Aktivitas imunomodulator dari fraksi air herba Songgolangit (Tridax procumbens L.) terhadap mencit jantan galur balb/C dengan metode Carbon Clearance dan Neutrophil Adhesion - USD Repository

  

AKTIVITAS IMUNOMODULATOR DARI FRAKSI AIR HERBA

SONGGOLANGIT ( Tridax procumbens L. ) TERHADAP MENCIT

JANTAN GALUR BALB/C DENGAN METODE CARBON CLEARANCE

DAN NEUTROPHIL ADHESION

  

SKRIPSI

  Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)

  Program Studi Ilmu Farmasi Oleh:

  Ika Rahayu NIM : 068114063

  

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

  

AKTIVITAS IMUNOMODULATOR DARI FRAKSI AIR HERBA

SONGGOLANGIT ( Tridax procumbens L. ) TERHADAP MENCIT

JANTAN GALUR BALB/C DENGAN METODE CARBON CLEARANCE

DAN NEUTROPHIL ADHESION

  

SKRIPSI

  Diajukan untuk Memenuhi Salah Satu Syarat Memperoleh Gelar Sarjana Farmasi (S.Farm)

  Program Studi Ilmu Farmasi Oleh:

  Ika Rahayu NIM : 068114063

  

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS SANATA DHARMA

YOGYAKARTA

  

LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN

PUBLIKASI KARYA ILMIAH UNTUK KEPENTINGAN AKADEMIS

  Yang bertanda tangan dibawah ini, saya mahasiswa Universitas Sanata Dharma: Nama : Ika Rahayu NIM : 068114063 Demi pengembangan ilmu pengetahuan, saya memberikan kepada Perpustakaan Universitas Sanata Dharma karya ilmiah saya yang berjudul:

  

“Aktivitas Imunomodulator dari Fraksi Air Herba Songgolangit (Tridax

procumbens L.) Terhadap Mencit Jantan Galur Balb/c dengan Metode Carbon Clearance dan Neutrophil Adhesion”.

  beserta perangkat yang diperlukan (bila ada). Dengan demikian saya memberikan kepada Perpustakaan Universitas Sanata Dharma hak untuk menyimpan, mengalihkan, dalam bentuk media lain, mengelolanya dalam bentuk pangkalan data, mendistribusikan secara terbatas, dan mempublikasikannya di internet atau media lain untuk kepentingan akademis tanpa perlu meminta ijin dari saya maupun memberikan royalti kepada saya selama tetap mencantumkan nama saya sebagai penulis Demikian pernyataan ini saya buat dengan sebenarnya.

  Dibuat di Yogyakarta Pada tanggal : 21 Februari 2011 Yang menyatakan

PERNYATAAN KEASLIAN KARYA

  Saya menyatakan dengan sesungguhnya bahwa skripsi yang saya tulis ini tidak memuat karya atau bagian karya orang lain, kecuali yang telah disebutkan dalam kutipan dan daftar pustaka, sebagaimana layaknya karya ilmiah.

  Apabila di kemudian hari ditemukan indikasi plagiarisme dalam naskah ini, maka saya bersedia menanggung segala sanksi sesuai peraturan perundang- undangan yang berlaku.

  Yogyakarta, 21 Februari 2011 Penulis,

  (Ika Rahayu)

  

PRAKATA

  Puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Esa atas segala kasih dan berkat-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi dengan judul “Aktivitas Imunomodulator Dari Fraksi Air Heba Songgolangit ( Tridax procumbens L.) Terhadap Mencit Jantan Galur Balb/c dengan Metode Carbon Clearance dan

  

Neutrophil Adhesion ”. Skripsi ini dibuat untuk memenuhi salah satu syarat

  memperoleh gelar Sarjana Farmasi (S.Farm.) pada Program Studi Farmasi di Universitas Sanata Dharma Yogyakarta.

  Penulisan skripsi ini tidak mungkin selesai tanpa adanya bimbingan, bantuan dan dukungan dari berbagai pihak. Pada kesempatan ini, penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada:

  1. Bapak Ipang Djunarko, M.Sc., Apt. selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma.

  2. Bapak Dr. C.J. Soegihardjo, Apt., selaku Dosen Pembimbing, yang selalu memberikan semangat, dukungan, bimbingan, dan saran selama penyusunan skripsi.

  3. Bapak Yohanes Dwiatmaka, M.Si., Apt., selaku Dosen Penguji yang telah berkenan menguji, memberikan masukan, dan saran.

  4. Ibu Yunita Linawati, M.Sc., Apt., selaku Dosen Penguji yang telah berkenan menguji, dan banyak memberikan masukan serta pengetahuan yang berkaitan dengan skripsi ini.

  5. Mas Heru, Mas Parjiman, Mas Wagiran, Mas Kayat, Mas Andri, Mas Sigit, Mas Bimo dan segenap dosen dan karyawan di Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma yang telah memberikan bimbingan dan bantuan.

  6. Bayu Reztha Nagara atas motivasi untuk tidak pernah menyerah dan bantuan-bantuannya.

  7. Ko Ahian yang selalu mengingatkan dan memberi semangat disaat-saat sulit.

  8. M.A Ratna Kumalasari, Pius Perwita, , Kho Jimmy, Yohanes Pungky, Jayanti Michele, atas kerjasama, diskusi, canda tawa dan keluh kesah selama penyusunan skripsi ini.

  9. Seluruh anggota “kos Dewi” terutama Eka Hapsari, Dwitya Kusuma, Reni Agustina, Irene Christina, Nisia Anggita, Elizabeth Himawan, dan Venny Handayani.

