Identifikasi dan Fingerprint Senyawa Golongan Fenol Dari Ekstrak Etanol Daun Sirih (Piper betle Linn.) Dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri.
i
IDE
ENTIFIK
KASI DA
AN FING
GERPRIINT SEN
NYAWA
A
GOL
LONGA
AN FENO
OL DAR
RI EKST
TRAK E
ETANOL
L
DAU
UN SIRIIH HIJA
AU (Pipeer betle Linn.)
L
DE
ENGAN
N
MET
TODE KLT
K
SPE
EKTROF
FOTOD
DENSITO
OMETR
RI
PSI
SKRIP
H
HARLINA
ATI MANU
URUNG
SETIAWA
1208505
5019
JU
URUSAN FA
ARMASI
FAKU
ULTAS MA
ATEMATIIKA DAN ILMU
I
PEN
NGETAHU
UAN ALAM
M
UNIV
VERSITAS UDAYANA
A
2016
6
ii
KATA PENGANTAR
Segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yesus Kristus
karena atas berkat dan karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang
berjudul ”Identifikasi dan Fingerprint Senyawa Golongan Fenol dari Ekstrak
Etanol Daun Sirih Hijau (Piper Betle Linn.) dengan Metode KLT
Spektrofotodensitometri” tepat pada waktunya.Pada kesempatan ini penulis
mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Ibu Ni Made Pitri Susanti, S. Farm., M. Si., Apt selaku pembimbing I yang
telah membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan,
nasihat, saran, dan waktu dalam penyusunan skripsi ini.
2. Ibu L. P. Mirah Kusuma Dewi SF., M.Sc., Apt.selaku pembimbing II yang
telah membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan,
nasihat, saran dan waktu dari awal penyusunan skripsi ini.
3. Drs. Ida Bagus Made Suaskara, M.Si., selaku Dekan Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana.
4. Bapak Dr.rer.nat I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. selaku Ketua
Jurusan Farmasi Fakultas MIPA Universitas Udayana yang telah
membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan, nasihat,
saran, dan waktu dalam penyusunan skripsi ini.
5. Seluruh Dosen, staf pegawai, dan laboran di Jurusan Farmasi Fakultas
MIPA Universitas Udayana yang telah telah memberikan bantuan kepada
penulis selama penyusunan skripsi ini.
iii
6. Keluarga, yaitu orang tua yang sangat penulis sayangi dan hormati, Bapak
Hakim Manurung dan Ibu Taruli Asi Sitorus, serta saudara kandung
penulis yang dikasihi, dr. Berton Manurung, M. Kes., Henry Manurung,
S.E., Horas Manurung, S.Sos., dan Seftiana Br. Manurung, S.E.,
terimakasih atas dukungan doa dan semangat yang telah diberikan baik
moral maupun material dalam penyusunan skripsi ini.
7. Teman-temanTanpo tersayang, Tantri, Anggi, Widya, Budi, Meci, Novi,
Sarah, dan Linda yang selalu memberikan semangat, menjadi teman
bertukar pikiran, dan membantu saat dalam kesulitan.
8. Sahabat tercinta, Tio Fridanna Siahaan, S.Farm.,Apt., Luh Putu Dian
Wulandari, Bella Christy, Tetry Agustina Sitohang, Stefi, dan Febriyanti
yang setia menjadi kawan bertukar pikiran dan memberikan semangat.
9. Sahabat seperjuangan satu pembimbing “Mama Pitri” (Odi, KaGis, Mitsu,
dan Ayu); serta Tim seperjuangan Piper betle (Budi, KaSuas, Cahyani,
Sulys, Dewi, Putri, Pebri, Dein, dan Inggrid) yang selalu memberikan
semangat dan membantu saat dalam kesulitan.
10. Teman-teman seperjuangan riset analisis 2012 (Vanadium Spectra), terdiri
dari 23 orang yang sungguh luar biasa memberikan semangat, dukungan,
dan menjadi kawan bertukar pikiran dalam penulisan skripsi ini.
11. Teman-teman seperjuangan Dioscuri Hygeia 2012, teman-teman KKNPPM UNUD Periode XI Desa Pengotan, dan PMKFMIPA yang senantiasa
menyertai penulis dalam senang dan sedih, memberikan masukan
pemikiran dan semangat untuk penulis.
iv
12. Semua pihak yang terlibat dan telah membantu penulis dalam penyusunan
skripsi ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu, tidak ada
ucapan terspesial karena setiap dukungan adalah spesial bagi penulis.
Penulis menyadari bahwa penyusunan skrisi ini masih jauh dari sempurna.
Untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran dari semua pihak yang bersifat
membangun sehingga di masa yang akan datang dapat menjadi lebih baik. Penulis
berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak yang
membutuhkannya.
Bukit Jimbaran, Juli 2016
Penulis
v
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ....................................................................................
i
LEMBAR PENGESAHAN ..........................................................................
ii
KATA PENGANTAR ..................................................................................
iii
DAFTAR ISI .................................................................................................
vi
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................
ix
DAFTAR TABEL .........................................................................................
xi
DAFTARLAMPIRAN ..................................................................................
xii
DAFTAR ISTILAH DAN SINGKATAN ....................................................
xiii
ABSTRAK ....................................................................................................
xv
BAB IPENDAHULUAN ..............................................................................
1
1.1 Latar Belakang...........................................................................
1
1.2 Rumusan Masalah .....................................................................
3
1.3 Tujuan Penelitian .......................................................................
4
1.4 Manfaat Penelitian .....................................................................
4
BAB IITINJAUAN PUSTAKA ...................................................................
5
2.1 Tanaman Sirih (Piper betle Linn.).............................................
5
2.1.1 Klasifikasi .......................................................................
5
2.1.2 Deskripsi Tanaman .........................................................
5
2.1.3 Kandungan Kimia ...........................................................
6
2.1.4 Khasiat dan Kegunaan ....................................................
6
2.1.5 Identifikasi Kandungan kimia .........................................
7
vi
2.2 Senyawa Fenol...........................................................................
7
2.3 Metode Ekstraksi .......................................................................
8
2.3.1 Ekstraksi Secara Umum ..................................................
8
2.3.2 Ekstraksi Daun Sirih .......................................................
9
2.4 Pemisahan dan Identifikasi Senyawa dengan Kromatografi
Lapis Tipis-Spektrofotodensitometri .........................................
10
2.4.1 Kromatografi Lapis Tipis-Spektrofotodensitometri ......
10
2.4.2 Parameter Kromatogram .................................................
11
2.5 Kromatografi Fingerprint ..........................................................
14
2.5.1 Pemanfaatan KLT-Spektrofotodensitometri dalam
Kromatografi Fingerprint ...............................................
15
BAB IIIMETODE PENELITIAN ................................................................
17
3.1 Rancangan Penelitian ................................................................
17
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian .....................................................
17
3.3 Alat dan Bahan Penelitian .........................................................
17
3.3.1 Bahan Penelitian .............................................................
17
3.3.2 Alat Penelitian .................................................................
18
3.4 Prosedur Penelitian ....................................................................
18
3.4.1 Pengumpulan dan Determinasi Daun Sirih .....................
18
3.4.2 Pembuatan Serbuk Sampel Daun Sirih Hijau .................
19
3.4.3 Penetapan Susut Pengeringan .........................................
19
3.4.4 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau (Piper
betle Linn.) ......................................................................
vii
19
3.4.5 Pemilihan Fase Gerak .....................................................
20
3.4.6 Kromatografi Fingerprint Senyawa Golongan Fenol
dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri ...............
21
BAB IV PEMBAHASAN.............................................................................
23
4.1 Pengumpulan dan Determinasi Tanaman ..................................
23
4.2 Penetapan Susut Pengeringan ....................................................
23
4.3 Ekstraksi Daun Sirih Hijau (Piper betle Linn.) .........................
24
4.4 Identifikasi Senyawa Golongan Fenol dan Pemilihan
Fase Gerak .................................................................................
25
4.5 Kromatografi Fingerprint Senyawa Golongan Fenol
dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri .........................
31
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................
37
5.1 Kesimpulan ................................................................................
37
5.2 Saran ..........................................................................................
37
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................
38
LAMPIRAN ..................................................................................................
41
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1
Tanaman Sirih(Piper betle L.) ...............................................
6
Gambar 2.2
Jenis Perhitungan Tailling Factor (Tf) ...................................
13
Gambar 4.1
Ekstrak Kental Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) .....
25
Gambar 4.2
Identitas KLT-Spektrofotodensitometri Ekstrak Etanol Daun
Sirih Hijau dengan Fase Gerak Toluen: Etil Asetat
(93:7 v/v) ...............................................................................
Gambar 4.3
26
Spektrum dari Masing-Masing Puncak Kromatogram
Senyawa Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau
yang Dipindai pada panjang gelombang 210 nm (FG I) .......
Gambar 4.4
27
Identitas KLT-Spektrofotodensitometri Ekstrak Etanol Daun
Sirih Hijau dengan Fase Gerak Toluen: Etil Asetat: Asam Format
(3:3:0,2 v/v)...........................................................................
Gambar 4.5
28
Spektrum dari Masing-Masing Puncak Kromatogram
Senyawa Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau
yang Dipindai pada panjang gelombang 210 nm (FG II) .....
Gambar 4.6
Pengamatan Bercak Kromatogram Sampel Ekstrak
Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) ..............................
Gambar 4.7
29
32
Pola Puncak Kromatogram Senyawa Golongan
Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau pada Panjang
Gelombang 210 nm ...............................................................
ix
33
Gambar 4.8
Spektrum Masing-Masing Puncak Kromatogram Senyawa
Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau yang
Dipindai pada panjang gelombang 210 nm ..........................
Gambar 4.9
34
Pola Puncak Kromatogram Senyawa Golongan
Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau pada Panjang
Gelombang 283 nm ...............................................................
35
Gambar 4.10 Spektrum Masing-Masing Puncak Kromatogram Senyawa
Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau yang
Dipindai pada panjang gelombang 283 nm ..........................
x
36
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1 Hasil Penetapan Susut Pengeringan Serbuk Daun Sirih
Hijau (Piper betle Linn.) .............................................................
24
Tabel 4.2 Nilai Rs dan Tf Masing-Masing Puncak Senyawa Golongan
Fenol dari Kedua Sistem Fase Gerak ..........................................
xi
30
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Skema Kerja Penelitian ..........................................................
41
Lampiran 2. Hasil Determinasi Tanaman Sirih Hijau (Piper betle Linn.) ..
42
xii
DAFTAR ISTILAH DAN SINGKATAN
AUC
: Area Under Curve. Luas area dari sebuah puncak
dalam kromatogram
Ekstrak
: Hasil dari proses menyari simplisia
Elusi
: Proses menyingkirkan analit dari adsorben dengan
mengalirkan suatu pelarut yang disebut eluen,
melewati kompleks penjerap-analit
Fase diam
: Adsorben yang digunakan dalam kromatografi
Fase gerak (FG)
: Pelarut atau eluen dalam kromatografi
Fingerprint
: Istilah untuk menyebutkan pola kromatogram
HPTLC
: High Performance Thin Layer Chromatography
Integritas
: Suatu konsep berkaitan dengan konsistensi dalam
tindakan-tindakan,
nilai-nilai,
metode-metode,
prinsip-prinsip, dan berbagai hal yang dihasilkan
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
Kontrol kualitas
: Kegiatan untuk memelihara atau meningkatkan suatu
produk melalui proses penelitian, pengembangan serta
perancangan produk
Kromatografi
: Suatu metode pemisahan molekul berdasarkan pola
pergerakan antara fase gerak dan fase diam yang
berada pada larutan
Kromatogram
: Data yang diperoleh dari teknik kromatografi
xiii
Metabolit sekunder
: Senyawa-senyawa organik yang berasal dari sumber
alami tumbuhan, yang dapat memberikan efek
fisiologis, umumnya merupakan senyawa bioaktif.
