UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH DURIAN (Durio zibethinus Murr) LOKAL DAN FRAKSI- UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL KULIT BUAH DURIAN (Durio zibethinus Murr) LOKAL DAN FRAKSI- FRAKSINYA DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN KADAR FE
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL KULIT
BUAH DURIAN (Durio zibethinus Murr) LOKAL DAN FRAKSIFRAKSINYA DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN
KADAR FENOLIK DAN FLAVONOID TOTALNYA
SKRIPSI
Oleh:
RISA WIDIANI BATUBARA
K100070122
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2011
i
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL KULIT
BUAH DURIAN (Durio zibethinus Murr) LOKAL DAN FRAKSIFRAKSINYA DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN
KADAR FENOLIK DAN FLAVONOID TOTALNYA
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
RISA WIDIANI BATUBARA
K100070122
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2011
ii
iii
PERSEMBAHAN
Sebuah persembahan untuk:
Allah SWT yang telah memberikanku hidup
Para Rosul-Nya yang telah memberi teladan bagiku
Ayah dan Mama tercinta sebagai bentuk baktiku
Adik tersayang Nina dan Putri
Saudara, sahabat dan teman
Almamater UMS
iv
MOTTO
“Sebuah perjalanan tak biasa akan menjadikanmu sebagai orang yang luar
biasa. ”
(Penulis)
“Don’t dream it, but do it.”
(Richard O’brien)
“Be thankful for the past, for it has built the present.
Be hopeful for tomorrow, for it holds the dream.
Embrace the present, for it doesn’t last.
Always be grateful, for despite what happens, life is beautiful.
And God is listening.”
(Clio Freya)
v
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya
yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan
Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat
yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis
diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, Juni 2011
Peneliti,
(Risa Widiani Batubara)
vi
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh.
Segala puji bagi Allah yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah
sehinga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi yang
berjudul: “UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL KULIT
BUAH DURIAN (Durio zibethinus Murr) LOKAL DAN FRAKSI-FRAKSINYA
DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK DAN
FLAVONOID TOTALNYA” sebagai salah satu syarat untuk mencapai derajat
Sarjana Farmasi (S.Farm) di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Surakarta.
Dalam penyusunan ini penulis banyak mendapatkan bantuan dari berbagai
pihak. Untuk itu penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1.
Bapak Drs. Muhammad Da’i, M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta dan sebagai dosen penguji usulan
skripsi yang telah banyak memberikan koreksi dan saran.
2.
Bapak Drs. Muhtadi, M.Si selaku pembimbing akademik dan pembimbing
utama yang telah memberikan banyak bimbingan, pengarahan, dan
dukungan selama penulis menempuh studi, penelitian maupun penyusunan
skripsi ini.
3.
Ibu Rosita Melannisa, M.Sc., Apt selaku pembimbing pendamping yang
telah memberikan banyak bimbingan, pengarahan, dan dukungan selama
penelitian maupun penyusunan skripsi ini.
vii
4.
Bapak Broto Santoso, M.Sc., Apt dan Ibu Ika Trisharyanti D. K., M.Farm.,
Apt selaku dosen penguji skripsi yang telah memberikan banyak koreksi dan
saran.
5.
Bapak dan Ibu Dosen serta staf karyawan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
6.
Keluarga penulis, Bapak Ir. Yanharbi Batubara, Ibu Sri Rahayu Ningsih,
saudari-saudariku Nina Fitria Ningsih dan Yuni Yanti Putri, yang selalu
memberiku cinta dan dukungan terbaik mereka.
7.
Special person, Mahfur, you always influenced me, inspired me, and help me
in any way that possibly can.
8.