  10. Teman-teman angkatan 2006 Fakultas Farmasi Universitas Sanata Dharma atas kebersamaannya.

  11. Semua pihak yang telah banyak memberikan dukungan dalam penyelesaian skripsi ini yang tidak dapat disebutkan satu persatu.

  Penulis menyadari masih banyak kekurangan dan ketidaksempurnaan yang ada dalam penyusunan skripsi ini. Untuk itulah penulis mengharapkan kritik dan saran yang dapat membuat karya ini menjadi lebih baik. Akhir kata, semoga penelitian skripsi yang telah dilakukan penulis dapat bermanfaat bagi perkembangan ilmu kefarmasian pada umumnya, utamanya dalam bidang imunologi.

  Yogyakarta, Desember 2010 Penulis

  

DAFTAR ISI

  HALAMAN JUDUL ................................................................................... .. ii HALAMAN PERSETUJUAN PEMBIMBING ........................................... iii HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................... iv

  HALAMAN PERSEMBAHAN ................................................................... v LEMBAR PERNYATAAN PERSETUJUAN PUBLIKASI KARYA

  ILMIAH ........................................................................................................ vi PERNYATAAN KEASLIAN KARYA ....................................................... vii PRAKATA .................................................................................................... viii DAFTAR ISI ................................................................................................. xi DAFTAR TABEL ......................................................................................... xiv DAFTAR GAMBAR .................................................................................... xv

  DAFTAR LAMPIRAN ................................................................................. xvii

  INTISARI ...................................................................................................... xviii

  

ABSTRACT .................................................................................................... xix

  BAB I PENGANTAR .................................................................................. 1 A. Latar Belakang ..................................................................................... 1 1. Permasalahan .............................................................................. 2

  2. Keaslian penelitian ...................................................................... 3 3.

  Manfaat penelitian ....................................................................... 4

  B. Tujuan penelitian .................................................................................. 4

  BAB II PENELAAHAN PUSTAKA........................................................... 5

  1. Keterangan botani ....................................................................... 5

  ............................................................................................... 21 K. Landasan teori ...................................................................................... 22 L. Hipotesis ...............................................................................................

  1.Determinasi tanaman ......................................................................... 26

  D. Tata Cara Penelitian ............................................................................. 26

  2. Bahan .......................................................................................... 26

  1. Alat ............................................................................................ 26

  C. Alat dan Bahan Penelitian .................................................................... 26

  B. Variabel Penelitian dan Definisi Operasional ................................... 24

  A. Jenis dan Rancangan Penelitian ........................................................ 24

  23 BAB III METODOLOGI PENELITIAN ................................................... 24

  ®

  2. Morfologi .................................................................................... 6 3.

  20 J. Imboost

  18 I. Makrofag ..............................................................................................

  18 G. Carbon clearance ................................................................................. 18 H. Neutrofil ...............................................................................................

  16 F. Neutrophil adhesion .............................................................................

  D. Imunomodulator……… ....................................................................... 15 E. Ekstraksi ...............................................................................................

  C. Sistem imun……………. ..................................................................... 10

  B. Flavonoid .............................................................................................. 7

  Khasiat songgolangit ................................................................... 6

  2.Pengumpulan bahan .......................................................................... 27

  3. Pembuatan fraksi air herba songgolangit ................................... 27

  4. Identifikasi senyawa flavonoid dengan metode KLT ................ 28

  5. Prosedur penelitian ...................................................................... 29

  6. Carbon clearance test ................................................................. 29

  7. Neutrophil adhesion test ............................................................. 30

  E. Analisis Hasil ....................................................................................... 30

  BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ..................................................... 31 A. Determinasi Tanaman ..........................................................................

  31 B. Pengumpulan Herba Songgolangit dan Pembuatan Simplisia .............

  31 C. Hasil Ekstraksi ..................................................................................... 32

  D. Identifikasi Flavonoid .......................................................................... 34

  E. Hasil Perlakuan Terhadap Hewan Uji .................................................. 35

  F. Cara Kerja Makrofag dan Neutrofil Terhadap Sistem Imun ................ 38 G. Hasil Uji Carbon Clearance ................................................................

  41 H. Hasil Uji Neutrophil Adhesion .............................................................

  46 BAB V. KESIMPULAN DAN SARAN ....................................................... 51

  A. Kesimpulan .......................................................................................... 51

  B. Saran ..................................................................................................... 52 DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 53 LAMPIRAN .................................................................................................. 57 BIOGRAFI PENULIS .................................................................................. 129

  

DAFTAR TABEL

  Tabel I. Hasil Uji Kualitatif KLT Fraksi Air Herba Songgolangit ............... 35 Tabel II. Deskripsi Indeks Fagositosis dengan Carbon Clearance Test ....... 42 Tabel III. Test Homogeneity of Variances Indeks Fagositosis ...................... 43 Tabel IV. One Way ANOVA Indeks Fagositosis.......................................... 44 Tabel V. Rangkuman Hasil Post Hoc Test Bonferroni Carbon Clearance .. 44 Tabel VI. Deskripsi Persentase Neutrophil Adhesion Test ........................... 47 Tabel VII. Test Homogeneity of Variances Neutrophil Adhesion Test ......... 48 Tabel VIII. One Way ANOVA Neutrophil Adhesion ................................... 48 Tabel IX. Rangkuman Hasil Post Hoc Test Bonferroni Neutrophil

  

Adhesion ................................................................... .................... 49

  

DAFTAR GAMBAR

  Gambar 1. Tanaman Tridax procumbens ................................................... 5 Gambar 2. Struktur Molekuler dari Rangka Flavon