NMR
: Nuclear Magnetic Resonance
Resolusi (Rs)
: Derajat keterpisahan suatu analit dengan analit yang
lain
Rf
: Retardation Factor
Spektrofotodensitometri : Detektor
dengan
prinsip
interaksi
radiasi
elektromagnetik dengan analit yang merupakan
noda/bercak pada plat
Spektrum
: Kurva antara panjang gelombang dan absorbansi yang
menjadi identitas suatu senyawa
Standardisasi
: Proses menghasilkan suatu kesepakatan yang terdiri
dari speksifikasi teknis atau kriteria yang akurat dari
suatu halyang didokumentasikan
Tailing
: Puncak kromatogram yang asimetris dan menjorok ke
belakang
Tf
: Tailing Factor
TLC
: Thin Layer Chromatography
WHO
: World Health Organization
xiv
ABSTRAK
Senyawa fenol dalam daun sirih memiliki aktivitas farmakologi
sebagaiantibakteri, antijamur, dan antioksidan. Aktivitas farmakologiobat herbal
dipengaruhi oleh kandungan fitokimianya, sehingga diperlukan standardisasi
untuk memperoleh pemastian kualitas, profil fitokimia, dan aktivitas farmakologi
yang konsisten dari obat herbal. Fingerprint merupakan standar utama yang
ditetapkan oleh WHO untuk pengawasan kualitas bahan baku obat herbal atau
produk herbal. Metode yang digunakan untuk memperoleh profil fingerprint
senyawa golongan fenol adalah KLT-Spektrofotodensitometri.
Sampel daun sirih diekstraksi dengan metode refluks menggunakan pelarut
etanol 96%. Identifikasi senyawa golongan fenol dilakukan dengan KLT
menggunakan fase diam silika gel 60 F254 dan fase gerak toluen: Etil asetat (93:7
v/v), serta pereaksi warna yaitu FeCl3 dan Folin-Ciocalteau. Profil fingerprint
senyawa golongan fenol ekstrak etanol daun sirih (Piper betle Linn.) ditunjukkan
pada Rf 0,19; 0,42; dan 0,62. Bercak positif senyawa golongan fenol berwarna
hitam berdasarkan identifikasi dengan FeCl3 dan biru tua dengan FolinCiocalteau. Panjang gelombang maksimum senyawa golongan fenol adalah 283
nm.
Kata Kunci: sirih, fenol, fingerprint, KLT-spektrofotodensitometri, ekstrak etanol.
xv
ABSTRACT
Phenol compound in Piper betle leaves has several pharmacology activities
such as antibacteria, antifungi and antioxidant. The pharmacology activities of a
herbal drug are influenced by the phytochemistry content, so in order to do a
quality determination that provides phytochemistry profile and consistent
pharmacology activities, a standardization is required. WHO has determined that
fingerprint is the main standard to perform quality control for herbal drug. TLCspectrophotodensitometry was used as the method in order to provide fingerprint
profile of phenol compound.
Piper betle leaves samples were extracted by reflux method using ethanol
96% as the solvent. Identification of phenol compound was done using TLCspectrophotodensitometry with Silica gel 60 F254 as the stationary phase, toluena:
ethyl acetate (93:7 v/v) as the mobile phase, FeCl3 and Folin-Ciocalteau as the
reagent.The fingerprint profile of phenol compund was shown in Rf value 0,19;
0,42; and 0,62. Positive results of phenol compound are black based on FeCl3and
dark blue based on Folin-Ciocalteau. Maximum wavelength of phenol compound
was 283 nm.
Keyword: Piper betle, phenol, fingerprint, TLC-spectrophotodensitometry,
ethanol extract.
xvi
i
IDE
ENTIFIK
KASI DA
AN FING
GERPRIINT SEN
NYAWA
A
GOL
LONGA
AN FENO
OL DAR
RI EKST
TRAK E
ETANOL
L
DAU
UN SIRIIH HIJA
AU (Pipeer betle Linn.)
L
DE
ENGAN
N
MET
TODE KLT
K
SPE
EKTROF
FOTOD
DENSITO
OMETR
RI
PSI
SKRIP
H
HARLINA
ATI MANU
URUNG
SETIAWA
1208505
5019
JU
URUSAN FA
ARMASI
FAKU
ULTAS MA
ATEMATIIKA DAN ILMU
I
PEN
NGETAHU
UAN ALAM
M
UNIV
VERSITAS UDAYANA
A
2016
6
ii
KATA PENGANTAR
Segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yesus Kristus
karena atas berkat dan karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang
berjudul ”Identifikasi dan Fingerprint Senyawa Golongan Fenol dari Ekstrak
Etanol Daun Sirih Hijau (Piper Betle Linn.) dengan Metode KLT
Spektrofotodensitometri” tepat pada waktunya.Pada kesempatan ini penulis
mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Ibu Ni Made Pitri Susanti, S. Farm., M. Si., Apt selaku pembimbing I yang
telah membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan,
nasihat, saran, dan waktu dalam penyusunan skripsi ini.
2. Ibu L. P. Mirah Kusuma Dewi SF., M.Sc., Apt.selaku pembimbing II yang
telah membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan,
nasihat, saran dan waktu dari awal penyusunan skripsi ini.
3. Drs. Ida Bagus Made Suaskara, M.Si., selaku Dekan Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana.
4. Bapak Dr.rer.nat I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. selaku Ketua
Jurusan Farmasi Fakultas MIPA Universitas Udayana yang telah
membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan, nasihat,
saran, dan waktu dalam penyusunan skripsi ini.
5. Seluruh Dosen, staf pegawai, dan laboran di Jurusan Farmasi Fakultas
MIPA Universitas Udayana yang telah telah memberikan bantuan kepada
penulis selama penyusunan skripsi ini.
iii
6. Keluarga, yaitu orang tua yang sangat penulis sayangi dan hormati, Bapak
Hakim Manurung dan Ibu Taruli Asi Sitorus, serta saudara kandung
penulis yang dikasihi, dr. Berton Manurung, M. Kes., Henry Manurung,
S.E., Horas Manurung, S.Sos., dan Seftiana Br. Manurung, S.E.,
terimakasih atas dukungan doa dan semangat yang telah diberikan baik
moral maupun material dalam penyusunan skripsi ini.
7. Teman-temanTanpo tersayang, Tantri, Anggi, Widya, Budi, Meci, Novi,
Sarah, dan Linda yang selalu memberikan semangat, menjadi teman
bertukar pikiran, dan membantu saat dalam kesulitan.
8. Sahabat tercinta, Tio Fridanna Siahaan, S.Farm.,Apt., Luh Putu Dian
Wulandari, Bella Christy, Tetry Agustina Sitohang, Stefi, dan Febriyanti
yang setia menjadi kawan bertukar pikiran dan memberikan semangat.
9. Sahabat seperjuangan satu pembimbing “Mama Pitri” (Odi, KaGis, Mitsu,
dan Ayu); serta Tim seperjuangan Piper betle (Budi, KaSuas, Cahyani,
Sulys, Dewi, Putri, Pebri, Dein, dan Inggrid) yang selalu memberikan
semangat dan membantu saat dalam kesulitan.
10. Teman-teman seperjuangan riset analisis 2012 (Vanadium Spectra), terdiri
dari 23 orang yang sungguh luar biasa memberikan semangat, dukungan,
dan menjadi kawan bertukar pikiran dalam penulisan skripsi ini.
11. Teman-teman seperjuangan Dioscuri Hygeia 2012, teman-teman KKNPPM UNUD Periode XI Desa Pengotan, dan PMKFMIPA yang senantiasa
menyertai penulis dalam senang dan sedih, memberikan masukan
pemikiran dan semangat untuk penulis.
iv
12. Semua pihak yang terlibat dan telah membantu penulis dalam penyusunan
skripsi ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu, tidak ada
ucapan terspesial karena setiap dukungan adalah spesial bagi penulis.
Penulis menyadari bahwa penyusunan skrisi ini masih jauh dari sempurna.
Untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran dari semua pihak yang bersifat
membangun sehingga di masa yang akan datang dapat menjadi lebih baik. Penulis
berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak yang
membutuhkannya.
Bukit Jimbaran, Juli 2016
Penulis
v
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ....................................................................................
i
LEMBAR PENGESAHAN ..........................................................................
ii
KATA PENGANTAR ..................................................................................
iii
DAFTAR ISI .................................................................................................
vi
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................
ix
DAFTAR TABEL .........................................................................................
xi
DAFTARLAMPIRAN ..................................................................................
xii
DAFTAR ISTILAH DAN SINGKATAN ....................................................
xiii
ABSTRAK ....................................................................................................
xv
BAB IPENDAHULUAN ..............................................................................
1
1.1 Latar Belakang...........................................................................
1
1.2 Rumusan Masalah .....................................................................
3
1.3 Tujuan Penelitian .......................................................................
4
1.4 Manfaat Penelitian .....................................................................
4
BAB IITINJAUAN PUSTAKA ...................................................................
5
2.1 Tanaman Sirih (Piper betle Linn.).............................................
5
2.1.1 Klasifikasi .......................................................................
5
2.1.2 Deskripsi Tanaman .........................................................
5
2.1.3 Kandungan Kimia ...........................................................
6
2.1.4 Khasiat dan Kegunaan ....................................................
6
2.1.5 Identifikasi Kandungan kimia .........................................
7
vi
2.2 Senyawa Fenol...........................................................................
7
2.3 Metode Ekstraksi .......................................................................
8
2.3.1 Ekstraksi Secara Umum ..................................................
8
2.3.2 Ekstraksi Daun Sirih .......................................................
9
2.4 Pemisahan dan Identifikasi Senyawa dengan Kromatografi
Lapis Tipis-Spektrofotodensitometri .........................................
10
2.4.1 Kromatografi Lapis Tipis-Spektrofotodensitometri ......
10
2.4.2 Parameter Kromatogram .................................................
11
2.5 Kromatografi Fingerprint ..........................................................
14
2.5.1 Pemanfaatan KLT-Spektrofotodensitometri dalam
Kromatografi Fingerprint ...............................................
15
BAB IIIMETODE PENELITIAN ................................................................
17
3.1 Rancangan Penelitian ................................................................
17
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian .....................................................
17
3.3 Alat dan Bahan Penelitian .........................................................
17
3.3.1 Bahan Penelitian .............................................................
17
3.3.2 Alat Penelitian .................................................................
18
3.4 Prosedur Penelitian ....................................................................
18
3.4.1 Pengumpulan dan Determinasi Daun Sirih .....................
18
3.4.2 Pembuatan Serbuk Sampel Daun Sirih Hijau .................
19
3.4.3 Penetapan Susut Pengeringan .........................................
19
3.4.4 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau (Piper
betle Linn.) ......................................................................
vii
19
3.4.5 Pemilihan Fase Gerak .....................................................
20
3.4.6 Kromatografi Fingerprint Senyawa Golongan Fenol
dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri ...............
21
BAB IV PEMBAHASAN.............................................................................
23
4.1 Pengumpulan dan Determinasi Tanaman ..................................
23
4.2 Penetapan Susut Pengeringan ....................................................
23
4.3 Ekstraksi Daun Sirih Hijau (Piper betle Linn.) .........................
24
4.4 Identifikasi Senyawa Golongan Fenol dan Pemilihan
Fase Gerak .................................................................................