Sahabat-sahabat dan saudaraku di Solo: Ririn, Santi, Arif, Asdi, Astrina,
Alm. Fian Dio, Kiki, Rio, Doni, Alm. Fitri, Pena, Putri Tara, Kembar Aya
dan Dijah, Mbak Nung, Rangga, Ratih, Ratih Ardelia, Mbak Ana, Susi,
Mitha, Adit, Ardhi, Arina, Upa, Lalu Ari, Rifka, Lanjar, Atina, Indri, Ratih,
Didiek, Yudhist, Endah, Ayu, Devi, Nindi, Era, Nurul, Tessa, Tholib, Fairus,
Khusnul, Mbak Noor, MPC, Sains ’07, Kost Ardelia, dan Wisma Serasi III
dan All BEMers, untuk suka duka yang telah dilalui bersama akan menjadi
kenangan yang tak terganti.
Segenap pihak yang telah banyak membantu dan memberi dukungan yang
tidak dapat disebutkan satu persatu.
Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi siapa saja yang
membacanya dan muncul kritik dan saran untuk perbaikan penulis selanjutnya.
Wassalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh.
Surakarta, Juni 2011
Peneliti
viii
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL........................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN..........................................................................
iii
PERSEMBAHAN ............................................................................................
iv
MOTTO ...........................................................................................................
v
DEKLARASI ...................................................................................................
vi
KATA PENGANTAR .....................................................................................
vii
DAFTAR ISI....................................................................................................
ix
DAFTAR TABEL............................................................................................
xiii
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................
xiv
DAFTAR LAMPIRAN....................................................................................
xv
INTISARI.........................................................................................................
xvi
BAB I PENDAHULUAN
A. Latar Belakang ..........................................................................................
1
B. Perumusan Masalah ..................................................................................
3
C. Tujuan Penelitian.......................................................................................
3
D. Tinjuan Pustaka.........................................................................................
4
1. Tanaman Durian .................................................................................
4
a. Klasifikasi Tanaman ..................................................................
4
b.Morfologi Tanaman ...................................................................
4
c. Kandungan Kimia ......................................................................
5
d.Manfaat Tanaman ......................................................................
6
ix
2. Radikal Bebas.....................................................................................
6
3. Antioksidan ........................................................................................
8
4. DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil)....................................................
9
5. Ekstraksi .............................................................................................
10
6. Fraksinasi............................................................................................
11
E. Landasan Teori .........................................................................................
12
F. Hipotesis ...................................................................................................
13
BAB II METODE PENELITIAN
A. Jenis Penelitian .........................................................................................
14
B. Variabel Penelitian....................................................................................
14
C. Alat Dan Bahan.........................................................................................
15
1. Alat Yang Digunakan.........................................................................
15
2. Bahan Yang Digunakan .....................................................................
15
D. Jalannya Penelitian ...................................................................................
15
1. Determinasi Tanaman ........................................................................
15
2. Pengumpulan Bahan ..........................................................................
15
3. Pengeringan dan Penyerbukan ...........................................................
16
4. Optimasi Penyari................................................................................
16
5. Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Buah Durian...................................
16
6. Fraksinasi Ekstrak Etanol Kulit Buah Durian....................................
17
7. Pembuatan Larutan Stok Uji ..............................................................
18
a.
Pembuatan Larutan Stok DPPH 0,4 mM ...............................
18
b. Pembuatan Larutan Stok Vitamin E 0,1% .............................
18
x
c.
Pembuatan Larutan Stok Asam Galat 0,1% ...........................
18
d. Pembuatan Larutan Stok Rutin 0,1% .....................................
18
e.
8.
Fraksi Kulit Buah Durian........................................................
19
Analisis Kualitatif dengan KLT ........................................................
19
a.
9.
Pembuatan Larutan Stok 0,1% Ekstrak Etanol dan Fraksi-
Aktivitas Antioksidan.............................................................
19
b. Senyawa Fenolik ....................................................................
19
c.
Senyawa Flavonoid ................................................................
20
Penentuan Aktivitas Antioksidan .....................................................
20
a.
Penentuan Waktu Inkubasi.....................................................
20
b. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum (λmaks) DPPH ....
20
c.
Pembacaan Serapan DPPH ....................................................