  (2-fenil-1,4-benzopiron

  8 Gambar 3. Struktur Isoflavon .................................................................... 8 Gambar 4. Struktur Neoflavonoid .............................................................. 8 Gambar 5. Sistem Imun ............................................................................. 11 Gambar 6. Neutrofil Segmen dan Neutrofil Batang .................................. 19 Gambar 7. Makrofag ................................................................................. . 20 Gambar 8. Profil Rata-Rata Berat Badan Mencit Tiap Hari dengan Metode

  Carbon Clearance ...................................................................... 38

  Gambar 9. Profil Rata-Rata Berat Badan Mencit Tiap Hari dengan Metode

  Neutrophil Adhesion .................................................................. 38

  Gambar 10. Ilustrasi Sel Makrofag .............................................................. 40 Gambar 11. Histogram Rata-Rata Indeks Fagositosis ................................. 45 Gambar 12. Histogram Rata-Rata Neutrophil Adhesion .............................. 50

  DAFTAR LAMPIRAN

  Lampiran 1. Perhitungan Dosis Fraksi Air Herba Songgolangit ............. 57 Lampiran 2. Perhitungan Konsentrasi untuk Pembuatan 50ml Ekstrak

  Fraksi Air Herba Songgolangit ............................................. 59 Lampiran 3. Perhitungan Volume Pemberian Fraksi Air Herba

  Songgolangit Dosis I, II, III, dan Kontrol Negatif CMC Na 0,5% ....................................................................... 60

  Lampiran 4. Perhitungan Data Carbon Clearance Fraksi Air Herba Songgolangit Dosis I, II, III, Kontrol Negatif, dan Kontrol

  Positif …………………....…................................................ 62 Lampiran 5. Perhitungan Data Neutrophil Adhesion Fraksi Air Herba

  Songgolangit Dosis I, II, III, Kontrol Negatif, dan Kontrol Positif ....................................................................... 63

  Lampiran 6. Data Pembuatan Ekstrak Herba Songgolangit ..................... 65 Lampiran 7. Perhitungan Rendemen Fraksi Air Herba Songgolangit ....... 66 Lampiran 8. Foto Hewan Uji ..................................................................... 67 Lampiran 9. Foto Ekstrak Kental Fraksi Air Herba Songgolangit.........… 68

  ®

  Lampiran 10. Foto Kontrol Positif Imboost ............................................... 69 Lampiran 11. Foto Preparat Sel darah Mencit Setelah Diberi Pewarna

  Giemsa....................……………............................................ 70 Lampiran 12. Foto Neutrofil Sel Darah Mencit untuk Differential

  Lampiran 13. Uji Kualitatif Flavonoid dengan KLT………….….……….. 72 Lampiran 14. Hasil Analisa Statistik Neutrophil Adhesion dengan One Way

  

ANOVA .................................................................................. 74

  Lampiran 15. Hasil Analisa Statistik Indeks Fagositosis dengan One Way

  

ANOVA .................................................................................. 76

  Lampiran 16. Surat Determinasi Herba Tridax procumbens L. ………....... 78 Lampiran 17. Hasil Analisa Pemeriksaan Sel Darah Mencit......................... 79

  

INTISARI

Sistem imun merupakan sistem pertahanan tubuh terhadap suatu penyakit.

  Tanaman herba songgolangit adalah salah satu tanaman yang diduga dapat meningkatkan sistem imun tubuh. Berbagai penelitian yang telah dilakukan menyatakan bahwa ekstrak etanolik herba songgolangit berkhasiat meningkatkan sistem imun. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui aktivitas imunomodulator herba songgolangit terhadap mencit jantan galur balbc/c bila dibandingkan dengan kontrol.

  Penelitian ini adalah penelitian eksperimental murni dengan rancangan acak lengkap pola satu arah. Mencit jantan galur balb/c diberi perlakuan ekstrak fraksi air herba songgolangit, kemudian diteliti aktivitas imunomodulatornya dengan menggunakan metode carbon clearance dan neutrophil adhesion. Pengukuran aktivitas imunomodulator dilakukan dengan menghitung indeks fagositosis dan jumlah persen pelekatan neutrofil pada jaringan darah. Data yang diperoleh kemudian diolah secara statistik dengan uji One Way ANOVA.

  Hasil penelitian menunjukkan bahwa ekstrak fraksi air herba songgolangit mempunyai aktivitas imunomodulator dengan adanya peningkatan indeks fagositosis dan persen pelekatan neutrofil dibandingkan kontrol. Aktivitas imunomodulator herba songgolangit paling besar terjadi pada kelompok perlakuan dosis III (529,984 mg/kg BB), berbeda signifikan bila dibandingkan dengan kontrol negatif dan berbeda tidak bermakna bila dibandingkan dengan kontrol

  ®

  positif Imboost . Hal ini menunjukan bahwa fraksi air herba songgolangit memiliki efek aktivitas imunomodulator yang sama dengan kontrol positif

  ® Imboost bila diberikan pada hewan uji mencit Balb/c.

  Kata kunci : carbon clearance, neutrophil adhesion, mencit jantan, fraksi air Tridax procumbens L, imunomodulator.

  

ABSTRACT

  Immune system protects the body from many diseases. Tridax procumbens L. is plant which is expected to increase immune system. Various researches had been done previously show that ethanolic extract of Tridax procumbens’s increased immune system. The purposes of this research are to know the immunomodulatory activity of aqueous extract of Tridax procumbens’s whole plant on balb/c male mice if compared with control.

  This research is a pure experimental research with the complete random design one way pattern. Balb/c male mice were given aqueous extract of Tridax

  

procumbens ’s whole plant, then the immunomodulatory activity was observed by

  using carbon clearance and neutrophil adhesion method. The result was analysed statistically by using One Way Anova test.

