Penentuan pH Dan Suhu Optimum Untuk Aktivitas Ekstrak Kasar Enzim Lipase Dari Kecambah Biji Karet (Hevea Brasiliensis) Terhadap Hidrolisis PKO (Palm Kernel Oil)
PENENTUAN pH DAN SUHU OPTIMUM UNTUK AKTIVITAS
EKSTRAK KASAR ENZIM LIPASE DARI KECAMBAH
BIJI KARET (Hevea brasiliensis) TERHADAP
HIDROLISIS PKO (Palm Kernel Oil)
SKRIPSI
RIZKI AMALIA NST
080802015
PENENTUAN pH DAN SUHU OPTIMUM UNTUK AKTIVITAS
EKSTRAK KASAR ENZIM LIPASE DARI KECAMBAH
BIJI KARET (Hevea brasiliensis) TERHADAP
HIDROLISIS PKO (Palm Kernel Oil)
SKRIPSI
Diajukan untuk melengkapi tugas dan memenuhi syarat mencapai gelar Sarjana Sains
RIZKI AMALIA NST
080802015
PERSETUJUAN Judul : PENENTUAN pH DAN SUHU OPTIMUM UNTUK AKTIVITAS EKSTRAK KASAR ENZIM LIPASE DARI KECAMBAH BIJI KARET (Hevea brasiliensis) TERHADAP HIDROLISIS PKO (Palm Kernel Oil) Kategori : SKRIPSI Nama : RIZKI AMALIA NST Nomor Induk Mahasiswa : 080802015 Program Studi : SARJANA (S1) KIMIA Departemen : KIMIA Fakultas : MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM (FMIPA) UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
PERNYATAAN
PENENTUAN pH DAN SUHU OPTIMUM UNTUK AKTIVITAS
EKSTRAK KASAR ENZIM LIPASE DARI KECAMBAH
BIJI KARET (Hevea brasiliensis) TERHADAP
HIDROLISIS PKO (Palm Kernel Oil)
SKRIPSI
Saya mengakui bahwa skripsi ini adalah hasil kerja saya sendiri, kecuali beberapa kutipan dan ringkasan yang masing-masing disebutkan sumbernya.
PENGHARGAAN
Bismillahirrohmaanirrohim..Alhamdulillah, segala Puji dan Syukur Penulis ucapkan atas kehadirat Allah SWT yang telah memberikan Rahmat dan karunia-Nya sehingga Penulis dapat menyelesaikan skripsi ini.
Dalam hal ini penulis ucapkan terima kasih dan penghargaan kepada kedua orangtua tercinta, ayahanda Abdul Rahim Nst dan Ibunda Nurhayati Nst yang dengan doa, semangat dan dukungannya yang sangat besar serta selalu mendampingi penulis demi terselesaikannya skripsi ini. Dan juga terima kasih kepada adik saya tercinta Khairunnisa Nst yang telah memberikan semangat serta membantu penulis dalam menyelesaikan skripsi ini.
Terima kasih kepada Ibu Dr. Rumondang Bulan Nst, MS selaku Dosen Pembimbing I dan Bapak Drs. Firman Sebayang, MS selaku Dosen pembimbing II, yang telah dengan sabar membantu, mengarahkan dan membimbing Penulis dalam mengerjakan penelitian dan menyelesaikan skripsi ini. Terima kasih kepada Ketua Departemen dan Sekretaris Departemen Kimia S-1, Ibu Dr. Rumondang Bulan Nst,
ABSTRAK
Telah dilakukan penentuan pH dan suhu optimum untuk aktivitas crude enzim lipase dari kecambah biji karet (Hevea brasiliensis). Kecambah biji karet dibuat melalui proses perendaman, pemisahan biji dengan cangkangnya dan perkecambahan biji
o
dilakukan pada suhu kamar (27 – 30
C) selama 6 hari. Ekstrak kasar enzim lipase diperoleh melalui dua kali proses sentrifugasi selama 30 menit dengan kecepatan putaran 5000 rpm dan 10000 rpm dan dengan penambahan aseton 70%. Crude enzim lipase yang dihasilkan dilarutkan dengan buffer fosfat pH 7,0. Uji aktivitas dari crude enzim lipase dilakukan dengan pengukuran kadar asam lemak bebas yang diperoleh dari proses hidrolisis minyak PKO (Palm Kernel Oil) sebagai substrat dengan metode
o titrimetri pada variasi suhu 30; 35; 40; 45; 50 C dan pH 6,0; 6,5; 7,0; 7,5; 8,0. o
Sehingga diperoleh pH optimum 7,0 dan suhu optimum 40
C, dengan aktivitas tertingginya adalah 2,432 U/mL.
