Appendix Pengaruh Pemberian Jus Buah Delima (Punica Granatum L.) Terhadap Kualitas Sperma Pada Mencit Yang Telah Diinduksi Ekstrak Daun Tembakau
28
Yanjun, Z., Dana, K., Robert, D., Rypo, L., dan David, W. International
Multidimentional Authenticity Specification (IMAS) Algorithm for
Detectionof Comercial Pomegranate Juice Adulteration. J. Agric Food
Chem. 57(6):2550-2557.
LAMPIRAN
LAMPIRAN 1. Data Rataan Jumlah Spermatozoa mencit (Mus musculus L.)
Rataan jumlah spermatozoa mencit (Mus musculus L.)
Kelompok
Jumlah spermatozoa (jt/ml)
K0
103
K1
6,91
K2
154,81
P1
123,78
P2
117,25
P3
123,35
LAMPIRAN 2. Data Rataan Morfologi Spermatozoa mencit (Mus musculus
L.)
Rataan morfologi spermatozoa mencit (Mus musculus L.)
Kelompok
Morfologi spermatozoa (%)
K0
74
K1
5.18
K2
87,17
P1
85,03
P2
85,7
P3
84,11
LAMPIRAN 3. Data Rataan Viabilitas Spermatozoa mencit (Mus musculus
L.)
Rataan Viabilitas spermatozoa mencit (Mus musculus L.)
Kelompok
Viabilitas spermatozoa (%)
K0
73,5
29
K1
K2
P1
P2
P3
5,08
85,63
82,98
83,73
83,5
LAMPIRAN 4. Data Rataan Motilitas Spermatozoa mencit (Mus musculus
L.)
Rataan Viabilitas spermatozoa mencit (Mus musculus L.)
Kelompok
Viabilitas spermatozoa (%)
K0
72,5
K1
5,77
K2
85,3
P1
82,9
P2
82,07
P3
83,31
30
LAMPIRAN 5. Analisis Statistik
a. Jumlah Spermatozoa
Onewa
ANOVA
Jumlah_Spermatozoa
Sum of Squares
Between Groups
Within Groups
Total
Df
Mean Square
51587,092
5
10317,418
950,093
18
52,783
52537,185
23
F
Sig.
195,469
,000
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: Jumlah_Sperm
Bonferroni
(I) Perlakuan
(J) Perlakuan
Mean
Std. Error
Sig.
Difference (I-J)
5,13726
,000
78,7217
113,4533
K2
-51,81250
*
5,13726
,000
-69,1783
-34,4467
P1
-20,78750
*
5,13726
,011
-38,1533
-3,4217
P2
-14,25000
5,13726
,188
-31,6158
3,1158
P3
-18,97500
*
5,13726
,025
-36,3408
-1,6092
-96,08750
*
5,13726
,000
-113,4533
-78,7217
-147,90000
*
5,13726
,000
-165,2658
-130,5342
-116,87500
*
5,13726
,000
-134,2408
-99,5092
-110,33750
*
5,13726
,000
-127,7033
-92,9717
-115,06250
*
5,13726
,000
-132,4283
-97,6967
51,81250
*
5,13726
,000
34,4467
69,1783
147,90000
*
5,13726
,000
130,5342
165,2658
31,02500
*
5,13726
,000
13,6592
48,3908
37,56250
*
5,13726
,000
20,1967
54,9283
32,83750
*
5,13726
,000
15,4717
50,2033
K2
P1
P2
P3
K0
K1
K2
Upper Bound
*
K0
K1
Lower Bound
96,08750
K1
K0
95% Confidence Interval
P1
P2
P3
31
20,78750
*
5,13726
,011
3,4217
38,1533
116,87500
*
5,13726
,000
99,5092
134,2408
K2
-31,02500
*
5,13726
,000
-48,3908
-13,6592
P2
6,53750
5,13726
1,000
-10,8283
23,9033
P3
1,81250
5,13726
1,000
-15,5533
19,1783
K0
14,25000
5,13726
,188
-3,1158
31,6158
K1
110,33750
*
5,13726
,000
92,9717
127,7033
K2
-37,56250
*
5,13726
,000
-54,9283
-20,1967
P1
-6,53750
5,13726
1,000
-23,9033
10,8283
P3
-4,72500
5,13726
1,000
-22,0908
12,6408
K0
18,97500
*
5,13726
,025
1,6092
36,3408
K1
115,06250
*
5,13726
,000
97,6967
132,4283
K2
-32,83750
*
5,13726
,000
-50,2033
-15,4717
P1
-1,81250
5,13726
1,000
-19,1783
15,5533
P2
4,72500
5,13726
1,000
-12,6408
22,0908
K0
K1
P1
P2
P3
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
b. Morfologi Spermatozoa
Oneway
ANOVA
Morfologi_Spermatozoa
Sum of Squares
Between Groups
Mean Square
26417,369
4
6604,342
51,086
20
2,554
26468,455
24
Within Groups
Total
Df
F
Sig.
