Tampilan Imunohistokimia Latent Membrane Protein-1 (LMP-1) Epstein-Barr Virus Pada Karsinoma Sel Skuamosa Rongga Mulut

1

TAMPILAN IMUNOHISTOKIMIA LATENT MEMBRANE
PROTEIN-1 (LMP-1) EPSTEIN-BARR VIRUS PADA
KARSINOMA SEL SKUAMOSA
RONGGA MULUT
SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi tugas dan melengkapi
syarat memperoleh gelar Sarjana Kedokteran gigi

Oleh :
Anita Carolina
NIM :090600142

FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN 2013

Universitas Sumatera Utara


2

Fakultas Kedokteran Gigi
Departemen Biologi Oral
Tahun 2013

Anita Carolina
Tampilan imunohistokimia Latent membrane protein-1 (Lmp-1) Epstein-barr
virus pada karsinoma sel skuamosa rongga mulut.
vi + 42 Halaman
Karsinoma sel skuamosa (KSS) adalah salah satu jenis kanker yang ditemui di
rongga mulut. Etiologi yang diduga sebagai penyebab KSS rongga mulut adalah
Epstein-Barr virus (EBV). Tujuan penelitian ini melihat tampilan Latent Membrane
Protein-1 (Lmp-1) sebagai salah satu protein yang dihasilkan oleh EBV yang berperan
dalam proses karsinogenesis KSS rongga mulut, dan menghubungkannya dengan
intensitas tampilan imunohistokimia Lmp-1 terhadap sub-tipe KSS (Keratinisasi dan
Nonkeratinisasi). Rancangan penelitian ini merupakan deskriptif dengan pendekatan
cross sectional terhadap 30 sampel blok parafin yang terdiagnosa sebagai KSS rongga
mulut yang diperoleh dari Laboratorium Patologi Anatomi FK USU/RSUP Haji Adam
Malik Medan tahun 2009-2011, dengan menggunakan pemeriksaan imunohistokimia

Lmp-1 (Clones CS1-4, ready to use, Dako Co, Denmark) dan dilihat di bawah
mikroskop cahaya merek Olympus CX21. Hasil penelitian diperoleh 27 kasus (90%)
Lmp-1 positif, yang terdiri dari 23 kasus (100%) pada lesi KSS keratinisasi, dan 4
kasus (57,1%) lesi KSS nonkeratinisasi. Sedangkan 3 kasus (10%) Lmp-1 negatif
hanya dijumpai pada kasus KSS nonkeratinisasi. Hasil pewarnaan imunohistokimia
Lmp-1 positif dengan intensitas kuat dijumpai sebanyak 20 kasus (66,7%), intensitas
sedang 7 kasus (23,3%), dan tidak ditemukan hasil dengan intensitas yang lemah.
Kesimpulan penelitian ini menunjukkan adanya peran EBV terhadap proses
karsinogenesis KSS rongga mulut dengan melihat tampilan Lmp-1 positif dan
intensitas yang kuat,sedang.
Kata kunci : Epstein-barr virus (EBV), Latent membrane protein-1

(Lmp-1),

Karsinoma sel skuamosa rongga mulut.

Universitas Sumatera Utara

3


TAMPILAN IMUNOHISTOKIMIA LATENT MEMBRANE
PROTEIN-1 (LMP-1) EPSTEIN-BARR VIRUS PADA
KARSINOMA SEL SKUAMOSA
RONGGA MULUT
SKRIPSI

Diajukan untuk memenuhi tugas dan melengkapi
syarat memperoleh gelar Sarjana Kedokteran gigi

Oleh :
Anita Carolina
NIM :090600142

FAKULTAS KEDOKTERAN GIGI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN 2013

Universitas Sumatera Utara

4


PERNYATAAN PERSETUJUAN

Skripsi ini telah disetujui untuk dipertahankan
di hadapan tim penguji skripsi

Medan, 11 Juli 2013
Pembimbing:

Tanda tangan

1. dr. Betty, M.Ked.(PA),Sp.PA
NIP. 19681009 199902 3 002
2. Rehulina Ginting,drg.,M.Si
NIP. 19511018 198003 2 001

Universitas Sumatera Utara

5


TIM PENGUJI SKRIPSI

Skripsi ini telah dipertahankan di hadapan tim penguji
pada tanggal 11 juli 2013

TIM PENGUJI

KETUA

: dr. Betty, M.Ked.(PA),Sp.PA

ANGGOTA : 1. Rehulina Ginting,drg.,M.Si
2. Minasari,drg.