25
4.5 Kromatografi Fingerprint Senyawa Golongan Fenol
dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri .........................
31
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................
37
5.1 Kesimpulan ................................................................................
37
5.2 Saran ..........................................................................................
37
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................
38
LAMPIRAN ..................................................................................................
41
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1
Tanaman Sirih(Piper betle L.) ...............................................
6
Gambar 2.2
Jenis Perhitungan Tailling Factor (Tf) ...................................
13
Gambar 4.1
Ekstrak Kental Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) .....
25
Gambar 4.2
Identitas KLT-Spektrofotodensitometri Ekstrak Etanol Daun
Sirih Hijau dengan Fase Gerak Toluen: Etil Asetat
(93:7 v/v) ...............................................................................
Gambar 4.3
26
Spektrum dari Masing-Masing Puncak Kromatogram
Senyawa Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau
yang Dipindai pada panjang gelombang 210 nm (FG I) .......
Gambar 4.4
27
Identitas KLT-Spektrofotodensitometri Ekstrak Etanol Daun
Sirih Hijau dengan Fase Gerak Toluen: Etil Asetat: Asam Format
(3:3:0,2 v/v)...........................................................................
Gambar 4.5
28
Spektrum dari Masing-Masing Puncak Kromatogram
Senyawa Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau
yang Dipindai pada panjang gelombang 210 nm (FG II) .....
Gambar 4.6
Pengamatan Bercak Kromatogram Sampel Ekstrak
Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) ..............................
Gambar 4.7
29
32
Pola Puncak Kromatogram Senyawa Golongan
Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau pada Panjang
Gelombang 210 nm ...............................................................
ix
33
Gambar 4.8
Spektrum Masing-Masing Puncak Kromatogram Senyawa
Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau yang
Dipindai pada panjang gelombang 210 nm ..........................
Gambar 4.9
34
Pola Puncak Kromatogram Senyawa Golongan
Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau pada Panjang
Gelombang 283 nm ...............................................................
35
Gambar 4.10 Spektrum Masing-Masing Puncak Kromatogram Senyawa
Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau yang
Dipindai pada panjang gelombang 283 nm ..........................
x
36
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1 Hasil Penetapan Susut Pengeringan Serbuk Daun Sirih
Hijau (Piper betle Linn.) .............................................................
24
Tabel 4.2 Nilai Rs dan Tf Masing-Masing Puncak Senyawa Golongan
Fenol dari Kedua Sistem Fase Gerak ..........................................
xi
30
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Skema Kerja Penelitian ..........................................................
41
Lampiran 2. Hasil Determinasi Tanaman Sirih Hijau (Piper betle Linn.) ..
42
xii
DAFTAR ISTILAH DAN SINGKATAN
AUC
: Area Under Curve. Luas area dari sebuah puncak
dalam kromatogram
Ekstrak
: Hasil dari proses menyari simplisia
Elusi
: Proses menyingkirkan analit dari adsorben dengan
mengalirkan suatu pelarut yang disebut eluen,
melewati kompleks penjerap-analit
Fase diam
: Adsorben yang digunakan dalam kromatografi
Fase gerak (FG)
: Pelarut atau eluen dalam kromatografi
Fingerprint
: Istilah untuk menyebutkan pola kromatogram
HPTLC
: High Performance Thin Layer Chromatography
Integritas
: Suatu konsep berkaitan dengan konsistensi dalam
tindakan-tindakan,
nilai-nilai,
metode-metode,
prinsip-prinsip, dan berbagai hal yang dihasilkan
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
Kontrol kualitas
: Kegiatan untuk memelihara atau meningkatkan suatu
produk melalui proses penelitian, pengembangan serta
perancangan produk
Kromatografi
: Suatu metode pemisahan molekul berdasarkan pola
pergerakan antara fase gerak dan fase diam yang
berada pada larutan
Kromatogram
: Data yang diperoleh dari teknik kromatografi
xiii
Metabolit sekunder
: Senyawa-senyawa organik yang berasal dari sumber
alami tumbuhan, yang dapat memberikan efek
fisiologis, umumnya merupakan senyawa bioaktif.
NMR
: Nuclear Magnetic Resonance
Resolusi (Rs)
: Derajat keterpisahan suatu analit dengan analit yang
lain
Rf
: Retardation Factor
Spektrofotodensitometri : Detektor
dengan
prinsip
interaksi
radiasi
elektromagnetik dengan analit yang merupakan
noda/bercak pada plat
Spektrum
: Kurva antara panjang gelombang dan absorbansi yang
menjadi identitas suatu senyawa
Standardisasi
: Proses menghasilkan suatu kesepakatan yang terdiri
dari speksifikasi teknis atau kriteria yang akurat dari
suatu halyang didokumentasikan
Tailing
: Puncak kromatogram yang asimetris dan menjorok ke
belakang
Tf
: Tailing Factor
TLC
: Thin Layer Chromatography
WHO
: World Health Organization
xiv
ABSTRAK
Senyawa fenol dalam daun sirih memiliki aktivitas farmakologi
sebagaiantibakteri, antijamur, dan antioksidan. Aktivitas farmakologiobat herbal
dipengaruhi oleh kandungan fitokimianya, sehingga diperlukan standardisasi
untuk memperoleh pemastian kualitas, profil fitokimia, dan aktivitas farmakologi
yang konsisten dari obat herbal. Fingerprint merupakan standar utama yang
ditetapkan oleh WHO untuk pengawasan kualitas bahan baku obat herbal atau
produk herbal. Metode yang digunakan untuk memperoleh profil fingerprint
senyawa golongan fenol adalah KLT-Spektrofotodensitometri.
Sampel daun sirih diekstraksi dengan metode refluks menggunakan pelarut
etanol 96%. Identifikasi senyawa golongan fenol dilakukan dengan KLT
menggunakan fase diam silika gel 60 F254 dan fase gerak toluen: Etil asetat (93:7
v/v), serta pereaksi warna yaitu FeCl3 dan Folin-Ciocalteau. Profil fingerprint
senyawa golongan fenol ekstrak etanol daun sirih (Piper betle Linn.) ditunjukkan
pada Rf 0,19; 0,42; dan 0,62. Bercak positif senyawa golongan fenol berwarna
hitam berdasarkan identifikasi dengan FeCl3 dan biru tua dengan FolinCiocalteau. Panjang gelombang maksimum senyawa golongan fenol adalah 283
nm.
Kata Kunci: sirih, fenol, fingerprint, KLT-spektrofotodensitometri, ekstrak etanol.
xv
ABSTRACT
Phenol compound in Piper betle leaves has several pharmacology activities
such as antibacteria, antifungi and antioxidant. The pharmacology activities of a
herbal drug are influenced by the phytochemistry content, so in order to do a
quality determination that provides phytochemistry profile and consistent
pharmacology activities, a standardization is required. WHO has determined that
fingerprint is the main standard to perform quality control for herbal drug. TLCspectrophotodensitometry was used as the method in order to provide fingerprint
profile of phenol compound.
Piper betle leaves samples were extracted by reflux method using ethanol
96% as the solvent. Identification of phenol compound was done using TLCspectrophotodensitometry with Silica gel 60 F254 as the stationary phase, toluena:
ethyl acetate (93:7 v/v) as the mobile phase, FeCl3 and Folin-Ciocalteau as the
reagent.The fingerprint profile of phenol compund was shown in Rf value 0,19;
0,42; and 0,62. Positive results of phenol compound are black based on FeCl3and
dark blue based on Folin-Ciocalteau. Maximum wavelength of phenol compound
was 283 nm.
Keyword: Piper betle, phenol, fingerprint, TLC-spectrophotodensitometry,
ethanol extract.
xvi
i
IDE
ENTIFIK
KASI DA
AN FING
GERPRIINT SEN
NYAWA
A
GOL
LONGA
AN FENO
OL DAR
RI EKST
TRAK E
ETANOL
L
DAU
UN SIRIIH HIJA
AU (Pipeer betle Linn.)
L
DE
ENGAN
N
MET
TODE KLT
K
SPE
EKTROF
FOTOD
DENSITO
OMETR
RI
PSI
SKRIP
H
HARLINA
ATI MANU
URUNG
SETIAWA
1208505
5019
JU
URUSAN FA
ARMASI
FAKU
ULTAS MA
ATEMATIIKA DAN ILMU
I
PEN
NGETAHU
UAN ALAM
M
UNIV
VERSITAS UDAYANA
A
2016
6
ii
KATA PENGANTAR
Segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yesus Kristus
karena atas berkat dan karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang
berjudul ”Identifikasi dan Fingerprint Senyawa Golongan Fenol dari Ekstrak
Etanol Daun Sirih Hijau (Piper Betle Linn.) dengan Metode KLT
Spektrofotodensitometri” tepat pada waktunya.Pada kesempatan ini penulis
mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Ibu Ni Made Pitri Susanti, S. Farm., M. Si., Apt selaku pembimbing I yang
telah membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan,
nasihat, saran, dan waktu dalam penyusunan skripsi ini.
2. Ibu L. P. Mirah Kusuma Dewi SF., M.Sc., Apt.selaku pembimbing II yang
telah membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan,
nasihat, saran dan waktu dari awal penyusunan skripsi ini.
3. Drs. Ida Bagus Made Suaskara, M.Si., selaku Dekan Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana.
4. Bapak Dr.rer.nat I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. selaku Ketua
Jurusan Farmasi Fakultas MIPA Universitas Udayana yang telah
membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan, nasihat,
saran, dan waktu dalam penyusunan skripsi ini.
5. Seluruh Dosen, staf pegawai, dan laboran di Jurusan Farmasi Fakultas
MIPA Universitas Udayana yang telah telah memberikan bantuan kepada
penulis selama penyusunan skripsi ini.
iii
6. Keluarga, yaitu orang tua yang sangat penulis sayangi dan hormati, Bapak
Hakim Manurung dan Ibu Taruli Asi Sitorus, serta saudara kandung
penulis yang dikasihi, dr. Berton Manurung, M. Kes., Henry Manurung,
S.E., Horas Manurung, S.Sos., dan Seftiana Br. Manurung, S.E.,
terimakasih atas dukungan doa dan semangat yang telah diberikan baik
moral maupun material dalam penyusunan skripsi ini.
7. Teman-temanTanpo tersayang, Tantri, Anggi, Widya, Budi, Meci, Novi,
Sarah, dan Linda yang selalu memberikan semangat, menjadi teman
bertukar pikiran, dan membantu saat dalam kesulitan.
8. Sahabat tercinta, Tio Fridanna Siahaan, S.Farm.,Apt., Luh Putu Dian
Wulandari, Bella Christy, Tetry Agustina Sitohang, Stefi, dan Febriyanti
yang setia menjadi kawan bertukar pikiran dan memberikan semangat.
9. Sahabat seperjuangan satu pembimbing “Mama Pitri” (Odi, KaGis, Mitsu,
dan Ayu); serta Tim seperjuangan Piper betle (Budi, KaSuas, Cahyani,
Sulys, Dewi, Putri, Pebri, Dein, dan Inggrid) yang selalu memberikan
semangat dan membantu saat dalam kesulitan.
10. Teman-teman seperjuangan riset analisis 2012 (Vanadium Spectra), terdiri
dari 23 orang yang sungguh luar biasa memberikan semangat, dukungan,
dan menjadi kawan bertukar pikiran dalam penulisan skripsi ini.
11. Teman-teman seperjuangan Dioscuri Hygeia 2012, teman-teman KKNPPM UNUD Periode XI Desa Pengotan, dan PMKFMIPA yang senantiasa
menyertai penulis dalam senang dan sedih, memberikan masukan
pemikiran dan semangat untuk penulis.
iv
12. Semua pihak yang terlibat dan telah membantu penulis dalam penyusunan
skripsi ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu, tidak ada
ucapan terspesial karena setiap dukungan adalah spesial bagi penulis.