2585,578
,000
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: Morfologi_Spermatozoa
Bonferroni
(I) Kelompok
(J) Kelompok
Mean
Std. Error
Sig.
Difference (I-J)
Lower Bound
Upper Bound
-82,45000
*
1,01080
,000
-85,6375
-79,2625
P1
-80,90000
*
1,01080
,000
-84,0875
-77,7125
P2
-81,77000
*
1,01080
,000
-84,9575
-78,5825
-79,83000
*
1,01080
,000
-83,0175
-76,6425
K1
82,45000
*
1,01080
,000
79,2625
85,6375
P1
1,55000
1,01080
1,000
-1,6375
4,7375
P2
,68000
1,01080
1,000
-2,5075
3,8675
K2
K1
P3
K2
95% Confidence Interval
32
P1
P2
P3
2,62000
1,01080
,174
-,5675
5,8075
K1
80,90000
*
1,01080
,000
77,7125
84,0875
K2
-1,55000
1,01080
1,000
-4,7375
1,6375
P2
-,87000
1,01080
1,000
-4,0575
2,3175
P3
1,07000
1,01080
1,000
-2,1175
4,2575
K1
81,77000
*
1,01080
,000
78,5825
84,9575
K2
-,68000
1,01080
1,000
-3,8675
2,5075
P1
,87000
1,01080
1,000
-2,3175
4,0575
P3
1,94000
1,01080
,693
-1,2475
5,1275
K1
79,83000
*
1,01080
,000
76,6425
83,0175
K2
-2,62000
1,01080
,174
-5,8075
,5675
P1
-1,07000
1,01080
1,000
-4,2575
2,1175
P2
-1,94000
1,01080
,693
-5,1275
1,2475
P3
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
c. Viabilitas Spermatozoa
Oneway
ANOVA
Viabilitas_Spermatozoa
Sum of Squares
Between Groups
Mean Square
25352,523
4
6338,131
53,419
20
2,671
25405,942
24
Within Groups
Total
Df
F
Sig.
2372,987
,000
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: Viabilitas_Spermatozoa
Bonferroni
(I) Kelompok
(J) Kelompok
Mean
Std. Error
Sig.
Difference (I-J)
Lower Bound
Upper Bound
K2
-80,73000
*
P1
-78,58000
*
1,03362
,000
-81,8394
-75,3206
P2
-79,85000
*
1,03362
,000
-83,1094
-76,5906
P3
-79,21000
*
1,03362
,000
-82,4694
-75,9506
K1
80,73000
*
1,03362
,000
77,4706
83,9894
P1
2,15000
1,03362
,506
-1,1094
5,4094
P2
,88000
1,03362
1,000
-2,3794
4,1394
P3
1,52000
1,03362
1,000
-1,7394
4,7794
K1
K2
95% Confidence Interval
1,03362
,000
-83,9894
-77,4706
33
P1
P2
K1
78,58000
*
1,03362
,000
75,3206
81,8394
K2
-2,15000
1,03362
,506
-5,4094
1,1094
P2
-1,27000
1,03362
1,000
-4,5294
1,9894
P3
-,63000
1,03362
1,000
-3,8894
2,6294
K1
79,85000
*
1,03362
,000
76,5906
83,1094
K2
-,88000
1,03362
1,000
-4,1394
2,3794
P1
1,27000
1,03362
1,000
-1,9894
4,5294
P3
,64000
1,03362
1,000
-2,6194
3,8994
K1
79,21000
*
1,03362
,000
75,9506
82,4694
K2
-1,52000
1,03362
1,000
-4,7794
1,7394
P1
,63000
1,03362
1,000
-2,6294
3,8894
P2
-,64000
1,03362
1,000
-3,8994
2,6194
P3
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
d. Motilitas Spermatozoa
Oneway
ANOVA
Motilitas_Spermatozoa
Sum of Squares
Between Groups
Mean Square
24614,983
4
6153,746
78,422
20
3,921
24693,405
24
Within Groups
Total
Df
F
Sig.