Universitas Sumatera Utara

6

KATA PENGANTAR


Puji syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa karena atas kasih dan karuniaNya,
penulis dapat menyelesaikan skripsi ini sebagai salah satu syarat untuk mendapatkan
gelar Sarjana Kedokteran Gigi di Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Sumatera
Utara.
Penulis mengucapkan terima kasih kasih banyak kepada Betty, dr., M.Ked. (PA).
Sp.PA. selaku pembimbing skripsi yang telah banyak meluangkan waktu dalam
memberikan masukan, bimbingan, arahan yang sangat berguna dalam meningkatkan
semangat dan motivasi penulis untuk penyelesaian skripsi ini. Juga tidak lupa ucapan
terima kasih kepada Rehulina Ginting, drg., M.Si., selaku kepala Departemen
Biologi Oral Fakultas Kedokteran Gigi Universitas Sumatera Utara dan pembimbing
skripsi yang juga telah membimbing dan membantu penulis serta memberikan
masukan dalam penyelesaian skripsi ini. Pada kesempatan ini dengan rendah hati
penulis mengucapkan terima kasih kepada yang terhormat :
1.

Prof. Nazruddin, drg., Ph.D., Sp.Ort selaku Dekan Fakultas Kedokteran Gigi

Universitas Sumatera Utara.
2.


Sumadhi S, drg.,Ph.D dan Kholidina Imanda Harahap.,drg selaku penasehat

akademik yang selama ini telah banyak memberikan nasehat selama penulis
menjalankan pendidikan di fakultas kedokteran Gigi Universitas Sumatera Utara.
3.

Seluruh staf pengajar dan pegawai Departemen Biologi Oral FKG USU Lisna

Unita, drg., M.Kes, Minasari, drg., Yendriwati, drg., M.Kes., Dr. Ameta Primasari,
drg., MDSc., M.Kes., dan Yumi Lindawati, drg., selaku para staf pengajar
Departemen Biologi Oral. Ngaisah dan Dani Irma Suryani selaku staf pegawai yang
telah membantu dalam penelitian, memberikan saran, arahan dan motivasi dalam
penyelesaian skripsi ini.
4.

Seluruh dokter dan pegawai di Departemen Patologi Anatomi FK-

USU/RSUP H. Adam Malik Medan.

Universitas Sumatera Utara


7

5.

Teman dekat dan sahabat-sahabat penulis Lulu, Julia, Witta, Olivia yang telah

banyak memberikan masukan dalam pembuatan skripsi ini. Femy Rilinda, Shalini
Jagadisen, Dwi Desmiana, Novelya, Sherly, Sri fitria yang telah memberi semangat
penulis dalam penyelesaian skripsi ini.
8.

Teristimewa kepada kedua orang tua tercinta Ayah Djoni Iwan dan Ibu Elty

N yang selalu memberikan semangat, nasehat, kesabaran, doa, kasih sayang dan
dukungan baik moral maupun materil sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi
ini. Tidak lupa penulis mengucapkan terima kasih kepada kedua adik tersayang
Pangeran dan Irawan Chandra, abo Rita, sepupu Henny Sutrisman,drg.,MDSc untuk
semua doa, semangat, dukungan dan kasih sayangnya.
Penulis menyadari bahwa masih banyak kekurangan di dalam penulisan

skripsi ini dan penulis mengharapkan saran dan kritik yang membangun untuk
menghasilkan karya yang lebih baik lagi di kemudian hari.
Akhir kata penulis mengharapkan semoga hasil karya atau skripsi ini dapat
memberikan sumbangan pikiran yang berguna bagi fakultas dan mahasiswa.

Medan,11 Juli 2013
Penulis,

(..................................)
Anita Carolina
NIM: 090600142

Universitas Sumatera Utara

8

DAFTAR ISI

Halaman
HALAMAN JUDUL.............................................................................

HALAMAN PERSETUJUAN..............................................................
HALAMAN TIM PENGUJI.................................................................
KATA PENGANTAR...........................................................................
DAFTAR ISI.........................................................................................

i

DAFTAR GAMBAR.............................................................................

iii

DAFTRA TABEL.................................................................................

iv

DAFTAR SINGKATAN.......................................................................

v

DAFTAR LAMPIRAN.........................................................................


vi

BAB 1 PENDAHULUAN.....................................................................
1.1 Latar belakang.....................................................................
1.2 Rumusan masalah................................................................
1.3 Tujuan penelitian.................................................................
1.3.1 Tujuan umum....................................................................
1.3.2 Tujuan khusus...................................................................
1.4 Manfaat penelitian.............................................................
1.4.1 Manfaat teoritis.................................................................
1.4.2 Manfaat praktis.................................................................

1
1
3
3
3
3
3
3
3

BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA............................................................
2.1 KSS rongga mulut................................................................
2.1.1 Gambaran histopatologi Sel skuamosa rongga
mulut................................................................................
2.1.2 Etiologi.............................................................................

4
4
5
8

Universitas Sumatera Utara

9

2.2 Epstein barr virus (EBV).....................................................
2.2.1 Gejala klinis EBV..............................................................
2.2.2 Siklus hidup EBV..............................................................
2.2.3 Patogenesis.......................................................................
2.3 Latent membrane protein-1 (Lmp-1)...................................
2.3.1 Hubungan Lmp-1 terhadap KSS rongga mulut.................
2.4 Pewarnaan imunohistokimia................................................
2.5 Kerangka konsep.................................................................