Penulis menyadari bahwa penyusunan skrisi ini masih jauh dari sempurna.
Untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran dari semua pihak yang bersifat
membangun sehingga di masa yang akan datang dapat menjadi lebih baik. Penulis
berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak yang
membutuhkannya.
Bukit Jimbaran, Juli 2016
Penulis
v
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ....................................................................................
i
LEMBAR PENGESAHAN ..........................................................................
ii
KATA PENGANTAR ..................................................................................
iii
DAFTAR ISI .................................................................................................
vi
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................
ix
DAFTAR TABEL .........................................................................................
xi
DAFTARLAMPIRAN ..................................................................................
xii
DAFTAR ISTILAH DAN SINGKATAN ....................................................
xiii
ABSTRAK ....................................................................................................
xv
BAB IPENDAHULUAN ..............................................................................
1
1.1 Latar Belakang...........................................................................
1
1.2 Rumusan Masalah .....................................................................
3
1.3 Tujuan Penelitian .......................................................................
4
1.4 Manfaat Penelitian .....................................................................
4
BAB IITINJAUAN PUSTAKA ...................................................................
5
2.1 Tanaman Sirih (Piper betle Linn.).............................................
5
2.1.1 Klasifikasi .......................................................................
5
2.1.2 Deskripsi Tanaman .........................................................
5
2.1.3 Kandungan Kimia ...........................................................
6
2.1.4 Khasiat dan Kegunaan ....................................................
6
2.1.5 Identifikasi Kandungan kimia .........................................
7
vi
2.2 Senyawa Fenol...........................................................................
7
2.3 Metode Ekstraksi .......................................................................
8
2.3.1 Ekstraksi Secara Umum ..................................................
8
2.3.2 Ekstraksi Daun Sirih .......................................................
9
2.4 Pemisahan dan Identifikasi Senyawa dengan Kromatografi
Lapis Tipis-Spektrofotodensitometri .........................................
10
2.4.1 Kromatografi Lapis Tipis-Spektrofotodensitometri ......
10
2.4.2 Parameter Kromatogram .................................................
11
2.5 Kromatografi Fingerprint ..........................................................
14
2.5.1 Pemanfaatan KLT-Spektrofotodensitometri dalam
Kromatografi Fingerprint ...............................................
15
BAB IIIMETODE PENELITIAN ................................................................
17
3.1 Rancangan Penelitian ................................................................
17
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian .....................................................
17
3.3 Alat dan Bahan Penelitian .........................................................
17
3.3.1 Bahan Penelitian .............................................................
17
3.3.2 Alat Penelitian .................................................................
18
3.4 Prosedur Penelitian ....................................................................
18
3.4.1 Pengumpulan dan Determinasi Daun Sirih .....................
18
3.4.2 Pembuatan Serbuk Sampel Daun Sirih Hijau .................
19
3.4.3 Penetapan Susut Pengeringan .........................................
19
3.4.4 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau (Piper
betle Linn.) ......................................................................
vii
19
3.4.5 Pemilihan Fase Gerak .....................................................
20
3.4.6 Kromatografi Fingerprint Senyawa Golongan Fenol
dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri ...............
21
BAB IV PEMBAHASAN.............................................................................
23
4.1 Pengumpulan dan Determinasi Tanaman ..................................
23
4.2 Penetapan Susut Pengeringan ....................................................
23
4.3 Ekstraksi Daun Sirih Hijau (Piper betle Linn.) .........................
24
4.4 Identifikasi Senyawa Golongan Fenol dan Pemilihan
Fase Gerak .................................................................................
25
4.5 Kromatografi Fingerprint Senyawa Golongan Fenol
dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri .........................
31
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................
37
5.1 Kesimpulan ................................................................................
37
5.2 Saran ..........................................................................................
37
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................
38
LAMPIRAN ..................................................................................................
41
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1
Tanaman Sirih(Piper betle L.) ...............................................
6
Gambar 2.2
Jenis Perhitungan Tailling Factor (Tf) ...................................
13
Gambar 4.1
Ekstrak Kental Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) .....
25
Gambar 4.2
Identitas KLT-Spektrofotodensitometri Ekstrak Etanol Daun
Sirih Hijau dengan Fase Gerak Toluen: Etil Asetat
(93:7 v/v) ...............................................................................
Gambar 4.3
26
Spektrum dari Masing-Masing Puncak Kromatogram
Senyawa Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau
yang Dipindai pada panjang gelombang 210 nm (FG I) .......
Gambar 4.4
27
Identitas KLT-Spektrofotodensitometri Ekstrak Etanol Daun
Sirih Hijau dengan Fase Gerak Toluen: Etil Asetat: Asam Format
(3:3:0,2 v/v)...........................................................................
Gambar 4.5
28
Spektrum dari Masing-Masing Puncak Kromatogram
Senyawa Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau
yang Dipindai pada panjang gelombang 210 nm (FG II) .....
Gambar 4.6
Pengamatan Bercak Kromatogram Sampel Ekstrak
Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) ..............................
Gambar 4.7
29
32
Pola Puncak Kromatogram Senyawa Golongan
Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau pada Panjang
Gelombang 210 nm ...............................................................
ix
33
Gambar 4.8
Spektrum Masing-Masing Puncak Kromatogram Senyawa
Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau yang
Dipindai pada panjang gelombang 210 nm ..........................
Gambar 4.9
34
Pola Puncak Kromatogram Senyawa Golongan
Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau pada Panjang
Gelombang 283 nm ...............................................................
35
Gambar 4.10 Spektrum Masing-Masing Puncak Kromatogram Senyawa
Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau yang
Dipindai pada panjang gelombang 283 nm ..........................
x
36
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1 Hasil Penetapan Susut Pengeringan Serbuk Daun Sirih
Hijau (Piper betle Linn.) .............................................................
24
Tabel 4.2 Nilai Rs dan Tf Masing-Masing Puncak Senyawa Golongan
Fenol dari Kedua Sistem Fase Gerak ..........................................
xi
30
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Skema Kerja Penelitian ..........................................................
41
Lampiran 2. Hasil Determinasi Tanaman Sirih Hijau (Piper betle Linn.) ..
42
xii
DAFTAR ISTILAH DAN SINGKATAN
AUC
: Area Under Curve. Luas area dari sebuah puncak
dalam kromatogram
Ekstrak
: Hasil dari proses menyari simplisia
Elusi
: Proses menyingkirkan analit dari adsorben dengan
mengalirkan suatu pelarut yang disebut eluen,
melewati kompleks penjerap-analit
Fase diam
: Adsorben yang digunakan dalam kromatografi
Fase gerak (FG)
: Pelarut atau eluen dalam kromatografi
Fingerprint
: Istilah untuk menyebutkan pola kromatogram
HPTLC
: High Performance Thin Layer Chromatography
Integritas
: Suatu konsep berkaitan dengan konsistensi dalam
tindakan-tindakan,
nilai-nilai,
metode-metode,
prinsip-prinsip, dan berbagai hal yang dihasilkan
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
Kontrol kualitas
: Kegiatan untuk memelihara atau meningkatkan suatu
produk melalui proses penelitian, pengembangan serta
perancangan produk
Kromatografi
: Suatu metode pemisahan molekul berdasarkan pola
pergerakan antara fase gerak dan fase diam yang
berada pada larutan
Kromatogram
: Data yang diperoleh dari teknik kromatografi
xiii
Metabolit sekunder
: Senyawa-senyawa organik yang berasal dari sumber
alami tumbuhan, yang dapat memberikan efek
fisiologis, umumnya merupakan senyawa bioaktif.
NMR
: Nuclear Magnetic Resonance
Resolusi (Rs)
: Derajat keterpisahan suatu analit dengan analit yang
lain
Rf
: Retardation Factor
Spektrofotodensitometri : Detektor
dengan
prinsip
interaksi
radiasi
elektromagnetik dengan analit yang merupakan
noda/bercak pada plat
Spektrum
: Kurva antara panjang gelombang dan absorbansi yang
menjadi identitas suatu senyawa
Standardisasi
: Proses menghasilkan suatu kesepakatan yang terdiri
dari speksifikasi teknis atau kriteria yang akurat dari
suatu halyang didokumentasikan
Tailing
: Puncak kromatogram yang asimetris dan menjorok ke
belakang
Tf
: Tailing Factor
TLC
: Thin Layer Chromatography
WHO
: World Health Organization
xiv
ABSTRAK
Senyawa fenol dalam daun sirih memiliki aktivitas farmakologi
sebagaiantibakteri, antijamur, dan antioksidan. Aktivitas farmakologiobat herbal
dipengaruhi oleh kandungan fitokimianya, sehingga diperlukan standardisasi
untuk memperoleh pemastian kualitas, profil fitokimia, dan aktivitas farmakologi
yang konsisten dari obat herbal. Fingerprint merupakan standar utama yang
ditetapkan oleh WHO untuk pengawasan kualitas bahan baku obat herbal atau
produk herbal. Metode yang digunakan untuk memperoleh profil fingerprint
senyawa golongan fenol adalah KLT-Spektrofotodensitometri.
Sampel daun sirih diekstraksi dengan metode refluks menggunakan pelarut
etanol 96%. Identifikasi senyawa golongan fenol dilakukan dengan KLT
menggunakan fase diam silika gel 60 F254 dan fase gerak toluen: Etil asetat (93:7
v/v), serta pereaksi warna yaitu FeCl3 dan Folin-Ciocalteau. Profil fingerprint
senyawa golongan fenol ekstrak etanol daun sirih (Piper betle Linn.) ditunjukkan
pada Rf 0,19; 0,42; dan 0,62. Bercak positif senyawa golongan fenol berwarna
hitam berdasarkan identifikasi dengan FeCl3 dan biru tua dengan FolinCiocalteau. Panjang gelombang maksimum senyawa golongan fenol adalah 283
nm.
Kata Kunci: sirih, fenol, fingerprint, KLT-spektrofotodensitometri, ekstrak etanol.
xv
ABSTRACT
Phenol compound in Piper betle leaves has several pharmacology activities
such as antibacteria, antifungi and antioxidant. The pharmacology activities of a
herbal drug are influenced by the phytochemistry content, so in order to do a
quality determination that provides phytochemistry profile and consistent
pharmacology activities, a standardization is required. WHO has determined that
fingerprint is the main standard to perform quality control for herbal drug. TLCspectrophotodensitometry was used as the method in order to provide fingerprint
profile of phenol compound.
Piper betle leaves samples were extracted by reflux method using ethanol
96% as the solvent. Identification of phenol compound was done using TLCspectrophotodensitometry with Silica gel 60 F254 as the stationary phase, toluena:
ethyl acetate (93:7 v/v) as the mobile phase, FeCl3 and Folin-Ciocalteau as the
reagent.The fingerprint profile of phenol compund was shown in Rf value 0,19;
0,42; and 0,62. Positive results of phenol compound are black based on FeCl3and
dark blue based on Folin-Ciocalteau. Maximum wavelength of phenol compound
was 283 nm.
Keyword: Piper betle, phenol, fingerprint, TLC-spectrophotodensitometry,
ethanol extract.
xvi
IDE
ENTIFIK
KASI DA
AN FING
GERPRIINT SEN
NYAWA
A
GOL
LONGA
AN FENO
OL DAR
RI EKST
TRAK E
ETANOL
L
DAU
UN SIRIIH HIJA
AU (Pipeer betle Linn.)