1569,393
,000
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: Motilitas_Spermatozoa
Bonferroni
(I) Kelompok
(J) Kelompok
Mean
Std. Error
Sig.
Difference (I-J)
Lower Bound
Upper Bound
-79,81000
*
1,25237
,000
-83,7592
-75,8608
P1
-77,96000
*
1,25237
,000
-81,9092
-74,0108
P2
-77,80000
*
1,25237
,000
-81,7492
-73,8508
-78,13000
*
1,25237
,000
-82,0792
-74,1808
K1
79,81000
*
1,25237
,000
75,8608
83,7592
P1
1,85000
1,25237
1,000
-2,0992
5,7992
P2
2,01000
1,25237
1,000
-1,9392
5,9592
P3
1,68000
1,25237
1,000
-2,2692
5,6292
K2
K1
P3
K2
95% Confidence Interval
34
P1
P2
K1
77,96000
*
1,25237
,000
74,0108
81,9092
K2
-1,85000
1,25237
1,000
-5,7992
2,0992
P2
,16000
1,25237
1,000
-3,7892
4,1092
P3
-,17000
1,25237
1,000
-4,1192
3,7792
K1
77,80000
*
1,25237
,000
73,8508
81,7492
K2
-2,01000
1,25237
1,000
-5,9592
1,9392
P1
-,16000
1,25237
1,000
-4,1092
3,7892
P3
-,33000
1,25237
1,000
-4,2792
3,6192
K1
78,13000
*
1,25237
,000
74,1808
82,0792
K2
-1,68000
1,25237
1,000
-5,6292
2,2692
P1
,17000
1,25237
1,000
-3,7792
4,1192
P2
,33000
1,25237
1,000
-3,6192
4,2792
P3
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
35
LAMPIRAN 6. Alat dan Bahan
Pemeliharaan Kandang
Mus musculusL.
Improved Neubauer
Gelas Arloji
Disecting set
Jus Buah Delima
36
Chloroform
Methanol
Daun Tembakau
Ekstrak Tembakau
Larutan NaOH 10%
Larutan HCL 2N
37
LAMPIRAN 7. Gambar Hasil Pengamatan
Ket:
1. Kepala berkait
2. Leher lurus
3. Ekor lurus
Spermatozoa Normal
Ket:
1. Kepala tumpul
2. Leher bengkok
3. Ekor bengkok
38
Spermatozoa Abnormal
LAMPIRAN 8. Prosedur Pembuatan Jus Buah Delima
Buah Delima
dicuci bersih buah delima
dikupas kulit
ditimbang buah sebanyak 250 gram
diblender buah delima
disaring bijinya
dibuat konsentrasi 4%, 5% dan 6%
ditambahkan air sebanyak 100 ml
disimpan dilemari es pada suhu 40C
Hasil
39
LAMPIRAN 9. Prosedur Pembuatan Ekstrak DaunTembakau
Daun Tembakau
dipotong kecil-kecil
dikeringkan anginkan selama 48 jam
diblender sampai halus
Simplisia
ditimbang sebanyak 800g
dimasukan kedalam botol winker
dimeserasi selama 48 jam dalam pelarut metanol
Meserat
dipisahkan dengan rotavapor
dimasukkan kedalam beaker glasss
diasamkan dengan HCl 2N sampai PH=2
dicek dengan kertas lakmus
diekstraksi dengan CHCl3
Filtrat
Residu
dimasukkan kedalam corong pemisah
dimasukkan kedalam beaker glass
ditambahkan NaOH 10% sampai PH=10
dicek dengan kertas lakmus
Residu
Filtrat
ditambahkan CHCl3
dipisahkan dengan corong
dirotavapor
40
Ekstrak
dibuat dosis 0.121mg/bb
ditambahkan aquades 100 ml
Larutan Ekstrak
LAMPIRAN 10. Prosedur Pengamatan Spermatozoa Mencit
a. Jumlah Spermatozoa
Mus musculus L.
