BAB 3. METODOLOGI PENELITIAN
3.1 Jenis dan Rancangan Penelitian
Jenis  penelitian  ini  adalah  penelitian  eksperimental  laboratoris  yaitu penelitian  yang dilakukan dengan mengadakan manipulasi terhadap objek penelitian
dan  disertai  adanya  kontrol  Nazir,  2005.  Rancangan  penelitian  yang  digunakan adalah  the  post  test  only  control  group  design  untuk  mengetahui  perbedaan  yang
signifikan antara kelompok perlakuan dan kontrol Santoso dkk., 1994.
3.2 Tempat Penelitian
a. Identifikasi spesies tembakau dilakukan di Balai Penelitian Tanaman Pemanis dan
Serat Balittas Jalan Raya Karangploso 199 Km 4 Malang, Jawa Timur, b.  Pembuatan  ekstrak  etanol  daun  tembakau  dilakukan  di  Laboratorium  Biologi
Fakultas Farmasi, Universitas Jember, c.  Uji  aktivitas  antibakteri  dan  antijamur  dilakukan  di  Laboratorium  Mikrobiologi,
Fakultas Kedokteran Gigi, Universitas Jember.
3.3 Waktu Penelitian
Penelitian ini dilaksanakan pada bulan Desember 2014.
3.4 Variabel Penelitian
a. Variabel bebas Ekstrak etanol daun tembakau Nicotiana tabacum,
b. Variabel terikat Daya  hambat  ekstrak  etanol  daun  tembakau  terhadap  pertumbuhan  bakteri
Streptococcus  mutans  dan  Porphyromonas  gingivalis  serta  jamur  Candida albicans,
c. Variabel terkendali Diameter  kertas  cakram  5  mm,  volume  ekstrak  etanol  daun  tembakau  yang
diteteskan pada kertas cakram 13 μ L dan waktu pengamatan 24 dan 48 jam.
3.5 Definisi Operasional
a. Ekstrak  etanol  daun  tembakau  Nicotiana  tabacum  diambil  dari  daun  tembakau
kasturi  usia  muda  campuran  dari bagian  atas  dan  tengah
yang  kemudian diekstraksi  menggunakan  etanol  96  dengan  metode  maserasi.  Daun  tembakau
yang digunakan berasal  dari Desa  Tanjung Rejo  Kecamatan Wuluhan Kabupaten Jember, Jawa Timur.
b. Daya  hambat  diketahui  dengan  mengukur  zona  hambat  pertumbuhan  bakteri
Streptococcus  mutans  dan  Porphyromonas  gingivalis  serta  jamur  Candida albicans.  Zona  hambat  adalah  daerah  atau  wilayah  jernih  yang  tampak  di
sekeliling  kertas  cakram  yang  diukur  menggunakan  jangka  sorong  dalam  skala millimeter
untuk mengetahui kekuatan daya hambat ekstrak etanol daun tembakau Nicotiana  tabacum  terhadap  pertumbuhan  bakteri
Streptococcus  mutans  dan Porphyromonas gingivalis serta jamur Candida albicans.
c. Diameter zona hambat 5 mm berarti tidak terdapat daerah atau wilayah jernih yang
tampak di sekeliling kertas cakram.
3.6 Sampel Penelitian