21
10. Penetapan Kadar Fenolik dalam Sampel ...........................................
21
a.
Penentuan Operating Time (OT)............................................
21
b. Penentuan Panjang Gelombang Maksimal (λmaks) ................
22
c.
Penetapan Kurva Baku Asam Galat .......................................
22
d. Penetapan Kadar Fenolik Dalam Sampel...............................
22
11. Penetapan Kadar Total Senyawa Flavonoid Dalam Sampel .............
23
a. Penentuan Operating Time (OT)............................................
23
b. Menentukan Panjang Gelombang Maksimal (λmaks) ..............
23
c. Penetapan Kurva Baku Rutin .................................................
23
d. Penetapan Kadar Total Senyawa Flavonoid Dalam Sampel..
24
E. Analisis Data.............................................................................................
24
xi
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Ekstraksi dan Fraksinasi ...........................................................................
27
B. Penentuan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Kulit Dalam dan Kulit
Luar Durian Serta Fraksi-Fraksinya Dengan Metode DPPH....................
31
C. Penetapan Kadar Fenolik Total.................................................................
34
D. Penetapan Kadar Flavonoid Total.............................................................
36
E. Korelasi Kandungan Fenolik dan Flavonoid Total dengan Aktivitas
Antioksidan ...............................................................................................
38
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan ..........................................................................................
44
B. Saran.....................................................................................................
45
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................
46
LAMPIRAN.....................................................................................................
51
xii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.
Optimasi Penyari Simplisia Kulit Dalam dan Kulit Luar Durian .
28
Tabel 2.
Hasil Penyarian Simplisia Kulit Dalam dan Kulit Luar Durian....
28
Tabel 3.
Hasil Fraksinasi Ekstrak Etanol Kulit Dalam dan Kulit Luar
Durian............................................................................................
xiii
29
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Foto buah dan kulit durian (Durio zibethinus Murr).....................
5
Gambar 2. Resonansi Pada Struktur DPPH ....................................................
10
Gambar 3. Reaksi Radikal Bebas DPPH dengan Antioksidan .......................
10
Gambar 4. Profil bioautografi optimasi penyari sampel setelah disemprot
DPPH.............................................................................................
28
Gambar 5. Profil KLT semua sampel kulit durian setelah disemprot DPPH..
30
Gambar 6. Hasil Totolan Sampel setelah disemprot DPPH............................
31
Gambar 7. Hasil % Aktivitas Antiradikal Orientasi Sampel dengan kadar
100 µg/mL ....................................................................................
31
Gambar 8. Hasil IC50 pada sampel dan vitamin E ..........................................
33
Gambar 9. Uji Kualitatif Senyawa Fenolik Sampel Kulit Durian ..................
34
Gambar 10.Kadar GAE dalam Sampel ............................................................
36
Gambar 11.Uji Kualitatif Senyawa Flavonoid Sampel Kulit Durian .............
36
Gambar 12.Contoh reaksi kompleks antara senyawa flavonol (flavonoid)
dengan AlCl3 .................................................................................
37
Gambar 13. Kadar RE dalam Sampel ..............................................................
38
Gambar 14.Nilai IC50, Kadar Fenolik dan Kadar Flavonoid dalam sampel
Kulit Durian ..................................................................................
39
Gambar 15.Kurva Korelasi IC50 dan Kadar Fenolik Total Sampel Kulit
Durian............................................................................................
40
Gambar 14.Kurva Korelasi IC50 dan Kadar Flavonoid Total Sampel Kulit
Durian............................................................................................
xiv
41
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1.
Hasil Determinasi Tanaman Buah Durian (Durio zibethinus
Murr).........................................................................................
52
Lampiran 2.
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH .................
53
Lampiran 3.
Hasil Penentuan % Aktivitas Antiradikal Ekstrak Etanol
Kulit Dalam dan Kulit Luar Durian serta fraksi-fraksinya dan
Vitamin E..................................................................................
54
Lampiran 4.