dilakukan pembedahan
dipotong bagian epididimis dan bagian distal vas deferens
dimasukkan cauda epididimis ke dalam cawan arloji yang berisi
NaCl 0,9 %
dipotong dengan pisau silet
diambil dengan pipet tetes
dimasukkan ke dalam kaca hemositometer/improved neubauer
ditutup dengan cover glass
diamati dibawah mikroskop
dilakukan penghitungan
Hasil
b. Morfologi Spermatozoa Mencit
Mus musculus L.
dilakukan pembedahan
dipotong bagian epididimis dan bagian distal vas deferens
dimasukkan cauda epididimis ke dalam cawan arloji yang berisi
NaCl 0,9 %
dipotong dengan pisau silet
diambil dengan pipet tetes
dimasukkan ke dalam kaca hemositometer/improved neubauer
ditutup dengan cover glass
diamati dibawah mikroskop
41
dilakukan penghitungan sperma yang normal dan abnormal
Hasil
c. Viabilitas Spermatozoa Mencit
Mus musculus L.
dilakukan pembedahan
dipotong bagian epididimis dan bagian distal vas deferens
dimasukkan cauda epididimis ke dalam cawan arloji yang berisi
NaCl 0,9 %
dipotong dengan pisau silet
diambil dengan pipet tetes
dimasukkan ke dalam kaca hemositometer/improved neubauer
ditetesi pewarna giemsa 3%
ditutup dengan cover glass
diamati dibawah mikroskop
dilakukan perhitungan sperma yang hidup dan mati
Hasil
d. Motilitas Spermatozoa Mencit
Mus musculus L.
dilakukan pembedahan
dipotong bagian epididimis dan bagian distal vas deferens
dimasukkan cauda epididimis ke dalam cawan arloji yang berisi
NaCl 0,9 %
dipotong dengan pisau silet
diambil dengan pipet tetes
dimasukkan ke dalam kaca hemositometer/improved neubauer
ditutup dengan cover glass
42
diamati dibawah mikroskop
dilakukan penghitungan sperma yang bergerak dan tidak bergerak
Hasil
Yanjun, Z., Dana, K., Robert, D., Rypo, L., dan David, W. International
Multidimentional Authenticity Specification (IMAS) Algorithm for
Detectionof Comercial Pomegranate Juice Adulteration. J. Agric Food
Chem. 57(6):2550-2557.
LAMPIRAN
LAMPIRAN 1. Data Rataan Jumlah Spermatozoa mencit (Mus musculus L.)
Rataan jumlah spermatozoa mencit (Mus musculus L.)
Kelompok
Jumlah spermatozoa (jt/ml)
K0
103
K1
6,91
K2
154,81
P1
123,78
P2
117,25
P3
123,35
LAMPIRAN 2. Data Rataan Morfologi Spermatozoa mencit (Mus musculus
L.)
Rataan morfologi spermatozoa mencit (Mus musculus L.)
Kelompok
Morfologi spermatozoa (%)
K0
74
K1
5.18
K2
87,17
P1
85,03
P2
85,7
P3
84,11
LAMPIRAN 3. Data Rataan Viabilitas Spermatozoa mencit (Mus musculus
L.)
Rataan Viabilitas spermatozoa mencit (Mus musculus L.)
Kelompok
Viabilitas spermatozoa (%)
K0
73,5
29
K1
K2
P1
P2
P3
5,08
85,63
82,98
83,73
83,5
LAMPIRAN 4. Data Rataan Motilitas Spermatozoa mencit (Mus musculus
L.)
Rataan Viabilitas spermatozoa mencit (Mus musculus L.)
Kelompok
Viabilitas spermatozoa (%)
K0
72,5
K1
5,77
K2
85,3
P1
82,9
P2
82,07
P3
83,31
30
LAMPIRAN 5. Analisis Statistik
a. Jumlah Spermatozoa
Onewa
ANOVA
Jumlah_Spermatozoa
Sum of Squares
Between Groups
Within Groups
Total
Df
Mean Square
51587,092
5
10317,418
950,093
18
52,783
52537,185
23
F
Sig.
