengendapan Steinernema spp. Selama 2 jam.
5. Aplikasi Nematoda Entomopatogen Steinernema spp. NEP
Sebelum aplikasi dilakukan terlebih dahulu menyiapkan vial – vial
sebanyak 25 buah, kemudian dilapisi kertas tisuue, masukkan sawi sebanyak 1
gram setiap hari selama 4 hari kedalam vial. Kemudian masing – masing vial
masukkan 10 larva S. litura (Gambar 11). Aplikasi NEP dilakukan dengan
menyemprotkan Steinernema spp. kedalam vial sesuai dengan konsentrasi
kemudian tutup dengan kain kasa yang berwarna hitam.

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

6

Gambar 11. Memasukkan Larva S. litura kedalam Vial.

6. Metode Penelitian
Pengamatan

kematian larva

S.

litura

yang terserang nematoda

entomopatogen Steinernema spp. dilakukan pada 1, 2, 3 dan 4 hari setelah aplikasi
(HSA), kemudian pengamatan kematian larva S.

litura

sampai mencapai

kematian 100 %.

7. Rancangan Percobaan
Penelitian ini menggunakan faktor tunggal dengan lima perlakuan, masing
– masing perlakuan diletakkan di Rancangan Acak Lengkap dan di ulang lima
kali. (Gambar 12)

B5

A2

D3

E5

A1

D1

D2

E4

A3

C4

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

7

E1

C2

E3

D5

B3

B4

A5

A4

B1

C1

B2

E2

C3

D4

C5

Gambar 12. Denah penempatan perlakuan pada Rancangan Acak
Lengkap
Keterangan : A adalah Konsentrasi 50 IJ /ml
B adalah Konsentrasi 100 IJ /ml
C adalah Konsentrasi 200 IJ /ml
D adalah Konsentrasi 400 IJ /ml
E adalah Konsentrasi 800 IJ /ml
1 – 5 Ulangan
Cara mendapatkan konsentrasi 800, 400, 200, 100 dan 50 IJ/ml yang di
aplikasikan pada larva S. litura yaitu: terlebih dahulu panen nematoda
entomopatogen Steinernema spp. yang diinkubasikan selama 14-21 hari. Cara
menghitung konsentrasi sebagai berikut:
2996 IJ isi

30 cc/IJ

1550 IJ isi

60 cc/IJ

800 IJ isi

800 cc/IJ

Cara menghitung konsentrasi berikutnya yaitu: 400, 200, 100 dan 50 IJ sama
seperti cara yang di atas.
8. Analisis Data

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

8

Data hasil pengamatan dianalisis dengan metode sidik ragam atau anova.
Apabila F hitung lebih besar dari F tabel maka selanjutnya diuji dengan beda
nyata terkecil (BNT) 5 % .

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

1

IV. HASIL DAN PEMBAHASAN

I. Hasil
Hasil analisis statistik menunjukkan bahwa dari perlakuan konsentrasi
yang berbeda setelah aplikasi, persentase kematian larva S. litura instar 2
menunjukkan berbeda nyata pada pengamatan 4 hari setelah aplikasi (HSA)
(Tabel 1).
Tabel 2. Persentase Kematian Larva S. litura 1 sampai 4 Hari Setelah Aplikasi.
Per sentase Kematian Lar va S. litura (% )
Pengamatan Har i ke………
2
3
4

Perlakuan
1

Notasi

IJ/ml

Dt
6

Tr
2.39

Dt
16

Tr
4.08

Dt
22

Tr
4.72

Dt
28

Tr
5.25

a

100 IJ/ml

6

2.39

8

2.85

10

3.11

22

4.64

a

200 IJ/ml

8

2.38

14

3.26

18

3.98

36

5.99

a b

400 IJ/ml

10

2.84

18

3.98

22

4.34

48

6.90

b

800 IJ/ml

12

3.57

18

4.33

26

5.04

90

9.50

50

BNT 5%

tn

tn

tn

c

1,61

Keterangan: Angka – angka yang diikuti huruf yang sama pada kolom yang
sama, tidak berbeda nyata pada uji 5% (Data Trasformasi √(x +1).
Dt = Data Asli
Tr = Data Transformasi
Persentase kematian larva S. litura pada hari ke 1 – 3 setelah aplikasi tidak
menunjukkan perbedaan. Pengamatan hari ke 4 pada konsentrasi 50 – 200 IJ/ml
menunjukkan tidak berbeda nyata, sedangkan konsentrasi 50 – 400 IJ/ml

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

2

menunjukkan berbeda nyata. Pengamatan dari seluruh perlakuan konsentrasi 800
IJ/ml tertinggi persentase kematian larva S. litura.
Kematian larva S. litura yang di akibatkan Steinernema spp. ditandai
dengan morfologi fisik antara serangga inang yang sehat dan terserang
Steinernema spp. tubuh larva yang sehat warna tubuh coklat muda, dan larva yang
terserang nematoda entomopatogen tubuh berwarna coklat kehitaman. Seperti
(Gambar 13) sebagai berikut.

a

b

Gambar 13. Larva S. litura yang Sehat dan yang Terserang Nematoda
Entomopatogen Steinernema spp.
Keter angan : a. adalah Larva yang Sehat
b. adalah Larva yang Sudah Terserang Steinernema spp.

Adapun dalam bentuk histogram dapat diketahui, bahwa hasil mortalitas
larva S. litura yang terserang nematoda entomopatogen Steinernema spp. isolat
lokal sebagai berikut:

Hak Cipta © milik UPN "Veteran" Jatim :
Dilarang mengutip sebagian atau seluruh karya tulis ini tanpa mencantumkan dan menyebutkan sumber.

3

Mor talitas Spodoptera litura (% )

100
90
80
70
60

50 IJ/ml

50

100 IJ/ml

40

200 IJ/ml

30

400 IJ/ml

20

800 IJ/ml

10
0
1

2

3

4

Pengamatan Har i ke ..... Setelah Aplikasi

Gambar 14. Histogram Mortalitas