Hasil Penentuan Operating Time Asam Galat..........................
61
Lampiran 5.
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Asam Galat.........
62
Lampiran 6.
Kurva Baku Asam Galat...........................................................
63
Lampiran 7.
Kadar Fenolik Total dalam Sampel..........................................
64
Lampiran 8.
Contoh Perhitungan Kadar Fenolik Total.................................
69
Lampiran 9.
Hasil Penentuan Operating Time Rutin....................................
70
Lampiran 10. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Rutin...................
71
Lampiran 11. Kurva Baku Rutin.....................................................................
72
Lampiran 12. Kadar Flavonoid Total dalam Sampel......................................
73
Lampiran 13. Contoh Perhitungan Kadar Flavonoid Total.............................
78
Lampiran 14. Uji T Satu Sampel Antara IC50 Ekstrak Etanol Kulit Durian
dan Fraksi-Fraksinya dengan IC50 Vitamin E .........................
xv
79
INTISARI
Antioksidan merupakan substansi yang diperlukan tubuh untuk
menetralisir radikal bebas dan mencegah munculnya berbagai penyakit
degeneratif. Durian (Durio zibethinus Murr) merupakan salah satu tanaman
dengan potensi sebagai antioksidan. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui
aktivitas antioksidan kulit buah durian lokal dan bagaimana korelasi dengan kadar
fenolik dan flavonoid totalnya. Aktivitas antioksidan dapat ditentukan dengan
menggunakan metode DPPH sedangkan penentuan kadar fenolik dan flavonoid
total dilakukan dengan menggunakan metode kolorimetri.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit dalam serta
fraksi kloroform dan etil asetat sebagai fraksi aktifnya memiliki aktivitas
antioksidan tinggi dengan nilai IC50 secara berturut-turut adalah 61,57; 32,49; dan
17,13 µg/mL, kadar fenoliknya (GAE) 71,75; 113,93; dan 150,03 mg/g sampel
dan kadar flavonoidnya (RE) 64,82; 211,15; dan 212,67 mg/g sampel. Kulit luar
juga memiliki aktivitas antioksidan tinggi dengan nilai IC50 28,83; 32,81; dan
14,91 µg/mL, kadar fenoliknya (GAE) 79,49; 109,93; dan 200,26 mg/g sampel
dan kadar flavonoidnya (RE) 135,76; 197,43; dan 339,02 mg/g sampel. Vitamin E
sebagai pembanding memiliki aktivitas antioksidan paling tinggi dibanding semua
sampel (IC50 = 6,81 µg/mL). Korelasi kadar fenolik total dengan aktivitas
antioksidan sampel kulit dalam dan kulit luar durian memberikan hasil yang
positif yaitu 98,2% dan 80,4% sedangkan korelasi kadar flavonoid total dengan
aktivitas antioksidannya juga memberikan hasil yang positif yaitu 88,9% dan
75,8%. Fraksi heksana dan metanol:air dari masing-masing bagian kulit durian
menunjukkan potensi yang rendah pada uji kualitatif sehingga tidak dilanjutkan ke
uji kuantitatifnya.
Kata kunci: antioksidan, durian, DPPH, fenolik, flavonoid.
xvi
BUAH DURIAN (Durio zibethinus Murr) LOKAL DAN FRAKSIFRAKSINYA DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN
KADAR FENOLIK DAN FLAVONOID TOTALNYA
SKRIPSI
Oleh:
RISA WIDIANI BATUBARA
K100070122
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2011
i
UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL KULIT
BUAH DURIAN (Durio zibethinus Murr) LOKAL DAN FRAKSIFRAKSINYA DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN
KADAR FENOLIK DAN FLAVONOID TOTALNYA
SKRIPSI
Diajukan untuk memenuhi salah satu syarat mencapai
derajat Sarjana Farmasi (S.Farm) pada Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta
di Surakarta
Oleh:
RISA WIDIANI BATUBARA
K100070122
FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SURAKARTA
SURAKARTA
2011
ii
iii
PERSEMBAHAN
Sebuah persembahan untuk:
Allah SWT yang telah memberikanku hidup
Para Rosul-Nya yang telah memberi teladan bagiku
Ayah dan Mama tercinta sebagai bentuk baktiku
Adik tersayang Nina dan Putri
Saudara, sahabat dan teman
Almamater UMS
iv
MOTTO
“Sebuah perjalanan tak biasa akan menjadikanmu sebagai orang yang luar
biasa. ”
(Penulis)
“Don’t dream it, but do it.”
