Efek Ekstrak Etanol Daun Puguh Tanoh (Curanga fel-terrae Merr.) Terhadap Kadar Nitrogen Monooksida Plasma Darah Tikus Sebagai Terapi Pendamping Pada Penggunaan Doksorubisin

  EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN PUGUH TANOH (Curanga fel-terrae Merr.) TERHADAP KADAR NITROGEN MONOOKSIDA PLASMA DARAH TIKUS SEBAGAI TERAPI PENDAMPING PADA PENGGUNAAN DOKSORUBISIN SKRIPSI OLEH: FENNIE SJAHRIAL NIM 091501067

  EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN PUGUH TANOH (Curanga fel-terrae Merr.) TERHADAP KADAR NITROGEN MONOOKSIDA PLASMA DARAH TIKUS SEBAGAI TERAPI PENDAMPING PADA PENGGUNAAN DOKSORUBISIN SKRIPSI Diajukan untuk melengkapi salah satu syarat untuk memperoleh Gelar Sarjana Farmasi pada Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara OLEH: FENNIE SJAHRIAL NIM 091501067 PROGRAM STUDI SARJANA FARMASI FAKULTAS FARMASI UNIVERSITAS SUMATERA UTARA MEDAN 2013

PENGESAHAN SKRIPSI EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN PUGUH TANOH (Curanga fel-terrae Merr.) TERHADAP KADAR NITROGEN MONOOKSIDA PLASMA DARAH TIKUS SEBAGAI TERAPI PENDAMPING PADA PENGGUNAAN DOKSORUBISIN OLEH: FENNIE SJAHRIAL NIM 091501067

  Dipertahankan di Hadapan Panitia Penguji Skripsi Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara

  Pada Tanggal: 27 Agustus 2013 Pembimbing I, Panitia Penguji, Pembimbing II,

  Medan, Oktober 2013 Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Dekan, Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt.

  NIP 195311281983031002 Prof. Dr. Urip Harahap, Apt.

  NIP 195301011983031004 Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt. NIP 197806032005012004 Poppy Anjelisa Z. Hasibuan, S.Si, M.Si., Apt.

  NIP 197506102005012003 Drs. Suryadi Achmad, M.S., Apt.

  NIP 195109081985031002 Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt. NIP 197806032005012004 Marianne, S.Si., M.Si., Apt.

  NIP 198005202005012006 Puji dan syukur kepada Tuhan Yang Maha Kuasa yang telah melimpahkan anugerah dan kemurahan-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan skripsi yang berjudul “Efek ekstrak etanol daun puguh tanoh

  (Curanga fel-terrae Merr.) terhadap kadar nitrogen monooksida plasma darah tikus sebagai terapi pendamping pada penggunaan Doksorubisin”.

  Skripsi ini diajukan sebagai salah satu syarat guna memperoleh gelar Sarjana Farmasi dari Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara.

  Pada kesempatan ini penulis hendak menyampaikan rasa hormat dan terima kasih yang sebesar-besarnya kepada Bapak Prof. Dr. Sumadio Hadisahputra, Apt., selaku Dekan Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara yang telah memberikan fasilitas dan bantuan selama masa pendidikan dan penelitian, kepada Ibu Aminah Dalimunthe, S.Si., M.Si., Apt., dan Ibu Poppy Anjelisa Z. Hasibuan, S.Si., M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing yang telah banyak memberikan bimbingan, arahan dan bantuan selama masa penelitian hingga selesainya penulisan skripsi ini. Penulis juga menyampaikan ucapan terima kasih kepada Bapak Prof. Dr. Urip Harahap, Apt., Ibu Marianne, S.Si., M.Si., Apt. dan Bapak Drs. Suryadi Achmad, M.Sc., Apt. selaku dosen penguji yang telah memberikan masukan dalam penyusunan skripsi ini serta kepada Ibu Aswita Hafni Lubis, M.Si., Apt., selaku dosen pembimbing akademik yang telah membimbing selama masa pendidikan.

  Ucapan terima kasih serta penghargaan yang tulus dan tak terhingga penulis sampaikan kepada orangtua tersayang Ayahanda Herry Sjahrial dan Ibunda Nina Tandiono, kakak Lannie Sjahrial dan adik Jovian Sjahrial serta kakek (Alm.) Herman Sjahrial atas doa dan dukungan baik moril maupun materiil kepada penulis selama masa perkuliahan hingga selesainya penyusunan skripsi ini.