9
10
10
11
12
13
16
19

BAB 3 METODE PENELITIAN..........................................................
3.1 Jenis penelitian.....................................................................
3.2 Lokasi penelitian dan waktu penelitian...............................
3.2.1 Lokasi penelitian...............................................................
3.2.2 Waktu penelitian...............................................................
3.3 Populasi dan sampel............................................................
3.3.1 Populasi.............................................................................
3.3.2 Sampel..............................................................................
3.3.3 Besar sampel.....................................................................
3.4 Kriteria inklusi dan ekslusi..................................................
3.4.1 Kriteria inklusi..................................................................
3.4.2 Kriteria ekslusi..................................................................
3.5 Kerangka operasional..........................................................
3.6 Variabel penelitian...............................................................
3.6.1 Variabel bebas..................................................................
3.6.2 Variabel terikat.................................................................
3.6.3 Variabel terkendali............................................................
3.7 Definisi operasional.............................................................
3.8 Alat dan bahan.....................................................................
3.8.1 Alat penelitian...................................................................
3.8.2 Bahan penelitian...............................................................
3.9 Metode pengumpulan data...................................................
3.9.1 Pembuatan sediaan mikroskpis........................................
3.9.2 Prosedur pewarnaan Hematoxiline Eosin........................
3.9.3 Prosedur pulasan imunohistokimia antibodi monoclonal
Lmp-1...............................................................................
3.10 Analisis data.......................................................................

20
20
20
20
20
20
20
20
21
21
21
22
22
23
23
23
23
23
25
25
26
26
26
27
27
28

BAB 4 HASIL PENELITIAN...............................................................

Universitas Sumatera Utara

10

BAB 5 PEMBAHASAN.......................................................................

29

BAB 6 KESIMPULAN DAN SARAN.................................................

34

DAFTAR PUSTAKA............................................................................

38

LAMPIRAN

42

Universitas Sumatera Utara

11

DAFTAR GAMBAR

Halaman

Gambar
1

Gambaran histopatologi KSS differensiasi baik....................

6

2

Gambaran histopatologi KSS differensiasi sedang.................

7

3

Gambaran histopatologi KSSdifferensiasi buruk...................

7

4

Dua virions Epstein-barr virus………….................................

9

5

Model EBV..............................................................................

12

6

Skema molekuler dasar kanker...............................................

13

7

Siklus sel dan replikasi sel......................................................

14

8

Skema ilustrasi p53checkpoint...............................................

15

9

Peran p53 pada sel normal dan sel yang mengalami mutasi..

16

10

Metode ImunohistokimiaDirect……......................................

17

11

Metode Imunohistokimia Indirect…......................................

18

Universitas Sumatera Utara

12

DAFTAR TABEL

Tabel

Halaman

1

Klasifikasi WHO tumor pada kavitas rongga mulut.........

5

2

Persentase distribusi frekuensi karakteristik umum subjek yang diteliti..................................................................

29

Distribusi frekuensi tampilan imunohistokimia Lmp-1
pada karsinoma sel skuamosa rongga mulut.....................

30

Distribusi frekuensi tampilan imunohistokimia Lmp-1
positif pada KSS rongga Mulut........................................

31

Distribusi
intensitas
tampilan
pewarnaan
immunohistokimia Lmp-1 positif pada KSS rongga
mulut.................................................................................

31

Distribusi luas tampilan pewarnaan imunohistokimia
Lmp-1 positif pada KSS rongga mulut..............................

32

Distribusi hasil perkalian intensitas warna dengan
tampilan imunohistokimia
(hasil pewarnaan imuno
tokimia) Lmp-1 positif pada karsinoma sel skuamosa ron
mulut....................................................................

33

3
4

5

6

7

Universitas Sumatera Utara

13

DAFTAR SINGKATAN

CD21

Cluster of differentiation 21

CR 2

Complement reseptor type 2

DAB

Diamino benzinidine

EBV

Epstein-barr virus

EBER

EBV-RNA

EBNA

EBV nuclear antigen

Gp

Glikoprotein

HHV-4

Human herpesvirus-4

HSV

Herpes simplex virus

HPV

Human papiloma virus

HE

Pewarnaan Hematoksilin Eosin

IHK

Immunohistokimia

IL-10

Interleukin-10

KSS

Karsinoma sel skuamosa

Lmp-1

Latent membrane protein-1

NCL-RTU-D

Novostain Universal detection kit

PBS

Phosphate Buffer Saline

PMN

Polimorfonukleus

SCC

Squamous cell carcinoma

UV

Sinar Ultra violet

Universitas Sumatera Utara

14

DAFTAR LAMPIRAN

1. Alur Pikir.
2. Kerangka Teori.
3. Hasil pewarnaan imunohistokimia Lmp-1 pada KSS rongga mulut.
4. Gambar alat dan bahan.
5. a. Pembuatan sediaan mikroskopis dari blok parafin.
b. Proses Pemulasan Imunohisokimia antibodi Lmp-1.
6. Data hasil pewarnaan imunohistokimia.
7. Tabel hasil.
8. Ethical Clearance

Universitas Sumatera Utara