(Richard O’brien)
“Be thankful for the past, for it has built the present.
Be hopeful for tomorrow, for it holds the dream.
Embrace the present, for it doesn’t last.
Always be grateful, for despite what happens, life is beautiful.
And God is listening.”
(Clio Freya)
v
DEKLARASI
Dengan ini saya menyatakan bahwa dalam skripsi ini tidak terdapat karya
yang pernah diajukan untuk memperoleh gelar kesarjanaan di suatu Perguruan
Tinggi, dan sepanjang pengetahuan saya juga tidak terdapat karya atau pendapat
yang pernah ditulis atau diterbitkan oleh orang lain, kecuali yang secara tertulis
diacu dalam naskah ini dan disebutkan dalam daftar pustaka.
Surakarta, Juni 2011
Peneliti,
(Risa Widiani Batubara)
vi
KATA PENGANTAR
Assalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh.
Segala puji bagi Allah yang telah melimpahkan rahmat dan hidayah
sehinga penulis dapat menyelesaikan penelitian dan penyusunan skripsi yang
berjudul: “UJI AKTIVITAS ANTIOKSIDAN EKSTRAK ETANOL KULIT
BUAH DURIAN (Durio zibethinus Murr) LOKAL DAN FRAKSI-FRAKSINYA
DENGAN METODE DPPH SERTA PENETAPAN KADAR FENOLIK DAN
FLAVONOID TOTALNYA” sebagai salah satu syarat untuk mencapai derajat
Sarjana Farmasi (S.Farm) di Fakultas Farmasi Universitas Muhammadiyah
Surakarta.
Dalam penyusunan ini penulis banyak mendapatkan bantuan dari berbagai
pihak. Untuk itu penulis mengucapkan terima kasih kepada:
1.
Bapak Drs. Muhammad Da’i, M.Si., Apt selaku Dekan Fakultas Farmasi
Universitas Muhammadiyah Surakarta dan sebagai dosen penguji usulan
skripsi yang telah banyak memberikan koreksi dan saran.
2.
Bapak Drs. Muhtadi, M.Si selaku pembimbing akademik dan pembimbing
utama yang telah memberikan banyak bimbingan, pengarahan, dan
dukungan selama penulis menempuh studi, penelitian maupun penyusunan
skripsi ini.
3.
Ibu Rosita Melannisa, M.Sc., Apt selaku pembimbing pendamping yang
telah memberikan banyak bimbingan, pengarahan, dan dukungan selama
penelitian maupun penyusunan skripsi ini.
vii
4.
Bapak Broto Santoso, M.Sc., Apt dan Ibu Ika Trisharyanti D. K., M.Farm.,
Apt selaku dosen penguji skripsi yang telah memberikan banyak koreksi dan
saran.
5.
Bapak dan Ibu Dosen serta staf karyawan Fakultas Farmasi Universitas
Muhammadiyah Surakarta.
6.
Keluarga penulis, Bapak Ir. Yanharbi Batubara, Ibu Sri Rahayu Ningsih,
saudari-saudariku Nina Fitria Ningsih dan Yuni Yanti Putri, yang selalu
memberiku cinta dan dukungan terbaik mereka.
7.
Special person, Mahfur, you always influenced me, inspired me, and help me
in any way that possibly can.
8.
