masing pengenceran dilakukan secara duplo. Jumlah total bakteri dapat dihitung dengan menggunakan alat hand tally counter. Rumus perhitungan:
SNI-01-2332.3-2006 dengan :
N : jumlah koloni produk, dinyatakan dalam koloniml atau kolonig; ∑C : jumlah koloni pada semua cawan yang dihitung;
n1 : jumlah cawan pada pengenceran pertama yang dihitung; n2 : jumlah cawan pada pengenceran kedua yang dihitung;
d : pengenceran pertama yang dihitung.
3.6.3 Uji Proksimat
Preparasi sampel : Sampel dilumatkan hingga homogen dan dimasukkan ke dalam wadah plastik atau
gelas yang bersih dan tertutup. Jika sampel tidak langsung diuji, sampel disimpan dalam refrigerator atau freezer sampai pada saatnya untuk dianalisis. Sampel
dikondisikan pada suhu ruang dan dipastikan masih tetap homogen sebelum ditimbang, jika terjadi pemisahan antara cairan dan sampel maka diaduk ulang
dengan menggunakan blender sebelum dilakukan analisis.
3.6.3.1 Analisis Protein Berdasarkan SNI 01-2354.4-2006
1 Menimbang 2 gram homogenat sampel.
2 Menambahkan beberapa butir batu didih.
3 Menambahkan 15 ml H
2
SO
4
pekat dan 3 ml H
2
O
2
secara perlahan-lahan dan didiamkan selama 10 menit dalam ruang asam.
38
4 Melakukan dekstruksi pada suhu 410ºC selama ± 2 jam atau sampai
larutan jernih, didiamkan sampai mencapai suhu kamar dan ditambahkan 60 ml aquades.
5 Menyiapkan erlenmeyer berisi 25 ml larutan H
3
BO
3
0,04 N yang mengandung indikator sebagai penampung destilat.
6 Memasang labu yang berisi hasil dekstruksi pada rangkaian alat
destilasi uap. 7
Menambahkan 50 ml larutan natrium hidroksida-thiosulfat. 8
Melakukan destilasi, destilat ditampung dalam erlenmeyer yang telah disiapkan langkah kerja a.5 hingga volume mencapai minimal 150 ml
hasil destilat akan berubah jadi kuning. 9
Melakukan titrasi hasil destilat dengan HCl 0,2 N yang sudah sampai warna berubah dari hijau menjadi abu-abu netral.
10 Perlakuan blanko dilakukan seperti tahapan sampel.
11 Perhitungan :
Kadar protein = SNI 01-2354.4-2006
dengan : V
A
: ml HCl untuk titrasi sampel V
B
: ml HCl untuk titrasi blangko N
: Normalitas HCl standar yang digunakan 14,007 : Berat atom nitrogen
6,25 : Faktor konversi protein untuk ikan
39