  The result indicates that aqueous extract of Tridax procumbens’s whole plant shows immunomodulatory activity by the increase of phagocytic index and precentage of neutrophil adhesion compared with control. The highest immumodulatory activity is achieved at the dose of 529,984 mg/kg BB, significantly different from negative control and not significantly different from

  ®

  positive control Imboost . Its means that the Tridax procumbens L. have activity

  ®

  immunodulatory effect as same as with the control positive Imboost if its given to the Balb/c mice. Key words : carbon clearance, neutrophil adhesion, male mice, aqueous extract of Tridax procumbens L, immunomodulator.

BAB I PENGANTAR A. Latar Belakang Indonesia merupakan salah satu negara tropis yang kaya akan berbagai

  tanaman, termasuk tanaman obat. Ada lebih dari 1.000 jenis tanaman obat yang dapat dimanfaatkan sebagai bahan baku obat modern dan tradisional. Walaupun sebagian spesies tanaman obat tersebut sudah diuji secara klinis menyangkut kandungan fitokimia, khasiat, dan keamanan penggunaannya, namun masih banyak juga yang belum diketahui potensi dan kegunaannya. Hal ini membuka peluang besar untuk dilakukan penelitian lebih lanjut, meskipun pada awalnya informasi tentang khasiat bahan alami hanya berdasarkan pengalaman turun temurun (Rukmana, 2002).

  Eksplorasi tumbuhan obat sebagai obat alami perlu dipacu, hal ini dapat dilakukan melalui pengembangan obat tradisional secara tepat, sehingga baik keamanan maupun khasiatnya dapat dipertanggungjawabkan secara medik. Beberapa kandungan dari tanaman selain mengandung gizi yang menyehatkan, juga berkhasiat menguatkan sistem kekebalan tubuh dan menangkal penyakit.

  Tumbuhan obat yang bekerja pada sistem imunitas bukanlah bekerja sebagai efektor yang langsung menghadapi penyebab penyakitnya seperti halnya antibiotik, melainkan bekerja melalui sistem imunitas. Bahan-bahan yang bekerja demikian digolongkan sebagai imunomodulator. Jadi apabila kita mengobati suatu penyakit yang disebabkan oleh infeksi mikroorganisme dengan imunomodulator, maka imunomodulator tersebut tidak akan menghadapi langsung mikroorganismenya, melainkan sistem imunitas akan didorong untuk menghadapi melalui efektor sistem imun (Subowo, 1993).

  Tridax procumbens Linn yang biasanya dikenal dengan sebutan “coat buttons ” merupakan tanaman yang penting digunakan untuk melawan berbagai

  macam penyakit dalam pengobatan tradisional seperti penyembuhan luka, hepatoprotektif, antiinflamasi, antidiabetes, dan aktivitas imunomodulator (Zambare, Chakraborthy, dan Banerjee, 2010).

  Keistimewaan lain adalah songgolangit tidak beracun, tidak ada kerusakan yang terjadi pada pemberian ekstrak herba songgolangit terhadap hewan uji, jadi aman untuk hati dan ginjal. Ekstrak-ekstrak dari Tridax

  

procumbens telah dilaporkan memiliki berbagai macam efek farmakologis,

  aktivitas antimikroba melawan bakteri gram negatif dan gram positif, dan menstimulasi penyembuhan luka. Flavon, glikosida, polisakarida, monosakarida, telah diisolasi dari bagian tanaman ini (Oladunmoye, 2006).

  asteraceae

  Dari penelitian ini diharapkan adanya pengembangan sediaan herbal yang mampu meningkatkan sistem imun sehingga imunitas tubuh meningkat dan tubuh dalam kondisi siap dalam menghadapi penyakit.

1. Permasalahan

  a. Bagaimana perbandingan nilai indeks fagositosis mencit yang diberi fraksi air herba songgolangit dengan metode carbon clearance bila dibandingkan dengan kontrol? b.

  Bagaimana perbandingan pelekatan jumlah neutrofil pada serat nilon dalam pembuluh darah mencit yang diberi fraksi air herba songgolangit bila dibandingkan dengan kontrol?

2. Keaslian penelitian

  Sejauh penelusuran pustaka yang telah dilakukan oleh penulis, telah dilakukan penelitian mengenai “Immunomodulatory Effects of Tridax procumbens

  on Swiss Albino Rats Orrogastrically Dosed with Pseudomonas aeruginosa

  (NCIB 950) oleh Oladunmoye (2006) dengan hasil penelitian, yaitu Tridax

  

procumbens memiliki efek stimulan pada sistem imun humoral terhadap mencit

  Swiss albino, meningkatkan fagositosis, dan juga memberikan perlindungan terhadap infeksi dari Pseudomonas aeruginosa. Namun, Uji Aktivitas Immunomodulator dari Fraksi Air Herba Songgolangit (Tridax procumbens L.) Terhadap Mencit Jantan Galur Balb/c dengan Metode Carbon Clearance dan belum pernah dilakukan. Perbedaan dengan penelitian

  Neutrophil Adhesion

  imunomodulator Tridax procumbens sebelumnya adalah cara uji imunomodulator, peringkat dosis, metode ekstraksi, dan pada penelitian ini tidak menggunakan

  Pseudomonas aeruginosa .

3. Manfaat penelitian

  a. Manfaat teoritis Hasil penelitian ini dapat digunakan untuk menambah khasanah dan perkembangan ilmu pengetahuan di bidang kefarmasian, terkait dengan bidang imunitas.

  b.

  Manfaat praktis penelitian ini adalah pemanfaatan herba songgolangit sebagai peningkat sistem imun atau dapat dikembangkan menjadi produk herbal imunostimulan.

