Isolasi, Karakterisasi, Analisis Filogenetik berbasis gen 16S rRNA dan Teknologi Rekombinan Gen Pengkode Enzim Fitase dari Bakteria Asli Indonesia.

(B. MIPA Sains)
Isolasi, Karakterisasi, Analisis Filogenetik berbasis gen 16S rRNA dan Teknologi Rekombinan
Gen Pengkode Enzim Fitase dari Bakteria Asli Indonesia
Kata kunci: fitase, karakterisasi enzim, gen 16S rRNA, amplifikasi PCR dan teknologi rekombinan
Sajidan; Suranto; Sugiyarto
Program Pascasarjana UNS, Penelitian, BOPTN UNS, Hibah Pascasarjana, 2012
Penelitian ini bertujuan untuk mengisolasi, mengkarakterisasi fitase bakteri isolat yang berasal dari
berbagai daerah ekstrem di Indonesia dan melakukan analisis gen 16S rRNA untuk mengetahui
homologi (analisi Filogenetik) isolat yang ditemukan dengan date base urutan gen pada genbank dunia
(http://www.ncbi.nlm.nih.gov) antar spesies bakteria, serta teknologi rekombinan gen fitase pada
bakteria. Isolasi bakteri penghasil fitase akan dilakukan dengan menggunakan media LB (Luria Bertani)
yang diperkaya dengan asam fitat 0,4% dengan inkubasi pada suhu 37 oC selama 16 jam. Karakterisasi
enzim fitase meliputi karakterisasi secara fisik meliputi pH, temperatur optimum dan pengaruh efektor
logam terhadap aktivitas enzim relatif dengan menggunakan metode Greiner et al (1997). Analisis gen
16S rRNA dan gen fitase melalui amplifikasi PCR dan analisi filogenetik berdasarkan sekuen urutan basa
nitrogen. Teknologi rekombinan gen fitase melalui ligasi fragmen hasil amplifikasi PCR gen fitase pada
kloning plasmid PTZ dan kemudian dilanjutkan transformasi dan kloning plasmid rekombinan pada sel
bakteri kompeten E.coli DH5α.