  Penulis juga mengucapkan terima kasih kepada seluruh staf pengajar, asisten laboratorium, kakak-kakak, abang-abang dan teman-teman seperjuangan angkatan 2009 khususnya Masinis 09 dan Farmasi B’09 atas motivasi dan segala bantuan selama perkuliahan dan penyelesaian skripsi ini.

  Semoga Tuhan Yang Maha Kuasa memberikan balasan yang berlipat ganda kepada semua pihak yang telah membantu dalam penulisan skripsi ini.

  Tiada gading yang tak retak, begitu juga halnya dengan skripsi ini. Penulis menyadari bahwa skripsi ini masih banyak kekurangan. Oleh karena itu, dengan kerendahan hati, penulis menerima kritik dan saran yang bersifat membangun dari semua pihak untuk menyempurnakan skripsi ini. Akhir kata penulis berharap semoga skripsi ini bermanfaat bagi ilmu pengetahuan khususnya bidang farmasi.

  Medan, Agustus 2013 Penulis,

  Fennie Sjahrial 091501067

  EFEK EKSTRAK ETANOL DAUN PUGUH TANOH (Curanga fel-terrae Merr.) TERHADAP KADAR NITROGEN MONOOKSIDA PLASMA DARAH TIKUS SEBAGAI TERAPI PENDAMPING PADA PENGGUNAAN DOKSORUBISIN ABSTRAK

  Doksorubisin adalah agen kemoterapi golongan antrasiklin yang digunakan pada pengobatan kanker, namun penggunaannya terbatas karena menyebabkan kardiotoksisitas yang diduga akibat peningkatan nitrogen monooksida yang diinduksi oleh Doksorubisin. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui efek pemberian ekstrak etanol daun puguh tanoh terhadap kadar NO plasma darah yang diinduksi Doksorubisin.

  Penelitian ini meliputi karakterisasi simplisia dan ekstrak, skrining fitokimia simplisia dan ekstrak, pengujian pada hewan, dan pengukuran kadar NO plasma darah hewan. Kadar NO plasma diukur dalam bentuk nitrit dan nitrat menggunakan pereaksi Griess secara spektrofotometri UV-Vis pada panjang gelombang 540 nm. Penelitian ini menggunakan 5 kelompok perlakuan, yaitu kelompok blanko (tanpa perlakuan), kelompok kontrol ( CMC 0,5%), kelompok Doksorubisin, kelompok EEDPT, dan kelompok EEDPT+Doksorubisin.

  Hasil pemeriksaan karakteristik simplisia dan ekstrak secara berturut- turut diperoleh kadar air 5,99% dan 18,43%, kadar sari larut air 15,68% dan 59,40%, kadar sari larut etanol 12,38% dan 70,93%, kadar abu total 9,77% dan 7,29% serta kadar abu tidak larut asam 0,72% dan 0,58%. Hasil skrining fitokimia simplisia dan ekstrak menunjukkan adanya senyawa golongan flavonoid, glikosida, saponin dan steroid/triterpenoid. Hasil pengukuran dengan spektrofotometer UV-Vis menunjukkan peningkatan kadar nitrit dan nitrat plasma darah secara signifikan (n = 3, p < 0,05) kelompok yang diinduksi Doksorubisin (kadar nitrit

  6,47883 ± 0,46676 μg/ml dan kadar nitrat 6,60247 ± 0,29809 μg/ml) dibandingkan dengan kelompok blanko (kadar nitrit 3,35680 ± 0,19305 μg/ml dan kadar nitrat 3,94413 ± 0,16062 μg/ml).

  Pemberian ekstrak etanol daun puguh tanoh menunjukkan penurunan kadar nitrit dan nitrat plasma darah yang signifikan (n = 3, p < 0,05) pada kelompok yang diberikan ekstrak etanol daun puguh tanoh+Doksorubisin (kadar nitrit 4,37688 ± 0,05355 μg/ml dan nitrat 4,59327 ± 0,24537 μg/ml) dibandingkan dengan kelompok yang diinduksi dengan Doksorubisin.