L
DE
ENGAN
N
MET
TODE KLT
K
SPE
EKTROF
FOTOD
DENSITO
OMETR
RI
PSI
SKRIP
H
HARLINA
ATI MANU
URUNG
SETIAWA
1208505
5019
JU
URUSAN FA
ARMASI
FAKU
ULTAS MA
ATEMATIIKA DAN ILMU
I
PEN
NGETAHU
UAN ALAM
M
UNIV
VERSITAS UDAYANA
A
2016
6
ii
KATA PENGANTAR
Segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yesus Kristus
karena atas berkat dan karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang
berjudul ”Identifikasi dan Fingerprint Senyawa Golongan Fenol dari Ekstrak
Etanol Daun Sirih Hijau (Piper Betle Linn.) dengan Metode KLT
Spektrofotodensitometri” tepat pada waktunya.Pada kesempatan ini penulis
mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Ibu Ni Made Pitri Susanti, S. Farm., M. Si., Apt selaku pembimbing I yang
telah membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan,
nasihat, saran, dan waktu dalam penyusunan skripsi ini.
2. Ibu L. P. Mirah Kusuma Dewi SF., M.Sc., Apt.selaku pembimbing II yang
telah membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan,
nasihat, saran dan waktu dari awal penyusunan skripsi ini.
3. Drs. Ida Bagus Made Suaskara, M.Si., selaku Dekan Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana.
4. Bapak Dr.rer.nat I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. selaku Ketua
Jurusan Farmasi Fakultas MIPA Universitas Udayana yang telah
membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan, nasihat,
saran, dan waktu dalam penyusunan skripsi ini.
5. Seluruh Dosen, staf pegawai, dan laboran di Jurusan Farmasi Fakultas
MIPA Universitas Udayana yang telah telah memberikan bantuan kepada
penulis selama penyusunan skripsi ini.
iii
6. Keluarga, yaitu orang tua yang sangat penulis sayangi dan hormati, Bapak
Hakim Manurung dan Ibu Taruli Asi Sitorus, serta saudara kandung
penulis yang dikasihi, dr. Berton Manurung, M. Kes., Henry Manurung,
S.E., Horas Manurung, S.Sos., dan Seftiana Br. Manurung, S.E.,
terimakasih atas dukungan doa dan semangat yang telah diberikan baik
moral maupun material dalam penyusunan skripsi ini.
7. Teman-temanTanpo tersayang, Tantri, Anggi, Widya, Budi, Meci, Novi,
Sarah, dan Linda yang selalu memberikan semangat, menjadi teman
bertukar pikiran, dan membantu saat dalam kesulitan.
8. Sahabat tercinta, Tio Fridanna Siahaan, S.Farm.,Apt., Luh Putu Dian
Wulandari, Bella Christy, Tetry Agustina Sitohang, Stefi, dan Febriyanti
yang setia menjadi kawan bertukar pikiran dan memberikan semangat.
9. Sahabat seperjuangan satu pembimbing “Mama Pitri” (Odi, KaGis, Mitsu,
dan Ayu); serta Tim seperjuangan Piper betle (Budi, KaSuas, Cahyani,
Sulys, Dewi, Putri, Pebri, Dein, dan Inggrid) yang selalu memberikan
semangat dan membantu saat dalam kesulitan.
10. Teman-teman seperjuangan riset analisis 2012 (Vanadium Spectra), terdiri
dari 23 orang yang sungguh luar biasa memberikan semangat, dukungan,
dan menjadi kawan bertukar pikiran dalam penulisan skripsi ini.
11. Teman-teman seperjuangan Dioscuri Hygeia 2012, teman-teman KKNPPM UNUD Periode XI Desa Pengotan, dan PMKFMIPA yang senantiasa
menyertai penulis dalam senang dan sedih, memberikan masukan
pemikiran dan semangat untuk penulis.
iv
12. Semua pihak yang terlibat dan telah membantu penulis dalam penyusunan
skripsi ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu, tidak ada
ucapan terspesial karena setiap dukungan adalah spesial bagi penulis.
Penulis menyadari bahwa penyusunan skrisi ini masih jauh dari sempurna.
Untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran dari semua pihak yang bersifat
membangun sehingga di masa yang akan datang dapat menjadi lebih baik. Penulis
berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak yang
membutuhkannya.
Bukit Jimbaran, Juli 2016
Penulis
v
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ....................................................................................
i
LEMBAR PENGESAHAN ..........................................................................
ii
KATA PENGANTAR ..................................................................................
iii
DAFTAR ISI .................................................................................................
vi
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................
ix
DAFTAR TABEL .........................................................................................
xi
DAFTARLAMPIRAN ..................................................................................
xii
DAFTAR ISTILAH DAN SINGKATAN ....................................................
xiii
ABSTRAK ....................................................................................................
xv
BAB IPENDAHULUAN ..............................................................................
1
1.1 Latar Belakang...........................................................................
1
1.2 Rumusan Masalah .....................................................................
3
1.3 Tujuan Penelitian .......................................................................
4
1.4 Manfaat Penelitian .....................................................................
4
BAB IITINJAUAN PUSTAKA ...................................................................
5
2.1 Tanaman Sirih (Piper betle Linn.).............................................
5
2.1.1 Klasifikasi .......................................................................
5
2.1.2 Deskripsi Tanaman .........................................................
5
2.1.3 Kandungan Kimia ...........................................................
6
2.1.4 Khasiat dan Kegunaan ....................................................
6
2.1.5 Identifikasi Kandungan kimia .........................................
7
vi
2.2 Senyawa Fenol...........................................................................
7
2.3 Metode Ekstraksi .......................................................................
8
2.3.1 Ekstraksi Secara Umum ..................................................
8
2.3.2 Ekstraksi Daun Sirih .......................................................
9
2.4 Pemisahan dan Identifikasi Senyawa dengan Kromatografi
Lapis Tipis-Spektrofotodensitometri .........................................
10
2.4.1 Kromatografi Lapis Tipis-Spektrofotodensitometri ......
10
2.4.2 Parameter Kromatogram .................................................
11
2.5 Kromatografi Fingerprint ..........................................................
14
2.5.1 Pemanfaatan KLT-Spektrofotodensitometri dalam
Kromatografi Fingerprint ...............................................
15
BAB IIIMETODE PENELITIAN ................................................................
17
3.1 Rancangan Penelitian ................................................................
17
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian .....................................................
17
3.3 Alat dan Bahan Penelitian .........................................................
17
3.3.1 Bahan Penelitian .............................................................
17
3.3.2 Alat Penelitian .................................................................
18
3.4 Prosedur Penelitian ....................................................................
18
3.4.1 Pengumpulan dan Determinasi Daun Sirih .....................
18
3.4.2 Pembuatan Serbuk Sampel Daun Sirih Hijau .................
19
3.4.3 Penetapan Susut Pengeringan .........................................
19
3.4.4 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau (Piper
betle Linn.) ......................................................................
vii
19
3.4.5 Pemilihan Fase Gerak .....................................................
20
3.4.6 Kromatografi Fingerprint Senyawa Golongan Fenol
dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri ...............
21
BAB IV PEMBAHASAN.............................................................................
23
4.1 Pengumpulan dan Determinasi Tanaman ..................................
23
4.2 Penetapan Susut Pengeringan ....................................................
23
4.3 Ekstraksi Daun Sirih Hijau (Piper betle Linn.) .........................
24
4.4 Identifikasi Senyawa Golongan Fenol dan Pemilihan
Fase Gerak .................................................................................
25
4.5 Kromatografi Fingerprint Senyawa Golongan Fenol
dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri .........................
31
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................
37
5.1 Kesimpulan ................................................................................
37
5.2 Saran ..........................................................................................
37
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................
38
LAMPIRAN ..................................................................................................
41
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1
Tanaman Sirih(Piper betle L.) ...............................................
6
Gambar 2.2
Jenis Perhitungan Tailling Factor (Tf) ...................................
13
Gambar 4.1
Ekstrak Kental Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) .....
25
Gambar 4.2
Identitas KLT-Spektrofotodensitometri Ekstrak Etanol Daun
Sirih Hijau dengan Fase Gerak Toluen: Etil Asetat
(93:7 v/v) ...............................................................................
Gambar 4.3
26
Spektrum dari Masing-Masing Puncak Kromatogram
Senyawa Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau
yang Dipindai pada panjang gelombang 210 nm (FG I) .......
Gambar 4.4
27
Identitas KLT-Spektrofotodensitometri Ekstrak Etanol Daun
Sirih Hijau dengan Fase Gerak Toluen: Etil Asetat: Asam Format
(3:3:0,2 v/v)...........................................................................
Gambar 4.5
28
Spektrum dari Masing-Masing Puncak Kromatogram
Senyawa Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau
yang Dipindai pada panjang gelombang 210 nm (FG II) .....
Gambar 4.6
Pengamatan Bercak Kromatogram Sampel Ekstrak
Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) ..............................
Gambar 4.7
29
32
Pola Puncak Kromatogram Senyawa Golongan
Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau pada Panjang
Gelombang 210 nm ...............................................................
ix
33
Gambar 4.8
Spektrum Masing-Masing Puncak Kromatogram Senyawa
Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau yang
Dipindai pada panjang gelombang 210 nm ..........................
Gambar 4.9
34
Pola Puncak Kromatogram Senyawa Golongan
Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau pada Panjang
Gelombang 283 nm ...............................................................
35
Gambar 4.10 Spektrum Masing-Masing Puncak Kromatogram Senyawa
Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau yang
Dipindai pada panjang gelombang 283 nm ..........................
x
36
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1 Hasil Penetapan Susut Pengeringan Serbuk Daun Sirih
Hijau (Piper betle Linn.) .............................................................
24
Tabel 4.2 Nilai Rs dan Tf Masing-Masing Puncak Senyawa Golongan
Fenol dari Kedua Sistem Fase Gerak ..........................................
xi
30
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Skema Kerja Penelitian ..........................................................
41
Lampiran 2. Hasil Determinasi Tanaman Sirih Hijau (Piper betle Linn.) ..
42
xii
DAFTAR ISTILAH DAN SINGKATAN
AUC
: Area Under Curve. Luas area dari sebuah puncak
dalam kromatogram
Ekstrak
: Hasil dari proses menyari simplisia
Elusi
: Proses menyingkirkan analit dari adsorben dengan
mengalirkan suatu pelarut yang disebut eluen,
melewati kompleks penjerap-analit
Fase diam
: Adsorben yang digunakan dalam kromatografi
Fase gerak (FG)
: Pelarut atau eluen dalam kromatografi
Fingerprint
: Istilah untuk menyebutkan pola kromatogram
HPTLC
: High Performance Thin Layer Chromatography
Integritas
: Suatu konsep berkaitan dengan konsistensi dalam
tindakan-tindakan,
nilai-nilai,
metode-metode,
prinsip-prinsip, dan berbagai hal yang dihasilkan
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
Kontrol kualitas
: Kegiatan untuk memelihara atau meningkatkan suatu
produk melalui proses penelitian, pengembangan serta
perancangan produk
Kromatografi
: Suatu metode pemisahan molekul berdasarkan pola
pergerakan antara fase gerak dan fase diam yang
berada pada larutan
Kromatogram
: Data yang diperoleh dari teknik kromatografi
xiii
Metabolit sekunder
: Senyawa-senyawa organik yang berasal dari sumber
alami tumbuhan, yang dapat memberikan efek
fisiologis, umumnya merupakan senyawa bioaktif.