B. Tujuan Penelitian

  Tujuan dari penelitian mengenai uji “Aktivitas Immunomodulator dari Fraksi Air Herba Songgolangit (Tridax procumbens L.) terhadap Mencit Jantan Galur Balb/c dengan Metode Carbon Clearance dan Neutrophil Adhesion”, yaitu:

  1. Mengetahui perbandingan nilai indeks fagositosis mencit yang diberi fraksi air herba songgolangit dengan metode bersihan karbon bila dibandingkan dengan kontrol.

  2. Mengetahui perbandingan pelekatan jumlah neutrofil pada serat nilon dalam pembuluh darah mencit yang diberi fraksi air herba songgolangit bila dibandingkan dengan kontrol.

BAB II PENELAAHAN PUSTAKA A. Songgolangit

  1. Keterangan botani Gambar 1. Tanaman Tridax procumbens L.

  Herba songgolangit (Tridax procumbens L.) termasuk dalam familia Asteraceae. Nama lain dari tanaman songgolangit antara lain Gletang, Ind, J, Gobesan, J, Katumpang, J, Londotan, J, Orang-aring, J, Prepes, J, Sidawala, J, Srunen, J, Tar setaran, Md, Toroto, Md (van Steenis, 1975).

  Tridax procumbens dikenal dengan nama yang berbeda; di Inggris

  dikenal sebagai Mexican Daisy, dalam Ayurvedic dikenal sebagai Jayanti, di Tamil sebagai Vettukkaaya-thalai dan oleh orang-orang dikenal sebagai Akala Kohadi (Dhanabalan, Doss, Jagadeeswari, Balachandar, Kezia, Parivuguna, Josephine, Vaidheki, dan Kalamani, 2008).

  Berasal dari Amerika tropis, terutama di tempat kering, cerah matahari, 1-1500 m. Tepi jalan dan tanggul, tepi sungai, ladang, lapangan rumput (van Steenis, 1975).

  2. Morfologi

  Herba menahun, dengan akar tombak dan menjalar pada pangkalnya, batang tegak serong ke atas, tinggi 0,2-0,8 m. Batang bulat, sering keunguan, berambut panjang. Daun berhadapan, bertangkai, helaian daun bulat telur memanjang, bergerigi panjang hingga berlekuk menyirip, berambut, 2,5-6 kali 2- 4,5 cm. Bongkol terminal atau seolah-olah di ketiak, bertangkai panjang. Pembalut bentuk lonceng. Dasar bunga majemuk dengan sisik jerami bentuk garis, tetap tinggal. Bunga tepi betina, tabung langsing, kuning kehijauan, berambut panjang, pinggiran oval lebar, dengan pangkal dan ujung membulat, bercangap 3-4. Bunga cakram banyak, berkelamin dua, pinggiran bentuk tabung, berbibir lima. Tabung kepala sari kuning. Cabang tangkai putik panjang, runcing, berambut. Buah keras bersegi, coklat tua atau hitam, berambut rapat, lk 2 meter tinggi, dimahkotai oleh 15-20 rambut sikat, seperti bulu, kuat dan runcing (van Steenis, 1975).

  3. Khasiat songgolangit

  Saat ini diketahui terdapat tiga zat aktif pada Tridax procumbens di antaranya, flavonoid yang bersifat menyejukkan dan menghilangkan rasa nyeri rematik pada tulang dan pinggang, tanin yang berguna anti radang, antibiotik, peluruh kencing, pereda sakit dan penurunan asam urat, saponin yang bersifat analgesik yaitu meredakan rasa sakit dan nyeri (Kartika, 2007).

  Daunnya juga dipakai untuk menyembuhkan diare, disentri, bronchial

  

catarrh , dan mencegah rambut rontok. Flavonoid baru (procumbenetin)

  belakangan telah diisolasi dari daunnya dan merupakan 3,6-dimethoxy-5,7,2',3',4'- pentahydroxyflavone 7-O-beta-D-glucopyranoside (Kartika, 2007).

  Bunganya juga bermanfaat sebagai antiseptik, insecticidal, dan

  paracitidal , juga mengandung steroidal saponin, yaitu beta sitosterol 3-O-beta-D-

xylopiranoside . Tanaman ini juga kaya akan kandungan zat mineral diantaranya

  kalium (K), magnesium (Mg), dan kalsium (Ca) yang baik untuk menjaga kondisi tulang dan jaringannya (Kartika, 2007).

  B.

  

Flavonoid

  Flavonoid merupakan suatu senyawa polifenol yang memiliki inti dasar terdiri atas 15 atom karbon, yaitu dua cincin aromatik yang dihubungkan oleh rantai linier tiga atom karbon yang dapat atau tidak dapat membentuk cincin ketiga. Flavonoid merupakan suatu senyawa polifenol yang strukturnya merupakan turunan dari inti aromatik flavon atau 2-fenilbenzopiran. Golongan flavonoid dapat digambarkan sebagai deretan senyawa C6-C3-C6. Artinya, kerangka karbonnya terdiri atas dua gugus C6 (cincin benzena tersubstitusi) disambungkan oleh rantai alifatik tiga karbon (Robinson, 1995).