195,469
,000
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: Jumlah_Sperm
Bonferroni
(I) Perlakuan
(J) Perlakuan
Mean
Std. Error
Sig.
Difference (I-J)
5,13726
,000
78,7217
113,4533
K2
-51,81250
*
5,13726
,000
-69,1783
-34,4467
P1
-20,78750
*
5,13726
,011
-38,1533
-3,4217
P2
-14,25000
5,13726
,188
-31,6158
3,1158
P3
-18,97500
*
5,13726
,025
-36,3408
-1,6092
-96,08750
*
5,13726
,000
-113,4533
-78,7217
-147,90000
*
5,13726
,000
-165,2658
-130,5342
-116,87500
*
5,13726
,000
-134,2408
-99,5092
-110,33750
*
5,13726
,000
-127,7033
-92,9717
-115,06250
*
5,13726
,000
-132,4283
-97,6967
51,81250
*
5,13726
,000
34,4467
69,1783
147,90000
*
5,13726
,000
130,5342
165,2658
31,02500
*
5,13726
,000
13,6592
48,3908
37,56250
*
5,13726
,000
20,1967
54,9283
32,83750
*
5,13726
,000
15,4717
50,2033
K2
P1
P2
P3
K0
K1
K2
Upper Bound
*
K0
K1
Lower Bound
96,08750
K1
K0
95% Confidence Interval
P1
P2
P3
31
20,78750
*
5,13726
,011
3,4217
38,1533
116,87500
*
5,13726
,000
99,5092
134,2408
K2
-31,02500
*
5,13726
,000
-48,3908
-13,6592
P2
6,53750
5,13726
1,000
-10,8283
23,9033
P3
1,81250
5,13726
1,000
-15,5533
19,1783
K0
14,25000
5,13726
,188
-3,1158
31,6158
K1
110,33750
*
5,13726
,000
92,9717
127,7033
K2
-37,56250
*
5,13726
,000
-54,9283
-20,1967
P1
-6,53750
5,13726
1,000
-23,9033
10,8283
P3
-4,72500
5,13726
1,000
-22,0908
12,6408
K0
18,97500
*
5,13726
,025
1,6092
36,3408
K1
115,06250
*
5,13726
,000
97,6967
132,4283
K2
-32,83750
*
5,13726
,000
-50,2033
-15,4717
P1
-1,81250
5,13726
1,000
-19,1783
15,5533
P2
4,72500
5,13726
1,000
-12,6408
22,0908
K0
K1
P1
P2
P3
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
b. Morfologi Spermatozoa
Oneway
ANOVA
Morfologi_Spermatozoa
Sum of Squares
Between Groups
Mean Square
26417,369
4
6604,342
51,086
20
2,554
26468,455
24
Within Groups
Total
Df
F
Sig.
2585,578
,000
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: Morfologi_Spermatozoa
Bonferroni
(I) Kelompok
(J) Kelompok
Mean
Std. Error
Sig.
Difference (I-J)
Lower Bound
Upper Bound
-82,45000
*
1,01080
,000
-85,6375
-79,2625
P1
-80,90000
*
1,01080
,000
-84,0875
-77,7125
P2
-81,77000
*
1,01080
,000
-84,9575
-78,5825
-79,83000
*
1,01080
,000
-83,0175
-76,6425
K1
82,45000
*
1,01080
,000
79,2625
85,6375
P1
1,55000
1,01080
1,000
-1,6375
4,7375
P2
,68000
1,01080
1,000
-2,5075
3,8675
K2
K1
P3
K2
95% Confidence Interval
32
P1
P2
P3
2,62000
1,01080
,174
-,5675
5,8075
K1
80,90000
*
1,01080
,000
77,7125
84,0875
K2
-1,55000
1,01080
1,000
-4,7375
1,6375
P2
-,87000
1,01080
1,000
-4,0575
2,3175
P3
1,07000
1,01080
1,000
-2,1175
4,2575
K1
81,77000
*
1,01080
,000
78,5825
84,9575
K2
-,68000
1,01080
1,000
-3,8675
2,5075
P1
,87000
1,01080
1,000
-2,3175
4,0575
P3
1,94000
1,01080
,693
-1,2475
5,1275
K1
79,83000
*
1,01080
,000
76,6425
83,0175
K2
-2,62000
1,01080
,174
-5,8075
,5675
P1
-1,07000
1,01080
1,000
-4,2575
2,1175
P2
-1,94000
1,01080
,693
-5,1275
1,2475
P3
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
c. Viabilitas Spermatozoa
Oneway
ANOVA
Viabilitas_Spermatozoa
Sum of Squares
Between Groups
Mean Square
25352,523
4
6338,131
53,419
20
2,671
25405,942
24
Within Groups
Total
Df
F
Sig.