Sahabat-sahabat dan saudaraku di Solo: Ririn, Santi, Arif, Asdi, Astrina,
Alm. Fian Dio, Kiki, Rio, Doni, Alm. Fitri, Pena, Putri Tara, Kembar Aya
dan Dijah, Mbak Nung, Rangga, Ratih, Ratih Ardelia, Mbak Ana, Susi,
Mitha, Adit, Ardhi, Arina, Upa, Lalu Ari, Rifka, Lanjar, Atina, Indri, Ratih,
Didiek, Yudhist, Endah, Ayu, Devi, Nindi, Era, Nurul, Tessa, Tholib, Fairus,
Khusnul, Mbak Noor, MPC, Sains ’07, Kost Ardelia, dan Wisma Serasi III
dan All BEMers, untuk suka duka yang telah dilalui bersama akan menjadi
kenangan yang tak terganti.
Segenap pihak yang telah banyak membantu dan memberi dukungan yang
tidak dapat disebutkan satu persatu.
Semoga skripsi ini dapat memberikan manfaat bagi siapa saja yang
membacanya dan muncul kritik dan saran untuk perbaikan penulis selanjutnya.
Wassalamu’alaikum warohmatullohi wabarokatuh.
Surakarta, Juni 2011
Peneliti
viii
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL........................................................................................
i
HALAMAN PENGESAHAN..........................................................................
iii
PERSEMBAHAN ............................................................................................
iv
MOTTO ...........................................................................................................
v
DEKLARASI ...................................................................................................
vi
KATA PENGANTAR .....................................................................................
vii
DAFTAR ISI....................................................................................................
ix
DAFTAR TABEL............................................................................................
xiii
DAFTAR GAMBAR .......................................................................................
xiv
DAFTAR LAMPIRAN....................................................................................
xv
INTISARI.........................................................................................................
xvi
BAB I PENDAHULUAN
A. Latar Belakang ..........................................................................................
1
B. Perumusan Masalah ..................................................................................
3
C. Tujuan Penelitian.......................................................................................
3
D. Tinjuan Pustaka.........................................................................................
4
1. Tanaman Durian .................................................................................
4
a. Klasifikasi Tanaman ..................................................................
4
b.Morfologi Tanaman ...................................................................
4
c. Kandungan Kimia ......................................................................
5
d.Manfaat Tanaman ......................................................................
6
ix
2. Radikal Bebas.....................................................................................
6
3. Antioksidan ........................................................................................
8
4. DPPH (1,1-difenil-2-pikrilhidrazil)....................................................
9
5. Ekstraksi .............................................................................................
10
6. Fraksinasi............................................................................................
11
E. Landasan Teori .........................................................................................
12
F. Hipotesis ...................................................................................................
13
BAB II METODE PENELITIAN
A. Jenis Penelitian .........................................................................................
14
B. Variabel Penelitian....................................................................................
14
C. Alat Dan Bahan.........................................................................................
15
1. Alat Yang Digunakan.........................................................................
15
2. Bahan Yang Digunakan .....................................................................
15
D. Jalannya Penelitian ...................................................................................
15
1. Determinasi Tanaman ........................................................................
15
2. Pengumpulan Bahan ..........................................................................
15
3. Pengeringan dan Penyerbukan ...........................................................
16
4. Optimasi Penyari................................................................................
16
5. Pembuatan Ekstrak Etanol Kulit Buah Durian...................................
16
6. Fraksinasi Ekstrak Etanol Kulit Buah Durian....................................
17
7. Pembuatan Larutan Stok Uji ..............................................................
18
a.
Pembuatan Larutan Stok DPPH 0,4 mM ...............................
18
b. Pembuatan Larutan Stok Vitamin E 0,1% .............................
18
x
c.
Pembuatan Larutan Stok Asam Galat 0,1% ...........................
18
d. Pembuatan Larutan Stok Rutin 0,1% .....................................
18
e.
8.
Fraksi Kulit Buah Durian........................................................
19
Analisis Kualitatif dengan KLT ........................................................
19
a.
9.