  Gam mbar 2. Stru uktur Molek kuler dari Ra angka Flavo on (2-fenil-1 1,4-benzopir ron)  

  

Gamb bar 3. Strukt tur Isoflavo n

 

  Gamb bar 4. Strukt tur Neoflavo onoid

  F Flavonoid m mencakup b banyak pigm men yang paling umu um dan ter rdapat pada selu uruh dunia a tumbuhan n mulai F Fungus sam mpai Angio ospermae. Pada tumbuhan n tinggi, flav vonoid terd dapat baik d dalam bagia an vegetatif f maupun d dalam bunga. E Efek flavon noid terhad dap macam m-macam organisme sangat ba anyak macamnya a dan dap pat menjel laskan men ngapa tum mbuhan yan ng mengan ndung

  Flavonoid dapat bekerja sebagai inhibitor kuat pernafasan, merupakan senyawa pereduksi yang baik, penghambat banyak reaksi oksidasi, baik secara enzim maupun non enzim, mengurangi pembekuan darah, antihipertensi, dan antimutagen. Flavonoid bertindak sebagai penampung yang baik radikal hidroksi dan superoksida yang baik. Dengan demikian, flavonoid dapat melindungi membran lipid terhadap reaksi yang merusak. Aktivitas antioksidannya mungkin dapat menjelaskan mengapa flavonoid tertentu merupakan komponen aktif tumbuhan yang digunakan secara tradisional untuk mengobati gangguan fungsi hati (Robinson, 1995).

  Aktivitas flavonoid yang bermanfaat untuk kesehatan antara lain efek antioksidan, antikarsikogenik, antiproliferatif, antiangiogenik, antiinflamasi, dan antiestrogenik dengan tidak ada atau sedikit toksik. Berdasarkan sifat di atas, banyak suplemen makanan atau produk herbal yang mengandung flavonoid dapat diterima secara komersial pada saat ini (Zhang dan Morris, 2003).

  Flavonoid merupakan kandungan khas pada tumbuhan hijau, kecuali untuk golongan alga. Menurut penelitian, kira-kira 2% dari seluruh karbon yang difotosintesis oleh tumbuhan diubah menjadi flavonoid atau senyawa yang berkaitan erat dengannya. Flavonoid sebenarnya terdapat pada semua bagian tumbuhan termasuk daun, akar, kayu, kulit, tepung sari, nektar, bunga, dan buah buni (Harborne, 1987)

  Kelarutan flavonoid berbeda-beda sesuai dengan golongan dan substitusinya (Robbinson, 1995). Kelarutan ini disebabkan oleh polaritasnya yang berbeda-beda, sehingga untuk mengekstraksi digunakan pelarut yang memiliki polaritas yang sesuai dengan polaritas flavonoid tersebut. Pelarut-pelarut alkoholik umumnya merupakan pelarut pilihan untuk mengekstraksi semua golongan flavonoid. Biasanya digunakan metanol, etanol, dan propanol. Bahan- bahan kering dan berkayu dapat digunakan alkohol berair, hal ini disesuaikan dengan glikosida flavonoid. Pelarut yang kurang polar seperti benzena, kloroform, eter, dan etil asetat digunakan untuk mengekstraksi aglikon yang kurang polar seperti isoflavon, flavanon, flavon, flavavonol, dan flavonol yang termetilasi pada gugus hidroksinya (Harborne, 1987)

C. Sistem Imun

  Sistem imun merupakan mekanisme yang digunakan tubuh untuk mempertahankan keutuhannya terhadap bahaya yang dapat ditimbulkan oleh berbagai bahan dalam lingkungan hidup (Baratawidjaja, 2006).

  Pertahanan imun terdiri dari sistem imun alamiah atau non spesifik (natural/innate) dan sistem imun didapat atau spesifik (adaptive/acquired) (Baratawidjaja, 2006).

  Menurut Subowo (1993), sistem imun mempunyai tiga fungsi utama. Fungsi pertama ialah pertahanan melawan invasi mikroorganisme, jika elemen pertahanan seluler berhasil menyebar, maka hospes akan mampu mengatasi serangan tersebut. Tetapi bila elemen-elemen ini hiperaktif, maka tanda-tanda tertentu yang tidak diinginkan seperti alergi atau hipersensitivitas akan muncul.

  Sebaliknya jika elemen hipoaktif, maka kerentanan terhadap infeksi ulang akan bertambah.

  Fungsi kedua disebut homeostasis, yaitu menjaga keseimbangan pergantian sel dimana terjadi proses degradasi dan katabolisme yang bersifat normal agar unsur seluler yang telah rusak dapat dibersihkan dari tubuh.

  Fungsi ketiga disebut pengawasan (surveillance). Fungsi ini mengawasi sel-sel abnormal yang secara tetap selalu timbul dalam badan. Sel-sel abnormal ini dapat terjadi secara spontan atau disebabkan pengaruh virus tertentu atau zat-zat kimia.

  

Gambar 5. Sistem Imun (Baratawidjaja, 2004)

1.

   Sistem imun non spesifik

  Mekanisme fisiologik imunitas non spesifik berupa komponen normal tubuh yang selalu ditemukan pada individu sehat dan siap mencegah mikroba masuk tubuh dan dengan cepat menyingkirkan mikroba tersebut. Disebut non spesifik karena tidak ditunjukan terhadap mikroba tertentu, telah ada dan berfungsi sejak lahir. a.

  Pertahanan fisik/mekanik Dalam sistem pertahanan fisik atau mekanik, kulit, selaput lendir, silia saluran napas, batuk, dan bersin, merupakan garis pertahanan terhadap infeksi. Keratinosit dan lapisan epidermis kulit sehat, dan lapisan epitel mukosa yang utuh tidak dapat ditembus kebanyakan mikroba.

  b.

  Pertahanan biokimia Kebanyakan mikroba tidak dapat menembus kulit yang sehat.

  Namun beberapa dapat masuk tubuh melalui kelenjar sebaseus dan folikel rambut. pH asam, keringat, dan sekresi sebaseus, berbagai asam lemak yang dilepas kulit mempunyai efek denaturasi.

