Tabel 1. Jumlah sampel pada tiap kecamatan No
Kecamatan Jumlah sampel
1. Cijeruk 5
2. Caringin 7
3. Jasinga 7
4. Kelapa Nunggal 5
5. Lebak Wangi 3
6. Nanggung 5
7. Parung 5
8. Sukajaya 5
9. Sukamanah 4
10. Tenjolaya 2 Total
sample 48
b. Uji Total Plate Count TPC
• Disiapkan cawan petri steril dan diberi kode sesuai sampel yang diambil, dibuat duplo.
• Secara aseptis sampel susu bubuk ditimbang sebanyak 20 gram. • Dicampur dengan pengencer BPW sebanyak 180 ml, dihomogenkan.
• Larutan tersebut dibuat pengenceran mulai dari 10
-1
sampai 10
-3
. • Diambil 1 ml dari tiap-tiap pengenceran, dimasukan kedalam cawan petri
steril. • Masing-masing cawan petri tersebut dituangkan 15-20 ml plate count
agar suhu 40-50°C.
• Cawan ditutup dan dihomogenkan secara perlahan dengan membentuk angka delapan, didiamkan beberapa saat hingga agar memadat.
• Diinkubasi dalam inkubator pada suhu 35-37°C selama 18-24 jam Lukman et al. 2007.
• Seluruh koloni yang tumbuh diamati dan dihitung dengan cara seperti dibawah ini :
Jumlah koloni per ml = Jumlah koloni per cawan x encer
Faktorpeng 1
c. Pemeriksaan Bacillus cereus
• Disiapkan cawan petri yang telah diisi media manitol egg yolk polymyxine
agar, dibuat duplo dan diberi kode sesuai sampel yang diambil.
• Secara aseptis sampel susu bubuk ditimbang sebanyak 20 gram. • Dicampur dengan pengencer BPW sebanyak 180 ml, dihomogenkan.
• Larutan di heat shock dengan waterbath pada suhu 75°C selama 20
menit. • Setelah dikeluarkan dari waterbath larutan didiamkan atau didinginkan
sebentar. • Dibuat pengenceran mulai dari 10
sampai 10
-3
dari larutan tersebut. • Diambil 0,1 ml dari tiap-tiap pengencer dan dimasukan ke dalam
cawan petri yang telah disiapkan. diratakan dengan menggunakan “hockey stick”
. • Diinkubasi dalam inkubator pada suhu 30°C selama 24 -48 jam.
• Diamati koloni yang diduga B.cereus, yaitu koloni yang berwarna
merah jambu dengan zona presipitasi disekelilingnya, kemudian dihitung cawan yang memiliki jumlah 15-150 koloni.
• Diisolasi 5 atau lebih koloni yang diduga B.cereus ke nutrient agar miring, diinkubasi selama 24 jam pada suhu 30°C.
• Koloni yang tumbuh dikonfirmasi dengan uji biokimiawi dan pewarnaan Gram Rhodehamel dan Harmon 1998.
d. Uji Konfirmasi