Pembuatan Larutan Stok 0,1% Ekstrak Etanol dan Fraksi-
Aktivitas Antioksidan.............................................................
19
b. Senyawa Fenolik ....................................................................
19
c.
Senyawa Flavonoid ................................................................
20
Penentuan Aktivitas Antioksidan .....................................................
20
a.
Penentuan Waktu Inkubasi.....................................................
20
b. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum (λmaks) DPPH ....
20
c.
Pembacaan Serapan DPPH ....................................................
21
10. Penetapan Kadar Fenolik dalam Sampel ...........................................
21
a.
Penentuan Operating Time (OT)............................................
21
b. Penentuan Panjang Gelombang Maksimal (λmaks) ................
22
c.
Penetapan Kurva Baku Asam Galat .......................................
22
d. Penetapan Kadar Fenolik Dalam Sampel...............................
22
11. Penetapan Kadar Total Senyawa Flavonoid Dalam Sampel .............
23
a. Penentuan Operating Time (OT)............................................
23
b. Menentukan Panjang Gelombang Maksimal (λmaks) ..............
23
c. Penetapan Kurva Baku Rutin .................................................
23
d. Penetapan Kadar Total Senyawa Flavonoid Dalam Sampel..
24
E. Analisis Data.............................................................................................
24
xi
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN
A. Ekstraksi dan Fraksinasi ...........................................................................
27
B. Penentuan Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Kulit Dalam dan Kulit
Luar Durian Serta Fraksi-Fraksinya Dengan Metode DPPH....................
31
C. Penetapan Kadar Fenolik Total.................................................................
34
D. Penetapan Kadar Flavonoid Total.............................................................
36
E. Korelasi Kandungan Fenolik dan Flavonoid Total dengan Aktivitas
Antioksidan ...............................................................................................
38
BAB IV KESIMPULAN DAN SARAN
A. Kesimpulan ..........................................................................................
44
B. Saran.....................................................................................................
45
DAFTAR PUSTAKA ......................................................................................
46
LAMPIRAN.....................................................................................................
51
xii
DAFTAR TABEL
Halaman
Tabel 1.
Optimasi Penyari Simplisia Kulit Dalam dan Kulit Luar Durian .
28
Tabel 2.
Hasil Penyarian Simplisia Kulit Dalam dan Kulit Luar Durian....
28
Tabel 3.
Hasil Fraksinasi Ekstrak Etanol Kulit Dalam dan Kulit Luar
Durian............................................................................................
xiii
29
DAFTAR GAMBAR
Halaman
Gambar 1. Foto buah dan kulit durian (Durio zibethinus Murr).....................
5
Gambar 2. Resonansi Pada Struktur DPPH ....................................................
10
Gambar 3. Reaksi Radikal Bebas DPPH dengan Antioksidan .......................
10
Gambar 4. Profil bioautografi optimasi penyari sampel setelah disemprot
DPPH.............................................................................................
28
Gambar 5. Profil KLT semua sampel kulit durian setelah disemprot DPPH..
30
Gambar 6. Hasil Totolan Sampel setelah disemprot DPPH............................
31
Gambar 7. Hasil % Aktivitas Antiradikal Orientasi Sampel dengan kadar
100 µg/mL ....................................................................................
31
Gambar 8. Hasil IC50 pada sampel dan vitamin E ..........................................
33
Gambar 9. Uji Kualitatif Senyawa Fenolik Sampel Kulit Durian ..................
34
Gambar 10.Kadar GAE dalam Sampel ............................................................
36
Gambar 11.Uji Kualitatif Senyawa Flavonoid Sampel Kulit Durian .............
36
Gambar 12.Contoh reaksi kompleks antara senyawa flavonol (flavonoid)
dengan AlCl3 .................................................................................
37
Gambar 13. Kadar RE dalam Sampel ..............................................................
38
Gambar 14.Nilai IC50, Kadar Fenolik dan Kadar Flavonoid dalam sampel
Kulit Durian ..................................................................................