  Lisozim dalam keringat, ludah, air mata dan air susu ibu, melindungi tubuh terhadap berbagai kuman positif-Gram oleh karena dapat menghancurkan lapisan peptidoglikan dinding bakteri.

  Saliva mengandung enzim seperti laktooksidase yang merusak dinding sel mikroba dan menimbulkan kebocoran sitoplasma dan juga mengandung antibodi serta komplemen yang dapat berfungsi sebagai opsonin dalam lisis sel mikroba.

  Laktoferin dan transferin dalam serum mengikat besi yang merupakan metabolit esensial untuk hidup beberapa jenis mikroba seperti pseudomonas.

  Asam neuraminik yang mempunyai sifat antibakterial terhadap Escherichia coli dan stafilokok. c.

  Pertahanan Humoral

  1) Komplemen. Komplemen terdiri atas sejumlah besar protein

  yang bila diaktifkan akan memberikan proteksi terhadap infeksi dan berperan dalam respon inflamasi.

  2) Interferon. Merupakan sitokin berupa glikoprotein yang

  diproduksi makrofag yang diaktifkan, Natural Killer (NK) dan berbagai sel tubuh yang mengandung nukleus dan dilepas sebagai respon terhadap infeksi virus. Interferon mempunyai sifat antivirus dan dapat menginduksi sel-sel sekitar sel yang terinfeksi virus menjadi resisten terhadap virus.

  3) C-Reactive Protein (CRP). CRP merupakan salah satu protein

  fase akut, trmasuk golongan protein yang kadarnya dalam darah meningkat pada infeksi akut sebagai respon imunitas nonspesifik.

  d.

  Pertahanan Selular

  1) Fagosit. Meskipun berbagai sel dalam tubuh dapat melakukan

  fagositosis, tetapi sel utama yang berperan dalam pertahanan nonspesifik adalah sel mononuklear (monosit dan makrofag) seta sel polimorfonuklear atau granulosit. Makrofag juga berperan sebagai sel penyaji antigen (Antigen Presenting

  Cell /APC). Fagositosis yang efektif pada invasi kuman dini

  akan dapat mencegah timbulnya infeksi. Dalam kerjanya, sel fagosit juga berinteraksi dengan komplemen dan sistem imun spesifik lain. Penghancuran kuman terjadi dalam beberapa tingkat berikut, kemotaksis, menangkap, memakan (fagositosis), membunuh, dan mencerna.

  2) Makrofag. Monosit bermigrasi ke jaringan dan disana

  berdiferensiasi menjadi makrofag yang seterusnya hdup di dalam jaringan sebagai makrofag residen. Makrofag dapat hidup lama, mempunyai beberapa granul dan melepas berbagai bahan, antara lain lisozim, komplemen, interferon, dan sitokin yang semuanya memberikan kontribusi dalam pertahanan nonspesifik dan spesifik.

  3) Sel NK. Limfosit terdiri atas sel B, sel T (Th, CTL) dan sel

  Natural Killer (sel NK). Sel-sel tersebut berfungsi dalam imunitas nonspesifik terhadap virus dan sel tumor.

  4) Sel Mast. Sel mast berperan dalam reaksi alergi dan juga dalam

  pertahanan pejamu, jumlahnya menurun pada sindrom imunodefisiensi. Sel mast juga berperan pada imunitas terhadap parasit dalam usus dan terhadap invasi bakteri.

2. Sistem imun spesifik

  a. Sistem imun spesifik humoral Pemeran utama dalam sistem imun spesifik humoral adalah limfosit B atau sel B. Bila sel B dirangsang oleh benda asing, sel tersebut akan berproliferasi, berdiferensiasi, dan berkembang menjadi sel plasma yang membentuk antibodi. Antibodi yang dilepas dapat ditemukan di dalam serum. Fungsi utama antibodi ini adalah pertahanan terhadap infeksi ekstraselular, virus dan bakteri serta menetralisasi toksinnya.

  b.

  Sistem imun spesifik selular Limfosit T atau sel T berperan pada sistem imun spesifik selular. Sel tersebut juga berasal dari sel asal yang sama seperti sel B. Fungsi utama sistem imun spesifik selular ialah untuk pertahanan terhadap bakteri yang hidup intraselular, virus, jamur, parasit, dan keganasan (Baratawidjaya, 2004).

D. Imunomodulator

  Imunomodulator dapat didefinisikan sebagai substansi biologi atau sintetis yang mampu menstimulasi, menekan, atau memodulasi komponen- komponen pada sistem imun. Fungsi utama sistem imun adalah melindungi individu dalam menghadapi agen infeksi dan potensial patogen. Hal ini menempatkan sistem imun pada posisi vital yaitu antara kondisi sehat dan sakit (Juyal, 2003).

  Imunomodulator dapat diklasifikasikan menjadi tiga, yaitu imunorestorasi, imunosupresan, dan imunostimulan. Imunorestorasi adalah pengembalian fungsi sistem imun yang terganggu dengan memberikan berbagai komponen sistem imun, seperti imunoglobulin (Baratawidjaja, 2004).

  Imunostimulan adalah senyawa dari luar yang dapat membantu meningkatkan resistensi tubuh terhadap antigen yang masuk (Juyal, 2003).

  Imunosupresi adalah suatu penekanan sistem imun (Baratawidjaja, 2004). Senyawa-senyawa yang bersifat sebagai imunomodulator antara lain, yaitu rutin, saponin, polisakarida, artemisin, ginsenosid, inosin, limonen, asam linoleat, asam oleanolik, asam ursolik (Duke, 1996).

  Metode uji aktivitas imunomodulator yang dapat digunakan, yaitu:

  1. Metode bersihan karbon ("Carbon-Clearance") Pengukuran secara spektrofluorometrik laju eliminasi partikel karbon dari daerah hewan. Ini merupakan ukuran aktivitas fagositosis.