DETERMINATION OF OPTIMUM pH AND TEMPERATURE FOR
CRUDE LIPASE ENZYME ACTIVITY FROM RUBBER
(Hevea brasiliensis) SEED GERMINATION
TO HYDROLYSIS PKO
ABSTRACT
Determination of optimum pH and temperature for crude lipase enzyme activity from rubber seeds germination had been conducted. Rubber seed germination made by soaking time process, seed separation with shell’s and seed germination in
o
temperature 27-30 C during 6 days. Crude lipase enzyme was obtained by two times centrifugations with the speed of rotation at 5000 rpm and 10000 rpm during 30 minutes by additing aceton 70%. The crude enzyme is diluted with phosfat buffer pH 7,0. The activity test of crude lipase enzyme is done by measurement of free fatty acid levels is obtained from hydrolisis process of PKO as subtrate by titrimetric method at
o
temperature variation 40; 45; 50; 55; 60 C and pH 6,0; 6,5; 7,0; 7,5; 8,0. The result shower that the highest activity is 2,432 U/mL at pH optimum 7,0 and temperature
o
DAFTAR ISI
Halaman
DAFTAR ISI
x
3 1.4. Tujuan penelitian
3 1.3. Pembatasan masalah
1 1.2. Permasalahan
1 1.1. Latar Belakang
xii
xi
DAFTAR GAMBAR
DAFTAR TABEL
PERSETUJUAN
viii
vii
ABSTRACT
vi
ABSTRAK
v
PENGHARGAAN
iv
PERNYATAAN
iii
DAFTAR LAMPIRAN
BAB 1 PENDAHULUAN
2.7.2. Pengaruh Suhu
21
2.8. Isolasi dan Pemurnian Enzim
21
2.9. Minyak Inti Kelapa Sawit (PKO) Sebagai Substrat
22 BAB 3 BAHAN DAN METODE PENELITIAN
24
3.1. Alat – alat
24
3.2. Bahan – bahan
24
3.3. Prosedur Penelitian
25
3.3.1. Pembuatan Larutan Pereaksi
25
3.3.1.1. Pembuatan Indikator Pp 1%
25
3.3.1.2. Pembuatan Larutan KOH 0,0912 N
25
3.3.2. Pembuatan Buffer Fosfat 0,05 M
26
3.3.3. Pembuatan Kecambah dari Biji Karet
26
3.3.4. Penyediaan Crude enzim lipase dari Kecambah
26 biji karet
3.3.5. Penentuan suhu optimum untuk Aktivitas crude
27 enzim lipase pada hidrolisis PKO
3.3.6. Penentuan pH optimum untuk Aktivitas crude
27 enzim lipase
3.4. Bagan penelitian
28
3.4.1. Pembuatan Kecambah dari Biji Karet 28
DAFTAR TABEL
Tabel 2.1. Komposisi Asam Lemak Minyak Kelapa Sawit dan23 Minyak Inti Sawit
Tabel 3.1. Pembuatan Larutan Buffer Fosfat pH 6,0-8,026
o
Tabel 4.1. Hasil Perhitungan Aktivitas Crude Enzim Lipase pada Suhu 40-60 C 32Tabel 4.2. Hasil Perhitungan Aktivitas Crude Enzim Lipase pada pH 6,0-8,033
DAFTAR GAMBAR
Gambar 2.1. Tanaman Karet5 Gambar 2.2. Biji Karet
6 Gambar 4.1. Hidrolisis Trigliserida Oleh Enzim Lipase
34 Gambar 4.2. Pengaruh Suhu Terhadap Aktivitas Crude Enzim 35 Lipase pada Hidrolisis PKO
Gambar 4.3. Pengaruh pH Terhadap Aktivitas Crude Enzim36 Lipase Pada Hidrolisis PKO