NMR
: Nuclear Magnetic Resonance
Resolusi (Rs)
: Derajat keterpisahan suatu analit dengan analit yang
lain
Rf
: Retardation Factor
Spektrofotodensitometri : Detektor
dengan
prinsip
interaksi
radiasi
elektromagnetik dengan analit yang merupakan
noda/bercak pada plat
Spektrum
: Kurva antara panjang gelombang dan absorbansi yang
menjadi identitas suatu senyawa
Standardisasi
: Proses menghasilkan suatu kesepakatan yang terdiri
dari speksifikasi teknis atau kriteria yang akurat dari
suatu halyang didokumentasikan
Tailing
: Puncak kromatogram yang asimetris dan menjorok ke
belakang
Tf
: Tailing Factor
TLC
: Thin Layer Chromatography
WHO
: World Health Organization
xiv
ABSTRAK
Senyawa fenol dalam daun sirih memiliki aktivitas farmakologi
sebagaiantibakteri, antijamur, dan antioksidan. Aktivitas farmakologiobat herbal
dipengaruhi oleh kandungan fitokimianya, sehingga diperlukan standardisasi
untuk memperoleh pemastian kualitas, profil fitokimia, dan aktivitas farmakologi
yang konsisten dari obat herbal. Fingerprint merupakan standar utama yang
ditetapkan oleh WHO untuk pengawasan kualitas bahan baku obat herbal atau
produk herbal. Metode yang digunakan untuk memperoleh profil fingerprint
senyawa golongan fenol adalah KLT-Spektrofotodensitometri.
Sampel daun sirih diekstraksi dengan metode refluks menggunakan pelarut
etanol 96%. Identifikasi senyawa golongan fenol dilakukan dengan KLT
menggunakan fase diam silika gel 60 F254 dan fase gerak toluen: Etil asetat (93:7
v/v), serta pereaksi warna yaitu FeCl3 dan Folin-Ciocalteau. Profil fingerprint
senyawa golongan fenol ekstrak etanol daun sirih (Piper betle Linn.) ditunjukkan
pada Rf 0,19; 0,42; dan 0,62. Bercak positif senyawa golongan fenol berwarna
hitam berdasarkan identifikasi dengan FeCl3 dan biru tua dengan FolinCiocalteau. Panjang gelombang maksimum senyawa golongan fenol adalah 283
nm.
Kata Kunci: sirih, fenol, fingerprint, KLT-spektrofotodensitometri, ekstrak etanol.
xv
ABSTRACT
Phenol compound in Piper betle leaves has several pharmacology activities
such as antibacteria, antifungi and antioxidant. The pharmacology activities of a
herbal drug are influenced by the phytochemistry content, so in order to do a
quality determination that provides phytochemistry profile and consistent
pharmacology activities, a standardization is required. WHO has determined that
fingerprint is the main standard to perform quality control for herbal drug. TLCspectrophotodensitometry was used as the method in order to provide fingerprint
profile of phenol compound.
Piper betle leaves samples were extracted by reflux method using ethanol
96% as the solvent. Identification of phenol compound was done using TLCspectrophotodensitometry with Silica gel 60 F254 as the stationary phase, toluena:
ethyl acetate (93:7 v/v) as the mobile phase, FeCl3 and Folin-Ciocalteau as the
reagent.The fingerprint profile of phenol compund was shown in Rf value 0,19;
0,42; and 0,62. Positive results of phenol compound are black based on FeCl3and
dark blue based on Folin-Ciocalteau. Maximum wavelength of phenol compound
was 283 nm.
Keyword: Piper betle, phenol, fingerprint, TLC-spectrophotodensitometry,
ethanol extract.
xvi
i
IDE
ENTIFIK
KASI DA
AN FING
GERPRIINT SEN
NYAWA
A
GOL
LONGA
AN FENO
OL DAR
RI EKST
TRAK E
ETANOL
L
DAU
UN SIRIIH HIJA
AU (Pipeer betle Linn.)
L
DE
ENGAN
N
MET
TODE KLT
K
SPE
EKTROF
FOTOD
DENSITO
OMETR
RI
PSI
SKRIP
H
HARLINA
ATI MANU
URUNG
SETIAWA
1208505
5019
JU
URUSAN FA
ARMASI
FAKU
ULTAS MA
ATEMATIIKA DAN ILMU
I
PEN
NGETAHU
UAN ALAM
M
UNIV
VERSITAS UDAYANA
A
2016
6
ii
KATA PENGANTAR
Segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yesus Kristus
karena atas berkat dan karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang
berjudul ”Identifikasi dan Fingerprint Senyawa Golongan Fenol dari Ekstrak
Etanol Daun Sirih Hijau (Piper Betle Linn.) dengan Metode KLT
Spektrofotodensitometri” tepat pada waktunya.Pada kesempatan ini penulis
mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Ibu Ni Made Pitri Susanti, S. Farm., M. Si., Apt selaku pembimbing I yang
telah membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan,
nasihat, saran, dan waktu dalam penyusunan skripsi ini.
2. Ibu L. P. Mirah Kusuma Dewi SF., M.Sc., Apt.selaku pembimbing II yang
telah membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan,
nasihat, saran dan waktu dari awal penyusunan skripsi ini.
3. Drs. Ida Bagus Made Suaskara, M.Si., selaku Dekan Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana.
4. Bapak Dr.rer.nat I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. selaku Ketua
Jurusan Farmasi Fakultas MIPA Universitas Udayana yang telah
membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan, nasihat,
saran, dan waktu dalam penyusunan skripsi ini.
5. Seluruh Dosen, staf pegawai, dan laboran di Jurusan Farmasi Fakultas
MIPA Universitas Udayana yang telah telah memberikan bantuan kepada
penulis selama penyusunan skripsi ini.
iii
6. Keluarga, yaitu orang tua yang sangat penulis sayangi dan hormati, Bapak
Hakim Manurung dan Ibu Taruli Asi Sitorus, serta saudara kandung
penulis yang dikasihi, dr. Berton Manurung, M. Kes., Henry Manurung,
S.E., Horas Manurung, S.Sos., dan Seftiana Br. Manurung, S.E.,
terimakasih atas dukungan doa dan semangat yang telah diberikan baik
moral maupun material dalam penyusunan skripsi ini.
7. Teman-temanTanpo tersayang, Tantri, Anggi, Widya, Budi, Meci, Novi,
Sarah, dan Linda yang selalu memberikan semangat, menjadi teman
bertukar pikiran, dan membantu saat dalam kesulitan.
8. Sahabat tercinta, Tio Fridanna Siahaan, S.Farm.,Apt., Luh Putu Dian
Wulandari, Bella Christy, Tetry Agustina Sitohang, Stefi, dan Febriyanti
yang setia menjadi kawan bertukar pikiran dan memberikan semangat.
9. Sahabat seperjuangan satu pembimbing “Mama Pitri” (Odi, KaGis, Mitsu,
dan Ayu); serta Tim seperjuangan Piper betle (Budi, KaSuas, Cahyani,
Sulys, Dewi, Putri, Pebri, Dein, dan Inggrid) yang selalu memberikan
semangat dan membantu saat dalam kesulitan.
10. Teman-teman seperjuangan riset analisis 2012 (Vanadium Spectra), terdiri
dari 23 orang yang sungguh luar biasa memberikan semangat, dukungan,
dan menjadi kawan bertukar pikiran dalam penulisan skripsi ini.
11. Teman-teman seperjuangan Dioscuri Hygeia 2012, teman-teman KKNPPM UNUD Periode XI Desa Pengotan, dan PMKFMIPA yang senantiasa
menyertai penulis dalam senang dan sedih, memberikan masukan
pemikiran dan semangat untuk penulis.
iv
12. Semua pihak yang terlibat dan telah membantu penulis dalam penyusunan
skripsi ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu, tidak ada
ucapan terspesial karena setiap dukungan adalah spesial bagi penulis.
Penulis menyadari bahwa penyusunan skrisi ini masih jauh dari sempurna.
Untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran dari semua pihak yang bersifat
membangun sehingga di masa yang akan datang dapat menjadi lebih baik. Penulis
berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak yang
membutuhkannya.
Bukit Jimbaran, Juli 2016
Penulis
v
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ....................................................................................
i
LEMBAR PENGESAHAN ..........................................................................
ii
KATA PENGANTAR ..................................................................................
iii
DAFTAR ISI .................................................................................................
vi
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................
ix
DAFTAR TABEL .........................................................................................
xi
DAFTARLAMPIRAN ..................................................................................
xii
DAFTAR ISTILAH DAN SINGKATAN ....................................................
xiii
ABSTRAK ....................................................................................................
xv
BAB IPENDAHULUAN ..............................................................................
1
1.1 Latar Belakang...........................................................................
1
1.2 Rumusan Masalah .....................................................................
3
1.3 Tujuan Penelitian .......................................................................
4
1.4 Manfaat Penelitian .....................................................................
4
BAB IITINJAUAN PUSTAKA ...................................................................
5
2.1 Tanaman Sirih (Piper betle Linn.).............................................
5
2.1.1 Klasifikasi .......................................................................
5
2.1.2 Deskripsi Tanaman .........................................................
5
2.1.3 Kandungan Kimia ...........................................................
6
2.1.4 Khasiat dan Kegunaan ....................................................
6
2.1.5 Identifikasi Kandungan kimia .........................................
7
vi
2.2 Senyawa Fenol...........................................................................
7
2.3 Metode Ekstraksi .......................................................................
8
2.3.1 Ekstraksi Secara Umum ..................................................
8
2.3.2 Ekstraksi Daun Sirih .......................................................
9
2.4 Pemisahan dan Identifikasi Senyawa dengan Kromatografi
Lapis Tipis-Spektrofotodensitometri .........................................
10
2.4.1 Kromatografi Lapis Tipis-Spektrofotodensitometri ......
10
2.4.2 Parameter Kromatogram .................................................
11
2.5 Kromatografi Fingerprint ..........................................................
14
2.5.1 Pemanfaatan KLT-Spektrofotodensitometri dalam
Kromatografi Fingerprint ...............................................
15
BAB IIIMETODE PENELITIAN ................................................................
17
3.1 Rancangan Penelitian ................................................................
17
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian .....................................................
17
3.3 Alat dan Bahan Penelitian .........................................................
17
3.3.1 Bahan Penelitian .............................................................
17
3.3.2 Alat Penelitian .................................................................
18
3.4 Prosedur Penelitian ....................................................................
18
3.4.1 Pengumpulan dan Determinasi Daun Sirih .....................
18
3.4.2 Pembuatan Serbuk Sampel Daun Sirih Hijau .................
19
3.4.3 Penetapan Susut Pengeringan .........................................
19
3.4.4 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau (Piper
betle Linn.) ......................................................................
vii
19
3.4.5 Pemilihan Fase Gerak .....................................................
20
3.4.6 Kromatografi Fingerprint Senyawa Golongan Fenol
dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri ...............
21
BAB IV PEMBAHASAN.............................................................................
23
4.1 Pengumpulan dan Determinasi Tanaman ..................................
23
4.2 Penetapan Susut Pengeringan ....................................................
23
4.3 Ekstraksi Daun Sirih Hijau (Piper betle Linn.) .........................
24
4.4 Identifikasi Senyawa Golongan Fenol dan Pemilihan
Fase Gerak .................................................................................
25
4.5 Kromatografi Fingerprint Senyawa Golongan Fenol
dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri .........................
31
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................
37
5.1 Kesimpulan ................................................................................
37
5.2 Saran ..........................................................................................
37
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................
38
LAMPIRAN ..................................................................................................
41
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1
Tanaman Sirih(Piper betle L.) ...............................................
6
Gambar 2.2
Jenis Perhitungan Tailling Factor (Tf) ...................................
13
Gambar 4.1
Ekstrak Kental Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) .....