  2. Uji granulosit Percobaan in vitro dengan mengukur jumlah sel ragi atau bakteri yang difagositir oleh fraksi granulosit yang diperoleh dari serum manusia.

  Percobaan ini dilakukan di bawah mikroskop.

3. Bioluminisensi radikal

  Jumlah radikal 02 yang dibebaskan akibat kontak mitogen dengan granulosit atau makrofag, merupakan ukuran besarnya stimulasi yang dicapai.

  4. Uji transformasi limfosit T Suatu populasi limfosit T diinkubasi dengan suatu mitogen. Timidin bertanda (3 H) akan masuk ke dalam asam nukleat limfosit 1. Dengan mengukur laju permbentukan dapat ditentukan besarnya stimulasi dibandingkan dengan fitohemaglutinin A (PHA) atau konkanavalin A (Con A) (Widianto, 1987).

E. Ekstraksi

  Ekstraksi adalah kegiatan penarikan kandungan kimia yang terlarut supaya terpisah dari bahan yang tidak dapat larut dengan pelarut cair. Simplisia yang diekstrak mengandung senyawa aktif yang dapat larut dan senyawa yang tidak dapat larut dalam cairan penyari (Dirjen POM RI, 2000).

  Cairan penyari yang biasa digunakan adalah air, eter atau campuran etanol dan air. Penyarian simplisia dengan air dapat dilakukan dengan maserasi, perkolasi atau penyeduhan dengan air mendidih. Penyarian campuran etanol dan air dilakukan dengan cara maserasi dan perkolasi (Dirjen POM RI, 1979).

  Maserasi adalah salah satu cara penyarian yang sederhana yang dilakukan dengan cara merencam serbuk dalam cairan penyari. Maserasi digunakan untuk penyarian simplisia yang mengandung zat aktif yang mudah larut dalam cairan penyari. Cairan penyari yang digunakan dapat berupa air, etanol, air-etanol, atau pelarut lain (Dirjen POM RI, 1986).

  Etanol dipertimbangkan sebagai cairan penyari karena lebih selektif, sulit ditumbuhi kapang dan kuman dalam etanol 20% ke atas, tidak beracun, netral, absorbsinya baik, etanol dapat bercampur dengan air pada segala perbandingan, dan panas yang dibutuhkan untuk pemekatan tidak terlalu tinggi (Dirjen POM RI, 1986).

  Etanol dapat melarutkan alkaloida basa, minyak menguap, glikosida, kurkumin, kumarin, antrakinon, flavonoid, steroid, damar dan klorofil. Lemak, malam, tanin dan saponin hanya sedikit larut, dengan demikian zat pengganggu yang larut hanya terbatas (Dirjen POM RI, 1986).

F. Neutrophil Adhesion

  Adhesi neutrofil pada serat nilon menggambarkan marginasi dari sel dalam jaringan darah dan jumlah neutrofil yang mencapai tempat inflamasi (Thomas, Asad, Hrishikeshavan, Chandrakala, 2007 ).

  Sitokin dikeluarkan melalui aktivasi sel imun, untuk marginasi proses fagositosis, terutama sel polymorfonuklear neutrofil. Serupa dengan makrofag, sel neutrofil juga bermigrasi dalam jaringan, merespon adanya stimulasi tertentu. Aktivasi sel neutrofil ini dapat dipelajari melalui adanya neutrophil adhesion. (Ghaisas, Shaikh, Deshpande, 2009).

G. Carbon Clearance

  Metode bersihan karbon ("Carbon-Clearance") adalah pengukuran secara spektrofluorometrik laju eliminasi partikel karbon dari darah hewan. Ini merupakan ukuran aktivitas fagositosis. (Widianto, 1987).

  Adannya peningkatan indeks carbon clearance, menggambarkan peningkatan fungsi fagositosis dari makrofag mononuklear dan imun non spesifik.

  Fagositosis makrofag penting dalam melawan benda asing berukuran kecil dan efektif sebagai penanda untuk peningkatkan proses opsonisasi parasit oleh antibodi (Ghaisas, dkk., 2009).

  H.

  

Neutrofil

  Neutrofil adalah sel darah putih yang bekerja seperti makrofag menelan dan membunuh bakteri dengan cara fagositosis. Selanjutnya, neutrofil mengeluarkan cairan kimia yang dapat membunuh bakteri lain yang berada di sekitarnya (Ridwan, 2010).

  Gambar 6. Neutrofil Segmen (kiri) dan Neutrofil Batang (kanan) (Firman, 2007).

  Neutrofil mengandung butiran yang melepaskan enzim untuk membantu membunuh dan mencerna sel ini. Neutrofil beredar didalam aliran darah dan harus diberi tanda untuk meninggalkan aliran darah dan memasuki jaringan. Tanda tersebut seringkali datang dari bakteri itu sendiri, dari protein tambahan, atau dari makrofag, semuanya menghasilkan bahan-bahan yang menarik neutrofil menuju daerah yang bermasalah (proses penarikan sel disebut kemotaksis) (Fahmi, 2010).

  Fungsi utama neutrofil adalah fagositosis dan penghancuran bakteri. Bakteri dapat difagosit setelah opsonisasi. Bakteri melepaskan kemotaktif yang menyebabkan neutrofil kemotaksis dan merangsang pelekatan neutrofil pada bakteri. Mula-mula neutrofil melekat pada bakteri dan kemudian memasukannya pada suatu fagosom yang dibatasi membran. Fagosom melebur dengan granula sekunder dan kemudian granula primer untuk membentuk fagolisosom (Johnson, 1993).