  Dari hasil penelitian dapat disimpulkan bahwa pemberian ekstrak etanol daun puguh tanoh pada tikus yang diinduksi Doksorubisin dapat menurunkan kadar nitrit dan nitrat plasma darah tikus. Kata kunci : Doksorubisin, puguh tanoh, NO plasma, pereaksi Griess

  EFFECT OF ETHANOL EXTRACT OF PUGUH TANOH (Curanga fel-terrae Merr.) LEAVES ON BLOOD NITRIC OXIDE LEVEL AS ADJUVANT THERAPY IN DOXORUBICIN ABSTRACT

  Doxorubicin is an anthracycline class of chemotherapeutic agents used in cancer treatment, but its use is limited due to its cardiotoxicity that is caused by increased nitric oxide level. This study aimed to determine the effect of ethanol extract of puguh tanoh leaves on blood NO level in Doxorubicin- induced rat.

  This research included the characterization of simplex and extract, phytochemical screening of simplex and extract, animal testing, and measurement of blood plasma NO level. Plasma NO level were measured in the form of nitrite and nitrate using the Griess reagent by UV-Vis spectrophotometry at wavelength 540 nm. This study used 5 groups, blank group (without treatment), control group (0.5% CMC), Doxorubicin group, EEDPT group, and EEDPT + Doxorubicin group.

  Results of the examination showed characteristic of simplex and extract respectively were water content 5.99% and 18.43%, water-soluble extract 15.68% and 59.40%, ethanol-soluble extract 12.38% and 70.93% , total ash content 9.77% and 7.29% and acid- insoluble ash 0.72% and 0.58%. Phytochemical screening results indicated the presence of flavonoid, glycosides, saponins and steroids / triterpenoids compounds in both simplex and extract. Measurement results by UV-Vis spectrophotometer showed significant increased of blood plasma nitrite and nitrate level (n = 3, p < 0.05) in Doxorubicin- induced group (nitrite level 6.47883 ± 0.46676 μg/ml and nitrate levels 6.

  60247 ± 0.29809 μg/ml) compared to the blank group (nitrite level 3.35680 ± 0.19305 μg/ml and nitrate level 3.94413 ± 0.16062 μg/ml). Ethanol extract of puguh tanoh leaves showed significant decreased of blood plasma nitrite and nitrate level (n = 3, p < 0.05) in group given with ethanol extract of puguh tanoh + Doxorubicin (nitrite level 4.37688 ± 0.0 5355 μg/ml and nitrate level 4.59327 ± 0.24537 μg/ml) compared with the group induced by Doxorubicin.

  From the research it can be concluded that ethanol extract of puguh tanoh leaves can decrease blood plasma nitrite and nitrate level in Doxorubicin-induced rats. Keywords: Doxorubicin, puguh tanoh, plasma NO, Griess reagent

  DAFTAR ISI Halaman

  JUDUL ................................................................................................ i HALAMAN JUDUL ........................................................................... ii LEMBAR PENGESAHAN ................................................................ iii KATA PENGANTAR ........................................................................ iv ABSTRAK .......................................................................................... vi ABSTRACT ........................................................................................ vii DAFTAR ISI ....................................................................................... viii DAFTAR TABEL ............................................................................... xii DAFTAR GAMBAR .......................................................................... xiii DAFTAR LAMPIRAN ....................................................................... xiv BAB I PENDAHULUAN ...................................................................

  1 1.1 Latar Belakang ......................................................................

  1 1.2 Perumusan Masalah ..............................................................

  3 1.3 Hipotesis ...............................................................................

  3 1.4 Tujuan Penelitian ..................................................................

  4 1.5 Manfaat Penelitian ................................................................

  4 1.6 Kerangka Pikir Penelitian .....................................................

  5 BAB II TINJAUAN PUSTAKA .......................................................

  6 2.1 Uraian Tumbuhan .................................................................

  6 2.1.1 Sistematika Tumbuhan .................................................

  6 2.1.2 Nama Daerah ...............................................................

  7

  2.1.3 Nama Asing .................................................................

  7 2.1.4 Morfologi Tumbuhan ...................................................

  7 2.1.5 Khasiat Tumbuhan .......................................................

  7 2.2 Kandungan Kimia .................................................................

  8 2.2.1 Flavonoid .....................................................................

  8 2.2.2 Fenilpropanoid .............................................................

  8 2.3 Ekstraksi ................................................................................

  9 2.4 Doksorubisin .........................................................................

  11 2.5 Nitrogen Monooksida (NO) ...................................................

  13 2.6 Spektrofotometri UV-Vis .......................................................

  15 2.7 Pereaksi Griess ......................................................................

  17 BAB III METODE PENELITIAN ......................................................

  18 3.1 Alat-alat .................................................................................