25
Gambar 4.2
Identitas KLT-Spektrofotodensitometri Ekstrak Etanol Daun
Sirih Hijau dengan Fase Gerak Toluen: Etil Asetat
(93:7 v/v) ...............................................................................
Gambar 4.3
26
Spektrum dari Masing-Masing Puncak Kromatogram
Senyawa Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau
yang Dipindai pada panjang gelombang 210 nm (FG I) .......
Gambar 4.4
27
Identitas KLT-Spektrofotodensitometri Ekstrak Etanol Daun
Sirih Hijau dengan Fase Gerak Toluen: Etil Asetat: Asam Format
(3:3:0,2 v/v)...........................................................................
Gambar 4.5
28
Spektrum dari Masing-Masing Puncak Kromatogram
Senyawa Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau
yang Dipindai pada panjang gelombang 210 nm (FG II) .....
Gambar 4.6
Pengamatan Bercak Kromatogram Sampel Ekstrak
Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) ..............................
Gambar 4.7
29
32
Pola Puncak Kromatogram Senyawa Golongan
Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau pada Panjang
Gelombang 210 nm ...............................................................
ix
33
Gambar 4.8
Spektrum Masing-Masing Puncak Kromatogram Senyawa
Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau yang
Dipindai pada panjang gelombang 210 nm ..........................
Gambar 4.9
34
Pola Puncak Kromatogram Senyawa Golongan
Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau pada Panjang
Gelombang 283 nm ...............................................................
35
Gambar 4.10 Spektrum Masing-Masing Puncak Kromatogram Senyawa
Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau yang
Dipindai pada panjang gelombang 283 nm ..........................
x
36
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1 Hasil Penetapan Susut Pengeringan Serbuk Daun Sirih
Hijau (Piper betle Linn.) .............................................................
24
Tabel 4.2 Nilai Rs dan Tf Masing-Masing Puncak Senyawa Golongan
Fenol dari Kedua Sistem Fase Gerak ..........................................
xi
30
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Skema Kerja Penelitian ..........................................................
41
Lampiran 2. Hasil Determinasi Tanaman Sirih Hijau (Piper betle Linn.) ..
42
xii
DAFTAR ISTILAH DAN SINGKATAN
AUC
: Area Under Curve. Luas area dari sebuah puncak
dalam kromatogram
Ekstrak
: Hasil dari proses menyari simplisia
Elusi
: Proses menyingkirkan analit dari adsorben dengan
mengalirkan suatu pelarut yang disebut eluen,
melewati kompleks penjerap-analit
Fase diam
: Adsorben yang digunakan dalam kromatografi
Fase gerak (FG)
: Pelarut atau eluen dalam kromatografi
Fingerprint
: Istilah untuk menyebutkan pola kromatogram
HPTLC
: High Performance Thin Layer Chromatography
Integritas
: Suatu konsep berkaitan dengan konsistensi dalam
tindakan-tindakan,
nilai-nilai,
metode-metode,
prinsip-prinsip, dan berbagai hal yang dihasilkan
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
Kontrol kualitas
: Kegiatan untuk memelihara atau meningkatkan suatu
produk melalui proses penelitian, pengembangan serta
perancangan produk
Kromatografi
: Suatu metode pemisahan molekul berdasarkan pola
pergerakan antara fase gerak dan fase diam yang
berada pada larutan
Kromatogram
: Data yang diperoleh dari teknik kromatografi
xiii
Metabolit sekunder
: Senyawa-senyawa organik yang berasal dari sumber
alami tumbuhan, yang dapat memberikan efek
fisiologis, umumnya merupakan senyawa bioaktif.
NMR
: Nuclear Magnetic Resonance
Resolusi (Rs)
: Derajat keterpisahan suatu analit dengan analit yang
lain
Rf
: Retardation Factor
Spektrofotodensitometri : Detektor
dengan
prinsip
interaksi
radiasi
elektromagnetik dengan analit yang merupakan
noda/bercak pada plat
Spektrum
: Kurva antara panjang gelombang dan absorbansi yang
menjadi identitas suatu senyawa
Standardisasi
: Proses menghasilkan suatu kesepakatan yang terdiri
dari speksifikasi teknis atau kriteria yang akurat dari
suatu halyang didokumentasikan
Tailing
: Puncak kromatogram yang asimetris dan menjorok ke
belakang
Tf
: Tailing Factor
TLC
: Thin Layer Chromatography
WHO
: World Health Organization
xiv
ABSTRAK
Senyawa fenol dalam daun sirih memiliki aktivitas farmakologi
sebagaiantibakteri, antijamur, dan antioksidan. Aktivitas farmakologiobat herbal
dipengaruhi oleh kandungan fitokimianya, sehingga diperlukan standardisasi
untuk memperoleh pemastian kualitas, profil fitokimia, dan aktivitas farmakologi
yang konsisten dari obat herbal. Fingerprint merupakan standar utama yang
ditetapkan oleh WHO untuk pengawasan kualitas bahan baku obat herbal atau
produk herbal. Metode yang digunakan untuk memperoleh profil fingerprint
senyawa golongan fenol adalah KLT-Spektrofotodensitometri.
Sampel daun sirih diekstraksi dengan metode refluks menggunakan pelarut
etanol 96%. Identifikasi senyawa golongan fenol dilakukan dengan KLT
menggunakan fase diam silika gel 60 F254 dan fase gerak toluen: Etil asetat (93:7
v/v), serta pereaksi warna yaitu FeCl3 dan Folin-Ciocalteau. Profil fingerprint
senyawa golongan fenol ekstrak etanol daun sirih (Piper betle Linn.) ditunjukkan
pada Rf 0,19; 0,42; dan 0,62. Bercak positif senyawa golongan fenol berwarna
hitam berdasarkan identifikasi dengan FeCl3 dan biru tua dengan FolinCiocalteau. Panjang gelombang maksimum senyawa golongan fenol adalah 283
nm.
Kata Kunci: sirih, fenol, fingerprint, KLT-spektrofotodensitometri, ekstrak etanol.
xv
ABSTRACT
Phenol compound in Piper betle leaves has several pharmacology activities
such as antibacteria, antifungi and antioxidant. The pharmacology activities of a
herbal drug are influenced by the phytochemistry content, so in order to do a
quality determination that provides phytochemistry profile and consistent
pharmacology activities, a standardization is required. WHO has determined that
fingerprint is the main standard to perform quality control for herbal drug. TLCspectrophotodensitometry was used as the method in order to provide fingerprint
profile of phenol compound.
Piper betle leaves samples were extracted by reflux method using ethanol
96% as the solvent. Identification of phenol compound was done using TLCspectrophotodensitometry with Silica gel 60 F254 as the stationary phase, toluena:
ethyl acetate (93:7 v/v) as the mobile phase, FeCl3 and Folin-Ciocalteau as the
reagent.The fingerprint profile of phenol compund was shown in Rf value 0,19;
0,42; and 0,62. Positive results of phenol compound are black based on FeCl3and
dark blue based on Folin-Ciocalteau. Maximum wavelength of phenol compound
was 283 nm.
Keyword: Piper betle, phenol, fingerprint, TLC-spectrophotodensitometry,
ethanol extract.
xvi
i
IDE
ENTIFIK
KASI DA
AN FING
GERPRIINT SEN
NYAWA
A
GOL
LONGA
AN FENO
OL DAR
RI EKST
TRAK E
ETANOL
L
DAU
UN SIRIIH HIJA
AU (Pipeer betle Linn.)
L
DE
ENGAN
N
MET
TODE KLT
K
SPE
EKTROF
FOTOD
DENSITO
OMETR
RI
PSI
SKRIP
H
HARLINA
ATI MANU
URUNG
SETIAWA
1208505
5019
JU
URUSAN FA
ARMASI
FAKU
ULTAS MA
ATEMATIIKA DAN ILMU
I
PEN
NGETAHU
UAN ALAM
M
UNIV
VERSITAS UDAYANA
A
2016
6
ii
KATA PENGANTAR
Segala puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yesus Kristus
karena atas berkat dan karunia-Nya penulis dapat menyelesaikan skripsi yang
berjudul ”Identifikasi dan Fingerprint Senyawa Golongan Fenol dari Ekstrak
Etanol Daun Sirih Hijau (Piper Betle Linn.) dengan Metode KLT
Spektrofotodensitometri” tepat pada waktunya.Pada kesempatan ini penulis
mengucapkan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada :
1. Ibu Ni Made Pitri Susanti, S. Farm., M. Si., Apt selaku pembimbing I yang
telah membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan,
nasihat, saran, dan waktu dalam penyusunan skripsi ini.
2. Ibu L. P. Mirah Kusuma Dewi SF., M.Sc., Apt.selaku pembimbing II yang
telah membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan,
nasihat, saran dan waktu dari awal penyusunan skripsi ini.
3. Drs. Ida Bagus Made Suaskara, M.Si., selaku Dekan Fakultas Matematika
dan Ilmu Pengetahuan Alam Universitas Udayana.
4. Bapak Dr.rer.nat I Made Agus Gelgel Wirasuta, M.Si., Apt. selaku Ketua
Jurusan Farmasi Fakultas MIPA Universitas Udayana yang telah
membantu dengan segenap tenaga, pikiran, motivasi, dorongan, nasihat,
saran, dan waktu dalam penyusunan skripsi ini.
5. Seluruh Dosen, staf pegawai, dan laboran di Jurusan Farmasi Fakultas
MIPA Universitas Udayana yang telah telah memberikan bantuan kepada
penulis selama penyusunan skripsi ini.
iii
6. Keluarga, yaitu orang tua yang sangat penulis sayangi dan hormati, Bapak
Hakim Manurung dan Ibu Taruli Asi Sitorus, serta saudara kandung
penulis yang dikasihi, dr. Berton Manurung, M. Kes., Henry Manurung,
S.E., Horas Manurung, S.Sos., dan Seftiana Br. Manurung, S.E.,
terimakasih atas dukungan doa dan semangat yang telah diberikan baik
moral maupun material dalam penyusunan skripsi ini.
7. Teman-temanTanpo tersayang, Tantri, Anggi, Widya, Budi, Meci, Novi,
Sarah, dan Linda yang selalu memberikan semangat, menjadi teman
bertukar pikiran, dan membantu saat dalam kesulitan.
8. Sahabat tercinta, Tio Fridanna Siahaan, S.Farm.,Apt., Luh Putu Dian
Wulandari, Bella Christy, Tetry Agustina Sitohang, Stefi, dan Febriyanti
yang setia menjadi kawan bertukar pikiran dan memberikan semangat.
9. Sahabat seperjuangan satu pembimbing “Mama Pitri” (Odi, KaGis, Mitsu,
dan Ayu); serta Tim seperjuangan Piper betle (Budi, KaSuas, Cahyani,
Sulys, Dewi, Putri, Pebri, Dein, dan Inggrid) yang selalu memberikan
semangat dan membantu saat dalam kesulitan.
10. Teman-teman seperjuangan riset analisis 2012 (Vanadium Spectra), terdiri
dari 23 orang yang sungguh luar biasa memberikan semangat, dukungan,
dan menjadi kawan bertukar pikiran dalam penulisan skripsi ini.
11. Teman-teman seperjuangan Dioscuri Hygeia 2012, teman-teman KKNPPM UNUD Periode XI Desa Pengotan, dan PMKFMIPA yang senantiasa
menyertai penulis dalam senang dan sedih, memberikan masukan
pemikiran dan semangat untuk penulis.
iv
12. Semua pihak yang terlibat dan telah membantu penulis dalam penyusunan
skripsi ini yang tidak dapat penulis sebutkan satu per satu, tidak ada
ucapan terspesial karena setiap dukungan adalah spesial bagi penulis.