2372,987
,000
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: Viabilitas_Spermatozoa
Bonferroni
(I) Kelompok
(J) Kelompok
Mean
Std. Error
Sig.
Difference (I-J)
Lower Bound
Upper Bound
K2
-80,73000
*
P1
-78,58000
*
1,03362
,000
-81,8394
-75,3206
P2
-79,85000
*
1,03362
,000
-83,1094
-76,5906
P3
-79,21000
*
1,03362
,000
-82,4694
-75,9506
K1
80,73000
*
1,03362
,000
77,4706
83,9894
P1
2,15000
1,03362
,506
-1,1094
5,4094
P2
,88000
1,03362
1,000
-2,3794
4,1394
P3
1,52000
1,03362
1,000
-1,7394
4,7794
K1
K2
95% Confidence Interval
1,03362
,000
-83,9894
-77,4706
33
P1
P2
K1
78,58000
*
1,03362
,000
75,3206
81,8394
K2
-2,15000
1,03362
,506
-5,4094
1,1094
P2
-1,27000
1,03362
1,000
-4,5294
1,9894
P3
-,63000
1,03362
1,000
-3,8894
2,6294
K1
79,85000
*
1,03362
,000
76,5906
83,1094
K2
-,88000
1,03362
1,000
-4,1394
2,3794
P1
1,27000
1,03362
1,000
-1,9894
4,5294
P3
,64000
1,03362
1,000
-2,6194
3,8994
K1
79,21000
*
1,03362
,000
75,9506
82,4694
K2
-1,52000
1,03362
1,000
-4,7794
1,7394
P1
,63000
1,03362
1,000
-2,6294
3,8894
P2
-,64000
1,03362
1,000
-3,8994
2,6194
P3
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
d. Motilitas Spermatozoa
Oneway
ANOVA
Motilitas_Spermatozoa
Sum of Squares
Between Groups
Mean Square
24614,983
4
6153,746
78,422
20
3,921
24693,405
24
Within Groups
Total
Df
F
Sig.
1569,393
,000
Post Hoc Tests
Multiple Comparisons
Dependent Variable: Motilitas_Spermatozoa
Bonferroni
(I) Kelompok
(J) Kelompok
Mean
Std. Error
Sig.
Difference (I-J)
Lower Bound
Upper Bound
-79,81000
*
1,25237
,000
-83,7592
-75,8608
P1
-77,96000
*
1,25237
,000
-81,9092
-74,0108
P2
-77,80000
*
1,25237
,000
-81,7492
-73,8508
-78,13000
*
1,25237
,000
-82,0792
-74,1808
K1
79,81000
*
1,25237
,000
75,8608
83,7592
P1
1,85000
1,25237
1,000
-2,0992
5,7992
P2
2,01000
1,25237
1,000
-1,9392
5,9592
P3
1,68000
1,25237
1,000
-2,2692
5,6292
K2
K1
P3
K2
95% Confidence Interval
34
P1
P2
K1
77,96000
*
1,25237
,000
74,0108
81,9092
K2
-1,85000
1,25237
1,000
-5,7992
2,0992
P2
,16000
1,25237
1,000
-3,7892
4,1092
P3
-,17000
1,25237
1,000
-4,1192
3,7792
K1
77,80000
*
1,25237
,000
73,8508
81,7492
K2
-2,01000
1,25237
1,000
-5,9592
1,9392
P1
-,16000
1,25237
1,000
-4,1092
3,7892
P3
-,33000
1,25237
1,000
-4,2792
3,6192
K1
78,13000
*
1,25237
,000
74,1808
82,0792
K2
-1,68000
1,25237
1,000
-5,6292
2,2692
P1
,17000
1,25237
1,000
-3,7792
4,1192
P2
,33000
1,25237
1,000
-3,6192
4,2792
P3
*. The mean difference is significant at the 0.05 level.