  18 3.2 Bahan-bahan .........................................................................

  19 3.3 Prosedur Pembuatan Simplisia .............................................

  19 3.3.1 Pengumpulan Bahan Tumbuhan ..................................

  19 3.3.2 Identiikasi Tumbuhan ..................................................

  19 3.3.3 Pembuatan Simplisia ....................................................

  20 3.4 Pemeriksaan Karakteristik Simplisia dan Ekstrak ................

  20 3.4.1 Pemeriksaan Makroskopik dan Organoleptik .............

  20 3.4.2 Pemeriksaan Mikroskopik ...........................................

  20 3.4.3 Penetapan Kadar Air ....................................................

  21 3.4.4 Penetapan Kadar Sari Larut dalam Air ........................

  22

  3.4.5 Penetapan Kadar Sari Larut dalam Etanol ...................

  22 3.4.6 Penetapan Kadar Abu Total .........................................

  22

  3.4.7 Penetapan Kadar Abu Tidak Larut dalam Asam ........ 23 3.5 Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak ............................

  23 3.5.1 Pemeriksaan Flavanoid ................................................

  23 3.5.2 Pemeriksaan Alkaloid ..................................................

  24 3.5.3 Pemeriksaan Saponin ...................................................

  25 3.5.4 Pemeriksaan Tanin ......................................................

  25 3.5.5 Pemeriksaan Glikosida ................................................

  25 3.5.6 Pemeriksaan Steroid / Triterpenoid .............................

  26 3.6 Pembuatan Ekstrak Etanol Daun Puguh Tanoh ....................

  26 3.7 Pembuatan Pereaksi ...............................................................

  27 3.7.1 Pembuatan Suspensi Na-CMC 0,5% ...........................

  27

  3.7.2 Pembuatan Suspensi Ekstrak Etanol Daun Puguh Tanoh (EEDPT) 5% ....................................................

  27 3.7.3 Pembuatan Pereaksi TCA 20% b/v .............................

  27 3.7.4 Pembuatan Larutan Asam Asetat Glasial 15% v/v ......

  27 3.7.5 Pembuatan Pereaksi Griess ..........................................

  27 3.7.5.1 Pembuatan Pereaksi Asam Sulfanilat 1% b/v ..

  28 3.7.5.2 Pembuatan Pereaksi NED 0,1% b/v .................

  28 3.8 Penyiapan Hewan Percobaan .............................................

  28 3.9 Perlakuan Hewan Percobaan ..............................................

  28 3.10 Penyiapan Plasma Darah Tikus ..........................................

  29 3.11 Pengukuran Kadar Nitrit dan Nitrat Pada Plasma ..............

  29

  3.11.1 Pembuatan Larutan Induk Baku Nitrit ....................

  29

  3.11.2 Penentuan Panjang Gelombang Maksimum Nitrit Baku ...............................................................

  30 3.11.3 Penentuan Waktu Kerja Nitrit Baku .......................

  30 3.11.4 Penentuan Kurva Kalibrasi Nitrit Baku ..................

  30 3.11.5 Pengukuran Kadar Nitrit dalam Plasma .................

  31 3.11.6 Pengukuran Kadar Nitrat dalam Plasma .................

  31 3.12 Analisis Data .......................................................................

  31 BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN ..........................................

  32 4.1 Hasil Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak ..........................

  32 4.2 Hasil Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak ................

  34

  4.3 Hasil Pengukuran Kadar Nitrit dan Nitrat dalam Plasma Darah .................................................................................

  35 BAB V KESIMPULAN DAN SARAN ..........................................

  40 5.1 Kesimpulan .........................................................................

  40 5.2 Saran ...................................................................................

  40 DAFTAR PUSTAKA .........................................................................

  41 LAMPIRAN ........................................................................................

  44

  DAFTAR TABEL Halaman Tabel 4.1 Hasil Karakterisasi Simplisia dan Ekstrak .......................

  33 Tabel 4.2 Hasil Skrining Fitokimia Simplisia dan Ekstrak ..............

  34 Tabel 4.3 Kadar Nitrit dan Nitrat dalam Plasma Darah ...................

  36 DAFTAR GAMBAR Halaman Gambar 1.1 Kerangka Pikir Penelitian ............................................

  5 Gambar 2 .1 Skema Reaksi Diazotasi ..............................................

  17 Gambar 4.1 Grafik Kadar Nitrit dan Nitrat dalam Plasma ..............

  36