39
Gambar 15.Kurva Korelasi IC50 dan Kadar Fenolik Total Sampel Kulit
Durian............................................................................................
40
Gambar 14.Kurva Korelasi IC50 dan Kadar Flavonoid Total Sampel Kulit
Durian............................................................................................
xiv
41
DAFTAR LAMPIRAN
Halaman
Lampiran 1.
Hasil Determinasi Tanaman Buah Durian (Durio zibethinus
Murr).........................................................................................
52
Lampiran 2.
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum DPPH .................
53
Lampiran 3.
Hasil Penentuan % Aktivitas Antiradikal Ekstrak Etanol
Kulit Dalam dan Kulit Luar Durian serta fraksi-fraksinya dan
Vitamin E..................................................................................
54
Lampiran 4.
Hasil Penentuan Operating Time Asam Galat..........................
61
Lampiran 5.
Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Asam Galat.........
62
Lampiran 6.
Kurva Baku Asam Galat...........................................................
63
Lampiran 7.
Kadar Fenolik Total dalam Sampel..........................................
64
Lampiran 8.
Contoh Perhitungan Kadar Fenolik Total.................................
69
Lampiran 9.
Hasil Penentuan Operating Time Rutin....................................
70
Lampiran 10. Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Rutin...................
71
Lampiran 11. Kurva Baku Rutin.....................................................................
72
Lampiran 12. Kadar Flavonoid Total dalam Sampel......................................
73
Lampiran 13. Contoh Perhitungan Kadar Flavonoid Total.............................
78
Lampiran 14. Uji T Satu Sampel Antara IC50 Ekstrak Etanol Kulit Durian
dan Fraksi-Fraksinya dengan IC50 Vitamin E .........................
xv
79
INTISARI
Antioksidan merupakan substansi yang diperlukan tubuh untuk
menetralisir radikal bebas dan mencegah munculnya berbagai penyakit
degeneratif. Durian (Durio zibethinus Murr) merupakan salah satu tanaman
dengan potensi sebagai antioksidan. Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui
aktivitas antioksidan kulit buah durian lokal dan bagaimana korelasi dengan kadar
fenolik dan flavonoid totalnya. Aktivitas antioksidan dapat ditentukan dengan
menggunakan metode DPPH sedangkan penentuan kadar fenolik dan flavonoid
total dilakukan dengan menggunakan metode kolorimetri.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak etanol kulit dalam serta
fraksi kloroform dan etil asetat sebagai fraksi aktifnya memiliki aktivitas
antioksidan tinggi dengan nilai IC50 secara berturut-turut adalah 61,57; 32,49; dan
17,13 µg/mL, kadar fenoliknya (GAE) 71,75; 113,93; dan 150,03 mg/g sampel
dan kadar flavonoidnya (RE) 64,82; 211,15; dan 212,67 mg/g sampel. Kulit luar
juga memiliki aktivitas antioksidan tinggi dengan nilai IC50 28,83; 32,81; dan
14,91 µg/mL, kadar fenoliknya (GAE) 79,49; 109,93; dan 200,26 mg/g sampel
dan kadar flavonoidnya (RE) 135,76; 197,43; dan 339,02 mg/g sampel. Vitamin E
sebagai pembanding memiliki aktivitas antioksidan paling tinggi dibanding semua
sampel (IC50 = 6,81 µg/mL). Korelasi kadar fenolik total dengan aktivitas
antioksidan sampel kulit dalam dan kulit luar durian memberikan hasil yang
positif yaitu 98,2% dan 80,4% sedangkan korelasi kadar flavonoid total dengan
aktivitas antioksidannya juga memberikan hasil yang positif yaitu 88,9% dan
75,8%. Fraksi heksana dan metanol:air dari masing-masing bagian kulit durian
menunjukkan potensi yang rendah pada uji kualitatif sehingga tidak dilanjutkan ke
uji kuantitatifnya.
Kata kunci: antioksidan, durian, DPPH, fenolik, flavonoid.
xvi