35
LAMPIRAN 6. Alat dan Bahan
Pemeliharaan Kandang
Mus musculusL.
Improved Neubauer
Gelas Arloji
Disecting set
Jus Buah Delima
36
Chloroform
Methanol
Daun Tembakau
Ekstrak Tembakau
Larutan NaOH 10%
Larutan HCL 2N
37
LAMPIRAN 7. Gambar Hasil Pengamatan
Ket:
1. Kepala berkait
2. Leher lurus
3. Ekor lurus
Spermatozoa Normal
Ket:
1. Kepala tumpul
2. Leher bengkok
3. Ekor bengkok
38
Spermatozoa Abnormal
LAMPIRAN 8. Prosedur Pembuatan Jus Buah Delima
Buah Delima
dicuci bersih buah delima
dikupas kulit
ditimbang buah sebanyak 250 gram
diblender buah delima
disaring bijinya
dibuat konsentrasi 4%, 5% dan 6%
ditambahkan air sebanyak 100 ml
disimpan dilemari es pada suhu 40C
Hasil
39
LAMPIRAN 9. Prosedur Pembuatan Ekstrak DaunTembakau
Daun Tembakau
dipotong kecil-kecil
dikeringkan anginkan selama 48 jam
diblender sampai halus
Simplisia
ditimbang sebanyak 800g
dimasukan kedalam botol winker
dimeserasi selama 48 jam dalam pelarut metanol
Meserat
dipisahkan dengan rotavapor
dimasukkan kedalam beaker glasss
diasamkan dengan HCl 2N sampai PH=2
dicek dengan kertas lakmus
diekstraksi dengan CHCl3
Filtrat
Residu
dimasukkan kedalam corong pemisah
dimasukkan kedalam beaker glass
ditambahkan NaOH 10% sampai PH=10
dicek dengan kertas lakmus
Residu
Filtrat
ditambahkan CHCl3
dipisahkan dengan corong
dirotavapor
40
Ekstrak
dibuat dosis 0.121mg/bb
ditambahkan aquades 100 ml
Larutan Ekstrak
LAMPIRAN 10. Prosedur Pengamatan Spermatozoa Mencit
a. Jumlah Spermatozoa
Mus musculus L.
dilakukan pembedahan
dipotong bagian epididimis dan bagian distal vas deferens
dimasukkan cauda epididimis ke dalam cawan arloji yang berisi
NaCl 0,9 %
dipotong dengan pisau silet
diambil dengan pipet tetes
dimasukkan ke dalam kaca hemositometer/improved neubauer
ditutup dengan cover glass
diamati dibawah mikroskop
dilakukan penghitungan
Hasil
b. Morfologi Spermatozoa Mencit
Mus musculus L.
dilakukan pembedahan
dipotong bagian epididimis dan bagian distal vas deferens
dimasukkan cauda epididimis ke dalam cawan arloji yang berisi
NaCl 0,9 %
dipotong dengan pisau silet
diambil dengan pipet tetes
dimasukkan ke dalam kaca hemositometer/improved neubauer
ditutup dengan cover glass
diamati dibawah mikroskop
41
dilakukan penghitungan sperma yang normal dan abnormal
Hasil
c. Viabilitas Spermatozoa Mencit
Mus musculus L.
dilakukan pembedahan
dipotong bagian epididimis dan bagian distal vas deferens
dimasukkan cauda epididimis ke dalam cawan arloji yang berisi
NaCl 0,9 %
dipotong dengan pisau silet
diambil dengan pipet tetes
dimasukkan ke dalam kaca hemositometer/improved neubauer
ditetesi pewarna giemsa 3%
ditutup dengan cover glass
diamati dibawah mikroskop
dilakukan perhitungan sperma yang hidup dan mati
Hasil
d. Motilitas Spermatozoa Mencit
Mus musculus L.
dilakukan pembedahan
dipotong bagian epididimis dan bagian distal vas deferens
dimasukkan cauda epididimis ke dalam cawan arloji yang berisi
NaCl 0,9 %
dipotong dengan pisau silet
diambil dengan pipet tetes
dimasukkan ke dalam kaca hemositometer/improved neubauer
ditutup dengan cover glass
42
diamati dibawah mikroskop
dilakukan penghitungan sperma yang bergerak dan tidak bergerak
Hasil