Penulis menyadari bahwa penyusunan skrisi ini masih jauh dari sempurna.
Untuk itu penulis mengharapkan kritik dan saran dari semua pihak yang bersifat
membangun sehingga di masa yang akan datang dapat menjadi lebih baik. Penulis
berharap semoga skripsi ini dapat bermanfaat bagi semua pihak yang
membutuhkannya.
Bukit Jimbaran, Juli 2016
Penulis
v
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL ....................................................................................
i
LEMBAR PENGESAHAN ..........................................................................
ii
KATA PENGANTAR ..................................................................................
iii
DAFTAR ISI .................................................................................................
vi
DAFTAR GAMBAR ....................................................................................
ix
DAFTAR TABEL .........................................................................................
xi
DAFTARLAMPIRAN ..................................................................................
xii
DAFTAR ISTILAH DAN SINGKATAN ....................................................
xiii
ABSTRAK ....................................................................................................
xv
BAB IPENDAHULUAN ..............................................................................
1
1.1 Latar Belakang...........................................................................
1
1.2 Rumusan Masalah .....................................................................
3
1.3 Tujuan Penelitian .......................................................................
4
1.4 Manfaat Penelitian .....................................................................
4
BAB IITINJAUAN PUSTAKA ...................................................................
5
2.1 Tanaman Sirih (Piper betle Linn.).............................................
5
2.1.1 Klasifikasi .......................................................................
5
2.1.2 Deskripsi Tanaman .........................................................
5
2.1.3 Kandungan Kimia ...........................................................
6
2.1.4 Khasiat dan Kegunaan ....................................................
6
2.1.5 Identifikasi Kandungan kimia .........................................
7
vi
2.2 Senyawa Fenol...........................................................................
7
2.3 Metode Ekstraksi .......................................................................
8
2.3.1 Ekstraksi Secara Umum ..................................................
8
2.3.2 Ekstraksi Daun Sirih .......................................................
9
2.4 Pemisahan dan Identifikasi Senyawa dengan Kromatografi
Lapis Tipis-Spektrofotodensitometri .........................................
10
2.4.1 Kromatografi Lapis Tipis-Spektrofotodensitometri ......
10
2.4.2 Parameter Kromatogram .................................................
11
2.5 Kromatografi Fingerprint ..........................................................
14
2.5.1 Pemanfaatan KLT-Spektrofotodensitometri dalam
Kromatografi Fingerprint ...............................................
15
BAB IIIMETODE PENELITIAN ................................................................
17
3.1 Rancangan Penelitian ................................................................
17
3.2 Lokasi dan Waktu Penelitian .....................................................
17
3.3 Alat dan Bahan Penelitian .........................................................
17
3.3.1 Bahan Penelitian .............................................................
17
3.3.2 Alat Penelitian .................................................................
18
3.4 Prosedur Penelitian ....................................................................
18
3.4.1 Pengumpulan dan Determinasi Daun Sirih .....................
18
3.4.2 Pembuatan Serbuk Sampel Daun Sirih Hijau .................
19
3.4.3 Penetapan Susut Pengeringan .........................................
19
3.4.4 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau (Piper
betle Linn.) ......................................................................
vii
19
3.4.5 Pemilihan Fase Gerak .....................................................
20
3.4.6 Kromatografi Fingerprint Senyawa Golongan Fenol
dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri ...............
21
BAB IV PEMBAHASAN.............................................................................
23
4.1 Pengumpulan dan Determinasi Tanaman ..................................
23
4.2 Penetapan Susut Pengeringan ....................................................
23
4.3 Ekstraksi Daun Sirih Hijau (Piper betle Linn.) .........................
24
4.4 Identifikasi Senyawa Golongan Fenol dan Pemilihan
Fase Gerak .................................................................................
25
4.5 Kromatografi Fingerprint Senyawa Golongan Fenol
dengan Metode KLT-Spektrofotodensitometri .........................
31
BAB V KESIMPULAN DAN SARAN .......................................................
37
5.1 Kesimpulan ................................................................................
37
5.2 Saran ..........................................................................................
37
DAFTAR PUSTAKA ...................................................................................
38
LAMPIRAN ..................................................................................................
41
viii
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1
Tanaman Sirih(Piper betle L.) ...............................................
6
Gambar 2.2
Jenis Perhitungan Tailling Factor (Tf) ...................................
13
Gambar 4.1
Ekstrak Kental Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) .....
25
Gambar 4.2
Identitas KLT-Spektrofotodensitometri Ekstrak Etanol Daun
Sirih Hijau dengan Fase Gerak Toluen: Etil Asetat
(93:7 v/v) ...............................................................................
Gambar 4.3
26
Spektrum dari Masing-Masing Puncak Kromatogram
Senyawa Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau
yang Dipindai pada panjang gelombang 210 nm (FG I) .......
Gambar 4.4
27
Identitas KLT-Spektrofotodensitometri Ekstrak Etanol Daun
Sirih Hijau dengan Fase Gerak Toluen: Etil Asetat: Asam Format
(3:3:0,2 v/v)...........................................................................
Gambar 4.5
28
Spektrum dari Masing-Masing Puncak Kromatogram
Senyawa Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau
yang Dipindai pada panjang gelombang 210 nm (FG II) .....
Gambar 4.6
Pengamatan Bercak Kromatogram Sampel Ekstrak
Etanol Daun Sirih Hijau (Piper betle L.) ..............................
Gambar 4.7
29
32
Pola Puncak Kromatogram Senyawa Golongan
Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau pada Panjang
Gelombang 210 nm ...............................................................
ix
33
Gambar 4.8
Spektrum Masing-Masing Puncak Kromatogram Senyawa
Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau yang
Dipindai pada panjang gelombang 210 nm ..........................
Gambar 4.9
34
Pola Puncak Kromatogram Senyawa Golongan
Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau pada Panjang
Gelombang 283 nm ...............................................................
35
Gambar 4.10 Spektrum Masing-Masing Puncak Kromatogram Senyawa
Golongan Fenol Ekstrak Etanol Daun Sirih Hijau yang
Dipindai pada panjang gelombang 283 nm ..........................
x
36
DAFTAR TABEL
Tabel 4.1 Hasil Penetapan Susut Pengeringan Serbuk Daun Sirih
Hijau (Piper betle Linn.) .............................................................
24
Tabel 4.2 Nilai Rs dan Tf Masing-Masing Puncak Senyawa Golongan
Fenol dari Kedua Sistem Fase Gerak ..........................................
xi
30
DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Skema Kerja Penelitian ..........................................................
41
Lampiran 2. Hasil Determinasi Tanaman Sirih Hijau (Piper betle Linn.) ..
42
xii
DAFTAR ISTILAH DAN SINGKATAN
AUC
: Area Under Curve. Luas area dari sebuah puncak
dalam kromatogram
Ekstrak
: Hasil dari proses menyari simplisia
Elusi
: Proses menyingkirkan analit dari adsorben dengan
mengalirkan suatu pelarut yang disebut eluen,
melewati kompleks penjerap-analit
Fase diam
: Adsorben yang digunakan dalam kromatografi
Fase gerak (FG)
: Pelarut atau eluen dalam kromatografi
Fingerprint
: Istilah untuk menyebutkan pola kromatogram
HPTLC
: High Performance Thin Layer Chromatography
Integritas
: Suatu konsep berkaitan dengan konsistensi dalam
tindakan-tindakan,
nilai-nilai,
metode-metode,
prinsip-prinsip, dan berbagai hal yang dihasilkan
KLT
: Kromatografi Lapis Tipis
Kontrol kualitas
: Kegiatan untuk memelihara atau meningkatkan suatu
produk melalui proses penelitian, pengembangan serta
perancangan produk
Kromatografi
: Suatu metode pemisahan molekul berdasarkan pola
pergerakan antara fase gerak dan fase diam yang
berada pada larutan
Kromatogram
: Data yang diperoleh dari teknik kromatografi
xiii
Metabolit sekunder
: Senyawa-senyawa organik yang berasal dari sumber
alami tumbuhan, yang dapat memberikan efek
fisiologis, umumnya merupakan senyawa bioaktif.
NMR
: Nuclear Magnetic Resonance
Resolusi (Rs)
: Derajat keterpisahan suatu analit dengan analit yang
lain
Rf
: Retardation Factor
Spektrofotodensitometri : Detektor
dengan
prinsip
interaksi
radiasi
elektromagnetik dengan analit yang merupakan
noda/bercak pada plat
Spektrum
: Kurva antara panjang gelombang dan absorbansi yang
menjadi identitas suatu senyawa
Standardisasi
: Proses menghasilkan suatu kesepakatan yang terdiri
dari speksifikasi teknis atau kriteria yang akurat dari
suatu halyang didokumentasikan
Tailing
: Puncak kromatogram yang asimetris dan menjorok ke
belakang
Tf
: Tailing Factor
TLC
: Thin Layer Chromatography
WHO
: World Health Organization
xiv
ABSTRAK
Senyawa fenol dalam daun sirih memiliki aktivitas farmakologi
sebagaiantibakteri, antijamur, dan antioksidan. Aktivitas farmakologiobat herbal
dipengaruhi oleh kandungan fitokimianya, sehingga diperlukan standardisasi
untuk memperoleh pemastian kualitas, profil fitokimia, dan aktivitas farmakologi
yang konsisten dari obat herbal. Fingerprint merupakan standar utama yang
ditetapkan oleh WHO untuk pengawasan kualitas bahan baku obat herbal atau
produk herbal. Metode yang digunakan untuk memperoleh profil fingerprint
senyawa golongan fenol adalah KLT-Spektrofotodensitometri.
Sampel daun sirih diekstraksi dengan metode refluks menggunakan pelarut
etanol 96%. Identifikasi senyawa golongan fenol dilakukan dengan KLT
menggunakan fase diam silika gel 60 F254 dan fase gerak toluen: Etil asetat (93:7
v/v), serta pereaksi warna yaitu FeCl3 dan Folin-Ciocalteau. Profil fingerprint
senyawa golongan fenol ekstrak etanol daun sirih (Piper betle Linn.) ditunjukkan
pada Rf 0,19; 0,42; dan 0,62. Bercak positif senyawa golongan fenol berwarna
hitam berdasarkan identifikasi dengan FeCl3 dan biru tua dengan FolinCiocalteau. Panjang gelombang maksimum senyawa golongan fenol adalah 283
nm.
Kata Kunci: sirih, fenol, fingerprint, KLT-spektrofotodensitometri, ekstrak etanol.
xv
ABSTRACT
Phenol compound in Piper betle leaves has several pharmacology activities
such as antibacteria, antifungi and antioxidant. The pharmacology activities of a
herbal drug are influenced by the phytochemistry content, so in order to do a
quality determination that provides phytochemistry profile and consistent
pharmacology activities, a standardization is required. WHO has determined that
fingerprint is the main standard to perform quality control for herbal drug. TLCspectrophotodensitometry was used as the method in order to provide fingerprint
profile of phenol compound.
Piper betle leaves samples were extracted by reflux method using ethanol
96% as the solvent. Identification of phenol compound was done using TLCspectrophotodensitometry with Silica gel 60 F254 as the stationary phase, toluena:
ethyl acetate (93:7 v/v) as the mobile phase, FeCl3 and Folin-Ciocalteau as the
reagent.The fingerprint profile of phenol compund was shown in Rf value 0,19;
0,42; and 0,62. Positive results of phenol compound are black based on FeCl3and
dark blue based on Folin-Ciocalteau. Maximum wavelength of phenol compound
was 283 nm.
Keyword: Piper betle, phenol, fingerprint, TLC-spectrophotodensitometry,
ethanol extract.
xvi